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天冬氨酸酶基因工程菌质粒pXZ70的稳定性 被引量:2
1
作者 陆军 张晓宇 +1 位作者 张红缨 张今 《吉林大学自然科学学报》 CAS CSCD 1997年第4期75-78,共4页
将pSC101质粒上的Par区域(控制质粒分配的基因座)克隆到含有天冬氨酸酶基因的质粒pXZ70上,构建成重组质粒pZZ1,将pZZ1质粒转化入大肠杆菌JM109细胞中,得到一株质粒可稳定遗传的重组子细胞,培养100代后,含质粒菌数仍在90%以上.
关键词 天冬氨酸酶 Par区域 稳定性 基因工程 重组质粒
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有机相中脂肪酶催化糖酯合成的研究 被引量:24
2
作者 张念湘 曹淑桂 +4 位作者 董桓 刘彦彬 任毅青 韩四平 杨红 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1996年第9期1404-1407,共4页
研究了有机相中脂肪酶催化以单糖和乙酸乙烯酯或乙酸酐为底物的糖酯合成反应。建立了定性、定量检测糖酯的方法,考察了7种脂肪酶催化糖酯合成的活力,发现来自假单孢菌属的PSL1的活力最高。研究了PSL1对不同单糖底物的选择性... 研究了有机相中脂肪酶催化以单糖和乙酸乙烯酯或乙酸酐为底物的糖酯合成反应。建立了定性、定量检测糖酯的方法,考察了7种脂肪酶催化糖酯合成的活力,发现来自假单孢菌属的PSL1的活力最高。研究了PSL1对不同单糖底物的选择性,发现对甘露醇的选择性最好,转化率可达95%,研究了反应体系中的含水量对糖酯合成的影响,探讨了酶浓度和温度对反应的影响。 展开更多
关键词 脂肪酶 糖酯 有机相 酯化 乙酸乙烯酯 乙酸酐
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谷胱甘肽的抗线粒体脂质过氧化作用 被引量:38
3
作者 高姝娟 刘锡锰 +1 位作者 高贵 杨同书 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1997年第3期287-291,共5页
谷胱甘肽是细胞内重要的抗氧化损伤物质之一.以NADH诱导的牛心肌线粒体脂质过氧化体系为模型,研究了谷胱甘肽的抗氧化作用.结果表明,一定浓度的谷胱甘肽能够部分抑制该体系中线粒体的脂质过氧化.保护组的丙二醛含量为损伤组72.5... 谷胱甘肽是细胞内重要的抗氧化损伤物质之一.以NADH诱导的牛心肌线粒体脂质过氧化体系为模型,研究了谷胱甘肽的抗氧化作用.结果表明,一定浓度的谷胱甘肽能够部分抑制该体系中线粒体的脂质过氧化.保护组的丙二醛含量为损伤组72.5%;线粒体的膨胀度较损伤组降低;细胞色素C氧化酶及ATP酶活力分别较损伤组提高了1.5及2.2倍. 展开更多
关键词 线粒体 过氧化脂质 谷胱甘肽
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米曲氨基酰化酶的纯化及固定化酶法拆分D,L-丙氨酸 被引量:10
4
作者 王晓平 刘一鸣 +2 位作者 王丽娟 张红缨 张今 《吉林大学自然科学学报》 CAS CSCD 1998年第4期81-84,共4页
利用硫酸铵分级与双水相萃取结合的方法从米曲霉中提取米曲氨基酰化酶,并将其固定在DEAE-SephadexA-25上,用于拆分D,L-丙氨酸。
关键词 氨基酰化酶 固定化酶法 丙氨酸 米曲霉 氨基酸
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脂肪酶在有机溶剂中催化酯合成和酯交换反应 被引量:6
5
作者 曹淑桂 刘占斌 +2 位作者 冯雁 丁忠田 程玉华 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1991年第11期1555-1557,共3页
报道了猪胰脂肪酶在冻干时的pH值、有机溶剂的极性、反应系统的含水量、温度以及底物碳链的长度和支链对酶在有机相中催化活性的影响规律。利用该酶合成了具有玫瑰香味的月桂酸香茅酯和辛酸香茅酯。
关键词 脂肪酶 合成 交换 香料
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β-葡萄糖苷酶的分离纯化和性质研究 被引量:13
6
作者 孙迎庆 曹淑桂 韩四平 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第1期82-82,共1页
β-葡萄糖苷酶是纤维素酶的重要组分之一,它不仅可水解纤维二糖和寡糖,更可解除纤维二糖对β-1,4-内切葡聚糖酶和外切葡聚糖酶的抑制,提高水解速率和程度.利用SephadexG-150和DEAE-SephadexA-5... β-葡萄糖苷酶是纤维素酶的重要组分之一,它不仅可水解纤维二糖和寡糖,更可解除纤维二糖对β-1,4-内切葡聚糖酶和外切葡聚糖酶的抑制,提高水解速率和程度.利用SephadexG-150和DEAE-SephadexA-50层析法从黑曲霉变异株L-22中分离提纯了β-葡萄糖苷酶,该酶是由两个分子量相同的亚基组成的二聚体,每个亚基分子量为203kD.该酶最适pH为4.8,pH稳定范围在3.6~6.4;最适温度是60℃,温度稳定范围为4~60℃;酶分子含糖量为8.35%.它是一个酸性β-葡萄糖苷水解酶,专一性地水解β-糖苷键.而不水解α-糖苷键,对短链底物表现了相对高的活力.用动力学分析和共价化学修饰方法探讨了与该酶活力有关的必需基团.由pH对lgVm和lgVm/Km的影响,推测出酶活性部位至少有两个可解离基团为酶活性所必需,它们在酶-底物复合物中的pKes1和pKes2的值分别为4.0和5.6,在游离酶中的pK值分别为4.2和5.9.由此可初步判断这两个可解离基团可能为组氨酸和含羧基的氨基酸,它们与酶的催化和底物结合可能有关. 展开更多
关键词 Β-葡萄糖苷酶 分离 纯化 动力学
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在有机介质中用固定化木瓜蛋白酶合成生物活性短肽的研究 被引量:12
7
作者 王旭 张学忠 +2 位作者 陈松明 吴晓霞 李建军 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1995年第5期622-624,共3页
在有机介质中用固定化木瓜蛋白酶合成生物活性短肽的研究王旭,张学忠,陈松明,吴晓霞,李建军(吉林大学酶工程国家重点实验室,长春130023)近年来,利用酶法合成多肽的方法由于与化学法和基因工程法比较有诸多优点,而越来越... 在有机介质中用固定化木瓜蛋白酶合成生物活性短肽的研究王旭,张学忠,陈松明,吴晓霞,李建军(吉林大学酶工程国家重点实验室,长春130023)近年来,利用酶法合成多肽的方法由于与化学法和基因工程法比较有诸多优点,而越来越引起人们的重视,并进行了大量研究。... 展开更多
关键词 多肽 生物活性短肽 合成 木瓜蛋白酶 固定化
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β-葡萄糖苷酶的分离纯化和性质研究 被引量:11
8
作者 孙迎庆 曹淑桂 韩四平 《生物学杂志》 CAS CSCD 1997年第5期12-15,共4页
采用分子筛和离子交换层析技术从黑曲霉L-22菌株发酵液中分离提纯了一个由两个相同的亚基组成的β葡萄糖苷酶。研究了其酶学性质和底物专一性。
关键词 Β-葡萄糖苷酶 分离 纯化 性质
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用傅立叶变换红外光谱研究有机溶剂对脂肪酶构象的影响 被引量:9
9
作者 杨红 高修功 +1 位作者 曹淑桂 章克昌 《无锡轻工大学学报(食品与生物技术)》 CAS CSCD 1997年第2期42-46,共5页
利用衰减全反射(AtenuatedTotalReflection,ATR)傅立叶变换红外光谱研究了脂肪酶在不同非水有机溶剂中的构象变化。结果表明,各种溶剂均能使酶的二级结构发生一定程度的变化,极性愈强效果愈明显。这种... 利用衰减全反射(AtenuatedTotalReflection,ATR)傅立叶变换红外光谱研究了脂肪酶在不同非水有机溶剂中的构象变化。结果表明,各种溶剂均能使酶的二级结构发生一定程度的变化,极性愈强效果愈明显。这种构象变化是一动态过程,且具有一定的可逆性。另外,两亲分子也能导致酶构象的改变。 展开更多
关键词 傅立叶变换 红外光谱 脂肪酶 构象 有机溶剂
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亲水化法稳定超氧化物歧化酶 被引量:6
10
作者 梁涌涛 刘卫华 +2 位作者 孙启安 罗贵民 杨同书 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1994年第5期596-599,共4页
在氰基硼氢化钠存在下用乙醛酸修饰含铁超氧化物歧化酶(Fe-SOD)的氨基可使酶的热稳定性显著提高,酶在80℃时的半寿期增加一倍。
关键词 超氧化物歧化酶 稳定化 亲水化 化学修饰
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微环境对脂肪酶催化拆分外消旋2-辛醇的影响 被引量:5
11
作者 杨红 曹淑桂 +2 位作者 韩四平 黄仲丽 杨同书 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1996年第3期377-379,共3页
微环境对脂肪酶催化拆分外消旋2-辛醇的影响       杨红,曹淑桂,韩四平,黄仲丽,杨同书(吉林大学酶工程国家重点实验室,长春130023)手性2-辛醇不仅是制备液晶材料不可缺少的重要手性原料,也是合成具有光学活性... 微环境对脂肪酶催化拆分外消旋2-辛醇的影响       杨红,曹淑桂,韩四平,黄仲丽,杨同书(吉林大学酶工程国家重点实验室,长春130023)手性2-辛醇不仅是制备液晶材料不可缺少的重要手性原料,也是合成具有光学活性的医药和农药的重要手性中间体.本文... 展开更多
关键词 2-辛醇 脂肪酶 拆分 微环境
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化学修饰的和固定化的脂肪酶在有机溶剂中的催化作用研究 被引量:7
12
作者 曹淑桂 冯雁 +3 位作者 刘占斌 丁忠田 马林 程玉华 《生物化学杂志》 CSCD 1991年第6期646-650,共5页
本文对聚乙二醇修饰脂肪酶、多孔玻璃载体吸附酶、多孔玻璃载体丙酮沉积酶、硅藻土吸附酶、氧化铝吸附酶和琼脂珠疏水载体吸附酶在有机相中酯合成和酯交换反应的催化作用进行了研究。实验表明,不同形式的酶需要不同的最适加水量。而且,... 本文对聚乙二醇修饰脂肪酶、多孔玻璃载体吸附酶、多孔玻璃载体丙酮沉积酶、硅藻土吸附酶、氧化铝吸附酶和琼脂珠疏水载体吸附酶在有机相中酯合成和酯交换反应的催化作用进行了研究。实验表明,不同形式的酶需要不同的最适加水量。而且,在各自最适条件下,对各种形式酶进行了比较,得出硅藻土和琼脂珠疏水载体是很好的固定化载体,疏水性琼脂珠固定化酶在有机相中的活力比酶粉高46.5%。 展开更多
关键词 脂肪酶 化学修饰 固定化 有机溶剂
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铜绿假单孢菌脂肪酶产生条件 被引量:4
13
作者 朴真三 刘畅 +1 位作者 冯艳 曹淑桂 《吉林大学自然科学学报》 CAS CSCD 1998年第1期97-99,共3页
产生优质脂肪酶的铜绿假单孢菌JEP-606菌株的培养成分(质量分数)为大豆1.5%,玉米浸出液3.0%,葡萄糖0.5%,橄榄油0.75%,当菌株液体培养时,细胞直径约0.4μm,长1.5~3.5μm,革兰氏阴性,产生蓝绿色素.提高菌株脂肪酶... 产生优质脂肪酶的铜绿假单孢菌JEP-606菌株的培养成分(质量分数)为大豆1.5%,玉米浸出液3.0%,葡萄糖0.5%,橄榄油0.75%,当菌株液体培养时,细胞直径约0.4μm,长1.5~3.5μm,革兰氏阴性,产生蓝绿色素.提高菌株脂肪酶活性和生物量的培养条件是:初始pH7.0~9.0,28℃,150r/min,培养时间60~140h,装液量25mL(250mL三角瓶)和0.75%橄榄油. 展开更多
关键词 假单孢菌 脂肪酶 产酶条件
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双链聚乙二醇与超氧化物歧化酶共价结合物的理化和免疫学性质 被引量:6
14
作者 王继华 曹淑桂 程玉华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1992年第6期444-448,共5页
用三聚氯氰活化单甲氧基聚乙二醇,得到了双链聚乙二醇(PEGm_2).以PEGm_2修饰牛血Cu,Zn-SOD,得到了氨基修饰率为30%,残余活力为80%的纯PEGm_2-SOD.修饰酶的荧光光谱及圆二色谱均有改变;盐酸胍变性及胃蛋白酶水解实验结果表明,修饰酶的... 用三聚氯氰活化单甲氧基聚乙二醇,得到了双链聚乙二醇(PEGm_2).以PEGm_2修饰牛血Cu,Zn-SOD,得到了氨基修饰率为30%,残余活力为80%的纯PEGm_2-SOD.修饰酶的荧光光谱及圆二色谱均有改变;盐酸胍变性及胃蛋白酶水解实验结果表明,修饰酶的稳定性高于天然酶;免疫学实验表明,与天然酶比较,修饰酶的免疫原性及抗原抗体反应性大为降低. 展开更多
关键词 共价修饰 超氧物歧化酶 聚乙二醇
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鸭血清胆碱酯酶的纯化及性质研究 被引量:7
15
作者 郭胜清 曹树桂 程玉华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1993年第2期119-124,共6页
首次采用新技术双水相萃取方法作为鸭血清胆碱酯酶(EC.3.1.1.8 CHE) 纯化的第一步,后经 DEAE-Sephadex A50,sephadex G200 柱层析,获得电泳纯鸭血清胆碱酯酶,提纯倍数1018倍,酶活力回收43.4%,比活274.9U/mg。鸭血清胆碱酯酶性质研究表明... 首次采用新技术双水相萃取方法作为鸭血清胆碱酯酶(EC.3.1.1.8 CHE) 纯化的第一步,后经 DEAE-Sephadex A50,sephadex G200 柱层析,获得电泳纯鸭血清胆碱酯酶,提纯倍数1018倍,酶活力回收43.4%,比活274.9U/mg。鸭血清胆碱酯酶性质研究表明:此酶是糖蛋白和酸性蛋白水解酶,等电点 4.2 左右,最适 pH7.5 左右;对底物碘化硫代丁酰胆碱的 K_m=9.8×10^(-5)mol/L;SDS-PAGE 电泳和聚丙烯酰胺梯度电泳表明,鸭血清胆碱酯酶以相同亚基组成的不同聚合体形式存在,亚基分子量 78000,具有完整的酶活性.不同聚合体带电状态相同. 展开更多
关键词 胆碱酯酶 提纯 血清
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模拟谷胱甘肽过氧化物酶活性三肽的制备及其性质研究 被引量:3
16
作者 朱振齐 罗贵民 +3 位作者 丁兰 孙启安 杨同书 沈家骢 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1995年第3期338-342,共5页
开发一种制备硒代谷胱甘肽(GseH)的新方法。以合成的谷氨酰-γ-丝氨酰-甘氨酸(Glu-Ser-Gly)三肽为原料,经苯甲基磺酰氟(PMSF)活化,用H_2Se突变Ser成硒代半脱氨酸(SeCys)制成GSeH。用... 开发一种制备硒代谷胱甘肽(GseH)的新方法。以合成的谷氨酰-γ-丝氨酰-甘氨酸(Glu-Ser-Gly)三肽为原料,经苯甲基磺酰氟(PMSF)活化,用H_2Se突变Ser成硒代半脱氨酸(SeCys)制成GSeH。用元素分析及氨基酸分析确定此三肽的组成并推导出此三肽的结构。研究了GSeH的性质.结果表明,此三肽具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的活性,其活力比其它一些小分子有机模拟物高,在性质上也有优于它们的一些特点,其动力学行为与天然GPX类似。 展开更多
关键词 谷胱甘肽 过氧化物酶 模拟三肽 制备
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α-淀粉酶在脲变性过程中构象与活性的变化 被引量:3
17
作者 张学忠 吴晓霞 吴华 《吉林大学自然科学学报》 CAS CSCD 1994年第2期115-118,共4页
本文利用蛋白质内源荧光和紫外吸收变化,研究了细菌α-淀粉酶在脲变性过程中的构象变化,并且与失活过程进行了比较.α-淀粉酶脲变性与失活的动力学数据表明,变性是单相过程过程,而失活是一个双相过程,快相失活的速度常数比变性... 本文利用蛋白质内源荧光和紫外吸收变化,研究了细菌α-淀粉酶在脲变性过程中的构象变化,并且与失活过程进行了比较.α-淀粉酶脲变性与失活的动力学数据表明,变性是单相过程过程,而失活是一个双相过程,快相失活的速度常数比变性速度常数至少大一个数量级. 展开更多
关键词 Α-淀粉酶 变性 构象 活性 尿素
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反向胶束中脂肪酶催化猪油的甘油解反应 被引量:3
18
作者 邢艳 褚莹 +1 位作者 吴子生 曹淑桂 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期189-191,共3页
specific lipase(PSL) catalyzed glycerolysis of lard was performed in microemulsions containing sodium bis(2 ethylhexyl) sulfosuccinate(AOT) and a combination of water and glycerol as the polar components. The effects ... specific lipase(PSL) catalyzed glycerolysis of lard was performed in microemulsions containing sodium bis(2 ethylhexyl) sulfosuccinate(AOT) and a combination of water and glycerol as the polar components. The effects of reaction conditions and system parameters on the yield of monofattyacylglycerols have been investigated and the optimum conditions of syntheses of monofattyacylglycerols were established. The reactions were carried out at 34 ℃, iso octane being the best hydrocarbon. The other optima were established as follows: pH, 7 0; water content(in mass % of the system), 0 8; AOT content 5%; glycerol content 2 5%, and the monofattyacylglycerols yield herein was 17 3%. Maximum yield of monofattyacylglycerols is obtained at optimum molar ratio of (water+glycerol)/surfactant 6 3, which corresponds to droplet size of ca. 7 2 nm. 展开更多
关键词 反向胶束 甘油解反应 单脂肪酸甘油酯 脂肪酶
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模拟谷胱甘肽过氧化物酶活性三肽的合成及表征 被引量:2
19
作者 朱振齐 孙启安 +3 位作者 丁兰 罗贵民 李维 沈家骢 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 1994年第6期77-79,共3页
用B,B-二氟硼杂唑烷酮保护谷氨酸的α-氨基和α-羧基,通过液相合成法制得谷氨酰-γ-丝氨酰-甘氨酸三肽。结合苯甲基磺酰氟(PMSF)与硒化氢(H2Se)的突变,再经纯化制得具有谷胱甘肽过氧化物酶活性的三肽模拟物,即... 用B,B-二氟硼杂唑烷酮保护谷氨酸的α-氨基和α-羧基,通过液相合成法制得谷氨酰-γ-丝氨酰-甘氨酸三肽。结合苯甲基磺酰氟(PMSF)与硒化氢(H2Se)的突变,再经纯化制得具有谷胱甘肽过氧化物酶活性的三肽模拟物,即γ-谷氨酰-硒代半腕氨酰-甘氨酸。元素分析、氨基酸分析均证明了两种三肽的结构。电子能谱技术分析测得硒的价态及含量。 展开更多
关键词 三肽模拟物 谷胱甘肽 过氧化物酶 合成 表征
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以淀粉珠为载体的亲和层析法分离纯化高温α淀粉酶 被引量:2
20
作者 张学忠 宋伦 +2 位作者 王群 吴晓霞 唐锌进 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1995年第2期224-226,共3页
以淀粉珠为载体的亲和层析法分离纯化高温α淀粉酶张学忠,宋伦,王群,吴晓霞,唐锌进(吉林大学酶工程国家重点实验室,长春130023;南京师范大学生物系,南京210024)金凤燮等人从酒曲中筛选出高产热稳定α淀粉酶的菌株... 以淀粉珠为载体的亲和层析法分离纯化高温α淀粉酶张学忠,宋伦,王群,吴晓霞,唐锌进(吉林大学酶工程国家重点实验室,长春130023;南京师范大学生物系,南京210024)金凤燮等人从酒曲中筛选出高产热稳定α淀粉酶的菌株,命名为Bacillussp-JF... 展开更多
关键词 Α淀粉酶 淀粉珠 亲和层析 分离 提纯 发酵
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