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苜蓿中华根瘤菌fabA和fabB基因功能的鉴定
被引量：
5
1
作者
胡喆
马金成
+1 位作者
蒋晶晶
王海洪
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期1148-1159,共12页
在大肠杆菌(Escherichia coli)脂肪酸合成酶体系中,fabA基因编码有双功能的3-羟基脂酰ACP脱水异构酶,其异构产物能被fabB基因编码的3-酮基脂酰ACP合成酶Ⅰ延伸,合成不饱和脂肪酸,该FabA-FabB途径被认为是缺氧条件下不饱和脂肪酸合成的...
在大肠杆菌(Escherichia coli)脂肪酸合成酶体系中,fabA基因编码有双功能的3-羟基脂酰ACP脱水异构酶,其异构产物能被fabB基因编码的3-酮基脂酰ACP合成酶Ⅰ延伸,合成不饱和脂肪酸,该FabA-FabB途径被认为是缺氧条件下不饱和脂肪酸合成的经典途径.生物信息学分析发现,苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)的SmFabA与EcFabA相似性达到60.6%,具有相同的保守活性位点和两个保守的α螺旋结构;SmFabB与EcFabB相似性达到61.1%,具有相同的Cys-His-His活性中心.用携带SmfabA和SmfabB的质粒载体遗传互补大肠杆菌温度敏感突变株CY57和CY242,在添加三氯森(TCL)抑制烯脂酰ACP还原酶活性的条件下,转化子能在42℃恢复生长,且放射性薄层层析能检测到转化子中不饱和脂肪酸棕榈油酸(Δ9C16:1)和十八碳烯酸(Δ11C18:1)的合成.体外重建脂肪酸合成反应表明,SmFabA能催化羟脂酰ACP的脱水反应且能够使反-2-癸烯酰ACP异构化,SmFabB能催化不同链长的脂酰ACP和丙二酸单酰ACP的聚合反应.另外,未得到SmFabA和SmFabB的突变株,表明SmFabA和SmFabB可能是苜蓿中华根瘤菌脂肪酸合成酶系中必不可少的关键蛋白.上述结果证实了苜蓿中华根瘤菌fabA和fabB两个基因在不饱和脂肪酸合成中的功能.
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关键词
苜蓿中华根瘤菌
细菌脂肪酸合成
3-羟基脂酰ACP脱水异构酶
3-酮基脂酰ACP合成酶Ⅰ
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题名
苜蓿中华根瘤菌fabA和fabB基因功能的鉴定
被引量：
5
1
作者
胡喆
马金成
蒋晶晶
王海洪
机构
华南农业大学生命科学学院、广东省农业生物蛋白质功能与调控重点实验室
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期1148-1159,共12页
基金
国家自然科学基金(31200028)
高等学校博士学科点专项科研基金(20104404110005)
广东高校优秀青年创新人才培养计划(LYM10038)资助项目~~
文摘
在大肠杆菌(Escherichia coli)脂肪酸合成酶体系中,fabA基因编码有双功能的3-羟基脂酰ACP脱水异构酶,其异构产物能被fabB基因编码的3-酮基脂酰ACP合成酶Ⅰ延伸,合成不饱和脂肪酸,该FabA-FabB途径被认为是缺氧条件下不饱和脂肪酸合成的经典途径.生物信息学分析发现,苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)的SmFabA与EcFabA相似性达到60.6%,具有相同的保守活性位点和两个保守的α螺旋结构;SmFabB与EcFabB相似性达到61.1%,具有相同的Cys-His-His活性中心.用携带SmfabA和SmfabB的质粒载体遗传互补大肠杆菌温度敏感突变株CY57和CY242,在添加三氯森(TCL)抑制烯脂酰ACP还原酶活性的条件下,转化子能在42℃恢复生长,且放射性薄层层析能检测到转化子中不饱和脂肪酸棕榈油酸(Δ9C16:1)和十八碳烯酸(Δ11C18:1)的合成.体外重建脂肪酸合成反应表明,SmFabA能催化羟脂酰ACP的脱水反应且能够使反-2-癸烯酰ACP异构化,SmFabB能催化不同链长的脂酰ACP和丙二酸单酰ACP的聚合反应.另外,未得到SmFabA和SmFabB的突变株,表明SmFabA和SmFabB可能是苜蓿中华根瘤菌脂肪酸合成酶系中必不可少的关键蛋白.上述结果证实了苜蓿中华根瘤菌fabA和fabB两个基因在不饱和脂肪酸合成中的功能.
关键词
苜蓿中华根瘤菌
细菌脂肪酸合成
3-羟基脂酰ACP脱水异构酶
3-酮基脂酰ACP合成酶Ⅰ
Keywords
Sinorhizobium meliloti, bacterial fatty acid synthesis, 3-ketoacyl-ACP synthase I ,3-hydroxydecanoyl-ACP dehydratase/isomerase
分类号
Q93 [生物学—微生物学]
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作者
出处
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1
苜蓿中华根瘤菌fabA和fabB基因功能的鉴定
胡喆
马金成
蒋晶晶
王海洪
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2013
5
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