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聚合酶链反应-单链构象多态性分析在家族性高胆固醇血症研究中的应用: 1; 作者郦明芳范乐明 +2 位作者管晓翔李崇勇陈琪《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期97-100,共4页; 目的：探讨聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ－ｓｉｎｇｌｅｓｔｒａｎｄｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）在家族性高胆固醇血症（ｆａｍｉｌ... 展开更多; 关键词家族性高胆固醇血症聚合酶链反应-单链构象多态性分析基因突变诊断发病机制; 在线阅读下载PDF 职称材料

稳定表达GlyRα1的HEK293细胞系的建立被引量：5: 2; 作者蒋玲琳刘丽 +3 位作者朱含章杨青范乐明陈琪《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期647-650,共4页; 目的:建立稳定表达甘氨酸受体α1亚基(GlyRα1)真核表达载体的人胚肾细胞(HEK293)细胞系。方法:构建pcDNA3.1-GlyRα1真核表达载体,应用脂质体介导的转染技术将该质粒导入HEK293细胞,再用G418筛选表达稳定的细胞系。真核细胞中GlyRα1... 展开更多; 关键词甘氨酸受体基因转染 HEK293细胞稳定表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

甘氨酸在细胞ATP耗竭性损伤中的保护作用被引量：4: 3; 作者白小明潘超 +2 位作者范乐明季勇陈琪《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期433-436,446,共5页; 目的:观察甘氨酸(Gly)对ATP耗竭的犬近曲小管上皮细胞(MDCK细胞)的保护作用,探讨其对复能时细胞损伤、增殖及代谢情况的影响。方法:通过正置显微镜观察、四甲基噻唑蓝(MTT)实验、3H鄄TdR掺入实验、乳酸脱氢酶(LDH)释放、台盼蓝活细胞计... 展开更多; 关键词甘氨酸 ATP耗竭复能; 在线阅读下载PDF 职称材料

蛋白激酶C抑制剂Staurosporine对A类清道夫受体胞浆域结构去除后功能的影响被引量：3: 4; 作者管晓翔陈琪范乐明《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第8期693-698,共6页; A类清道夫受体 (scavengerreceptor,SR A)是一种主要位于巨噬细胞膜表面的同源三聚体糖蛋白 ,能够结合和摄取多种配基并介导内移 .在清道夫受体胞浆域有几个潜在的磷酸化位点 ,有关这些磷酸化位点与受体功能之间的确切关系目前尚所知甚... 展开更多; 关键词 A类清道夫受体胞浆域磷酸化蛋白激酶C抑制剂巨噬细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

高脂血症敏感兔肝组织差减cDNA文库的构建被引量：1: 5; 作者李晓宇唐震 +3 位作者何龙嵇曙强陈秀英陈琪《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期459-461,共3页; 目的:构建高脂血症敏感兔肝组织差异表达基因的抑制差减cDNA文库。方法:分别从兔高脂血症敏感组和非敏感组肝组织分离mRNA,合成双链cDNA,酶切后将敏感组cDNA分成两组,分别与不同的接头连接,再通过两轮差减杂交和两次抑制性PCR得到两者... 展开更多; 关键词高脂血症肝组织 CDNA文库抑制性差减杂交; 在线阅读下载PDF 职称材料

β淀粉样多肽人源性抗体的筛选与鉴定被引量：3: 6; 作者夏骏李晓宇 +2 位作者陈秀英范乐明陈琪《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期328-331,共4页; 目的:制备β淀粉样多肽(Aβ)人源性抗体并进行鉴定。方法:以Aβ1-42为抗原,利用噬菌体抗体库技术,通过“吸附-洗脱-扩增”的富集反应,筛选出阳性克隆,进行ELISA检测。将单克隆噬菌粒转化大肠杆菌HB2151,诱导表达可溶性单链抗体(scFv)。... 展开更多; 关键词噬菌体抗体库 AΒ1-42 人单克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名聚合酶链反应-单链构象多态性分析在家族性高胆固醇血症研究中的应用: 1; 作者郦明芳范乐明管晓翔李崇勇陈琪; 机构南京医科大学动脉硬化研究中心; 出处《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期97-100,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(39970310); 文摘目的：探讨聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ－ｓｉｎｇｌｅｓｔｒａｎｄｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）在家族性高胆固醇血症（ｆａｍｉｌｉａｌｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ，ＦＨ）研究中的应用价值。方法：提取ＦＨ患者外周血基因组ＤＮＡ，进行ＰＣＲ－ＳＳＣＰ及ＤＮＡ序列分析。结果：对１家２例临床诊断为ＦＨ的患儿及其父母从基因水平明确了诊断。ＬＤＬ受体基因突变是位于第６外显子的移框突变。结论：ＰＣＲ－ＳＳＣＰ可以从基因水平对ＦＨ患者明确诊断，并可对先证者家系成员早期诊断，以便提供咨询和指导。; 关键词家族性高胆固醇血症聚合酶链反应-单链构象多态性分析基因突变诊断发病机制; Keywords familial hypercholesterolemia polymerase chain reacti on-single strand conformation polymorphism gene mutation; 分类号 R589.2 [医药卫生—内分泌]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名稳定表达GlyRα1的HEK293细胞系的建立被引量：5: 2; 作者蒋玲琳刘丽朱含章杨青范乐明陈琪; 机构南京医科大学动脉硬化研究中心; 出处《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期647-650,共4页; 基金江苏省高校自然科学重大基础研究项目(06KJA31027); 文摘目的:建立稳定表达甘氨酸受体α1亚基(GlyRα1)真核表达载体的人胚肾细胞(HEK293)细胞系。方法:构建pcDNA3.1-GlyRα1真核表达载体,应用脂质体介导的转染技术将该质粒导入HEK293细胞,再用G418筛选表达稳定的细胞系。真核细胞中GlyRα1的表达分别用RT-PCR与Western blot方法检测。结果:在7株转染并经G418反复筛选的HEK293细胞系中,有4株细胞系明显表达GlyRα1的mRNA及其蛋白质,其余3株细胞表达较弱或者没有表达。结论:用pcDNA3.1-GlyRα1转染的HEK293细胞经G418筛选,可成功建立GlyRα1稳定表达系。; 关键词甘氨酸受体基因转染 HEK293细胞稳定表达; Keywords glycine receptor gene transfection HEK 293 cell stable expression; 分类号 Q813 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甘氨酸在细胞ATP耗竭性损伤中的保护作用被引量：4: 3; 作者白小明潘超范乐明季勇陈琪; 机构南京医科大学动脉硬化研究中心; 出处《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期433-436,446,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(30370659); 文摘目的:观察甘氨酸(Gly)对ATP耗竭的犬近曲小管上皮细胞(MDCK细胞)的保护作用,探讨其对复能时细胞损伤、增殖及代谢情况的影响。方法:通过正置显微镜观察、四甲基噻唑蓝(MTT)实验、3H鄄TdR掺入实验、乳酸脱氢酶(LDH)释放、台盼蓝活细胞计数,观察ATP耗竭时加入Gly对MDCK细胞的保护作用,及其后细胞复能时对细胞损伤、增殖及代谢情况的影响。结果:ATP耗竭2h后,Gly处理组细胞台盼蓝染色率较耗竭组降低约50%,LDH释放率明显减少,而3H鄄TdR掺入量为耗竭组细胞的3倍以上。复能不同时相,光镜下Gly处理组细胞损伤程度明显减轻,台盼蓝染色率及LDH释放率均显著低于耗竭组,而MTTD值和3H鄄TdR掺入量明显高于耗竭组。结论:甘氨酸对ATP耗竭的MDCK细胞具有保护作用,可增加复能后细胞存活的机会,防止细胞膜通透性增加,提高受损细胞的增殖活性和代谢潜能。; 关键词甘氨酸 ATP耗竭复能; Keywords glycine ATP depletion recovery; 分类号 R365 [医药卫生—病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蛋白激酶C抑制剂Staurosporine对A类清道夫受体胞浆域结构去除后功能的影响被引量：3: 4; 作者管晓翔陈琪范乐明; 机构南京医科大学动脉硬化研究中心; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第8期693-698,共6页; 基金国家重点基础研究发展规划项目 ( 973 ) (TG2 0 0 0 5 6910 ) 江苏省科委应用基础资助项目 (BK2 0 0 1113 )~~; 文摘 A类清道夫受体 (scavengerreceptor,SR A)是一种主要位于巨噬细胞膜表面的同源三聚体糖蛋白 ,能够结合和摄取多种配基并介导内移 .在清道夫受体胞浆域有几个潜在的磷酸化位点 ,有关这些磷酸化位点与受体功能之间的确切关系目前尚所知甚少 .为深入探讨A类清道夫受体胞浆域与磷酸化之间的关系 ,以及受体胞浆域磷酸化对受体功能的影响 ,实验以含有SR AcDNA质粒为模板 ,采用PCR方法扩增不含胞浆域序列的清道夫受体 ,同时扩增全长清道夫受体作为对照 .PCR产物经纯化酶切后 ,进一步亚克隆到PcDNA3 1/HisB中 ,测序结果表明 ,重组产物能够编码正确的氨基酸序列 .重组产物经脂质体Lipofectamine (LF2 0 0 0 )介导转化入CHO细胞中 ,在含G4 18选择性培养液中培养筛选 14天后 ,分离阳性克隆 ,继续培养 .采用流式细胞计数仪 (FACS)鉴定转化筛选后细胞能否表达具有功能的清道夫受体 .结果发现 ,转化的CHO细胞可以稳定表达SR A的蛋白质 ,但受体胞浆域去除后 ,摄取配基的能力明显弱于全长组 (1∶1 337) .用荧光DiI标记乙酰化低密度脂蛋白(DiI AcLDL) ,37℃孵育转化细胞 5h后 ,激光共聚焦显微镜下观察到 :全长受体转化组细胞荧光散在分布于细胞膜和细胞器 ,而去除胞浆域组荧光只局限于细胞膜 ,说明SR; 关键词 A类清道夫受体胞浆域磷酸化蛋白激酶C抑制剂巨噬细胞; Keywords scavenger receptor cytoplasmic domain phosphorylation protein kinase C inhibitor; 分类号 Q26 [生物学—细胞生物学] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名高脂血症敏感兔肝组织差减cDNA文库的构建被引量：1: 5; 作者李晓宇唐震何龙嵇曙强陈秀英陈琪; 机构南京医科大学动脉硬化研究中心; 出处《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期459-461,共3页; 文摘目的:构建高脂血症敏感兔肝组织差异表达基因的抑制差减cDNA文库。方法:分别从兔高脂血症敏感组和非敏感组肝组织分离mRNA,合成双链cDNA,酶切后将敏感组cDNA分成两组,分别与不同的接头连接,再通过两轮差减杂交和两次抑制性PCR得到两者之间差异表达的cDNA。将PCR产物与T/A载体连接构建差减cDNA文库。挑取克隆进行PCR扩增鉴定。结果:构建的差减cDNA文库包含500个克隆,其中463个有插入片段,大小范围在250～700bp之间。结论:用抑制性差减杂交及T/A克隆技术成功构建了高脂血症敏感兔差异表达基因差减cDNA文库。; 关键词高脂血症肝组织 CDNA文库抑制性差减杂交; Keywords hyperlipidemia suppression subtractive hybridization cDNA library; 分类号 R589.2 [医药卫生—内分泌]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名β淀粉样多肽人源性抗体的筛选与鉴定被引量：3: 6; 作者夏骏李晓宇陈秀英范乐明陈琪; 机构南京医科大学动脉硬化研究中心; 出处《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期328-331,共4页; 基金江苏省高校高新技术产业化项目资助项目(JH01-048); 文摘目的:制备β淀粉样多肽(Aβ)人源性抗体并进行鉴定。方法:以Aβ1-42为抗原,利用噬菌体抗体库技术,通过“吸附-洗脱-扩增”的富集反应,筛选出阳性克隆,进行ELISA检测。将单克隆噬菌粒转化大肠杆菌HB2151,诱导表达可溶性单链抗体(scFv)。结果:经过4轮筛选,获得56个能与AB结合的ELISA阳性克隆。经蛋白印迹检测(Western blot),表达的可溶性seFv抗体片段能够特异性地与Aβ1-42结合,而与牛血清白蛋白(BSA)没有交叉反应。结论:该技术便捷有效,可不经免疫制备出高特异性的人源性抗体,为开展阿尔茨海默病的免疫疗法奠定了基础。; 关键词噬菌体抗体库 AΒ1-42 人单克隆抗体; Keywords phage antibody library β amyloid protein 1-42 human antibody; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学] Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	聚合酶链反应-单链构象多态性分析在家族性高胆固醇血症研究中的应用	郦明芳范乐明管晓翔李崇勇陈琪	《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2002	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	稳定表达GlyRα1的HEK293细胞系的建立	蒋玲琳刘丽朱含章杨青范乐明陈琪	《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2007	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	甘氨酸在细胞ATP耗竭性损伤中的保护作用	白小明潘超范乐明季勇陈琪	《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2005	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	蛋白激酶C抑制剂Staurosporine对A类清道夫受体胞浆域结构去除后功能的影响	管晓翔陈琪范乐明	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	2004	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	高脂血症敏感兔肝组织差减cDNA文库的构建	李晓宇唐震何龙嵇曙强陈秀英陈琪	《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2002	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	β淀粉样多肽人源性抗体的筛选与鉴定	夏骏李晓宇陈秀英范乐明陈琪	《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2004	3	在线阅读下载PDF 职称材料