中药“神经再生素”促神经生长过程中基因差异性表达的初步研究 被引量：24

1

作者 刘梅 顾晓松 +3 位作者 刘炎 崔学芝 彭聿平 张沛云 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期101-106,共6页

为了探索中药“神经再生素”促神经生长过程中基因水平的变化。本实验采用 dd-PCR方法 ,从体外培养背根神经节细胞加药组和不加药组中获得两者的差异表达片段 ,并经反杂交筛选、克隆测序、DNA序列检索分析、Northern验证。结果表明 ,差... 为了探索中药“神经再生素”促神经生长过程中基因水平的变化。本实验采用 dd-PCR方法 ,从体外培养背根神经节细胞加药组和不加药组中获得两者的差异表达片段 ,并经反杂交筛选、克隆测序、DNA序列检索分析、Northern验证。结果表明 ,差异显示共获得 8个差异条带 ,一个为下调基因 ,其余为上调基因 ,其中 2个 c DNA序列与 RRAJ5 16 1基因 (增殖相关基因 )、AF196 3 15基因 (锌指样蛋白 DDP2 ) 10 0 %同源 ,2个 c DNA序列与 AK0 0 175 7基因、STA5 SRR基因 (t RNA合成酶 )部分同源。结论是中药“神经再生素”在促神经生长过程中 ,对神经元基因的选择性表达起着重要的调控作用。 展开更多

关键词 神经再生素 神经生长 DD-PCR 基因表达 大鼠 中药药理

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聚吡咯的生长及与神经组织相容性的研究 被引量：7

2

作者 陈树建 袁春伟 +2 位作者 王晓冬 张沛云 顾晓松 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第2期212-214,共3页

通过化学氧化和电化学氧化方法得到聚吡咯 ,用所得到的聚吡咯与神经组织联合培养 ,通过倒置光学显微镜和扫描电子显微镜观察其生物相容特性 .得知聚吡咯与神经组织有较好的生物相容性 .

关键词 聚吡咯 神经组织 生物相容性 DRG 桥接神经再生

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神经再生素对皮层细胞基因表达影响的基因芯片研究 被引量：8

3

作者 丁斐 顾星星 +1 位作者 王东 顾晓松 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期78-80,共3页

目的 :采用基因芯片技术 ,观察神经再生素对体外培养的胚鼠大脑皮层细胞基因表达的影响。方法 :取ICR胚鼠 (15d)大脑皮层细胞 ,无血清培养。实验组加入神经再生素 (2 μg/ml) ,对照组加入等量基础培养液。培养 6h后 ,抽提实验组和对照... 目的 :采用基因芯片技术 ,观察神经再生素对体外培养的胚鼠大脑皮层细胞基因表达的影响。方法 :取ICR胚鼠 (15d)大脑皮层细胞 ,无血清培养。实验组加入神经再生素 (2 μg/ml) ,对照组加入等量基础培养液。培养 6h后 ,抽提实验组和对照组皮层细胞总RNA ,经反转录分别用Cy5、Cy3荧光标记成cDNA探针。将荧光标记的cDNA与MGEC 40s基因表达谱芯片杂交 ,芯片扫描、数据处理。结果 :实验组和对照组大脑皮层细胞出现 64条差异性表达的基因。呈现上调的基因有 :钙调素结合蛋白、锌指蛋白激酶、核糖体蛋白等基因 ;下调基因有 :抑制细胞分裂因子等基因。结论 :神经再生素可作用于体外培养的胚鼠大脑皮层细胞 。 展开更多

关键词 神经再生素 皮层细胞 基因表达 基因芯片 研究

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神经生长液对兔周围神经损伤的修复作用研究 被引量：7

4

作者 张俊芳 周鸣鸣 +1 位作者 刘梅 丁斐 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2005年第1期83-86,共4页

目的:研究神经生长液(nerve growth decoction,NGD)促进兔周围神经损伤的修复作用。方法:大耳白兔40只,雌雄各半,行腓总神经夹伤术。实验分为五组:NGD低、中、高剂量组,弥可保组(阳性对照),空白对照组。口服给药四周后行电生理、组织学... 目的:研究神经生长液(nerve growth decoction,NGD)促进兔周围神经损伤的修复作用。方法:大耳白兔40只,雌雄各半,行腓总神经夹伤术。实验分为五组:NGD低、中、高剂量组,弥可保组(阳性对照),空白对照组。口服给药四周后行电生理、组织学检测和超微结构观察。结果:NGD高、中剂量组和弥可保组在腓总神经传导速度恢复率,脊髓前角运动神经元的存活率及再生髓鞘计数均明显好于空白对照组(P<0.01)。超微结构观察给药组有髓神经纤维的髓鞘形态、厚度、成熟度均优于对照组,变性纤维的数目少于对照组。结论:神经生长液能促进损伤周围神经的再生和功能的恢复。 展开更多

关键词 神经生长液/药理学 神经再生/中药疗法 周围神经损伤 兔 弥可保

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神经再生素激活PC12细胞ERK1/2的实验研究 被引量：7

5

作者 强亮 顾星星 丁斐 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期369-372,共4页

本实验初步探讨了神经再生素 ( NRF)作用于 PC12细胞的信号传导途径。采用 MTT法检测 NRF对无血清培养的PC12细胞存活率的影响 ;用磷酸化的 Elk单克隆抗体 ,通过 Western blot法观察 NRF的不同浓度 ( 10、10 0、10 0 0 ng/ m l)及不同... 本实验初步探讨了神经再生素 ( NRF)作用于 PC12细胞的信号传导途径。采用 MTT法检测 NRF对无血清培养的PC12细胞存活率的影响 ;用磷酸化的 Elk单克隆抗体 ,通过 Western blot法观察 NRF的不同浓度 ( 10、10 0、10 0 0 ng/ m l)及不同作用时间 ( 0 min、15 min、3 0 min、1h、2 h)对无血清培养的 PC12细胞 ERK1/ 2活性的影响 ;还运用 MEK1/ 2阻断剂 U0 12 6,观察NRF激活 ERK1/ 2是否需要其上游信号蛋白 MEK1/ 2的激活。结果表明 ,NRF作用于无血清培养的 PC12细胞 ,可以激活ERK1/ 2 ,存在明显的剂量效应关系和时间依赖作用 ,在 10 0 0 ng/ ml浓度下最大 ,作用 2 h时达峰值 ;U0 12 6作用后 ,可抑制 NRF作用于 PC12细胞引起的 ERK1/ 2的激活。由此可见 ,NRF对无血清培养的 PC12细胞具有保护作用 ,可能通过激活 ERK1/ 2磷酸化级联途径来介导这些作用。 展开更多

关键词 神经再生素 ERKl/2 U0126 PCI2细胞 信号传导途径 细胞培养

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神经再生素对背根神经节细胞GAP-43和NF-L基因表达的影响 被引量：32

6

作者 丁斐 刘梅 顾晓松 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期231-234,共4页

目的 :观察中药有效组分神经再生素作用于神经细胞生长过程中 ,相关基因的表达变化 ,探讨神经再生素促神经生长的分子生物学机制。方法 :采用RT PCR法 ,观察神经再生素在促大鼠背根神经节生长过程中(4h、12h、2 4h) ,生长相关蛋白 43(GA... 目的 :观察中药有效组分神经再生素作用于神经细胞生长过程中 ,相关基因的表达变化 ,探讨神经再生素促神经生长的分子生物学机制。方法 :采用RT PCR法 ,观察神经再生素在促大鼠背根神经节生长过程中(4h、12h、2 4h) ,生长相关蛋白 43(GAP 43)和神经丝蛋白 (NF L)基因表达的变化。结果 :神经再生素可使背根神经节细胞GAP 43和NF LmRNA的表达量增加。结论 :神经再生素可作用于体外培养的神经细胞 。 展开更多

关键词 神经再生素 生长相关蛋白 神经丝蛋白 RT-PCR 基因表达 背根神经节细胞

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神经诱向生长因子18kD蛋白的纯化 被引量：11

7

作者 沈勤 顾晓松 +3 位作者 张沛云 姚登兵 谭湘陵 曹铮 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第3期235-240,共6页

提取与纯化诱向生长因子是神经生物化学研究中的一个重要课题．采用自然系统凝胶电泳，分离周围神经损伤过程中产生的具有诱向生长作用的１８ｋＤ蛋白，再以等电聚焦凝胶电泳与神经组织联合培养，揭示了ｐＩ为５．２的１８ｋＤ蛋白具有... 提取与纯化诱向生长因子是神经生物化学研究中的一个重要课题．采用自然系统凝胶电泳，分离周围神经损伤过程中产生的具有诱向生长作用的１８ｋＤ蛋白，再以等电聚焦凝胶电泳与神经组织联合培养，揭示了ｐＩ为５．２的１８ｋＤ蛋白具有诱神经生长的作用．经高效液相色谱仪分析获得较纯的１８ｋＤ诱向因子．蛋白／多肽测序仪检测，１８ｋＤ蛋白Ｎ端氨基酸序列为：ＰＥＰＡＷＳＡＰＡＰ． 展开更多

关键词 18kD蛋白 神经化学 诱向因子 纯化

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生后不同时期大鼠坐骨神经NGF基因的表达 被引量：6

8

作者 丁斐 徐炜岚 +1 位作者 顾晓松 姚登兵 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期257-260,共4页

采用 RT-PCR方法半定量分析生后 1、15、3 0、60、12 0和 3 60 d大鼠坐骨神经中 NGF m RNA表达的变化。结果表明 ,大鼠生后 1d坐骨神经中即有 NGF m RNA的表达 ;随着生后发育过程 ,NGF m RNA的表达量逐步增加 ,并呈严格单调上升的趋势... 采用 RT-PCR方法半定量分析生后 1、15、3 0、60、12 0和 3 60 d大鼠坐骨神经中 NGF m RNA表达的变化。结果表明 ,大鼠生后 1d坐骨神经中即有 NGF m RNA的表达 ;随着生后发育过程 ,NGF m RNA的表达量逐步增加 ,并呈严格单调上升的趋势。开始时增加速度较慢 ,但随鼠龄的增加而逐渐加快 ,至 49d时达到最快 ,然后逐渐减慢 ,到 12 0 d时已接近生后稳定表达水平。 展开更多

关键词 NGF MRNA RT-PCR 年龄变化 坐骨神经 基因表达

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生长相关蛋白及其mRNA在大鼠损伤坐骨神经中的表达 被引量：3

9

作者 丁斐 崔学芝 顾晓松 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期211-214,共4页

为了研究大鼠周围神经损伤后远侧端组织中生长相关蛋白 (GAP-4 3 )及其 m RNA的表达 ,采用正常 SD大鼠坐骨神经横断损伤的模型 ,于术后不同时间取坐骨神经远侧端组织 ,以 Western Blot和 RT-PCR法检测 GAP-4 3及其 m RNA的表达。RT-PCR... 为了研究大鼠周围神经损伤后远侧端组织中生长相关蛋白 (GAP-4 3 )及其 m RNA的表达 ,采用正常 SD大鼠坐骨神经横断损伤的模型 ,于术后不同时间取坐骨神经远侧端组织 ,以 Western Blot和 RT-PCR法检测 GAP-4 3及其 m RNA的表达。RT-PCR法检测结果显示 ,正常大鼠坐骨神经组织中 GAP-4 3 m RNA表达量较低 ,而损伤坐骨神经的远侧段 GAP-4 3 m RNA的表达量明显增加 ,于损伤第 2周时达高峰。用抗 GAP-4 3抗体进行 Western Blot检测 ,结果表明 ,正常坐骨神经 43 k Da处出现弱阳性反应的蛋白区带 ,而损伤后坐骨神经远侧段 43 k Da处阳性反应条带着色明显加深 ,损伤后第 3周时阳性反应着色最强。本研究结果提示 ,GAP-4 3及其 m RNA在大鼠损伤坐骨神经远侧段组织中表达增强 ,其 m RNA表达上调高峰在神经损伤后的第 2周 ;而其蛋白合成增加最为明显的时间是在神经损伤后的第 3周。 展开更多

关键词 生长相关蛋白 MRNA 大鼠 表达 坐骨神经损伤

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周围神经65KD蛋白在损伤性大鼠坐骨神经中的表达 被引量：2

10

作者 张沛云 严志强 +3 位作者 沈勤 沈爱国 谭湘陵 顾晓松 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 1999年第3期262-263,共2页

目的：研究周围神经６５ＫＤ蛋白在损伤性大鼠坐骨神经中的分布与表达。方法：取损伤１５ｄ后的大鼠坐骨神经近侧端及远侧端，冰冻切片，与抗６５ＫＤ蛋白单克隆抗体与切片孵育后，加羊抗小鼠ＩｇＧＨＲＰ，ＤＡＢ反应成色。结果：大... 目的：研究周围神经６５ＫＤ蛋白在损伤性大鼠坐骨神经中的分布与表达。方法：取损伤１５ｄ后的大鼠坐骨神经近侧端及远侧端，冰冻切片，与抗６５ＫＤ蛋白单克隆抗体与切片孵育后，加羊抗小鼠ＩｇＧＨＲＰ，ＤＡＢ反应成色。结果：大鼠坐骨神经远侧端及近侧端中均有６５ＫＤ蛋白阳性免疫反应产物，阳性免疫反应产物位于雪旺氏细胞。阳性免疫反应产物的密度及强度在神经的远侧端大于近侧端。结论：神经诱向因子６５ＫＤ蛋白由雪旺氏细胞产生。在损伤后神经近、远侧端都存在６５ＫＤ蛋白，远侧端的强度大于近侧端，这一浓度梯度可能是诱导再生的神经纤维定向生长过程中的一个重要因素。 展开更多

关键词 65KD蛋白 大鼠 坐骨神经 周围神经损伤

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兔感觉神经特异蛋白的纯化及稳定性观察 被引量：1

11

作者 蒲小平 汪家政 +2 位作者 张杰 顾晓松 范明 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第5期465-466,共2页

以兔脊神经节及背根纤维为材料 ,通过制备匀浆 ,DEAE Sephacel阴离子交换层析 ,高压液相凝胶过滤层析分离纯化了感觉神经特异蛋白 2 9ku ,并进行了该蛋白的稳定性观察 .

关键词 蛋白 感觉神经 特异蛋白 纯化 稳定性

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N-糖链合成相关β-1,4-半乳糖基转移酶在大鼠坐骨神经损伤后的表达变化 被引量：1

12

作者 沈爱国 严美娟 +3 位作者 龚蕾蕾 关晓颖 程纯 顾建新 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期220-224,共5页

为了分析与 N-糖链合成相关β-1,4-半乳糖基转移酶 - 、 、 (β-1,4-galactosyltransferase , , ,β-1,4-Gal T- , , ) m RNA在正常和损伤坐骨神经组织的表达变化。本研究采用 RT-PCR方法 ,分析 β-1,4-Gal T- 、 、 在小鼠坐骨神经中... 为了分析与 N-糖链合成相关β-1,4-半乳糖基转移酶 - 、 、 (β-1,4-galactosyltransferase , , ,β-1,4-Gal T- , , ) m RNA在正常和损伤坐骨神经组织的表达变化。本研究采用 RT-PCR方法 ,分析 β-1,4-Gal T- 、 、 在小鼠坐骨神经中的表达存在。以扩增的 c DNA片断标记探针 ,Northern blot分析β-1,4-Gal T- 、 、 m RNA在正常和损伤大鼠坐骨神经的表达变化。结果表明 :通过 RT-PCR方法 ,检测到 β-1,4-Gal T- 、 、 在小鼠坐骨神经中的表达存在 ;采用 Northern blot方法 ,发现β-1,4-Gal T- 、 、 在正常大鼠坐骨神经中有表达 ,并在坐骨神经损伤后发生表达变化 ,但三种同功酶的表达变化各不相同。结论 :本实验发现 β-1,4-Gal T- 、 、 在坐骨神经有表达 ,并在坐骨神经损伤后发生表达变化。提示与 展开更多

关键词 大鼠 坐骨神经 RT-PCR Β-1 4-半乳糖基转移酶 表达 蛋白修饰

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睫状神经节神经营养因子基因克隆 被引量：1

13

作者 谭湘陵 曹铮 +2 位作者 刘炎 刘梅 顾晓松 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期331-334,共4页

在构建了再生性外周神经组织cDNA文库的基础上，人工合成了睫状神经节神经营养因子（CNTF）阅读框架的引物，用PCR地高辛标记法标记了CNTF探针．筛选CDNA文库，得到了CNTF的阳性克隆，运用PCR法证实了克隆中存在着全长CNTF阅读框架，San... 在构建了再生性外周神经组织cDNA文库的基础上，人工合成了睫状神经节神经营养因子（CNTF）阅读框架的引物，用PCR地高辛标记法标记了CNTF探针．筛选CDNA文库，得到了CNTF的阳性克隆，运用PCR法证实了克隆中存在着全长CNTF阅读框架，Sanger法测定了DNA序列，证实序列无误。CNTF基因克隆为从基因水平上研究CNTF的分子生物学作用机制打下基础． 展开更多

关键词 睫状神经 神经营养因子 基因克隆

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Tropic 1808基因重组蛋白对损伤坐骨神经脊髓细胞凋亡的影响 被引量：1

14

作者 王晓冬 陈罡 张沛云 《科学技术与工程》 2003年第2期133-136,共4页

探讨Tropic1808基因重组蛋白对损伤坐骨神经的新生大鼠脊髓细胞凋亡影响,将新生SD大鼠一侧坐骨神经切断后,用无菌止血海绵包裹断离的神经近侧端,海绵内加入Tropic1808基因重组蛋白,阳性用神经生长因子、阴性用生理盐水作为对照;术后3、6... 探讨Tropic1808基因重组蛋白对损伤坐骨神经的新生大鼠脊髓细胞凋亡影响,将新生SD大鼠一侧坐骨神经切断后,用无菌止血海绵包裹断离的神经近侧端,海绵内加入Tropic1808基因重组蛋白,阳性用神经生长因子、阴性用生理盐水作为对照;术后3、6、12h经TUNEL法染色,在光镜、电镜和图像分析系统下,了解L4-L5段脊髓细胞凋亡情况。得到生理盐水组的脊髓出现大量凋亡细胞;Tropic1808基因重组蛋白组凋亡细胞数量较生理盐水组显著减少;Tropic1808基因重组蛋白组与神经生长因子组之间凋亡细胞数量的差别无显著性意义。说明Tropic1808基因重组蛋白有保护受损神经组织,减少细胞凋亡的作用。 展开更多

关键词 Tropic1808基因重组蛋白 新生大鼠 坐骨神经 脊髓 细胞凋亡

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β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅱ、Ⅴ表达的亚细胞结构定位研究

15

作者 沈爱国 何江虹 +3 位作者 丁斐 朱敏 王汉洲 顾建新 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期277-282,共6页

为了研究β-1,4-半乳糖基转移酶 和 (β-1,4-Gal T- and )蛋白表达的亚细胞结构定位 ,本实验构建了β-1,4-Gal T- 和 融合绿色荧光蛋白 (GFP)表达质粒 ,分别将构建的质粒转染到 PC12细胞和肝癌 772 1细胞中 ,在荧光显微镜下观察β-1... 为了研究β-1,4-半乳糖基转移酶 和 (β-1,4-Gal T- and )蛋白表达的亚细胞结构定位 ,本实验构建了β-1,4-Gal T- 和 融合绿色荧光蛋白 (GFP)表达质粒 ,分别将构建的质粒转染到 PC12细胞和肝癌 772 1细胞中 ,在荧光显微镜下观察β-1,4-Gal T- 和 在其中表达的亚细胞结构定位。发现 ,β-1,4-Gal T- 和 主要表达在这两种细胞的细胞核旁的 Golgi复合体 ,说明它们主要分布在 Golgi复合体上。提示它们可能是在 展开更多

关键词 Β-1 4-半乳糖基转移酶 表达 亚细胞结构 定位 肝癌细胞

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周围神经18kD蛋白单克隆抗体的制备

16

作者 张沛云 顾晓松 +3 位作者 沈爱国 沈勤 曹铮 谭湘陵 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期168-170,共3页

本实验用不连续、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳系统，以损伤坐骨神经远侧端提取的具有神经诱向生长作用的、PI为5．2的18kD蛋白作为抗原，免疫BALB／C小鼠，通过杂交瘤技术，Elisa法筛选，获得二株（Ⅲ8G、Ⅳ3C）稳定分泌单克隆抗体的杂交... 本实验用不连续、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳系统，以损伤坐骨神经远侧端提取的具有神经诱向生长作用的、PI为5．2的18kD蛋白作为抗原，免疫BALB／C小鼠，通过杂交瘤技术，Elisa法筛选，获得二株（Ⅲ8G、Ⅳ3C）稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。免疫印迹结果表明单克隆抗体能特异性识别分子量为18kD蛋白。免疫组化法显示：在实验组坐骨神经远侧端为阳性反应，对照组坐骨神经的神经膜为阴性。 展开更多

关键词 周围神经 18kD蛋白 单克隆抗体

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β-1,4-半乳糖苷键在周围神经损伤后的表达变化

17

作者 沈爱国 周鸣鸣 +3 位作者 丁斐 顾晓松 王汉洲 顾建新 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期272-276,共5页

为了探讨正常和损伤的周围神经中β-1,4-半乳糖苷键的表达定位和表达变化 ,本研究用特异识别β-1,4-半乳糖苷键的蓖麻凝集素 -I免疫组织化学方法结合 S-10 0和 neurofilam ent免疫双标记 ,研究了大鼠坐骨神经损伤对 β-1,4-半乳糖苷键... 为了探讨正常和损伤的周围神经中β-1,4-半乳糖苷键的表达定位和表达变化 ,本研究用特异识别β-1,4-半乳糖苷键的蓖麻凝集素 -I免疫组织化学方法结合 S-10 0和 neurofilam ent免疫双标记 ,研究了大鼠坐骨神经损伤对 β-1,4-半乳糖苷键的合成影响。结果表明 ,β-1,4-半乳糖苷键主要分布在正常和损伤坐骨神经的 Schwann细胞中 ,图像分析表明β-1,4-半乳糖苷键的表达在周围神经损伤后 1～ 2 d内有所增高 ,以后随时间延长表达量逐步下降。本研究结果提示 ,周围神经损伤对 β-1,4-半乳糖苷键的表达有影响 ,Schwann细胞表达的β-1。 展开更多

关键词 β—1 4-半乳糖苷键 周围神经损伤 表达变化 蓖麻凝集素-1

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大鼠周围神经43kDa蛋白的生化初步分析

18

作者 姚登兵 顾晓松 +1 位作者 丁斐 王云丹 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2004年第3期282-285,共4页

目的:提取大鼠损伤坐骨神经组织中表达增强的43kDa蛋白(PNP-43),并对PNP-43进行生化初步分析。方法:纯化抗PNP-43单克隆抗体,将纯化的抗PNP-43单克隆抗体与CNBr-activatedSepharose4B交联,用亲和层析的方法,提取PNP-43,并将提取的PNP-4... 目的:提取大鼠损伤坐骨神经组织中表达增强的43kDa蛋白(PNP-43),并对PNP-43进行生化初步分析。方法:纯化抗PNP-43单克隆抗体,将纯化的抗PNP-43单克隆抗体与CNBr-activatedSepharose4B交联,用亲和层析的方法,提取PNP-43,并将提取的PNP-43进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和等电聚焦凝胶电泳(IEF)分析,考马斯亮蓝染色,取SDS-PAGE后染色的43kDa蛋白区带胶条,进行基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱检测(MALDI-TOF-MS),测定肽质量指纹图谱,在相应的蛋白质谱数据库(MS-Fit)中检索。结果:⑴、经层析系统紫外检测,亲和层析后洗脱,在280nm波长处显示一个的紫外吸收峰。⑵、亲和层析获得的蛋白,经SDS-PAGE分析,在43.0kDa标准蛋白位置出现单一蛋白条带。⑶、经IEF分析,PNP-43的等电点(pI)为5.8。⑷、经MALDI-TOF-MS检测,测定肽质量指纹图谱,通过MS-Fit检索未发现有与该蛋白完全相同的质谱数据。结论:用亲和层析的方法,获得了大鼠损伤坐骨神经组织中表达增强的PNP-43,通过质谱分析和MS-Fit检索提示未发现有与该蛋白完全相同的质谱数据。为进一步深入研究PNP-43的结构与功能提供了科学依据。 展开更多

关键词 损伤坐骨神经 43kDa蛋白 亲和层析 MALDI-TOF-MS 大鼠

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18KD蛋白在损伤大鼠坐骨神经远侧端中的分布——免疫电镜与光镜观察

19

作者 严志强 陈云 顾晓松 《电子显微学报》 CAS CSCD 1998年第4期411-412,共2页

１８ＫＤ蛋白在损伤大鼠坐骨神经远侧端中的分布——免疫电镜与光镜观察严志强１陈云２顾晓松１（南通医学院神经科学研究所１，电镜室２，南通２２６００１）在神经系统发育及再生过程中，神经轴突如何到达其相应的靶器官，是当今神经... １８ＫＤ蛋白在损伤大鼠坐骨神经远侧端中的分布——免疫电镜与光镜观察严志强１陈云２顾晓松１（南通医学院神经科学研究所１，电镜室２，南通２２６００１）在神经系统发育及再生过程中，神经轴突如何到达其相应的靶器官，是当今神经科学的研究热点之一。近年来的研究显... 展开更多

关键词 18KD蛋白 大鼠 周围神经损伤 神经再生 诱向再生

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胚胎大鼠海马神经干细胞分离培养和分化 被引量：2

20

作者 吴星 张沛云 +1 位作者 罗莉 徐昌芬 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期109-111,F003,共4页

目的:研究胎鼠脑海马组织去掉的神经干细胞的分离、培养、增殖及分化特点。方法:采用无血清培养、单细胞克隆技术及免疫细胞化学方法,观察海马源性神经干细胞的体外扩增和贴壁分化情况。结果:从大鼠胚胎脑海马分离的细胞具有增殖能力,... 目的:研究胎鼠脑海马组织去掉的神经干细胞的分离、培养、增殖及分化特点。方法:采用无血清培养、单细胞克隆技术及免疫细胞化学方法,观察海马源性神经干细胞的体外扩增和贴壁分化情况。结果:从大鼠胚胎脑海马分离的细胞具有增殖能力,可以传代培养,子代细胞免疫组化显示神经巢蛋白(nestin)阳性。经含血清培养基培养,贴壁可分化为微管相关蛋白-2(MAP2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞。结论:用本方法分离培养的细胞具有自我复制和多向分化的能力,是中枢神经系统的干细胞。 展开更多

关键词 神经干细胞 海马 免疫细胞化学 细胞分化

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