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芪参益气浸膏对异丙肾上腺素致大鼠慢性心力衰竭治疗作用研究 被引量:10
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作者 李兵 陈相健 +6 位作者 朱舒舒 雍永宏 赵士禄 杨国平 徐晋妉 张寄南 杨笛 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期28-32,共5页
目的:观察芪参益气浸膏对异丙肾上腺素(ISO)诱导大鼠慢性心力衰竭(CHF)的治疗作用和对心肌能量代谢的影响方法:142只雄性SD大鼠随机分为对照组和CHF组,模型制备采用皮下多点注射ISO法,4周后CHF组再随机分为模型组和芪参益气浸膏高、中、... 目的:观察芪参益气浸膏对异丙肾上腺素(ISO)诱导大鼠慢性心力衰竭(CHF)的治疗作用和对心肌能量代谢的影响方法:142只雄性SD大鼠随机分为对照组和CHF组,模型制备采用皮下多点注射ISO法,4周后CHF组再随机分为模型组和芪参益气浸膏高、中、低3个治疗组及曲美他嗪治疗组。平均治疗5周后进行心脏超声检查,并测定心肌组织中高能磷酸化合物的含量和肌浆网Ca2+依赖型ATP酶(SERCA)活性。结果:芪参益气浸膏显著提高心衰大鼠左室短轴缩短率(FS%)(36.35±3.80vs31.48±5.98,P<0.05),左室射血分数也有改善趋势,心肌ATP和总腺苷(TAN)含量比模型组分别提高了19%和31%,与正常对照组无统计学差异(P>0.05)。芪参益气浸膏组和曲美他嗪组心肌SERCA活性显著高于模型组。结论:芪参益气浸膏有改善ISO诱导慢性心衰大鼠心功能的趋势,这种作用可能与心肌能量代谢的改善有关。 展开更多
关键词 慢性心力衰竭 异丙肾上腺素 芪参益气浸膏 能量代谢
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C反应蛋白基因多态性C+1444T与UAP相关性研究 被引量:2
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作者 何国平 沈丹丹 +7 位作者 戚猛 高磊 杨进 戴健 金鸣锋 戚传平 杨笛 张寄南 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1247-1250,共4页
目的:探讨中国苏皖地区汉族人群C反应蛋白(C-reaction protein,CRP)基因C+1444T多态性与不稳定性心绞痛(unstable angina pectoris,UAP)的相关性。方法:以142例UAP患者和307例非冠心病者(对照组)作为研究对象,应用聚合酶链反应-限制性... 目的:探讨中国苏皖地区汉族人群C反应蛋白(C-reaction protein,CRP)基因C+1444T多态性与不稳定性心绞痛(unstable angina pectoris,UAP)的相关性。方法:以142例UAP患者和307例非冠心病者(对照组)作为研究对象,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)方法检测CRP基因C+1444T多态性。结果:CC、CT和TT基因型频率在UAP组和对照组的分布无统计学差异(P值分别为0.117、0.061和0.131)。C等位基因频率在UAP组和对照组分别为90.5%和92.86%,2组间差异无统计学意义(P=0.221)。结论:在中国苏皖地区汉族人群中,CRP基因+1444C/T多态性与UAP的发病无明显相关。 展开更多
关键词 C反应蛋白 基因多态性 不稳定性心绞痛
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C反应蛋白自身抗体与急性冠脉综合征斑块不稳定的相关性研究 被引量:1
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作者 戴健 罗海明 +4 位作者 杨志健 邓中龙 姚望 周训杰 张寄南 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期996-999,共4页
目的:探讨C反应蛋白(CRP)自身抗体与急性冠脉综合征(ACS)患者冠脉病变严重程度、斑块不稳定的相关性。方法:应用间接酶联免疫吸附法检测120例ACS,61例稳定型心绞痛(SAP)和120例对照者血清CRP自身抗体吸光度(A)值,并以对照组的95%可信区... 目的:探讨C反应蛋白(CRP)自身抗体与急性冠脉综合征(ACS)患者冠脉病变严重程度、斑块不稳定的相关性。方法:应用间接酶联免疫吸附法检测120例ACS,61例稳定型心绞痛(SAP)和120例对照者血清CRP自身抗体吸光度(A)值,并以对照组的95%可信区间A值作为判断CRP自身抗体阳性或阴性的界点。结果:ACS征组血浆CRP自身抗体A值水平(1.75±1.09)显著高于SAP(1.27±0.61)和对照组(0.88±0.43),P<0.001,并与冠状动脉病变积分无相关性(P>0.05)。ACS组CRP自身抗体阳性比例(44.17%)显著高于SAP组(8.84%),P<0.001。结论:CRP自身抗体不是反映ACS患者冠状动脉病变严重程度的指标,CRP自身抗体水平可能是随着斑块不稳定而变化的,与ACS患者斑块不稳定相关,但CRP自身抗体在ACS中的作用机制尚不明了。 展开更多
关键词 C反应蛋白自身抗体 酶联免疫吸附实验 急性冠脉综合征 冠心病
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血小板反应素-4基因A387P多态性与心肌梗死的相关性研究
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作者 高磊 何国平 +5 位作者 马继政 戚传平 杨国英 卞智萍 杨笛 张寄南 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2007年第6期376-378,共3页
目的 研究中国华东地区汉族人群血小板反应素-4(thrombospondin-4,TSP-4)基因G29926C(A387P)多态性与心肌梗死(MI)发病的关联性.方法 应用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性方法分析TSP-4 A387P多态性,将639例患者分为MI组和对... 目的 研究中国华东地区汉族人群血小板反应素-4(thrombospondin-4,TSP-4)基因G29926C(A387P)多态性与心肌梗死(MI)发病的关联性.方法 应用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性方法分析TSP-4 A387P多态性,将639例患者分为MI组和对照组,MI组为302例经冠状动脉造影确诊的MI患者,对照组为337例冠状动脉造影阴性、排除冠心病诊断者.结果 GC基因型在两组的分布,差异无显著性意义(5.3%νs7.1%,P=0.34),未检测到CC纯合予.C等位基因频率在两组的分布,差异无显著性意义(2.6%νs 3.6%,P=0.35),对照组TSP-4 387A→P变异频数明显低.多元logistic回归分析显示TSP-4 A387P多态性与MI的发生无显著性相关(OR=0.81,95%CI:0.41~1.62,P=0.55).结论 TSP-4基因387A→P变异在中国华东地区汉族人群中发生频率明显低,且与MI的发病无显著相关性. 展开更多
关键词 心肌梗塞 凝血酶敏感蛋白类 多态性 限制性片段长度 聚合酶链反应
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黄芪甲苷逆转血管紧张素Ⅱ引起的主动脉平滑肌细胞线粒体功能障碍 被引量:7
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作者 路遥 徐晋妉 +4 位作者 卞智萍 吴恒芳 顾春荣 陈相健 杨笛 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期975-980,共6页
目的 :研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,As-Ⅳ)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)引起的线粒体功能障碍的逆转作用。方法:培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs),低血清培养液饥饿处理后分为24 h对照组、... 目的 :研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,As-Ⅳ)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)引起的线粒体功能障碍的逆转作用。方法:培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs),低血清培养液饥饿处理后分为24 h对照组、AngⅡ24 h处理组、48 h对照组、AngⅡ48 h处理组、As-Ⅳ治疗组。24 h对照组和AngⅡ24 h处理组使用线粒体呼吸功能检测仪进行线粒体呼吸功能检测,线粒体ATP含量检测;48 h对照组、AngⅡ48 h处理组和As-Ⅳ治疗组进行线粒体呼吸功能检测、线粒体ATP含量检测、电镜观察线粒体结构变化,共聚焦显微镜检测线粒体内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和Mn-SOD活性检测。结果:AngⅡ24 h处理组与24 h对照组相比,线粒体耗氧率(oxygen consumption rates,OCRs)出现下降,线粒体ATP含量减少(P≤0.05);AngⅡ48 h处理组与48 h对照组相比,线粒体OCRs显著下降,线粒体ATP含量明显减少(P<0.05),线粒体出现嵴模糊、肿胀、空泡,线粒体内ROS水平升高(P<0.05),Mn-SOD活性下降(P≤0.05);As-Ⅳ治疗组较AngⅡ48 h处理组线粒体OCRs和线粒体ATP含量明显回升(P<0.05),线粒体形态结构损伤减轻,线粒体内ROS水平降低(P<0.05),Mn-SOD活性升高(P≤0.05)。结论 :As-Ⅳ可以通过增强线粒体Mn-SOD活性,降低线粒体内ROS水平,进一步减轻线粒体结构损伤并提高线粒体OCRs和ATP含量,从而逆转AngⅡ引起的线粒体功能障碍。 展开更多
关键词 血管紧张素Ⅱ 黄芪甲苷 线粒体功能障碍 活性氧 平滑肌细胞
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PAPP-A基因多态性与子痫前期的相关性研究 被引量:3
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作者 李坤 孙丽洲 +2 位作者 吴恒芳 杨笛 张寄南 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期544-547,共4页
目的:探讨妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)基因多态性与子痫前期的相关性。方法:采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)对129例子痫前期患者(轻度子痫前期64例,重度子痫前期65例)和137例同期入院产检并在南京医科大学第一附属医院分娩... 目的:探讨妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)基因多态性与子痫前期的相关性。方法:采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)对129例子痫前期患者(轻度子痫前期64例,重度子痫前期65例)和137例同期入院产检并在南京医科大学第一附属医院分娩的正常孕妇,进行PAPP-A基因位点S1224Y(A/C)(dbSNP:rs7020782)多态性的分析,比较各基因型及等位基因的频率在子痫前期组和正常组间、重度子痫前期组和轻度子痫前期组间的差别。结果:AC基因型频率在子痫前期组(44.2%)高于对照组(31.4%,P﹤0.05);AC基因型频率在重度子痫前期组(75.4%)明显高于轻度子痫前期组(12.5%,P﹤0.001);C等位基因频率在重度子痫前期组(40.8%)明显高于轻度子痫前期组(18.7%,P<0.001)。结论:PAPP-A基因位点S1224Y(A/C)的AC基因型,C等位基因可能是子痫前期的重要遗传危险因素,并与病情的严重程度相关。 展开更多
关键词 妊娠相关血浆蛋白A 子痫前期 基因多态性
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曲美他嗪对慢性心力衰竭大鼠心肌能量代谢及超微结构的影响 被引量:50
7
作者 李兵 陈相健 +5 位作者 朱舒舒 赵士禄 杨国平 徐晋妉 张寄南 杨笛 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2008年第6期447-450,共4页
目的研究曲美他嗪对异丙肾上腺素诱导的慢性心力衰竭大鼠心肌能量代谢和超微结构的影响。方法72只雄性SD大鼠随机分为对照组(14只)和模型组(58只),模型制备采用皮下多点注射异丙肾上腺素法,4周后模型组大鼠死亡12只,再将存活的46只模型... 目的研究曲美他嗪对异丙肾上腺素诱导的慢性心力衰竭大鼠心肌能量代谢和超微结构的影响。方法72只雄性SD大鼠随机分为对照组(14只)和模型组(58只),模型制备采用皮下多点注射异丙肾上腺素法,4周后模型组大鼠死亡12只,再将存活的46只模型组大鼠随机分为未治疗组(M组,16只)、曲美他嗪治疗组(T组,15只)和培哚普利治疗组(P组,15只)。治疗5周后行二维心脏超声检查和病理形态学观察,并测定心肌组织能量代谢相关指标。结果与M组比较,T组大鼠LVEF、左心室短轴缩短率均提高;光镜和电镜下观察T组和P组心肌损伤程度较M组明显减轻。T组与P组大鼠心肌二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷、ATP/ADP和总腺苷含量与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。T组大鼠心肌肌浆网Ca2+-ATPase活性与对照组和P组比较差异无统计学意义。结论曲美他嗪能够改善心力衰竭大鼠心肌能量代谢、病理和超微结构,并且有改善大鼠心功能的趋势。 展开更多
关键词 心力衰竭 充血性 异丙肾上腺素 曲美他嗪 能量代谢
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肌浆网钙泵测定及其在高血压心肌中的变化 被引量:9
8
作者 祝宝华 张寄南 +1 位作者 马文珠 杨国平 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1998年第5期390-392,共3页
探讨直接利用心肌匀浆测定肌浆网Ca2+-ATP酶的方法,并观察左室肥厚时肌浆网Ca2+-ATP酶的变化。采用p-硝苯基磷酸(p-NPP)法建立SD大鼠心肌匀浆肌浆网Ca2+-ATP酶检测的最佳条件;取6周龄自发性高血... 探讨直接利用心肌匀浆测定肌浆网Ca2+-ATP酶的方法,并观察左室肥厚时肌浆网Ca2+-ATP酶的变化。采用p-硝苯基磷酸(p-NPP)法建立SD大鼠心肌匀浆肌浆网Ca2+-ATP酶检测的最佳条件;取6周龄自发性高血压大鼠(SHR)及对照组饲养24周,观察血压、左室肥厚及心肌肌浆网Ca2+-ATP酶活力。结果在心肌匀浆中建立了肌浆网Ca2+-ATP酶活力测定的最佳条件;并发现SHR左室肥厚时肌浆网Ca2+-ATP酶活力较对照组明显下降(P<0.01)。 展开更多
关键词 肌浆网 ATP酶 高血压 钙泵 左室肥厚
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CRP基因C+1444T多态性与中国苏皖地区汉族人群ACS的易感性无关 被引量:6
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作者 何国平 戚猛 +4 位作者 高磊 沈丹丹 金鸣锋 杨笛 张寄南 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期522-525,共4页
目的:探讨C反应蛋白(C-reactive portein,CRP)基因C+1444T多态性与急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)的易感性。方法:选择2003年11月~2008年5月住院的ACS患者443例(ACS组)和同期经冠脉造影排除冠心病者285例(对照组),采用... 目的:探讨C反应蛋白(C-reactive portein,CRP)基因C+1444T多态性与急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)的易感性。方法:选择2003年11月~2008年5月住院的ACS患者443例(ACS组)和同期经冠脉造影排除冠心病者285例(对照组),采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RELP)方法检测CRP基因C+1444T多态性。结果:ACS组的CC、CT和TT基因型以及C等位基因频率分布与对照组无显著性差异(83.7%vs 86.7%、14.4%vs 12.3%、1.8%vs 1.1%和91.0%vs 92.8%,P值分别为0.292、0.439、0.540和0.243)。调整年龄、性别、吸烟、收缩压、舒张压、血糖和血脂等多因素后采用多元Logistic回归分析显示,CRP基因C+1444T多态性与ACS的发生仍无显著性关联(P>0.05)。结论:在中国苏皖地区汉族人群中,CRP基因C+1444T多态性与ACS的易感性无显著相关性。 展开更多
关键词 C反应蛋白 基因多态性 急性冠脉综合征
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大鼠心肌肌钙蛋白I基因Lys184缺失突变重组腺病毒载体的构建 被引量:5
10
作者 万文辉 吴恒芳 +1 位作者 杨笛 张寄南 《医学研究生学报》 CAS 2008年第4期367-371,共5页
目的:构建SD大鼠心肌肌钙蛋白I(cTnI)赖氨酸(Lys)184缺失突变重组腺病毒载体。方法:利用PCR定点突变方法给大鼠cTn I基因引入Lys184缺失突变,将扩增片段克隆至pMD18-T载体,在C末端用PCR法加6×组氨酸(His)标签序列后,再亚克隆至Aden... 目的:构建SD大鼠心肌肌钙蛋白I(cTnI)赖氨酸(Lys)184缺失突变重组腺病毒载体。方法:利用PCR定点突变方法给大鼠cTn I基因引入Lys184缺失突变,将扩增片段克隆至pMD18-T载体,在C末端用PCR法加6×组氨酸(His)标签序列后,再亚克隆至Adeno-X腺病毒DNA,转染HEK 293细胞,包装形成重组腺病毒(Ad-cTnILys184del)。结果:PCR及测序结果表明,重组腺病毒序列正确,Western blot证明有融合突变蛋白表达。结论:本研究成功地构建了大鼠cTnI Lys184缺失突变重组腺病毒载体,为后续的功能研究提供了有价值的研究材料。 展开更多
关键词 心肌肌钙蛋白Ⅰ 定点突变 重组腺病毒
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C反应蛋白对小鼠主动脉内皮细胞胞内游离钙的影响 被引量:2
11
作者 刘强 张丹丹 +5 位作者 徐晋妉 卞智萍 吴恒芳 顾春荣 陈相健 杨笛 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期679-683,共5页
目的:研究C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)对小鼠主动脉内皮细胞胞内游离钙[Ca2+]i的作用。方法:原代培养小鼠主动脉内皮细胞,取生长状态良好的内皮细胞分为对照组(未加CRP)和不同浓度CRP处理组,25 min后观察各组内皮细胞[Ca2+]i。... 目的:研究C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)对小鼠主动脉内皮细胞胞内游离钙[Ca2+]i的作用。方法:原代培养小鼠主动脉内皮细胞,取生长状态良好的内皮细胞分为对照组(未加CRP)和不同浓度CRP处理组,25 min后观察各组内皮细胞[Ca2+]i。将内皮细胞用1μmol/L阿托伐他汀预处理30 min后,加入100 mg/L CRP,观察阿托伐他汀对CRP作用的影响。结果:与对照组相比,CRP可显著升高内皮细胞胞内[Ca2+]i并呈剂量依赖关系;阿托伐他汀可明显降低CRP引起的[Ca2+]i升高。结论:CRP可导致和加重小鼠主动脉内皮细胞的炎症反应,阿托伐他汀可部分拮抗CRP的致炎作用。 展开更多
关键词 C反应蛋白 内皮细胞 动脉粥样硬化
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实验性心肌损伤大鼠血清心肌肌钙蛋白Ⅰ的检测 被引量:2
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作者 卞智萍 杨笛 +1 位作者 冯振卿 张寄南 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期477-479,共3页
目的应用抗人cTnI单克隆抗体检测大鼠血清cTnI。方法SD大鼠皮下注射异丙肾上腺素8mg/kg,对照组大鼠注射等体积的生理盐水,4h后处死,观察心肌组织病理改变;应用2株抗人cTnI单克隆抗体建立双抗体夹心ELISA法检测大鼠血清cTnI。结果大鼠注... 目的应用抗人cTnI单克隆抗体检测大鼠血清cTnI。方法SD大鼠皮下注射异丙肾上腺素8mg/kg,对照组大鼠注射等体积的生理盐水,4h后处死,观察心肌组织病理改变;应用2株抗人cTnI单克隆抗体建立双抗体夹心ELISA法检测大鼠血清cTnI。结果大鼠注射异丙肾上腺素后心肌呈散在局灶性病变,表现为心肌纤维呈波浪样改变,部分心肌纤维断裂,心肌间质内炎细胞浸润、水肿。血清cTnI(OD值)明显高于对照组大鼠(1.28±0.78∶0.30±0.22,P<0.01)。结论本实验建立了大鼠血清cTnI双抗体夹心ELISA方法。血清cTnI能反映大鼠心肌病理变化,可作为诊断大鼠心肌损伤的一个可靠指标。 展开更多
关键词 心肌损伤 心肌肌钙蛋白Ⅰ 单克隆抗体 ELISA
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KLOTHO基因C-1818T多态性与中国苏皖地区汉族人群急性冠脉综合征的相关性分析 被引量:1
13
作者 何国平 金鸣锋 +5 位作者 杨进 王俊宏 戚传平 高磊 杨笛 张寄南 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期936-941,共6页
目的:探讨KLOTHO基因第4外显子C-1818T多态性与中国苏皖地区汉族人群急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)的可能关系。方法:应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)及基因芯片(gene microarray)技术对375例ACS患... 目的:探讨KLOTHO基因第4外显子C-1818T多态性与中国苏皖地区汉族人群急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)的可能关系。方法:应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)及基因芯片(gene microarray)技术对375例ACS患者(ACS组)和235例经相关检查排除冠心病(CAD)者(对照组)进行KLOTHO基因C-1818T多态性的检测。结果:与对照组相比:①ACS患者CC、CT和TT基因型以及T等位基因型频率分布无显著差异;②老年人(≥60岁)、男性和老年男性ACS患者的CT基因型频率均明显升高(P值分别为0.031、0.035和0.041)。在调整相关危险因素并经多元Logistic回归分析后,CT基因型与老年人和老年男性ACS均存在相关关系(P值分别为0.010和0.047),与男性ACS无明显相关关系(P=0.103)。结论:在中国苏皖地区汉族人群中,KLOTHO基因C-1818T多态性CT基因型与老年和老年男性ACS的发病均存在相关性。 展开更多
关键词 KLOTHO 基因多态性 急性冠状动脉综合征
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中国苏皖地区汉族人群KLOTHO基因启动子G-395A多态性与ACS相关性分析 被引量:1
14
作者 何国平 金鸣锋 +5 位作者 高磊 杨进 王俊宏 沈丽娟 杨笛 张寄南 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1402-1407,共6页
目的:探讨KLOTHO基因启动子区G-395A多态性与中国苏皖地区汉族人群急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)的关系。方法:采用聚合酶链反应和基因芯片方法对326例ACS(ACS组)[分为亚组急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI... 目的:探讨KLOTHO基因启动子区G-395A多态性与中国苏皖地区汉族人群急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)的关系。方法:采用聚合酶链反应和基因芯片方法对326例ACS(ACS组)[分为亚组急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)组和不稳定性心绞痛(unstable angina pectoris,UAP)组]和219例经检查排除冠心病的对照组进行KLOTHO基因G-395A多态性分析。结果:与对照组相比,ACS组、AMI组和UAP组(包括不同年龄和不同性别的亚组)的GG、GA、AA基因型和A等位基因频率均无明显差异(P>0.05)。结论:KLOTHO基因G-395A多态性与中国苏皖地区汉族人群ACS的发病无显著相关性。 展开更多
关键词 KLOTHO基因 多态性 急性冠脉综合征
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肥厚型心肌病基因突变与预后的相关性 被引量:2
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作者 吴恒芳 张寄南 《中国全科医学》 CAS CSCD 2006年第22期1837-1839,共3页
关键词 心肌病 肥厚型 基因突变 预后
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牛心肌肌钙蛋白Ⅰ的纯化及鉴定
16
作者 顾春荣 卞智萍 +2 位作者 徐晋丹 杨笛 张寄南 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期586-588,共3页
目的:提取和纯化牛心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)。方法:心室肌经匀浆、离心、盐析提取、CMSephadexC鄄50柱层析、DEAESephadexA鄄50柱层析,获得牛cTnⅠ。结果:从100g湿重牛心肌中获得15mg牛cTnⅠ,SDS鄄PAGE示牛cTnⅠ相对分子质量约为27ku,纯... 目的:提取和纯化牛心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)。方法:心室肌经匀浆、离心、盐析提取、CMSephadexC鄄50柱层析、DEAESephadexA鄄50柱层析,获得牛cTnⅠ。结果:从100g湿重牛心肌中获得15mg牛cTnⅠ,SDS鄄PAGE示牛cTnⅠ相对分子质量约为27ku,纯度约为90%,Western印迹证实纯化的牛cTnⅠ可被抗人cTnⅠ单克隆抗体识别。结论:实验从牛心肌中成功制备cTnⅠ。 展开更多
关键词 心肌肌钙蛋白Ⅰ 纯化 单克隆抗体
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华东地区汉族人群早发急性冠脉综合征患者血小板反应素-4基因G29926C多态性分析
17
作者 高磊 何国平 +2 位作者 杨国英 戚传平 马继政 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第3期371-373,共3页
目的:探讨中国华东地区汉族人群血小板反应素-4(thrombospondin-4,TSP-4)基因G29926C(A387P)多态性与早发急性冠脉综合征(ACS)发病的关联性。方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法,检测102例早发ACS患者(病例组)和121例年龄... 目的:探讨中国华东地区汉族人群血小板反应素-4(thrombospondin-4,TSP-4)基因G29926C(A387P)多态性与早发急性冠脉综合征(ACS)发病的关联性。方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法,检测102例早发ACS患者(病例组)和121例年龄及性别相匹配的非冠心病者(对照组)的TSP-4A387P多态性。结果:GC基因型在病例组和对照组的分布差异无统计学意义(5.9%vs7.4%,P=0.64),未检测到CC纯合子。C等位基因频率在病例组和对照组分别为2.9%、3.7%(P=0.65)。Logistic回归分析显示,TSP-4A387P多态性与早发ACS的发生无显著性相关(OR=0.71,95%CI:0.22~2.28,P=0.57)。结论:TSP-4基因387A→P变异在中国华东地区汉族人群中发生频率明显低于西方人群,且与早发ACS的发病无显著相关性。 展开更多
关键词 冠状动脉疾病 血小板反应素 基因多态性 聚合酶链反应
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妊娠相关血浆蛋白-A的纯化与鉴定
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作者 顾荣花 孙丽洲 +5 位作者 陈湘健 顾春荣 卞智萍 徐晋丹 杨笛 张寄南 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期167-170,共4页
目的:建立人妊娠血浆相关蛋白A(PAPP-A)的纯化与鉴定方法。方法:利用DEAE-Sephadex CL-6B离子交换和Heparin-sepharose CL-6B亲和层析进行分离纯化,变性SDS-PAGE测定其相对分子质量为200kD,Western blotting鉴定其特异性。结果:获得相... 目的:建立人妊娠血浆相关蛋白A(PAPP-A)的纯化与鉴定方法。方法:利用DEAE-Sephadex CL-6B离子交换和Heparin-sepharose CL-6B亲和层析进行分离纯化,变性SDS-PAGE测定其相对分子质量为200kD,Western blotting鉴定其特异性。结果:获得相对分子质量为200kD的蛋白条带,此条带可与妊娠血浆相关蛋白A单克隆抗体发生特异性反应。结论:成功地从孕妇血清中分离得到妊娠血浆相关蛋白A。 展开更多
关键词 妊娠血浆相关蛋白A 纯化 鉴定
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定量检测人超敏C-反应蛋白双抗体夹心ELISA方法的建立及初步临床应用 被引量:3
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作者 沈丹丹 卞智萍 +4 位作者 何国平 顾春荣 徐晋妉 杨笛 张寄南 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2009年第1期84-89,共6页
目的:建立定量检测人超敏C-反应蛋白(CRP)双抗体夹心EUSA方法。方法:采用Protein A亲和层析法纯化本室制备的抗CRP单克隆抗体(mAbs),并行SDS—PAGE和Western blotting对纯化抗体特性进行鉴定;利用简易过碘酸钠法对抗CRPmAbs进... 目的:建立定量检测人超敏C-反应蛋白(CRP)双抗体夹心EUSA方法。方法:采用Protein A亲和层析法纯化本室制备的抗CRP单克隆抗体(mAbs),并行SDS—PAGE和Western blotting对纯化抗体特性进行鉴定;利用简易过碘酸钠法对抗CRPmAbs进行标记HRP后行抗体配对实验;通过方阵滴定法确定包被抗体和酶标抗体的最适工作浓度;以纯化的CRP抗原为标准品建立标准曲线;以重复性、灵敏性和回收率实验评价ELISA方法。初步对人血浆中的超敏CRP水平进行检测。结果:最佳配对组合为抗CRP mAb 1C10和HRP标记的抗CRP mAb2 C11,最适工作浓度分别为10μg/mL和l:2000,该方法的批内、批间变异系数分别为3.1%~9.7%和3.6%~13.6%,灵敏度达8.3ng/mL,回收率为90%~109%。用ELISA法测定左右冠无明显狭窄者68例,狭窄小于50%者59例和狭窄大于50%患者67例的血浆hs.CRP水平,冠脉狭窄小于50%组(3.7±1.2)mg/L与冠脉无狭窄组(1.8±0.7)mg/L比较明显升高(P〈0.05);狭窄大于50%组(8.9±3.3)mg/L与狭窄小于50%组比较明显升高(P〈0.05)。结论:建立了一种可用于检测人超敏CRP的双抗体夹心ELISA方法。 展开更多
关键词 定量检测 超敏C-反应蛋白 ELISA双抗体夹心法
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