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核糖体蛋白L6对K562/A02细胞耐药性及凋亡的影响 被引量:1
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作者 陈宏 谢兆霞 +2 位作者 姜浩 张志伟 王光平 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第2期292-295,共4页
本研究观察核糖体蛋白L6(RPL6)基因表达的改变对白血病细胞耐药性的作用及其可能的机制。通过RT-PCR方法获得RPL6 cDNA序列,用真核表达载体pcDNA3.1(+)分别构建正向插入和反向插入的RPL6 cDNA重组质粒。以脂质体将正义RPL6 cDNA真核表... 本研究观察核糖体蛋白L6(RPL6)基因表达的改变对白血病细胞耐药性的作用及其可能的机制。通过RT-PCR方法获得RPL6 cDNA序列,用真核表达载体pcDNA3.1(+)分别构建正向插入和反向插入的RPL6 cDNA重组质粒。以脂质体将正义RPL6 cDNA真核表达质粒转染K562细胞,将反义RPL6 cDNA真核表达质粒转染K562/AO2细胞。以MTT、流式细胞术和荧光分光光度计观察RPL6对化疗药物耐药性、凋亡和caspase-3的作用。结果表明:转染正义RPL6 cDNA真核表达质粒后,K562细胞对阿霉素的耐药性增强到原来的325%,凋亡和caspase-3活性明显降低(P<0.005);转染反义RPL6 cDNA真核表达质粒后,K562/A02细胞对阿霉素的耐药性降低原来的38%;凋亡和caspase-3活性明显增加(P<0.005)。结论:RPL6基因过表达通过改变药物诱导的凋亡在K562/A02细胞耐药性的形成中起重要作用。 展开更多
关键词 核糖体蛋白L6 抗药性 细胞株 K562/A02
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人核糖体蛋白L6编码基因的克隆及正反义真核表达载体的构建 被引量:2
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作者 陈宏 姜浩 张志伟 《医学研究生学报》 CAS 2006年第6期495-497,共3页
目的:通过克隆人核糖体蛋白L6(RPL6)cDNA序列,构建其正反义真核表达载体,以探讨RPL6与白血病多药耐药的关系。方法:用RT-PCR技术扩增RPL6 cDNA序列,DNA重组技术构建其正反义真核表达载体。结果:成功扩增RPL6 cDNA序列,经DNA测序,证实与G... 目的:通过克隆人核糖体蛋白L6(RPL6)cDNA序列,构建其正反义真核表达载体,以探讨RPL6与白血病多药耐药的关系。方法:用RT-PCR技术扩增RPL6 cDNA序列,DNA重组技术构建其正反义真核表达载体。结果:成功扩增RPL6 cDNA序列,经DNA测序,证实与GenBank中的人RPL6编码区序列一致,酶切证实目的基因分别按正反两个方向亚克隆至真核表达载体。结论:成功克隆人RPL6 cDNA序列,并构建了正反义真核表达载体。 展开更多
关键词 核糖体蛋白L6 克隆 载体
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PIG11与热休克蛋白60的相互作用介导肝癌HepG2细胞凋亡
3
作者 刘小敏 胡蓉 +3 位作者 梁晓秋 王晓娟 王燕 张杨 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1138-1143,共6页
为了探讨候选肝癌抑癌蛋白PIG11(p53-induced gene11,PIG11)诱导细胞凋亡的机制,首次在HepG2细胞株中鉴定了11个PIG11结合蛋白,热休克蛋白60(heat shock protein60,Hsp60)为其中之一.采用免疫共沉淀联合Western blot技术对Hsp60进行了验... 为了探讨候选肝癌抑癌蛋白PIG11(p53-induced gene11,PIG11)诱导细胞凋亡的机制,首次在HepG2细胞株中鉴定了11个PIG11结合蛋白,热休克蛋白60(heat shock protein60,Hsp60)为其中之一.采用免疫共沉淀联合Western blot技术对Hsp60进行了验证.用Western blot检测其蛋白质表达,结果显示:pLXSN-PIG11-HepG2细胞中Hsp60蛋白表达较pLXSN-HepG2、HepG2细胞组下调(n=3,P<0.01).选取与Hsp60关系密切的Bax蛋白进行研究,Western blot结果显示PIG11高表达可引起胞浆Bax向线粒体转位.以上结果表明,PIG11蛋白能与HepG2细胞中的Hsp60结合,促进Hsp60-Bax的分离,引起Bax从胞液到线粒体转位,激活线粒体凋亡途径,这可能是其诱导HepG2细胞凋亡的主要机制之一. 展开更多
关键词 PIGl 1 HSP60 HEPG2 BAX
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靶向抑制CREB表达对H_2O_2所致的内皮细胞损伤的影响
4
作者 屈顺林 范文静 +1 位作者 唐志晗 张弛 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期1987-1987,共1页
关键词 CREB 内皮细胞损伤 H2O2 靶向 细胞核形态 细胞存活率 氧化损伤 转染 基因沉默 流式细胞仪检测
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家兔角膜上皮和内皮细胞DNA含量与PMI关系的图像分析 被引量:9
5
作者 刘承泉 熊平 《法医学杂志》 CAS CSCD 2003年第2期76-77,共2页
目的 探讨家兔角膜上皮和内皮细胞DNA含量与PMI的关系。方法 应用计算机图像分析技术,测定105只家兔死后72h内不同时间点家兔角膜上皮和内皮细胞核DNA含量(IOD)的变化值并做统计学分析。结果 家兔死后72h内其角膜上皮细胞和内皮细胞核DN... 目的 探讨家兔角膜上皮和内皮细胞DNA含量与PMI的关系。方法 应用计算机图像分析技术,测定105只家兔死后72h内不同时间点家兔角膜上皮和内皮细胞核DNA含量(IOD)的变化值并做统计学分析。结果 家兔死后72h内其角膜上皮细胞和内皮细胞核DNA降解速率与PMI具有显著的相关性,并由此归纳出体现DNA降解趋势的二项式回归方程。结论 应用计算机图像分析技术,测量机体死后角膜内外皮细胞DNA含量变化,将会成为推断PMI精确、客观的新方法。 展开更多
关键词 家兔 角膜 上皮细胞 内皮细胞 DNA含量 PMI 图像分析 法医学
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