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SD大鼠肌腱冷冻维持温度选择的实验研究 被引量:5
1
作者 李丽 周琳瑛 +5 位作者 张发惠 郑和平 陈红 陈莲云 钟秀容 陈曦 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2004年第1期84-86,共3页
目的 :探讨不同维持温度冷冻预处理超深低温保存对肌腱超微结构的影响 ,为同种异体肌腱保存移植提供依据。方法 :实验组设计维持温度为 -4 5℃、-5 0℃、-5 5℃、-60℃、-65℃、和 -70℃组 ,以 15 %二甲基亚砜为低温保护剂 ,对SD大鼠肌... 目的 :探讨不同维持温度冷冻预处理超深低温保存对肌腱超微结构的影响 ,为同种异体肌腱保存移植提供依据。方法 :实验组设计维持温度为 -4 5℃、-5 0℃、-5 5℃、-60℃、-65℃、和 -70℃组 ,以 15 %二甲基亚砜为低温保护剂 ,对SD大鼠肌腱进行上述温度冷冻预处理 ,液氮中保存 1周 ,HE染色组织学观察和透射电镜肌腱超微结构观察。结果 :电镜下 -4 5℃组胶原纤维排列较稀疏 ;-60℃组多数腱细胞胞浆水肿 ,核膜不完整 ;-65℃组胞浆内细胞器破坏 ;-70℃组部分腱细胞坏死脱落。 -5 0℃组和-5 5℃组与对照组之间差异不明显 ,肌腱组织超微结构得到良好保持。结论 :肌腱组织冷冻预处理的维持温度在 -5 0℃~ -5 5℃之间 ,-5 0℃是肌腱组织冷冻预处理的最佳维持温度值 ,可获得具有大部分生物活性的肌腱。 展开更多
关键词 同种异体 维持温度 肌腱移植 深低温保存 超微结构
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盐酸小檗碱对HL-60细胞的诱导分化及其作用机制 被引量:9
2
作者 王志红 林菁 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期165-168,共4页
目的:研究盐酸小檗碱对人早幼粒白血病HL-60细胞诱导分化的作用及其分子机制。方法:HL-60细胞经盐酸小檗碱处理后,观察细胞形态学变化,以及细胞NBT还原能力的改变,用流式细胞仪测定细胞增殖周期、CD11b、C-myc、C-fos表达。结果:盐酸小... 目的:研究盐酸小檗碱对人早幼粒白血病HL-60细胞诱导分化的作用及其分子机制。方法:HL-60细胞经盐酸小檗碱处理后,观察细胞形态学变化,以及细胞NBT还原能力的改变,用流式细胞仪测定细胞增殖周期、CD11b、C-myc、C-fos表达。结果:盐酸小檗碱作用于HL-60细胞后,形态学观察显示分化细胞的特征;NBT还原能力增强;CD11b表达升高;细胞被阻滞于G0/G1期,S期细胞数明显减少;C-myc基因表达减弱,C-fos基因表达增强。结论:盐酸小檗碱可诱导HL-60细胞分化成熟,其机制可能是通过调控与HL-60细胞增殖、分化相关基因表达,抑制DNA合成,从而抑制细胞增殖,诱导细胞分化。 展开更多
关键词 盐酸小檗碱 HL-60细胞 分化 作用机制
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慢性乙型肝炎患者血清HBVDNA含量和IL-12对其PBMC产生Th1/Th2类细胞因子影响的相关性研究 被引量:2
3
作者 王少扬 林玉梅 +2 位作者 马卫闽 兰凤华 威少然 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期276-278,共3页
目的:研究慢性乙型肝炎患者血清HBVDNA含量对IL-12诱导其PBMC产生Th1/Th2类细胞因子协同效应的影响。方法:分离 50例慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞,分别与 PHA(100 ug/ml)、HBcAg(... 目的:研究慢性乙型肝炎患者血清HBVDNA含量对IL-12诱导其PBMC产生Th1/Th2类细胞因子协同效应的影响。方法:分离 50例慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞,分别与 PHA(100 ug/ml)、HBcAg(1ug/ml)、HBeAg( 1 ug/ml)单独或联合IL-12(10 ng/ml)体外培养48 h,ELISA法检测培养上清液细胞因子 IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10。荧光定量PCR检测患者血清 DNA含量,并分成 HBVDNA小于103拷贝/ml、103~105拷贝/ml、105~107拷贝/ml、大于 107拷贝/ml4组。结果:以 HBVDNA小于103拷贝/ml组做对照组,比较发现无论抗原(PHA、HBcAg、HBeAg)单独诱导还是联合IL-12共同诱导,随着血清HBVDNA含量的增高,PBMC产生IL-2和IFN-γ水平逐渐降低,产生IL-4和IL-10水平逐渐升高,并且IL-12对PBMC产生IFN-γ的增殖效应逐渐减弱,特别是血清HBVDNA大于 107拷贝/ml患者几乎无明显增殖效应。结论:高水平血清HBVDNA含量对IL-12诱导慢性乙型肝炎PBMC产生IFN-γ协同效? 展开更多
关键词 乙型肝炎 白介素-12 TH1/TH2 细胞因子
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原发性血小板增多症患者JAK2基因突变分析 被引量:2
4
作者 陈捷 田红 +2 位作者 陈涛 王水良 吴颖 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第13期2104-2105,共2页
目的:探讨JAK2 V617F基因突变在原发性血小板增多症患者诊断中的价值。方法:采用PCR扩增及产物测序的方法对25例患者和10例正常对照者进行JAK2 V617F基因突变检测。结果:25例患者中检测到JAK2基因V617F突变11例,占44%。正常对照者中未... 目的:探讨JAK2 V617F基因突变在原发性血小板增多症患者诊断中的价值。方法:采用PCR扩增及产物测序的方法对25例患者和10例正常对照者进行JAK2 V617F基因突变检测。结果:25例患者中检测到JAK2基因V617F突变11例,占44%。正常对照者中未检测到该突变。结论:JAK2基因V617F突变在原发性血小板增多症患者中有较高的检出率,可作为临床诊断的指标之一。 展开更多
关键词 血小板增多 JAK基因 突变分析
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血清透明质酸的变化与供肝冷缺血时间的关系 被引量:2
5
作者 王丹 程烽 《医学研究生学报》 CAS 2008年第8期848-850,共3页
目的:探讨肝移植术中血清透明质酸浓度(HA)的变化与供肝低温保存冷缺血时间的关系。方法:根据低温保存时间的不同,将20例行原位肝移植术的患者分为A组(5—6h)、B组(8—9h)和C组(12h),分别在供肝血流再灌注后5、30、60、120... 目的:探讨肝移植术中血清透明质酸浓度(HA)的变化与供肝低温保存冷缺血时间的关系。方法:根据低温保存时间的不同,将20例行原位肝移植术的患者分为A组(5—6h)、B组(8—9h)和C组(12h),分别在供肝血流再灌注后5、30、60、120和180min,取3组患者血清检测HA浓度。结果:供肝血流再灌注后,患者血清HA浓度逐步下降。A组平均下降速度为4.58μg/L·min^-1,B组为4.16μg/L·min^-1,C组为2.26μg/L·min^-1。A组和B组HA平均下降速度比较的差异无统计学意义(P〉0.05);与C组相比,A组、B组平均下降速度的差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论:供肝低温保存导致的肝内皮细胞损伤程度与供肝低温保存的时间呈正比,并以患者血清HA的下降速度表现出来。 展开更多
关键词 透明质酸 临床肝移植术 冷缺血损伤
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冠状静脉窦的解剖及其在心脏逆行灌注中的临床意义 被引量:1
6
作者 刘道明 张发惠 +2 位作者 陈龙 郑和平 钟世镇 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第4期358-360,363,共4页
目的为临床选择逆行灌注的操作技术及提高灌注效果提供解剖学依据。方法取福尔马林固定的成年尸体心脏标本50例,重点观察冠状静脉窦属支的引流情况及冠状静脉窦口与房室结动脉的解剖关系。结果心中静脉在冠状静脉窦的开口距窦口的最短... 目的为临床选择逆行灌注的操作技术及提高灌注效果提供解剖学依据。方法取福尔马林固定的成年尸体心脏标本50例,重点观察冠状静脉窦属支的引流情况及冠状静脉窦口与房室结动脉的解剖关系。结果心中静脉在冠状静脉窦的开口距窦口的最短距离为(3.4±1.5)mm,左室后静脉、心小静脉汇入心中静脉者分别占30%和4%,心中静脉与心小静脉单独开口于右心房者分别占12%和2%。房室结动脉距冠状静脉窦口前、后点的距离分别为(4.9±2.5)和(9.9±4.2)mm,与窦口长轴成(21.2±15.6)°的交角。窦口左右两侧的心房壁厚度为(1.1±0.2)mm。结论直视下不带气囊的插管法较其他方法更具有解剖学优势,但在作窦口的荷包缝合时应充分考虑右房底壁厚度及窦口与房室结动脉的关系。为提高逆行灌注效果,应尽可能辅以顺行灌注、采用直视下不带气囊的插管法,以及对较大的异位心中静脉开口考虑附加灌注。 展开更多
关键词 心脏 逆行灌注 冠状静脉窦 解剖学 房室结动脉
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N-甲基亚硝基脲诱导小鼠胸腺淋巴瘤TCR基因重排分析 被引量:1
7
作者 黄榕芳 余英豪 李博 《中国比较医学杂志》 CAS 2010年第9期7-11,共5页
目的探讨N-甲基亚硝基脲(MNU)诱导的小鼠胸腺淋巴瘤的单克隆起源。方法采用巢式PCR方法,对8例MNU诱导的胸腺淋巴瘤组织进行T细胞受体β链(TCRβ)和γ链(TCRγ)克隆性基因重排分析,并对TCRγ基因重排的PCR产物直接测序。结果 8例胸腺淋... 目的探讨N-甲基亚硝基脲(MNU)诱导的小鼠胸腺淋巴瘤的单克隆起源。方法采用巢式PCR方法,对8例MNU诱导的胸腺淋巴瘤组织进行T细胞受体β链(TCRβ)和γ链(TCRγ)克隆性基因重排分析,并对TCRγ基因重排的PCR产物直接测序。结果 8例胸腺淋巴瘤检测TCRβ和TCRγ均呈克隆性基因重排。DNA序列测定证实TCRγ基因PCR扩增产物为基因重排产物。结论巢式PCR TCR基因重排检测及DNA序列分析证实,MNU诱导的小鼠胸腺淋巴瘤是来源于T细胞的肿瘤。 展开更多
关键词 恶性淋巴瘤 胸腺 N-甲基亚硝基脲/MNU T细胞受体 聚合酶链反应 基因重排
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抗阴道毛滴虫单克隆抗体的制备及其特性 被引量:1
8
作者 冯修高 唐玉钗 朱忠勇 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1993年第1期32-35,共4页
用杂交瘤技术建立了6株能稳定分泌抗阴道毛滴虫单克隆抗体的细胞株,选取其中3株进行了分析。3株单抗的效价分别是:ⅣA12B1和ⅣA22B1为250000ⅡB2A1为1250000。ⅣA12B1和ⅡB2A为IgG3抗体,ⅣA2281为IgGl抗体。位点分析及免疫酶染色发现,Ⅳ... 用杂交瘤技术建立了6株能稳定分泌抗阴道毛滴虫单克隆抗体的细胞株,选取其中3株进行了分析。3株单抗的效价分别是:ⅣA12B1和ⅣA22B1为250000ⅡB2A1为1250000。ⅣA12B1和ⅡB2A为IgG3抗体,ⅣA2281为IgGl抗体。位点分析及免疫酶染色发现,ⅣA12B1和ⅣA22B1抗同一抗原决定簇,所针对的抗原主要分布于膜上;ⅡB2A1针对的抗原主要分布于胞浆中。3株单抗针对的抗原均为糖蛋白。特异性试验发现,这3株单抗与人白细胞、阴道上皮细胞、白色念珠菌、大肠杆菌及人毛滴虫均无交叉反应。用制备的单克隆抗体,建立了试断滴虫性阴道炎的胶乳凝集试验(LAT)。研究表明,LAT是一种敏感、特异、简单和快速的方法。 展开更多
关键词 抗体 单克隆抗体 阴道毛滴虫 制备
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细菌诱导大鼠慢性阻塞性肺疾病中结缔组织生长因子的mRNA表达
9
作者 文文 赖国祥 +2 位作者 李子龙 柯龙凤 张亚彬 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第4期530-532,共3页
目的:研究结缔组织生长因子的mRNA在细菌感染导致的慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织中的表达。方法:以适量肺炎链球菌反复经气管穿刺注射感染大鼠,制作大鼠慢性阻塞性肺疾病模型,在感染后的不同时间段处死大鼠,采用实时荧光定量PCR,对大鼠... 目的:研究结缔组织生长因子的mRNA在细菌感染导致的慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织中的表达。方法:以适量肺炎链球菌反复经气管穿刺注射感染大鼠,制作大鼠慢性阻塞性肺疾病模型,在感染后的不同时间段处死大鼠,采用实时荧光定量PCR,对大鼠肺组织中结缔组织生长因子的mRNA表达情况进行研究。结果:生理盐水对照组结缔组织生长因子mRNA的表达明显低于肺炎链球菌组(P<0.01)。同时,肺炎链球菌组结缔组织生长因子mRNA的表达随着细菌感染时间的增加而升高(P<0.01)。结论:大鼠长期反复细菌感染可诱导慢性阻塞性肺疾病,其机制可能和结缔组织生长因子表达上调有关。 展开更多
关键词 肺疾病 慢性阻塞性 细菌 结缔组织生长因子
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抗人胎胰相关抗原单克隆抗体C1免疫组化研究
10
作者 郑智勇 王顺友 朱忠勇 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1994年第1期5-7,73,共4页
用人胎胰提取物免疫BALB/c小鼠,获得能稳定分泌IgG2a单抗的杂交瘤细胞C1。免疫组化染色表明,C1与胎胰、胰腺癌、胃癌和大肠癌等组织有较强结合反应,与正常胰腺、十二指肠、胃、大肠等处的消化腺上皮细胞有轻度结合反... 用人胎胰提取物免疫BALB/c小鼠,获得能稳定分泌IgG2a单抗的杂交瘤细胞C1。免疫组化染色表明,C1与胎胰、胰腺癌、胃癌和大肠癌等组织有较强结合反应,与正常胰腺、十二指肠、胃、大肠等处的消化腺上皮细胞有轻度结合反应。初步表明,通过定量分析单抗,C1对消化道癌肿的诊断有一定参考价值。 展开更多
关键词 单克隆抗体 胰腺肿瘤 早期诊断
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大鼠肝多聚核糖体及其mRNA的分离和鉴定
11
作者 兰凤华 赵雨田 《第一军医大学学报》 CSCD 1990年第1期60-63,共4页
利用超速离心法分离大鼠肝多聚核糖体,进一步用Oligo(dT)-Cellulose柱层析法从中直接分离出mRNA。紫外分光光度及蔗糖密度梯度分析均显示此多聚核糖体有较高的纯度。在兔网织红细胞体外翻译系统中,此多聚核糖体表现出较高的生物活性。
关键词 多聚核糖体 体外翻译 MRNA 大鼠肝
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杂化杂交瘤产生双特异性单克隆抗体研究进展
12
作者 吴玉水 朱忠勇 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1995年第3期100-103,共4页
杂化杂交瘤产生的双特异性单克隆抗体已广泛应用于体内外研究,包括细胞间的相互作用、改进免疫学诊断方法、自身免疫性疾病和肿瘤的导向治疗等诸多领域。本文着重就杂交瘤融合技术制备的双特异性单克隆抗体的有关理论和技术的优缺点,... 杂化杂交瘤产生的双特异性单克隆抗体已广泛应用于体内外研究,包括细胞间的相互作用、改进免疫学诊断方法、自身免疫性疾病和肿瘤的导向治疗等诸多领域。本文着重就杂交瘤融合技术制备的双特异性单克隆抗体的有关理论和技术的优缺点,以及应用研究进展作一简要综述。 展开更多
关键词 单克隆抗体 杂交瘤技术 双特异性 抗体 制备
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盆底器官脱垂患者阴道前壁组织中组织蛋白酶B和胱抑素C的mRNA表达 被引量:3
13
作者 李旭楠 宋岩峰 +1 位作者 王水良 余燕 《实用医学杂志》 CAS 2007年第11期1640-1642,共3页
目的:研究组织蛋白酶B(CB)、胱抑素C(CC)的mRNA在正常和盆底器官脱垂(POP)妇女阴道前壁筋膜中的表达。方法:选择绝经前后POP和因子宫良性疾病行阴式手术治疗患者共52例,采用实时荧光定量PCR方法对两组患者阴道前壁筋膜中的CB、CC mRNA... 目的:研究组织蛋白酶B(CB)、胱抑素C(CC)的mRNA在正常和盆底器官脱垂(POP)妇女阴道前壁筋膜中的表达。方法:选择绝经前后POP和因子宫良性疾病行阴式手术治疗患者共52例,采用实时荧光定量PCR方法对两组患者阴道前壁筋膜中的CB、CC mRNA表达情况进行研究。结果:在绝经前后,对照组CB mRNA的表达明显低于POP组,CC mRNA的表达明显高于POP组(P<0.05)。在不同脱垂程度的患者中,绝经前CB的mRNA表达随脱垂程度的增加而增加,CC的mRNA表达则随脱垂程度的增加而降低(P<0.05);绝经后Ⅲ度和Ⅳ度脱垂患者CB的mRNA表达较Ⅱ度明显增加,CC的表达较Ⅱ度明显降低(P<0.05)。结论:POP患者CB和CC表达改变引起细胞外基质的代谢发生改变,可能是POP的发病原因。 展开更多
关键词 子宫脱垂 肽水解酶类 组织蛋白酶B 半胱氨酸蛋白酶抑制剂 聚合酶链反应
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膜渗滤亲和层析法纯化腹水单克隆抗体 被引量:1
14
作者 徐兵 朱忠勇 +1 位作者 唐玉钗 兰小鹏 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第4期373-375,共3页
用膜渗滤亲和层析法纯化腹水单克隆抗体 (McAb) .采用硝酸纤维素膜 (NCM)作固相支持物吸附抗原 ,用负压使小鼠腹水渗滤NCM ,在滤过的同时腹水中的McAb不断结合于NCM上吸附的抗原 ,再将McAb从NCM上解离 ,从而得到高纯度的McAb .用此法纯... 用膜渗滤亲和层析法纯化腹水单克隆抗体 (McAb) .采用硝酸纤维素膜 (NCM)作固相支持物吸附抗原 ,用负压使小鼠腹水渗滤NCM ,在滤过的同时腹水中的McAb不断结合于NCM上吸附的抗原 ,再将McAb从NCM上解离 ,从而得到高纯度的McAb .用此法纯化抗白蛋白 (Alb)McAb .结果提纯的AlbMcAb纯度达PAGE电泳单条带 ,将此McAb点样NCM用于斑点免疫渗滤法 (DIFA)检测Alb ,其灵敏度比用腹水点样时高 2 0倍 .该法快速简便 ,可代替亲和层析柱用于纯化McAb . 展开更多
关键词 单克隆抗体 腹水 亲和层析 纯化
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肾上腺脑白质营养不良蛋白慢病毒载体的构建和表达
15
作者 张林 富显果 +2 位作者 林宇翔 兰风华 王志红 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期884-891,共8页
目的构建并表达野生型及突变型肾上腺脑白质营养不良蛋白(adrenoleukodystrophy protein,ALDP)的慢病毒载体,探讨ABCD1基因突变对ALDP结构和功能的影响。方法选择ABCD1基因的H283R和P534R两个突变,首先采用生物信息学方法,进行突变致病... 目的构建并表达野生型及突变型肾上腺脑白质营养不良蛋白(adrenoleukodystrophy protein,ALDP)的慢病毒载体,探讨ABCD1基因突变对ALDP结构和功能的影响。方法选择ABCD1基因的H283R和P534R两个突变,首先采用生物信息学方法,进行突变致病性及突变体结构稳定性预测;再利用分子克隆技术,将ABCD1基因克隆到pLEX-MCS慢病毒载体,构建野生型慢病毒载体:pLEX-ABCD1,定点诱变构建2个突变型重组载体:pLEX-ABCD1-H283R和pLEXABCD1-P534R,并与其他包装载体共转染293T细胞包装病毒。收集病毒并感染宿主细胞,RT-PCR检测慢病毒感染细胞中野生型与突变型ABCD1 mRNA表达,免疫荧光及蛋白质免疫印迹法分析野生型与突变型ALDP亚细胞定位及表达。结果生物信息学预测显示H283R和P534R为ALD致病性突变;RT-PCR结果显示慢病毒感染细胞中野生型与突变型ABCD1 mRNA均过表达;免疫荧光及蛋白质免疫印迹结果表明,H283R和P534R突变可能导致ALDP突变体表达量下降,但未观察到ALDP定位改变。结论成功构建ABCD1基因慢病毒表达载体,并评估了H283R和P534R突变对ALDP表达及亚细胞定位的影响,为深入研究ALD发病机制提供了实验依据。 展开更多
关键词 ABCD1基因 肾上腺脑白质营养不良蛋白 计算生物学 慢病毒属
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抽滤斑点免疫结合法筛选杂交瘤分泌抗体细胞系
16
作者 徐兵 朱忠勇 +2 位作者 冯修高 唐玉钗 黄俏佳 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1995年第1期67-68,共2页
抽滤斑点免疫结合法筛选杂交瘤分泌抗体细胞系徐兵,朱忠勇,冯修高,唐玉钗,黄俏佳(南京军区福州总医院实验科,福州350001)筛选分泌抗体的杂交瘤细胞是单克隆抗体制备的重要一环.目前常用的方法是以聚苯乙烯板为载体的EL... 抽滤斑点免疫结合法筛选杂交瘤分泌抗体细胞系徐兵,朱忠勇,冯修高,唐玉钗,黄俏佳(南京军区福州总医院实验科,福州350001)筛选分泌抗体的杂交瘤细胞是单克隆抗体制备的重要一环.目前常用的方法是以聚苯乙烯板为载体的ELISA法,至少需lh才能完成.本文... 展开更多
关键词 杂交瘤细胞 分泌抗体 单克隆抗体 制备
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批量渗滤免疫斑点结合法筛选杂交瘤培养上清
17
作者 徐兵 黄俏佳 朱忠勇 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1995年第3期94-95,共2页
批量渗滤免疫斑点结合法筛选杂交瘤培养上清徐兵,黄俏佳,朱忠勇(南京军区福州总医院实验科,福州350001)杂交瘤培养上清中特异性单克隆抗体(MCAb)的筛选需简捷、特异、敏感的方法。我们在抽滤免疫斑点结合法基础上(单... 批量渗滤免疫斑点结合法筛选杂交瘤培养上清徐兵,黄俏佳,朱忠勇(南京军区福州总医院实验科,福州350001)杂交瘤培养上清中特异性单克隆抗体(MCAb)的筛选需简捷、特异、敏感的方法。我们在抽滤免疫斑点结合法基础上(单克隆抗体通讯1995;1(l]):... 展开更多
关键词 杂交瘤技术 单克隆抗体 筛选 渗滤法
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