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LCM纯化的鼻咽癌间质和正常鼻咽间质的定量蛋白质组学研究 被引量:6
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作者 李美香 肖志强 +7 位作者 彭芳 李国庆 张鹏飞 李茂玉 李萃 李峰 刘迎福 陈主初 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1122-1133,共12页
间质在肿瘤发生发展中的作用越来越受到重视.为寻找与鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)发生发展相关的特异性间质蛋白,采用激光捕获显微切割技术(laser capture microdissection,LCM)纯化鼻咽癌间质和正常鼻咽黏膜间质,荧光差异双... 间质在肿瘤发生发展中的作用越来越受到重视.为寻找与鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)发生发展相关的特异性间质蛋白,采用激光捕获显微切割技术(laser capture microdissection,LCM)纯化鼻咽癌间质和正常鼻咽黏膜间质,荧光差异双向凝胶电泳(fluorescent two-dimensional difference gel electrophoresis 2-D,DIGE)结合质谱技术分离鉴定间质相关蛋白.Westernblot及免疫组织化学技术验证了其中3个差异蛋白(CapG、L-plastin和S100A9),证实了2D-DIGE结果的可靠性.建立了LCM纯化的鼻咽癌间质和正常鼻咽间质的荧光差异蛋白表达图谱,高通量筛选与肿瘤发生相关的间质蛋白,共得到34个有统计学意义的蛋白质点,质谱鉴定得到20个差异蛋白.研究结果提示:这些差异表达的蛋白质将有助于阐明鼻咽癌细胞和周围间质的关系.对间质蛋白功能的进一步研究,将有助于解析间质在肿瘤发生中的作用机制,并为从间质途径寻找肿瘤治疗靶标提供新思路. 展开更多
关键词 鼻咽癌 间质 激光捕获显微切割 荧光差异双向凝胶电泳 质谱 免疫组织化学
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ciglitazone对巨噬细胞CD36表达及胆固醇流入的影响 被引量:3
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作者 莫中成 陈欣 +3 位作者 龙治峰 曾颖 张青海 易光辉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期685-687,共3页
目的:观察过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(PPARγ)的激动剂ciglitazone对THP-1巨噬细胞CD36表达及细胞胆固醇流入的影响。方法:以THP-1巨噬细胞为研究对象,用50 mg/L氧化低密度指蛋白(oxLDL)分别与不同浓度的PPARγ激动剂ciglitazone(0... 目的:观察过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(PPARγ)的激动剂ciglitazone对THP-1巨噬细胞CD36表达及细胞胆固醇流入的影响。方法:以THP-1巨噬细胞为研究对象,用50 mg/L氧化低密度指蛋白(oxLDL)分别与不同浓度的PPARγ激动剂ciglitazone(0、5、10、15μmol/L)共同孵育THP-1巨噬细胞24 h后,采用液体闪烁计数法检测[3H]胆固醇流入,采用逆转录-聚合酶链式反应和Western blot分别检测CD36的表达。结果:oxLDL及不同浓度的ciglitazone与THP-1巨噬细胞共孵育后,与对照组比较(20.3%),加ciglitazone的处理组胆固醇流入随着浓度的增加而依次增加,分别为28.6%、37.2%、44.3%、48.7%,细胞CD36的表达上调。结论:ciglitazone可上调THP-1巨噬细胞CD36的表达,并增加细胞胆固醇流入。 展开更多
关键词 过氧化物酶体增殖物激活型受体-γ 环格列酮 CD36 动脉粥样硬化
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脂肪分化相关蛋白反义寡核苷酸抑制细胞内胆固醇积聚及其在动脉粥样硬化中的改变 被引量:4
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作者 袁中华 杨永宗 +4 位作者 尹卫东 唐显庆 易光辉 杨保堂 万载阳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期690-695,共6页
目的:研究ADRP与As发生和发展的关系。方法:使用80mg/LOx -LDL和/或1mmol/L反义ADRP寡核苷酸与小鼠腹腔巨噬细胞共孵育72h。测定细胞内胆固醇酯;油红O染色显示细胞内中性脂质;RT -PCR和Westernblotting观察反义寡核苷酸对ADRP表达的影... 目的:研究ADRP与As发生和发展的关系。方法:使用80mg/LOx -LDL和/或1mmol/L反义ADRP寡核苷酸与小鼠腹腔巨噬细胞共孵育72h。测定细胞内胆固醇酯;油红O染色显示细胞内中性脂质;RT -PCR和Westernblotting观察反义寡核苷酸对ADRP表达的影响。高胆固醇饲料喂养新西兰白兔12周,复制As模型。测定血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯及动脉壁胆固醇;苏丹Ⅳ染色显示主动脉病变面积;HE染色观察主动脉及肝脏的病变;免疫组织化学方法显示ADRP在主动脉病变区及肝脏中的表达。结果:反义ADRP寡核苷酸使细胞内胆固醇酯由(46. 6±3 .4 )mg/gprotein下降到(19. 9±1 .9)mg/gprotein ,细胞内中性脂质明显减少,ADRP基因和蛋白的表达显著下降。喂高胆固醇饲料的动物血清TC、LDL -C、TG及动脉壁胆固醇显著升高,主动脉病变面积为(40 . 1±7 .3) % ,ADRP在主动脉病变区免疫组织化学染色强阳性,在肝脏中染色阴性。结论:反义ADRP寡核苷酸能够明显抑制由氧化低密度脂蛋白引起的小鼠腹腔巨噬细胞中胆固醇酯的聚集。ADRP在兔As病变中表达明显增高。提示高表达ADRP促使As发生和发展。 展开更多
关键词 动脉硬化 脂蛋白类 LDL 巨噬细胞 小鼠
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大鼠卵巢的生后发育 被引量:2
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作者 屈丽华 罗文奇 +5 位作者 刘月顺 龙治峰 罗红梅 李美香 石金凤 莫中成 《四川动物》 CSCD 北大核心 2009年第5期746-748,F0003,共4页
目的研究大鼠卵巢中卵泡生长发育的增龄性变化,为生殖生物学研究寻找动物模型。方法用组织学方法,观察了0天~15月大鼠卵巢的形态结构。结果0天见卵母细胞聚集呈团索状,未见卵泡;4天见大量原始卵泡;1周出现大量初级卵泡;2周见次级卵泡;... 目的研究大鼠卵巢中卵泡生长发育的增龄性变化,为生殖生物学研究寻找动物模型。方法用组织学方法,观察了0天~15月大鼠卵巢的形态结构。结果0天见卵母细胞聚集呈团索状,未见卵泡;4天见大量原始卵泡;1周出现大量初级卵泡;2周见次级卵泡;3周次级卵泡数量增加,卵泡腔扩大;1月可见不同发育阶段的卵泡和闭锁卵泡;45天出现黄体;2月~5月,有大量黄体和生长卵泡;6月~8月,卵巢体积缩小,卵泡数量减少;12月萎缩,未见正常卵泡和黄体;15月,纤维化,可见囊泡。结论大鼠从6月开始,生殖功能随月龄增长而进行性衰减,机体逐渐衰老。大鼠可用作研究女性生殖与衰老关系的动物模型。 展开更多
关键词 卵巢 卵泡 发育 大鼠 组织学
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PFT-α对隐睾所致生精细胞凋亡的影响 被引量:1
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作者 谢丽 贺丽萍 +3 位作者 杨挚鹰 石金凤 龙治峰 谢远杰 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期276-281,共6页
目的:通过研究PFT-α对隐睾生精细胞中p53和bcl-2/bax表达的影响,探讨生精细胞凋亡的分子机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为假手术组、隐睾组、隐睾+p53抑制剂(p-i t y three inhibitor-alpha,PFT-α)组、隐睾+PFT-α溶媒(DMSO)组。后三... 目的:通过研究PFT-α对隐睾生精细胞中p53和bcl-2/bax表达的影响,探讨生精细胞凋亡的分子机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为假手术组、隐睾组、隐睾+p53抑制剂(p-i t y three inhibitor-alpha,PFT-α)组、隐睾+PFT-α溶媒(DMSO)组。后三组建立单侧隐睾模型,后两组分别于大鼠腹腔内注射PFT-α和PFT-α溶媒,每天1次,定时定量。7 d后处死所有大鼠,取双侧睾丸称湿重。观察手术侧睾丸生精细胞组织形态,采用TUNEL法结合流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测生精细胞凋亡程度,免疫组织化学和Western印迹分别检测p53和bcl-2/bax的表达。结果:隐睾+PFT-α组与隐睾组和隐睾+PFT-α溶媒组比较,生精上皮排列有序,细胞层数厚,凋亡指数较低,p53和bax表达弱,bcl-2表达强。结论:PFT-α可能通过上调bcl-2,下调p53和bax的表达,抑制隐睾生精细胞的过度凋亡。 展开更多
关键词 PFT-Α 生精细胞 凋亡 P53 BCL-2/BAX
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