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circROBO1上调KLF5促进视网膜细胞瘤侵袭的机制研究 被引量:1
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作者 刘越峰 张志伟 +1 位作者 李欣 罗卫民 《海南医学院学报》 2023年第17期1302-1308,共7页
目的:探索circROBO1通过上调KLF5促进视网膜Y79细胞侵袭的作用及其可能的调控机制。方法:RNase R酶消化及qRT-PCR实验检测环状RNA circROBO1在视网膜Y79细胞中的结构稳定性;分别提取视网膜Y79细胞的胞质及胞核RNA,进行circROBO1的亚细... 目的:探索circROBO1通过上调KLF5促进视网膜Y79细胞侵袭的作用及其可能的调控机制。方法:RNase R酶消化及qRT-PCR实验检测环状RNA circROBO1在视网膜Y79细胞中的结构稳定性;分别提取视网膜Y79细胞的胞质及胞核RNA,进行circROBO1的亚细胞定位分析;采用siRNA沉默视网膜Y79细胞中circROBO1的表达,划痕实验、Transwell细胞侵袭与迁移实验检测circROBO1对Y79细胞迁移与侵袭能力的影响;通过CircInteractome及TargetScan在线软件分别预测circROBO1与下游miRNA及miRNA与下游靶基因KLF5的靶向结合位点,并采用双荧光素酶报告基因实验验证两者之间的靶向调控关系。蛋白免疫印迹实验检测siRNA沉默Y79细胞中circROBO1的表达后对KLF5表达的影响。结果:与未经RNase R酶处理的对照组相比,circROBO1的相对表达量在RNase R酶处理后并无显著变化;而线性ROBO1的相对表达量在经RNase R酶处理后,则显著降低(t=16.18,P<0.05);circROBO1在细胞质中的含量显著高于细胞核(t=13.04, P<0.05);与转染si-control的对照组相比,si-circROBO1组视网膜Y79细胞的迁移率、Transwell细胞侵袭与迁移能力均显著降低(t=22.54,P<0.05);circROBO1可靶向吸附miR-885-5p、miR-885-5p与KLF5之间存在靶向结合位点(t=11.39,P<0.05);与si-control组相比,si-circROBO1组的KLF5蛋白表达显著降低(t=17.26,P<0.05)。结论:circROBO1通过上调KLF5促进视网膜Y79细胞瘤侵袭。 展开更多
关键词 视网膜Y79细胞 circROBO1 miR-885-5p KLF5 侵袭
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环状RNA在胃癌中的研究现状与策略 被引量:7
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作者 王攀 徐高生 +5 位作者 马蔚 叶东梅 李昱萱 罗苇如 肖懿洋 张志伟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2019年第3期238-247,共10页
环状RNA (circRNA)是一种共价闭合的非编码RNA,可以调节真核生物中的基因表达.最近应用高通量RNA测序和生物信息学方法揭示人类细胞中存在大量circRNA.许多circRNA具有一定的组织和时序特异性,且与生理发育和各种肿瘤等疾病密切相关. ci... 环状RNA (circRNA)是一种共价闭合的非编码RNA,可以调节真核生物中的基因表达.最近应用高通量RNA测序和生物信息学方法揭示人类细胞中存在大量circRNA.许多circRNA具有一定的组织和时序特异性,且与生理发育和各种肿瘤等疾病密切相关. circRNA被证明在细胞质中富集和稳定,表明其具有作为肿瘤生物标志物的潜力.胃癌(gastric carcinoma,GC)是一种常见的恶性肿瘤,在全球癌症相关死亡原因中排第3位.尽管该疾病在诊断和治疗方面取得了许多进展,但GC患者的预后仍然很差,大多数国家的5年总生存率低于30%.因此,寻找能调节GC发生发展和评估预后的新分子机制和治疗靶标至关重要.近年来circRNA在胃癌中的研究不断增多,其在胃癌的发生发展、诊断、治疗及预后过程中扮演重要角色.本文就circRNA产生机制及一般特征、生物学功能、在胃癌中的研究进展及研究中存在的问题作一综述. 展开更多
关键词 circRNA 胃癌 肿瘤生物标志物 肿瘤诊断
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二烯丙基二硫增强DJ-1过表达人胃癌SGC7901细胞对5-FU的敏感性 被引量:1
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作者 寻艺 夏红 +3 位作者 李志敏 刘芳 苏琦 苏波 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期99-105,共7页
目的 探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide, DADS)是否增强DJ-1(protein/nucleic acid deglycase,蛋白/核酸去糖化酶)过表达人胃癌SGC7901细胞对5-FU(5-fluorouracil, 5-氟尿嘧啶)的敏感性。方法 实验分为Control组、DADS组、VCR(Vincri... 目的 探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide, DADS)是否增强DJ-1(protein/nucleic acid deglycase,蛋白/核酸去糖化酶)过表达人胃癌SGC7901细胞对5-FU(5-fluorouracil, 5-氟尿嘧啶)的敏感性。方法 实验分为Control组、DADS组、VCR(Vincristine,长春新碱)组、VCR+DADS组、DJ-1组、DJ-1+DADS组;MTT检测DADS对5-FU抑制细胞增殖的影响;流式细胞术检测DADS对细胞凋亡的影响;qRT-PCR、Western blot、免疫荧光检测DADS对耐药相关基因表达的影响。结果 DADS增强5-FU对VCR耐药细胞和DJ-1过表达细胞增殖的抑制作用;DADS诱导VCR耐药细胞凋亡;DADS下调DJ-1表达、诱导DJ-1过表达细胞凋亡;过表达DJ-1上调P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)、Bcl-2、XIAP(X连锁凋亡抑制蛋白),下调caspase-3表达;DADS降低DJ-1过表达细胞和VCR耐药细胞P-gp、Bcl-2、XIAP,升高caspase-3表达。结论 DADS能增强DJ-1过表达细胞对5-FU的敏感性,与其拮抗DJ-1介导的P-gp、Bcl-2、XIAP上调、caspase-3下调有关。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 DJ-1 P-糖蛋白 胃癌细胞 耐药 5-氟尿嘧啶
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C1GALT1基因在胃癌组织中的表达及其对胃癌BGC-823细胞生物学行为的影响
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作者 乔沐川 李俊儒 +4 位作者 罗玲 夏童 陈艳华 胡梦龙 谢海龙 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第6期603-608,共6页
目的探讨C1GALT1在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞BGC-823生物学行为的影响。方法采用生物信息学、qRT-PCR和Western blot法分析C1GALT1 mRNA和蛋白在胃癌组织和正常胃黏膜组织、胃癌细胞和正常胃黏膜细胞中的表达,以C1GALT1 cDNA序列... 目的探讨C1GALT1在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞BGC-823生物学行为的影响。方法采用生物信息学、qRT-PCR和Western blot法分析C1GALT1 mRNA和蛋白在胃癌组织和正常胃黏膜组织、胃癌细胞和正常胃黏膜细胞中的表达,以C1GALT1 cDNA序列为靶点设计siRNA瞬时转染BGC-823细胞,采用Transwell实验检测C1GALT1-siRNA对胃癌BGC-823细胞迁移和侵袭能力的影响。运用Western blot法检测BGC-823细胞在转染C1GALT1-siRNA后上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白的表达。结果C1GALT1在胃癌组织和细胞(BGC-823、SGC-7901、MGC-803)中呈高表达(P<0.05);干扰BGC-823细胞中C1GALT1表达后,BGC-823细胞迁移和侵袭能力均下降(P<0.05),上皮细胞标志物E-cadherin和Claudin-1蛋白表达水平均升高,间充质细胞标志物vimentin和Slug蛋白表达水平均下降(P<0.05)。结论C1GALT1在胃癌组织和细胞中高表达,C1GALT1基因沉默后能抑制胃癌细胞BGC-823的迁移和侵袭能力,其机制可能与EMT相关。 展开更多
关键词 胃肿瘤 C1GALT1 侵袭 迁移 上皮-间充质转化
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二烯丙基二硫通过miR-7下调XIAP抑制人胃癌SGC7901细胞增殖与迁移侵袭 被引量:4
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作者 刘芳 李志敏 +3 位作者 曹振华 何慧 苏琦 苏波 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1164-1169,共6页
目的探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)是否通过miR-7下调X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP),抑制胃癌SGC7901细胞增殖、迁移和侵袭。方法构建XIAP过表达SGC7901细胞株;qRT-PCR、Western blot检... 目的探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)是否通过miR-7下调X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP),抑制胃癌SGC7901细胞增殖、迁移和侵袭。方法构建XIAP过表达SGC7901细胞株;qRT-PCR、Western blot检测DADS对过表达细胞XIAP表达的影响;CCK-8和平板克隆形成实验分析DADS对XIAP过表达细胞增殖的影响;划痕和Transwell实验分析DADS对XIAP过表达细胞迁移和侵袭的影响;qRT-PCR检测DADS对miR-7表达的影响;双荧光素酶报告实验、qRT-PCR和Western blot验证miR-7对XIAP靶向负调控作用。结果XIAP过表达增强SGC7901细胞增殖、迁移和侵袭能力;DADS下调XIAP、抑制XIAP过表达细胞增殖、迁移和侵袭;DADS上调miR-7表达;miR-7靶向调控XIAP 3′UTR,过表达miR-7降低XIAP表达,而敲低miR-7则上调XIAP表达。结论DADS通过miR-7下调XIAP抑制SGC7901细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 X连锁凋亡抑制蛋白 miR-7 胃癌 增殖 迁移 侵袭
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m6A修饰在神经系统疾病中的作用 被引量:7
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作者 张圆 张巳 +3 位作者 时萌萌 李梦琳 曾佳玉 何洁 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期109-115,共7页
N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)甲基化修饰是真核生物mRNA最常见的表观遗传修饰之一,在相关酶的催化调控下,m6A通过介导RNA转录、剪接、翻译、衰变等参与机体的生理和病理生理过程。以往主要关注m6A在肿瘤,如血液系统肿瘤、宫颈... N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)甲基化修饰是真核生物mRNA最常见的表观遗传修饰之一,在相关酶的催化调控下,m6A通过介导RNA转录、剪接、翻译、衰变等参与机体的生理和病理生理过程。以往主要关注m6A在肿瘤,如血液系统肿瘤、宫颈癌、乳腺癌等中的调控作用,近年来发现m6A富集于与神经发生、细胞周期、神经元分化等相关的mRNA中,其在神经系统中的调控作用逐渐被重视。m6A修饰水平及相关酶蛋白表达水平发生改变会引起神经系统功能紊乱,参与神经系统疾病的发生与转归。m6A修饰及其相关酶在重度抑郁症、帕金森病、阿尔茨海默症、脆性X综合征、肌萎缩侧索硬化、创伤性脑损伤及神经系统肿瘤等众多神经系统疾病的发展进程中扮演关键角色。 展开更多
关键词 N6-甲基腺苷 神经退行性疾病 重度抑郁症
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链脲佐菌素对糖尿病小鼠生精功能和睾丸m6A甲基化酶表达的影响 被引量:2
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作者 孟星圻 邓靖 +5 位作者 彭莉轩 张圆 林祎 周小兵 曹文宇 李素云 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2023年第2期182-186,共5页
目的探讨链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)对糖尿病小鼠生精功能和睾丸m6A甲基化酶表达的影响。方法20只8周龄雄性ICR小鼠,随机分为溶媒对照组和模型组,腹腔注射STZ诱导糖尿病动物模型。注射后第2、4、6、8周检测血糖及体重;第8周采用精... 目的探讨链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)对糖尿病小鼠生精功能和睾丸m6A甲基化酶表达的影响。方法20只8周龄雄性ICR小鼠,随机分为溶媒对照组和模型组,腹腔注射STZ诱导糖尿病动物模型。注射后第2、4、6、8周检测血糖及体重;第8周采用精子计数法检测小鼠精子数量,HE染色检测精子存活率及睾丸形态,称量睾丸、附睾的重量;Real-time PCR和Western blotting检测各组小鼠睾丸中m6A甲基化酶mRNA及蛋白表达。结果与对照组相比,模型组小鼠空腹血糖显著增高,体重降低(P<0.01);睾丸及附睾重量显著下降(P<0.01)、精子数量显著下降(P<0.05);睾丸形态结构破坏,生精小管萎缩,管腔直径变小,各级生精细胞排列紊乱,管腔内精子数量减少;睾丸m6A甲基化酶METTL3、FTO、YTHDF3 mRNA表达降低(P<0.05);METTL3、FTO蛋白质表达显著降低(P<0.05)。结论STZ诱导的糖尿病小鼠出现生精障碍,其生精障碍可能与睾丸内m6A甲基化酶METTL3以及FTO的表达异常有关。 展开更多
关键词 m6A甲基化 链脲佐菌素 糖尿病 生精功能障碍
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