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地塞米松抑制肥大细胞脱颗粒及其机制初探 被引量:6
1
作者 袁栎 郭薇 刘水平 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2003年第6期642-644,共3页
目的 :研究糖皮质激素对Ⅰ型超敏反应中的肥大细胞脱颗粒反应是否有直接作用。方法 :利用流式细胞仪技术观察地塞米松对RBL 2H3细胞 (大鼠嗜碱粒细胞 )脱颗粒程度的影响 ,利用westernblot分析ERK1 ERK2信号的改变。结果 :地塞米松预先... 目的 :研究糖皮质激素对Ⅰ型超敏反应中的肥大细胞脱颗粒反应是否有直接作用。方法 :利用流式细胞仪技术观察地塞米松对RBL 2H3细胞 (大鼠嗜碱粒细胞 )脱颗粒程度的影响 ,利用westernblot分析ERK1 ERK2信号的改变。结果 :地塞米松预先作用于RBL 2H3细胞 ,使AnnexinV标记的细胞阳性率较致敏原活化组明显下降 ,MAPK活性明显降低。结论 :地塞米松抑制肥大细胞脱颗粒反应 。 展开更多
关键词 药效学 地塞米松 肥大细胞 RBL-2H3 脱颗粒 ANNEXIN V MAPK
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血管生成抑素的原核表达及多克隆抗体的制备 被引量:2
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作者 王若宁 刘玲玲 +1 位作者 张一鸣 陈丙莺 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2001年第1期10-12,共3页
目的 :在原核系统中表达并纯化人血管生成抑素 (angiostatin) ,制备鼠抗人血管生成抑素多克隆抗体。方法 :设计引物扩增angiostatin的cDNA ,然后亚克隆入原核表达载体pQE ,并转化入大肠杆菌BL2 1中诱导表达并纯化 ,再用纯化的人血管生... 目的 :在原核系统中表达并纯化人血管生成抑素 (angiostatin) ,制备鼠抗人血管生成抑素多克隆抗体。方法 :设计引物扩增angiostatin的cDNA ,然后亚克隆入原核表达载体pQE ,并转化入大肠杆菌BL2 1中诱导表达并纯化 ,再用纯化的人血管生成抑素免疫小鼠并制备多抗。结果 :通过重组质粒酶切和测序分析等方法 ,筛选出重组阳性克隆 ,转化入大肠杆菌BL2 1中诱导表达并纯化成功 ,再利用纯化的人血管生成抑素制备成功鼠抗人血管生成抑素多克隆抗体。结论 :表达产物及多克隆抗体为下阶段深入研究提供了重要的实验材料。 展开更多
关键词 血管生成因子 血管生成抑制素 原核表达 多克隆抗体 制备
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JNK信号级联的诱导性失活机制 被引量:5
3
作者 古鉴 郭军 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1128-1131,共4页
MAPKKK(MEKK1或ASK1)/MAPKK(SEK1或MKK7)/JNK信号级联是介导细胞凋亡的重要信号通路,但在外界刺激下,机体也能诱导性抑制JNK激活,阻止细胞损伤。MAPK磷酸酶能直接诱导JNK去磷酸化灭活JNK;NO可使JNK的半胱氨酸残基上的巯基亚硝化灭活JNK... MAPKKK(MEKK1或ASK1)/MAPKK(SEK1或MKK7)/JNK信号级联是介导细胞凋亡的重要信号通路,但在外界刺激下,机体也能诱导性抑制JNK激活,阻止细胞损伤。MAPK磷酸酶能直接诱导JNK去磷酸化灭活JNK;NO可使JNK的半胱氨酸残基上的巯基亚硝化灭活JNK。针对JNK上游激酶级联,SGK1或Akt可以磷酸化SEK1的Ser78灭活SEK1;c-FLIPL能够结合MKK7上活化JNK的位点,抑制其对JNK的活化。半胱氨酸转移酶Mu1-1结合MEKK1;TRX、半胱氨酸转移酶π1-1可以结合ASK1,灭活MAPKKK,继而导致细胞内MAPKK/JNK活性降低,阻断信号通路。JNK的失活能增强肿瘤细胞的耐药性,也能抵抗各种刺激导致的细胞损伤。该文综述了上述信号蛋白诱导性灭活JNK的机制及其介导的抗凋亡效应。 展开更多
关键词 JNK 激酶级联 失活 抗凋亡
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MIA影响非洲爪蟾胚胎中胚层的形成 被引量:1
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作者 冯娇娇 殷晨阳 +5 位作者 李昕昕 徐校佩 郭静 王学军 王宁 袁栎 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期426-431,共6页
目的:探讨黑色素瘤抑制蛋白(melanoma inhibitory activity,MIA)在非洲爪蟾早期胚胎发育中的作用。方法:根据热带爪蟾MIA序列在非洲爪蟾EST数据库中找到MIA序列,利用RT-PCR扩增全长序列并克隆至pCS2+,用于测序。利用RT-PCR检测胚胎发育... 目的:探讨黑色素瘤抑制蛋白(melanoma inhibitory activity,MIA)在非洲爪蟾早期胚胎发育中的作用。方法:根据热带爪蟾MIA序列在非洲爪蟾EST数据库中找到MIA序列,利用RT-PCR扩增全长序列并克隆至pCS2+,用于测序。利用RT-PCR检测胚胎发育各阶段MIA mRNA的表达。通过显微注射特异的反义寡核苷酸morpholino(MO)敲降MIA;利用整胚原位杂交检测胚层标志性基因的表达。结果:克隆出非洲爪蟾MIA全长序列。在胚胎发育过程中MIA从受精卵开始持续表达。敲降MIA导致胚胎胚孔闭合延缓,中胚层标志基因xbra表达明显受抑,而内胚层标志性基因sox17α表达无明显改变。结论:MIA表达于非洲爪蟾胚胎发育各阶段,敲降MIA抑制中胚层的形成。 展开更多
关键词 黑色素瘤抑制蛋白 非洲爪蟾 胚胎发育 中胚层
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IRE1α通过UPR影响非洲爪蟾胚胎发育 被引量:2
5
作者 李昕昕 冯娇娇 +4 位作者 侯道荣 郭静 王学军 王宁 袁栎 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1399-1402,共4页
目的:探讨IRE1α在非洲爪蟾胚胎发育中是否介导未折叠蛋白反应(UPR),并在衣霉素(tunicamycin,TM)诱导的胚胎发育畸形中发挥挽救作用。方法:利用TM处理胚胎激发内质网应激;应用显微注射mRNA方法实现基因过表达,通过注射特异的反义寡核苷... 目的:探讨IRE1α在非洲爪蟾胚胎发育中是否介导未折叠蛋白反应(UPR),并在衣霉素(tunicamycin,TM)诱导的胚胎发育畸形中发挥挽救作用。方法:利用TM处理胚胎激发内质网应激;应用显微注射mRNA方法实现基因过表达,通过注射特异的反义寡核苷酸morpholino(MO)实现基因封闭;RT-PCR检测XBP1剪切情况。结果:XBP1剪切随IRE1α过表达及封闭而增加或减少;TM处理导致胚胎发育畸形,XBP1剪切增加,封闭XBP1可部分挽救发育畸形;封闭IRE1a可明显挽救发育畸形,XBP1剪切恢复。结论:IRE1α在非洲爪蟾胚胎发育中介导UPR,封闭IRE1α可逆转TM诱导的胚胎发育畸形,部分通过XBP1途径发挥作用。 展开更多
关键词 IRE1α 非洲爪蟾 胚胎发育
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IRE1α影响非洲爪蟾胰腺发育
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作者 李昕昕 冯娇娇 +6 位作者 殷晨阳 徐校佩 王璐璐 郭静 王学军 王宁 袁栎 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1483-1487,共5页
目的:探讨肌醇依赖性激酶1α(inositol requiring enzyme 1α,IRE1α)对非洲爪蟾胰腺发育的影响。方法:通过显微注射基因特异性反义寡核苷酸实现基因敲降;利用整体胚胎原位杂交方法检测基因表达。结果:IRE1α表达于爪蟾发育中的胰腺;利... 目的:探讨肌醇依赖性激酶1α(inositol requiring enzyme 1α,IRE1α)对非洲爪蟾胰腺发育的影响。方法:通过显微注射基因特异性反义寡核苷酸实现基因敲降;利用整体胚胎原位杂交方法检测基因表达。结果:IRE1α表达于爪蟾发育中的胰腺;利用基因特异性反义寡核苷酸敲降IRE1α后,非洲爪蟾肠道明显异常,胰腺内外分泌标志性基因胰岛素、淀粉酶表达显著减少;胰腺前体细胞的标志基因pdx1和p48表达明显减少;敲降IRE1α下游基因X-盒结合蛋白1(X-box binding protein 1,XBP1)后,非洲爪蟾的胰岛素、淀粉酶表达也明显减少。结论:IRE1α影响非洲爪蟾胰腺发育,可能通过XBP1发挥作用。 展开更多
关键词 肌醇依赖性激酶1α 非洲爪蟾 胰腺发育
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细胞结构动力学——实时调控细胞力学的因素分析
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作者 张小寒 郭军 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2015年第6期540-542,共3页
机械力普遍存在于活细胞的生命活动中,而细胞内力学活动必须依赖骨架结构传递,这种独特的力学形式被称为细胞结构力学.单位时间内细胞结构力学变化受多因素调控,如外力、渗透压、动力分子、张力敏感性离子通道、胞内力学感受器及骨架组... 机械力普遍存在于活细胞的生命活动中,而细胞内力学活动必须依赖骨架结构传递,这种独特的力学形式被称为细胞结构力学.单位时间内细胞结构力学变化受多因素调控,如外力、渗透压、动力分子、张力敏感性离子通道、胞内力学感受器及骨架组装等,构成了细胞结构动力学研究的重要内容.基于荧光共振能量转移(FRET)原理开发的荧光张力探针能整合到细胞骨架内,将细胞结构力学变化转化为光学信号,可能带来细胞力学研究的革命.随着细胞结构动力学研究内容的不断深入,特别是太空时代细胞力学稳态的打破,细胞结构动力学将在生命及医学研究领域显露出越来越重要的地位. 展开更多
关键词 细胞骨架 结构力学 动力学 FRET 荧光张力探针
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