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健脾化痰方对PCOS大鼠胰岛素抵抗及慢性炎症因子的影响 被引量：9
1
作者 李晓倩 沈山梅 +8 位作者 毕艳 瞿伟 王勇 房其军 金玺 石欢 韩小娟 李丽蓉 朱大龙 《中华中医药学刊》 CAS 2013年第11期2541-2544,I0012,共5页
目的:建立由脱氢表雄酮诱导的PCOS大鼠模型,观察健脾化痰方对PCOS大鼠胰岛素抵抗及慢性炎症因子水平的影响。方法:23日龄雌性SD大鼠皮下注射脱氢表雄酮6 mg/100 g体重/天,建立PCOS大鼠模型,成模大鼠随机分为4组:模型对照组、二甲双胍组... 目的:建立由脱氢表雄酮诱导的PCOS大鼠模型,观察健脾化痰方对PCOS大鼠胰岛素抵抗及慢性炎症因子水平的影响。方法:23日龄雌性SD大鼠皮下注射脱氢表雄酮6 mg/100 g体重/天,建立PCOS大鼠模型,成模大鼠随机分为4组:模型对照组、二甲双胍组、中药组(健脾化痰方)和二甲双胍+中药组,每组10只,分别给予相应药物进行干预,为期28 d。另设10只同龄SD大鼠为正常对照组。实验结束时,行腹腔糖耐量实验,测定0分、120分血糖及胰岛素水平;隔日将大鼠麻醉后下腔静脉取血,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、性激素结合球蛋白(SHBG)、白细胞介素-6(IL-6)、内脂素(visfatin)和色素上皮衍生因子(PEDF)的水平,HE染色观察大鼠卵巢的组织学改变及排卵情况。结果与正常组比较,模型组大鼠血清T、LH、LH/FSH、血糖、胰岛素、HOMA-IR、IL-6、PEDF水平均显著升高(P<0.05),卵巢组织HE染色光镜下可见各级发育期卵泡及黄体减少,囊性扩张的卵泡增多,卵巢颗粒细胞层数减少;与模型组比较,各治疗组大鼠血清T、LH、LH/FSH、血糖、胰岛素、HOMA-IR、IL-6、PEDF、visfatin水平均显著降低(P<0.05),FSH、SHBG水平均显著升高(P<0.05),卵巢HE染色光镜下见囊性扩张的卵泡明显减少,黄体及各级发育期卵泡增多,卵巢颗粒细胞层数增厚。结论健脾化痰方对PCOS大鼠具有明显改善胰岛素抵抗及降低慢性炎症因子水平的作用,并能够改善卵巢功能、恢复排卵。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 健脾化痰 胰岛素抵抗 慢性炎症因子
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半夏醇提取物对人肝癌HepG2细胞增殖与细胞周期的影响 被引量：17
2
作者 黄鹃 张伟云 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期89-93,共5页
目的:探讨半夏醇提物对人肝癌细胞(HepG2)的抑制作用及其机制。方法:用半夏醇提物(PTE)与体外培养的人肝癌HepG2细胞共培养,采用MTT比色法测定不同剂量组PTE对HepG2细胞生长的影响;采用流式细胞术分析PTE对其细胞周期分布的影响;免疫细... 目的:探讨半夏醇提物对人肝癌细胞(HepG2)的抑制作用及其机制。方法:用半夏醇提物(PTE)与体外培养的人肝癌HepG2细胞共培养,采用MTT比色法测定不同剂量组PTE对HepG2细胞生长的影响;采用流式细胞术分析PTE对其细胞周期分布的影响;免疫细胞化学法观察细胞周期调控相关蛋白cyclin D1、c-myc和β-catenin的表达。结果:PTE作用24 h、48 h和72 h对HepG2细胞的增殖均有显著抑制作用(P<0.05),随剂量增加抑制作用增强,其中400μg/mL PTE作用72 h,其抑制率达54.7%;PTE使HepG2细胞阻滞于G0/G1期,400μg/mL剂量组的比例达到(66.5±2.1)%,与对照组(58.6±1.3)%相比有显著性差异(P<0.01);PTE还使cyclin D1、c-myc和β-catenin蛋白表达显著下降,与对照组相比其阳性面积百分比和光密度值均有显著性下降(P<0.05)。结论:PTE可抑制HepG2细胞的增殖及周期调控相关蛋白cyc-lin D1、c-myc和β-catenin的表达,并使HepG2细胞周期阻滞于G0/G1期。 展开更多
关键词 半夏醇提物 HEPG2 增殖 流式细胞术 免疫细胞化学
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肿瘤生物治疗进展 被引量：9
3
作者 魏继武 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第9期897-901,共5页
癌症患者急需新型、高效的治疗手段。课题组前期研究集中在包括溶瘤病毒和免疫治疗在内的肿瘤生物治疗,并且首次探明了病毒诱导的线粒体自噬和视黄酸诱导基因I样受体信号通路之间的关系。更重要的是,研究发现溶瘤麻疹病毒减毒疫苗株的... 癌症患者急需新型、高效的治疗手段。课题组前期研究集中在包括溶瘤病毒和免疫治疗在内的肿瘤生物治疗,并且首次探明了病毒诱导的线粒体自噬和视黄酸诱导基因I样受体信号通路之间的关系。更重要的是,研究发现溶瘤麻疹病毒减毒疫苗株的溶瘤作用主要是由细胞坏死介导,而非以前研究所认为的细胞凋亡。同时,研究探明了线粒体自噬在细胞凋亡和细胞坏死的转变过程中所起到重要的作用。上述新的发现对于溶瘤免疫治疗的发展是至关重要的。文中就溶瘤病毒与细胞自噬研究进展、免疫诱导三磷酸小干扰RNA研究进展、谷氨酰胺酶在肝癌中的研究进展、纳米材料在对抗肿瘤耐药的应用研究进展进行阐述。 展开更多
关键词 肿瘤 溶瘤病毒 免疫治疗 自噬 肿瘤代谢 免疫诱导小干扰RNA 纳米碳管 光声效应
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GGPPS基因干扰腺病毒载体的构建及鉴定
4
作者 赵银娟 来珊珊 +1 位作者 李朝军 薛斌 《南京师大学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期104-107,112,共5页
构建GGPPS基因干扰腺病毒质粒载体并加以鉴定.根据GGPPS基因序列设计GGPPS干扰序列引物,定向克隆至穿梭载体pshuttle-H1的BglⅡ和HindⅢ位点,PmeⅠ酶切线性化的pShuttle-H1-SiGGPPS干扰质粒,并与腺病毒载体(pAdEasy-1质粒)共同转化E.col... 构建GGPPS基因干扰腺病毒质粒载体并加以鉴定.根据GGPPS基因序列设计GGPPS干扰序列引物,定向克隆至穿梭载体pshuttle-H1的BglⅡ和HindⅢ位点,PmeⅠ酶切线性化的pShuttle-H1-SiGGPPS干扰质粒,并与腺病毒载体(pAdEasy-1质粒)共同转化E.coli BJ5183感受态细菌,产生重组腺病毒载体.用PacⅠ酶切线性化的回收质粒,转染293A细胞包装腺病毒颗粒,在倒置显微镜下观察细胞CPE,用TCID50法测定病毒颗粒的浓度,并初步观察病毒感染PC12细胞对目的基因的干扰效率.经酶切鉴定、测序证实成功构建GGPPS基因干扰腺病毒载体.包装的腺病毒浓缩悬液滴度为1.995×107PFU/mL.GGPPS在人中具有保守性,该病毒能在人源的WRL-68细胞中成功表达,并且对GGPPS基因干扰效率达70%以上. 展开更多
关键词 GGPPS基因 干扰 腺病毒
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虫草菌酸性胞外多糖的抗氧化作用 被引量：5
5
作者 盛璐 李静 +1 位作者 陈佳萍 张伟云 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期370-373,共4页
目的:研究虫草菌酸性胞外多糖(EPS-A)的抗氧化作用。方法:体外建立大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞氧化损伤模型,测定EPS-A对细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力的影响;采用小鼠移植性肝癌模型,测定不同剂量EPS-A对荷瘤小鼠肝、脑... 目的:研究虫草菌酸性胞外多糖(EPS-A)的抗氧化作用。方法:体外建立大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞氧化损伤模型,测定EPS-A对细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力的影响;采用小鼠移植性肝癌模型,测定不同剂量EPS-A对荷瘤小鼠肝、脑和血清中MDA水平及SOD活力的影响。结果:EPS-A显著提高体外培养细胞的抗H2O2氧化能力;能逆转因移植肿瘤而引起的小鼠组织中MDA的升高和SOD的降低,同时显著抑制肿瘤生长。结论:EPS-A具有显著的抗氧化能力。 展开更多
关键词 虫草 酸性胞外多糖 抗氧化 超氧化物歧化酶 丙二醛
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雄激素对卵巢颗粒细胞性激素结合球蛋白表达的调节 被引量：8
6
作者 王文清 王道娟 王勇 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第5期453-458,共6页
目的雄激素信号通路参与调控卵泡早期生长发育以及卵泡闭锁过程,而性激素结合球蛋白是调控卵巢局部雄激素水平的重要因素。文中探讨雄激素对卵巢颗粒细胞中性激素结合球蛋白(SHBG)表达的影响。方法 1培养人卵巢颗粒癌细胞株(KGN),分别... 目的雄激素信号通路参与调控卵泡早期生长发育以及卵泡闭锁过程,而性激素结合球蛋白是调控卵巢局部雄激素水平的重要因素。文中探讨雄激素对卵巢颗粒细胞中性激素结合球蛋白(SHBG)表达的影响。方法 1培养人卵巢颗粒癌细胞株(KGN),分别给予含0 nmol/L DHT,500 nmol/L DHT,500 nmol/L DHT+60μmol/L flutamide的细胞培养液,提取细胞蛋白。用Western blot、免疫荧光等方法检测SHBG的表达。2脱氢表雄酮(DHEA)诱导高雄激素血症模型,12只雌性SD大鼠随机数字表法分为HA组和对照组,每组6只。HA组每只皮下注射DHEA 6 mg/(100 g·d)溶于0.2 m L实验级大豆油,对照组给予等体积的大豆油。连续注射35 d后腹腔注射5%水合氯醛麻醉各组大鼠,下腔静脉取各组大鼠血液,ELISA方法检测各组血清中SHBG的水平;剪切各组大鼠卵巢和部分肝,免疫组化方法检测卵巢颗粒细胞中SHBG的表达,Western blot方法检测肝雄激素受体(AR)及SHBG表达情况。结果与0nmol/L DHT处理24h AR表达(1.06±0.03)相比,300、400、500nmol/L DHT处理后(1.06±0.02、1.61±0.11、2.38±0.14)均升高(P<0.05);SHBG与AR表达变化一致,随DHT浓度梯度增加表达升高,但在500 nmol/L DHT处理24 h后SHBG表达升高显著(P<0.01)。与0 nmol/L DHT比较,500 nmol/L DHT处理后AR蛋白、SHBG蛋白表达均升高(P<0.01);与500 nmol/L DHT比较,500 nmol/L DHT+60μmol/L flutamide处理后AR蛋白、SHBG蛋白表达均降低(P<0.05)。免疫荧光结果表明,与0 nmol/L DHT相比,DHT促进AR的表达,同时加入flutamide可明显抑制AR的表达。SHBG的表达与AR相一致。卵巢组织HE染色结果表明HA组与对照组相比卵巢形态发生改变,表现为多囊卵巢;卵巢免疫组化结果表明SHBG在HA组中表达高于对照组。HA组血清SHBG表达低于对照组[(2.41±0.14)vs(4.80±0.35),P<0.01]。HA组中肝SHBG表达表达低于对照组,而AR蛋白表达高于对照组(P<0.05)。结论雄激素信号通路激活后SHBG在卵巢颗粒细胞癌细胞以及大鼠卵巢颗粒细胞中表达升高。 展开更多
关键词 高雄激素血症 雄激素受体 性激素结合球蛋白 卵巢颗粒细胞
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cnksr2基因干扰腺病毒的构建及鉴定
7
作者 梁金 沈宁 +2 位作者 徐康 李朝军 薛斌 《南京师大学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期103-107,共5页
构建小鼠cnksr2基因干扰腺病毒质粒载体并加以鉴定.根据小鼠cnksr2基因序列设计cnksr2干扰序列引物,定向克隆至穿梭载体pshuttle-H1的BglⅡ和HindⅢ位点,PmeⅠ酶切线性化的pShuttle-H1-Sicnksr2干扰质粒,并与腺病毒载体(pAdEasy-1质粒)... 构建小鼠cnksr2基因干扰腺病毒质粒载体并加以鉴定.根据小鼠cnksr2基因序列设计cnksr2干扰序列引物,定向克隆至穿梭载体pshuttle-H1的BglⅡ和HindⅢ位点,PmeⅠ酶切线性化的pShuttle-H1-Sicnksr2干扰质粒,并与腺病毒载体(pAdEasy-1质粒)共同转化E.coli BJ5183感受态细菌,产生重组腺病毒载体.用PacⅠ酶切线性化的回收质粒,转染293A细胞,包装腺病毒颗粒,在倒置显微镜下观察细胞病理性变化(Cell pathological effect,CPE),用TCID50法测定病毒颗粒的浓度,并初步观察病毒感染PC12细胞对目的基因的干扰效率.经酶切鉴定、测序证实成功构建小鼠cnksr2基因干扰腺病毒载体.包装的腺病毒浓缩悬液滴度为3.98×107PFU/mL.cnksr2在大鼠及小鼠中具有保守性,该病毒能在大鼠来源的PC12细胞中成功表达,并且对cnksr2基因干扰效率达50%以上.结论:成功构建了小鼠cnksr2基因的干扰腺病毒载体. 展开更多
关键词 cnksr2基因 干扰 腺病毒
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固有免疫记忆——训练免疫的研究进展 被引量：5
8
作者 李京蔓 潘宇晨 +1 位作者 窦环 侯亚义 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期992-998,共7页
经典的免疫系统分为固有免疫和获得性免疫。通常认为,获得性免疫具有免疫记忆,而固有免疫不具有免疫记忆。然而,最近研究发现,固有免疫在接受刺激后也能产生记忆,表现为固有免疫细胞的长期功能改变,从而在下次接受刺激时引起更为强烈的... 经典的免疫系统分为固有免疫和获得性免疫。通常认为,获得性免疫具有免疫记忆,而固有免疫不具有免疫记忆。然而,最近研究发现,固有免疫在接受刺激后也能产生记忆,表现为固有免疫细胞的长期功能改变,从而在下次接受刺激时引起更为强烈的免疫反应,这一现象被称为"训练免疫"。研究发现,训练免疫是机体适应能力的体现,可增强宿主防御能力,其形成机制主要与固有免疫细胞内的表观遗传学重组和代谢途径改变有关。训练免疫能影响自身免疫病和自身炎症性疾病的发生发展,通过药物等手段来调整训练免疫或许可以使固有免疫系统恢复正常平衡,达到治疗效果。训练免疫是一个崭新的概念,是哺乳动物免疫反应中宿主防御的一种基本属性,它的提出为人类免疫反应的研究提供了重要的信息。本文综述了训练免疫的具体表现、发生机制及其在健康和疾病中的研究进展。 展开更多
关键词 训练免疫 固有免疫记忆 表观遗传重编程 自身免疫性疾病 自身炎症性疾病.
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溶瘤免疫治疗的机遇与挑战 被引量：6
9
作者 魏继武 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2018年第7期678-682,共5页
癌症已经成为威胁患者健康第一大杀手。从传统治疗方法到21世纪初提出的靶向治疗,再到目前举世瞩目的免疫治疗,每一个惊喜过后是迎接新的挑战。有效的抗肿瘤免疫需要遵循"一个打破,一个维持"的原则,即打破肿瘤的免疫耐受和维... 癌症已经成为威胁患者健康第一大杀手。从传统治疗方法到21世纪初提出的靶向治疗,再到目前举世瞩目的免疫治疗,每一个惊喜过后是迎接新的挑战。有效的抗肿瘤免疫需要遵循"一个打破,一个维持"的原则,即打破肿瘤的免疫耐受和维持机体的免疫平衡。溶瘤病毒是一类具有自我复制能力,并选择性地在肿瘤细胞中复制,从而导致肿瘤细胞裂解和死亡的病毒。文章将从溶瘤病毒特点切入,对其进行免疫治疗的机制及相关研究成果进行介绍,以期为溶瘤免疫治疗的相关研究提供参考。 展开更多
关键词 癌症 免疫治疗 溶瘤病毒
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靶向宿主代谢重编程的溶瘤病毒调控策略 被引量：2
10
作者 孔令凯 吴俊华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2523-2532,共10页
溶瘤病毒是一类天然的或经过基因编辑后能特异性在肿瘤细胞中复制、发挥抗肿瘤效应的病毒。溶瘤病毒的抗肿瘤效应主要通过以下两个方面实现:a.直接的溶瘤效应,例如诱导肿瘤细胞发生凋亡、促使细胞裂解等;b.溶瘤病毒作为一种激活免疫的药... 溶瘤病毒是一类天然的或经过基因编辑后能特异性在肿瘤细胞中复制、发挥抗肿瘤效应的病毒。溶瘤病毒的抗肿瘤效应主要通过以下两个方面实现:a.直接的溶瘤效应,例如诱导肿瘤细胞发生凋亡、促使细胞裂解等;b.溶瘤病毒作为一种激活免疫的药物,通过诱导机体产生强烈的抗肿瘤免疫,达到清除肿瘤的目的。溶瘤病毒疗法作为免疫疗法的一个重要分支,因其具有肿瘤特异性,便于基因改造等优点,成为该领域的研究热点。截至目前,处在临床实验招募和完成阶段的溶瘤病毒疗法虽然已达100多例,但已批准上市的产品仅有4款。溶瘤疗法应用于肿瘤治疗领域还面临着诸多挑战。因此,系统性回顾溶瘤病毒的改造策略,深入了解溶瘤病毒的生物学过程显得尤为必要。病毒依赖于宿主完成复制、增殖过程,其生物学过程与宿主的代谢状态密切相关。肿瘤的标志性特征为代谢重编程,即肿瘤细胞重新构建代谢网络以满足指数生长和增殖的需求并防止氧化应激的过程。通常包括糖酵解的增强和谷氨酰胺分解,以及线粒体功能和氧化还原稳态的变化。通过靶向宿主代谢重编程增强溶瘤病毒的复制、溶瘤能力是当前极具前景的方向。本文综述溶瘤病毒的临床应用现状及与代谢相关的调控机制,为进一步开发新型溶瘤病毒以及联用方式提供新的思路。 展开更多
关键词 溶瘤病毒 免疫疗法 临床试验 代谢重编程 基因改造
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