【目的】探讨长链非编码RNA-1708(lncRNA-1708)在人骨髓间充质干细胞(hBMSC)成骨分化中的表达差异及其对hBMSC成骨分化的影响。【方法】将购买的3组不同来源的hBMSC进行体外增殖培养,并用实时荧光定量逆转录-多聚酶链反应(qRT-PCR)方法...【目的】探讨长链非编码RNA-1708(lncRNA-1708)在人骨髓间充质干细胞(hBMSC)成骨分化中的表达差异及其对hBMSC成骨分化的影响。【方法】将购买的3组不同来源的hBMSC进行体外增殖培养,并用实时荧光定量逆转录-多聚酶链反应(qRT-PCR)方法检测3组hBMSC成骨诱导分化前后lncRNA-1708的表达,分析其与hBMSC成骨分化的关系。分别转染lncRNA-1708过表达慢病毒及lncRNA-1708干扰质粒,获得稳定的hBMSC细胞株后成骨诱导分化14 d,用qRT-PCR检测Runt相关转录因子2(RUNX2)、碱性磷酸酶(ALP)mRNA的表达并行碱性磷酸酶染色。【结果】相较成骨诱导分化前,3组hBMSC成骨诱导分化7 d后lncRNA-1708表达量均降低(P <0.001)。在稳定高表达lncRNA-1708和低表达lncRNA-1708的hBMSC细胞株中lncRNA-1708的表达量较其对应的阴性对照相比有明显变化(lncRNA-1708过表达细胞株:48 h,P <0.05;lncRNA-1708低表达细胞株:48 h,P <0.01)。与阴性对照组相比,转染过表达lncRNA-1708的hBMSC中成骨相关基因RUNX2、ALP表达水平降低(0.46±0.03 vs. 1.00±0.02,0.15±0.07 vs. 1.02±0.28,P均<0.01)。相反,沉默LncRNA-1708的hBMSC中的RUNX2、ALP表达水平与其对应的阴性对照组相比则升高了(1.62±0.18 vs. 1.00±0.04,1.58±0.11 vs. 1.01±0.18,P均<0.01)。【结论】LncRNA-1708可能有抑制hBMSC的成骨分化的作用。展开更多
文摘【目的】探讨长链非编码RNA-1708(lncRNA-1708)在人骨髓间充质干细胞(hBMSC)成骨分化中的表达差异及其对hBMSC成骨分化的影响。【方法】将购买的3组不同来源的hBMSC进行体外增殖培养,并用实时荧光定量逆转录-多聚酶链反应(qRT-PCR)方法检测3组hBMSC成骨诱导分化前后lncRNA-1708的表达,分析其与hBMSC成骨分化的关系。分别转染lncRNA-1708过表达慢病毒及lncRNA-1708干扰质粒,获得稳定的hBMSC细胞株后成骨诱导分化14 d,用qRT-PCR检测Runt相关转录因子2(RUNX2)、碱性磷酸酶(ALP)mRNA的表达并行碱性磷酸酶染色。【结果】相较成骨诱导分化前,3组hBMSC成骨诱导分化7 d后lncRNA-1708表达量均降低(P <0.001)。在稳定高表达lncRNA-1708和低表达lncRNA-1708的hBMSC细胞株中lncRNA-1708的表达量较其对应的阴性对照相比有明显变化(lncRNA-1708过表达细胞株:48 h,P <0.05;lncRNA-1708低表达细胞株:48 h,P <0.01)。与阴性对照组相比,转染过表达lncRNA-1708的hBMSC中成骨相关基因RUNX2、ALP表达水平降低(0.46±0.03 vs. 1.00±0.02,0.15±0.07 vs. 1.02±0.28,P均<0.01)。相反,沉默LncRNA-1708的hBMSC中的RUNX2、ALP表达水平与其对应的阴性对照组相比则升高了(1.62±0.18 vs. 1.00±0.04,1.58±0.11 vs. 1.01±0.18,P均<0.01)。【结论】LncRNA-1708可能有抑制hBMSC的成骨分化的作用。
