胆红素对抗脂多糖诱导致大鼠急性肺损伤的实验研究 被引量：12

1

作者 李建强 高晓玲 +2 位作者 刘卓拉 徐永健 张珍祥 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期780-783,共4页

目的:探讨胆红素对抗急性肺损伤(ALI)的作用及其机制。方法:用雄性Wistar大鼠(2 0 0 - 2 5 0g) 30只,随机分为生理盐水对照组、脂多糖(LPS)致ALI动物模型组、胆红素干预组。观察病理形态变化并检测肺组织肺系数(LI) ;支气管肺泡灌洗液(B... 目的:探讨胆红素对抗急性肺损伤(ALI)的作用及其机制。方法:用雄性Wistar大鼠(2 0 0 - 2 5 0g) 30只,随机分为生理盐水对照组、脂多糖(LPS)致ALI动物模型组、胆红素干预组。观察病理形态变化并检测肺组织肺系数(LI) ;支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞(WBC)计数、中性粒细胞(PMN)百分比、蛋白质含量(Pr) ;肺泡通透指数(LPI)及肺组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH -Px)水平变化。结果:(1)ALI模型组LI,BALF中WBC计数、PMN百分比、Pr及LPI均显著高于生理盐水对照组(均P <0 . 0 1)。胆红素干预组LI,BALF中WBC计数和LPI均显著低于AIL模型组(均P <0 .0 1) ,PMN百分比和Pr明显低于ALI模型组(均P <0 . 0 5 ) ,且与生理盐水对照组无显著差异(P >0 .0 5 )。(2 )ALI模型组MDA含量显著多于生理盐水对照组(P <0 .0 1) ,SOD活性和GSH -Px含量都明显低于生理盐水对照组(P <0. 0 1)。胆红素干预组MDA含量明显低于ALI模型组(P <0 . 0 1) ,而SOD活性和GSH -Px含量显著多于ALI模型组(P <0 .0 1,P <0 .0 5 )且与生理盐水对照组无显著差异(P >0 . 0 5 )。结论:胆红素通过其抗氧化作用对抗大鼠急性肺损伤。 展开更多

关键词 胆红素 肺损伤 急性 脂多糖类

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抑癌基因WWOX在肺腺癌细胞株A549中表达的研究 被引量：10

2

作者 周玉龙 徐永健 张珍祥 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2005年第3期234-237,共4页

目的:检测WWOX(WW domain containing oxidoreductase)基因在肺腺癌细胞株A549中的变化及其意义.方法:用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术、聚合酶链反应结合二核苷酸重复序列多态性方法、免疫印迹分析(Western blot)方法分别对WWOX基因... 目的:检测WWOX(WW domain containing oxidoreductase)基因在肺腺癌细胞株A549中的变化及其意义.方法:用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术、聚合酶链反应结合二核苷酸重复序列多态性方法、免疫印迹分析(Western blot)方法分别对WWOX基因6～8外显子在A549细胞转录本丢失、杂和性丢失(LOH)和WWOX蛋白表达异常进行检测.结果:A549细胞样本为WWOX基因6～8外显子转录本的丢失,而在对照的原代培养人气道上皮细胞样本(简称原代培养)未发现WWOX基因的6～8外显子的丢失(P<0.05);A549细胞样本中存在D16S3029及D16S3096两个微卫星位点的LOH 而对照的原代培养中无WWOX基因的杂合性丢失(P<0.05);Western blot结果显示WWOX基因在A549细胞的蛋白表达(A值为817464.90±64916.64)明显低于在原代培养中的蛋白表达(A值为2150142.00±64916.64)(P<0.01).结论:WWOX基因可能在肺腺癌的发生发展中起重要作用;转录本丢失、LOH及蛋白低表达均可能是WWOX基因在肺腺癌中的失活方式. 展开更多

关键词 WWOX基因 杂合性丢失 逆转录-聚合酶链反应 免疫印迹分析 培养的肿瘤细胞 原代培养人气道上皮细胞

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端粒酶逆转录酶mRNA和蛋白质在正常肺组织和正常人外周血淋巴细胞表达的研究 被引量：1

3

作者 王孝养 张珍祥 +4 位作者 徐永健 熊维宁 方慧娟 丘小芬 李西融 《同济医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期112-115,共4页

用核酸原位杂交和用免疫组织化学法检测了 6例豚鼠正常肺组织、10～ 18例癌旁正常肺组织和 14例正常人外周血端粒酶逆转录酶 ( TERT)亚基的 m RNA和相应蛋白质表达。结果显示 ,豚鼠和人体正常肺组织支气管上皮细胞 ,肺泡巨噬细胞和少数... 用核酸原位杂交和用免疫组织化学法检测了 6例豚鼠正常肺组织、10～ 18例癌旁正常肺组织和 14例正常人外周血端粒酶逆转录酶 ( TERT)亚基的 m RNA和相应蛋白质表达。结果显示 ,豚鼠和人体正常肺组织支气管上皮细胞 ,肺泡巨噬细胞和少数肺泡上皮细胞有 TERT m RNA和蛋白质表达。正常人外周血淋巴细胞中 TERT原位杂交阳性表达细胞数为 ( 17.2 6± 8.5 7) % ,免疫组织化学阳性细胞表达数为 ( 2 8.10± 16.78) %。提示 :1正常肺组织支气管上皮细胞、肺泡巨噬细胞、少数肺泡上皮细胞和外周血淋巴细胞有 TERT m RNA和蛋白质表达 ;2正常肺组织中上述细胞TERT m RNA和蛋白质的表达在生理状况下对于保证支气管上皮和肺泡上皮细胞再生 ,维持上皮组织的完整性可能起着重要的作用 ,同时有利于肺泡巨噬细胞发挥其肺内“卫士”功能 ;3淋巴细胞 展开更多

关键词 端粒酶 肺癌 核酸原位杂交 免疫染色 逆转录酶 mRNA

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非小细胞肺癌中KAI1基因表达及其与P53的相关性研究 被引量：1

4

作者 郭超 潘铁成 +2 位作者 汤应雄 周玉龙 郑智 《中国肺癌杂志》 CAS 2005年第3期190-194,共5页

背景与目的近年研究表明,KAI1表达下调与多种肿瘤的转移有关,但其与非小细胞肺癌的关系研究较少,且导致其下调的机制尚未明确。本研究从mRNA和蛋白水平探讨KAI1基因在非小细胞肺癌组织中的表达与患者临床病理特征的关系及其与突变型P53... 背景与目的近年研究表明,KAI1表达下调与多种肿瘤的转移有关,但其与非小细胞肺癌的关系研究较少,且导致其下调的机制尚未明确。本研究从mRNA和蛋白水平探讨KAI1基因在非小细胞肺癌组织中的表达与患者临床病理特征的关系及其与突变型P53蛋白表达的关系。方法采用RTPCR和Westernblot法,检测48例肺癌患者手术切除的新鲜癌组织标本中KAI1mRNA、KAI1/CD82及突变型P53蛋白的表达,20例肺部良性疾病组织和正常肺组织作为对照。结果肺癌组和对照组中KAI1mRNA的阳性率分别为52%和90%(P<0.01),KAI1/CD82蛋白的阳性率分别为48%和85%(P<0.01),突变型P53蛋白阳性率分别为65%和5%(P<0.01)。KAI1mRNA、KAI1/CD82和突变型P53蛋白阳性率与肺癌患者临床分期、细胞分化程度和淋巴结转移有密切关系(P<0.05或P<0.01)。肺癌组织中KAI1mRNA与KAI1/CD82表达呈密切相关性(P<0.01),KAI1/CD82与突变型P53蛋白的表达亦呈显著相关性(P<0.05),KAI1mRNA与突变型P53表达无明显相关性(P>0.05)。结论KAI1基因的低表达可能与非小细胞肺癌的发生、发展和转移有关;其下调的机制可能主要发生在转录水平并与p53基因有关,二者可能作为评估肺癌患者转移潜能的指标。 展开更多

关键词 KAI1 P53 非小细胞肺癌 RT-PCR WESTERN BLOT

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p38蛋白激酶对大鼠肺泡巨噬细胞活化机制的调控 被引量：16

5

作者 黄翠萍 张珍祥 徐永健 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期661-663,共3页

目的 :探讨p38蛋白激酶对LPS诱导大鼠肺泡巨噬细胞激活机制的作用。方法 :提取细胞核蛋白 ,采用Western印迹分析p38蛋白激酶水平。用放射免疫法检测细胞上清TNF -α、IL - 8的含量。结果 :LPS显著增加肺泡巨噬细胞TNF -α、IL - 8的合... 目的 :探讨p38蛋白激酶对LPS诱导大鼠肺泡巨噬细胞激活机制的作用。方法 :提取细胞核蛋白 ,采用Western印迹分析p38蛋白激酶水平。用放射免疫法检测细胞上清TNF -α、IL - 8的含量。结果 :LPS显著增加肺泡巨噬细胞TNF -α、IL - 8的合成 ,呈剂量依赖性诱导p38的活化。特异性p38蛋白激酶抑制剂SB2 0 35 80能显著降低LPS诱导的肺泡巨噬细胞核蛋白p38的含量及细胞上清TNF -α、IL - 8水平。结论 :LPS刺激肺泡巨噬细胞释放炎性细胞因子TNF -α、IL - 展开更多

关键词 P38 蛋白激酶 大鼠 肺泡巨噬细胞 活化机制 调控 肺部炎症 放射免疫法

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[Ca^(2+)]_i对大鼠肺动脉平滑肌细胞膜钙激活氯离子通道的调节作用 被引量：6

6

作者 杨朝 张珍祥 +2 位作者 徐永健 李亚清 叶涛 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期1116-1119,共4页

目的:探讨细胞浆内游离钙离子浓度([Ca2+]i)在常氧、急性和慢性低氧条件下对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)膜钙激活氯离子通道(ClCa)的调节作用。方法:常规离体血管灌流法检测急性低氧时肺动脉环张力变化;钙荧光探针(Fura-2/AM)负载培养... 目的:探讨细胞浆内游离钙离子浓度([Ca2+]i)在常氧、急性和慢性低氧条件下对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)膜钙激活氯离子通道(ClCa)的调节作用。方法:常规离体血管灌流法检测急性低氧时肺动脉环张力变化;钙荧光探针(Fura-2/AM)负载培养PASMCs,观察常氧和慢性低氧条件下[Ca2+]i的变化并由此对ClCa的影响;同时用四唑盐(MTT)比色法观察当[Ca2+]i变化时ClCa对PASMCs增殖的影响。结果:(1)ClCa阻断剂尼氟灭酸(NFA)和indaryloxyaceticacid(IAA-94)可以舒张急性低氧引起的肺动脉环收缩。(2)慢性低氧时[Ca2+]i升高:常氧状态下,PASMCs[Ca2+]i为(123.63±18.98)nmol/L,低氧时为(281.75±16.48)nmol/L(P<0.01)。(3)常氧时,NFA和IAA-94对[Ca2+]i无明显影响(P>0.05)。(4)慢性低氧时,NFA和IAA-94使PASMCs[Ca2+]i由(281.75±16.48)nmol/L降低到(117.66±15.36)nmol/L(P<0.01)。(5)MTT比色法中,慢性低氧状态下NFA和IAA-94引起升高的吸光度(A)值降低,由0.459±0.058到0.224±0.025(P<0.01)。结论:低氧引起[Ca2+]i升高,这可能激活ClCa,对[Ca2+]i起正反馈作用,ClCa可能在低氧肺动脉高压中起作用;慢性低氧条件下ClCa可能参与促进大鼠PASMCs的增殖。 展开更多

关键词 氯化物通道 钙 肺动脉 肌 平滑 低氧肺血管收缩

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p38蛋白激酶抑制剂SB203580对支气管哮喘小鼠气道炎症和Th2类细胞因子的影响 被引量：12

7

作者 黄翠萍 张珍祥 杨和平 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1355-1358,共4页

目的观察特异性p38蛋白激酶(p38 MAPK)抑制剂SB203580对哮喘小鼠气道炎症和Th2类细胞因子的影响。方法BALB/c小鼠30只随机分成3组,即正常对照组、哮喘模型组和SB203580干预组。通过原位分子杂交和酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织IL-4、... 目的观察特异性p38蛋白激酶(p38 MAPK)抑制剂SB203580对哮喘小鼠气道炎症和Th2类细胞因子的影响。方法BALB/c小鼠30只随机分成3组,即正常对照组、哮喘模型组和SB203580干预组。通过原位分子杂交和酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织IL-4、IL-5 mRNA和支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL-4、IL-5)含量的变化,并观察BALF中炎症细胞和肺组织病理学改变。结果哮喘模型组小鼠BALF中炎症细胞计数和IL-4、IL-5含量以及肺组织IL-4、IL-5mRNA的表达较正常对照组明显升高,差异具有显著性(P<0.01);SB203580干预组小鼠上述指标较哮喘模型组小鼠明显降低,差异亦具有显著性(P<0.01),肺组织病理学改变明显减轻。结论SB203580能降低气道炎症细胞的聚集和炎症介质的表达。抑制p38 MAPK的活性可能成为哮喘治疗的新途径。 展开更多

关键词 P38蛋白激酶 哮喘 气道炎症 细胞因子 SB203580

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香烟烟雾提取物通过活化NF-κB上调小鼠巨噬细胞ICAM-1表达 被引量：9

8

作者 许建英 杜永成 +1 位作者 庞敏 徐永健 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1843-1845,共3页

目的:探讨核因子-κB(NF-κB)对香烟诱导的小鼠巨噬细胞细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的调控机制,以及地塞米松的抑制作用。方法:分别用香烟烟雾提取物(CSE)、CSE+二硫基氨基甲酸吡咯烷(PDTC)、CSE+地塞米松(DEX)与小鼠巨噬细胞共同孵育... 目的:探讨核因子-κB(NF-κB)对香烟诱导的小鼠巨噬细胞细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的调控机制,以及地塞米松的抑制作用。方法:分别用香烟烟雾提取物(CSE)、CSE+二硫基氨基甲酸吡咯烷(PDTC)、CSE+地塞米松(DEX)与小鼠巨噬细胞共同孵育1、4和12h,采用免疫细胞化学染色和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测巨噬细胞NF-κB和ICAM-1的表达。结果:(1)CSE组巨噬细胞NF-κB核染色阳性细胞百分比(41.50%±1.30%)明显高于对照组(10.40%±1.57%),P<0.01;CSE+PDTC组和CSE+DEX组阳性细胞百分比(17.89%±2.62%,12.72%±1.10%)明显低于CSE组,均P<0.01;(2)CSE组巨噬细胞ICAM-1mRNA水平(1.34±0.05)及其蛋白表达阳性细胞百分比(43.02%±2.37%)明显高于对照组(0.49±0.03,10.58%±0.88%),均P<0.01;CSE+PDTC组和CSE+DEX组巨噬细胞ICAM-1mRNA水平(0.98±0.05,1.07±0.04)及其蛋白表达阳性细胞百分比(18.42%±1.06%,27.76%±2.06%)明显低于CSE组,均P<0.01;(3)巨噬细胞NF-κB核染色阳性细胞百分比与ICAM-1mRNA水平及其蛋白表达阳性细胞百分比均呈显著正相关(分别为r=0.789和r=0.833,均P<0.01)。结论:香烟可通过诱导巨噬细胞NF-κB的活化在转录水平上上调ICAM-1的表达,地塞米松可抑制香烟诱导的NF-κB活化和ICAM-1的表达。 展开更多

关键词 NF-ΚB 胞间粘附分子1 吸烟 地塞米松 巨噬细胞

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survivin基因在化疗药物诱导的肺癌细胞凋亡中的作用 被引量：11

9

作者 王孝养 张珍祥 李西融 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期144-148,共5页

目的　探讨survivin基因在化疗药物顺铂 (DDP)和足叶乙苷 (VP16 )诱导的肺癌细胞凋亡中的作用。方法　用肺腺癌A5 4 9细胞株进行培养传代 ,MTT试验检测DDP和VP16不同药物浓度对肺癌细胞生长的抑制作用 ,实验分为 :DDP、VP16和对照组。DD... 目的　探讨survivin基因在化疗药物顺铂 (DDP)和足叶乙苷 (VP16 )诱导的肺癌细胞凋亡中的作用。方法　用肺腺癌A5 4 9细胞株进行培养传代 ,MTT试验检测DDP和VP16不同药物浓度对肺癌细胞生长的抑制作用 ,实验分为 :DDP、VP16和对照组。DDP和VP16组的肺癌细胞又分为高浓度和低浓度化疗药物处理组。用逆转率PCR检测sur vivin基因的表达。同时利用流式细胞术定量检测细胞凋亡。结果　不同浓度VP16和DDP对肺癌细胞生长均有明显的抑制作用 ,并有浓度和时间的依赖性。化疗药物组细胞凋亡率和survivin基因表达抑制率高于对照组 ,也有时间依赖性。 展开更多

关键词 SURVIVIN 凋亡 肺肿瘤 顺铂 足叶乙苷

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端粒酶活性检测对胸腔积液的鉴别诊断 被引量：5

10

作者 方慧娟 陈仕新 +2 位作者 王孝养 张珍祥 徐永健 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期185-187,共3页

目的　探讨端粒酶活性检测及与细胞学联合应用对良恶性胸腔积液鉴别诊断的价值。方法　用 TRAP-杂交分析法检测了 76例患者胸腔积液 (包括 4 4例良性胸腔积液和 32例恶性胸腔积液 )端粒酶活性 ,并与常规细胞学方法进行比较。结果　端粒... 目的　探讨端粒酶活性检测及与细胞学联合应用对良恶性胸腔积液鉴别诊断的价值。方法　用 TRAP-杂交分析法检测了 76例患者胸腔积液 (包括 4 4例良性胸腔积液和 32例恶性胸腔积液 )端粒酶活性 ,并与常规细胞学方法进行比较。结果　端粒酶活性在恶性胸腔积液中阳性率为 2 7/32 (85 % ) ,良性胸腔积液中阳性率为 11/44 (2 5 % )。端粒酶活性检测诊断恶性胸腔积液的敏感性为 0 .85 ,特异性 0 .75 ;和细胞学联合诊断恶性胸腔积液的敏感性 0 .91,特异性 0 .75。结论　端粒酶活性检测对恶性胸腔积液的诊断与细胞学方法比较其敏感性较高而特异性较低。 展开更多

关键词 胸腔积液 鉴别诊断 端粒酶活性检测 细胞学

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钾通道对大鼠肺动脉平滑肌细胞[Ca^(2+)]_i的调节 被引量：5

11

作者 樊再雯 张珍祥 徐永健 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期150-153,共4页

目的 :探讨在常氧、低氧条件下钾通道对大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMCs) [Ca2 + ]i 的调节。方法 :采用钙荧光探针 (Fura - 2 /AM)负载培养的大鼠PASMCs,观察常氧、低氧培养后 3种钾通道抑制剂 (4AP ,TEA、Glib)对PASMCs [Ca2 + ]i的调... 目的 :探讨在常氧、低氧条件下钾通道对大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMCs) [Ca2 + ]i 的调节。方法 :采用钙荧光探针 (Fura - 2 /AM)负载培养的大鼠PASMCs,观察常氧、低氧培养后 3种钾通道抑制剂 (4AP ,TEA、Glib)对PASMCs [Ca2 + ]i的调节 ,同时用四唑盐 (MTT)比色法比较 4AP、TEA、Glib对大鼠PASMCs增殖的影响。结果 :(1)常氧状态下 ,PASMCs[Ca2 + ]i 为 (15 6 91± 8 6 0 )nmol/L ,低氧时为 (2 94 0 1± 16 81)nmol/L(P <0 0 1)。 (2 )常氧状态下 ,4AP可引起PASMCs[Ca2 + ]i 升高 ,达 (2 80 5 2± 2 3 2 1)nmol/L(P <0 0 1) ,而TEA、Glib无此作用。 (3)低氧时 ,4AP和TEA都可引起PASMCs[Ca2 + ]i 的升高 ,分别为 (42 2 4 1± 2 4 2 8)nmol/L、(380 84± 11 0 2 )nmol/L(P <0 0 1) ,Glib无作用。(4)MTT比色法中 ,常氧和低氧状态下 4AP均引起吸光度 (A)值升高 ,分别是 0 5 82± 0 0 6 2 ,0 873± 0 0 4 3(P <0 0 1)。TEA仅在低氧时A值升高 (0 72 9± 0 0 4 1,P <0 0 5 ) ,而Glib无论常氧还是低氧均无影响。结论 :无论常氧还是低氧条件下 ,电压依赖性钾通道 (KV)对PASMCs[Ca2 + ]i 及其增殖起主要作用。钙激活的钾通道 (KCa)在常氧条件下对[Ca2 + ]i 不起调节作用 ,而在低氧下使 [Ca2 + ] 展开更多

关键词 钾通道 钙 肺动脉 肌 平滑

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线粒体膜电位对缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞内细胞色素C分布及细胞增殖的影响 被引量：2

12

作者 胡红玲 张珍祥 +2 位作者 汪涛 赵建平 徐永健 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期166-169,280,共5页

目的从线粒体ATP敏感性钾通道(MitoKATP)入手,研究在缺氧影响大鼠肺动脉平滑肌细胞内细胞色素C的分布及其引起细胞增殖变化中线粒体膜电位(Δψm)的作用。方法获取大鼠正常肺组织,分离出肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)进行常氧或慢性缺氧培... 目的从线粒体ATP敏感性钾通道(MitoKATP)入手,研究在缺氧影响大鼠肺动脉平滑肌细胞内细胞色素C的分布及其引起细胞增殖变化中线粒体膜电位(Δψm)的作用。方法获取大鼠正常肺组织,分离出肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)进行常氧或慢性缺氧培养。将标本分为6组:①正常对照组;②MitoKATP开放剂Diazoxide组;③MitoKATP阻断剂5-hydroxydecanoate(5-HD)组;④慢性缺氧(CH)组;⑤CH+Diazoxide组;⑥CH+5-HD组。利用激光共聚焦显微镜成像检测线粒体膜电位,Western blot法检测线粒体和细胞质中细胞色素C蛋白含量,流式细胞仪检测细胞周期,MTT法检测细胞增殖情况。结果①Diazoxide作用24 h后,细胞R-123荧光强度明显增强,线粒体膜电位去极化,细胞胞质与线粒体细胞色素C的比值明显降低,细胞明显增殖,凋亡减少,与正常对照组比较均P<0.05;而5-HD作用24h与正常对照组比较,上述指标无明显变化,均P>0.05;②慢性缺氧24 h,结果与Diazoxide组相似,各项指标与正常对照组比较均P<0.05;CH+Diazoxide组与CH组比较,细胞R-123荧光强度明显增强,线粒体膜电位去极化,细胞胞质与线粒体细胞色素C的比值明显降低,细胞明显增殖,凋亡减少,与CH组比较均P<0.05;CH+5-HD组与CH组比较,细胞R-123荧光强度明显减弱,线粒体膜电位部分消失,细胞胞质与线粒体细胞色素C的比值明显升高,细胞增殖减少,凋亡增多,与CH组比较均P<0.05。结论缺氧可以引起MitoKATP的开放以及线粒体膜电位去极化,进而抑制了细胞色素C从细胞线粒体释放到细胞质,抑制线粒体凋亡途径,从而参与并影响了肺动脉高压的发生发展。 展开更多

关键词 肺动脉平滑肌细胞 缺氧 钾通道 线粒体膜电位 细胞色素C

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血管内皮生长因子在肺癌伴恶性胸腔积液中的检测及其意义 被引量：3

13

作者 邹晖 熊盛道 徐永健 《中国肺癌杂志》 CAS 2004年第1期70-72,共3页

关键词 血管内皮生长因子 肺癌 恶性胸腔积液 检测 并发症 预后

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P38蛋白激酶对肺泡巨噬细胞环氧合酶-2 mRNA表达的影响 被引量：3

14

作者 黄翠萍 张珍祥 徐永健 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期39-42,共4页

目的　探讨 P3 8蛋白激酶对肺泡巨噬细胞环氧合酶 - 2 m RNA表达的影响。方法　采用蛋白质印迹、逆转录-聚合酶链反应 ( RT- PCR)和放射免疫分析法检测脂多糖 ( L PS)刺激的肺泡巨噬细胞 ( AM)核提取物 P3 8蛋白激酶、环氧合酶 - 2 ( CO... 目的　探讨 P3 8蛋白激酶对肺泡巨噬细胞环氧合酶 - 2 m RNA表达的影响。方法　采用蛋白质印迹、逆转录-聚合酶链反应 ( RT- PCR)和放射免疫分析法检测脂多糖 ( L PS)刺激的肺泡巨噬细胞 ( AM)核提取物 P3 8蛋白激酶、环氧合酶 - 2 ( COX- 2 ) m RNA及细胞培养上清血栓素 B2 ( TXB2 )和 6-酮 -前列腺素 F1α ( 6- Keto- PGF1α)含量的变化 ,并观察特异性 P3 8蛋白激酶抑制剂 SB2 0 3 5 80对 L PS作用的影响。结果　 L PS能显著刺激肺泡巨噬细胞 P3 8蛋白激酶活化 ,COX- 2 m RNA及细胞培养上清 TXB2 和 6- Keto- PGF1α含量随之增加 ( P<0 .0 1) ;SB2 0 3 5 80能显著抑制上述作用 ;P3 8蛋白激酶的活化与 COX- 2 m RNA及细胞培养上清 TXB2 和 6- Keto- PGF1α含量之间呈显著正相关 ( r=0 .862 ,0 .5 69,0 .715 ,均为 P<0 .0 1)。结论　 L PS刺激肺泡巨噬细胞 P3 8蛋白激酶活化可能参与了对 COX- 2 m 展开更多

关键词 脂多糖 肺泡巨噬细胞 P38蛋白激酶 环氧合酶

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脂多糖对吸烟大鼠肺泡巨噬细胞增殖细胞核抗原及肺泡Ⅱ型上皮细胞Fas/FasL系统表达的影响 被引量：2

15

作者 傅娟 徐永健 张珍祥 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期154-156,共3页

目的 :研究脂多糖 (LPS)对吸烟大鼠肺泡巨噬细胞 (AM)增殖细胞核抗原 (PCNA)及肺泡Ⅱ型上皮细胞Fas/FasL系统表达的作用。方法 :应用免疫组织化学SABC法和免疫荧光标记技术 ,检测不同时期LPS对吸烟大鼠肺泡巨噬细胞PCNA表达和肺泡Ⅱ型... 目的 :研究脂多糖 (LPS)对吸烟大鼠肺泡巨噬细胞 (AM)增殖细胞核抗原 (PCNA)及肺泡Ⅱ型上皮细胞Fas/FasL系统表达的作用。方法 :应用免疫组织化学SABC法和免疫荧光标记技术 ,检测不同时期LPS对吸烟大鼠肺泡巨噬细胞PCNA表达和肺泡Ⅱ型上皮细胞Fas/FasL系统表达的影响。结果 :吸烟大鼠AM上PCNA表达在第3、4月达高峰 ,LPS刺激的各组PCNA表达明显高于不加LPS组 (P <0 0 1) ;肺泡Ⅱ型上皮细胞Fas/FasL系统表达在加入LPS组表达显著高于未加LPS组 (P <0 0 1) ,且与AM上PCNA表达的变化相平行。结论 :吸烟引起气道AM增殖速率加快 ,AM在肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤与修复过程中起重要作用。 展开更多

关键词 吸烟 脂多糖类 增殖细胞核抗原 阻塞性肺疾病 COPD

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大鼠膈肌细胞的体外培养 被引量：1

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作者 贾红轩 熊盛道 +1 位作者 牛汝楫 徐永健 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2003年第4期527-530,共4页

目的 :探索体外培养大鼠膈肌细胞的可行性 ,观察体外培养的大鼠膈肌细胞的生长特点。方法 :用胰蛋白酶消化的方法分离得到膈肌细胞的前体细胞———肌卫星细胞 ,在 37℃、体积分数 5 %CO2 恒温培养箱内培养 ,用相差显微镜观察培养细胞... 目的 :探索体外培养大鼠膈肌细胞的可行性 ,观察体外培养的大鼠膈肌细胞的生长特点。方法 :用胰蛋白酶消化的方法分离得到膈肌细胞的前体细胞———肌卫星细胞 ,在 37℃、体积分数 5 %CO2 恒温培养箱内培养 ,用相差显微镜观察培养细胞的生长过程。结果与结论 :成功地培养出了大鼠膈肌细胞 ,体外培养膈肌细胞是可行的 ,其发生生长过程呈骨骼肌细胞发生生长特点。在体外培养条件下 。 展开更多

关键词 大鼠 膈肌细胞 体外培养 可行性 前体细胞 肌卫星细胞

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粘着斑激酶活性对气道上皮细胞粘附迁移的影响 被引量：1

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作者 许丽 汪涛 +1 位作者 张珍祥 徐永健 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期297-300,共4页

目的研究粘着斑激酶(FAK)磷酸化对细胞外基质成份诱导的气道上皮细胞粘附、迁移的影响,探讨FAK活化对气道上皮细胞损伤后修复的影响机制。方法通过纤维连接蛋白(FN)诱导培养的气道上皮细胞,以计数法测定细胞粘附率,以损伤实验测定细胞... 目的研究粘着斑激酶(FAK)磷酸化对细胞外基质成份诱导的气道上皮细胞粘附、迁移的影响,探讨FAK活化对气道上皮细胞损伤后修复的影响机制。方法通过纤维连接蛋白(FN)诱导培养的气道上皮细胞,以计数法测定细胞粘附率,以损伤实验测定细胞迁移速度,以Westernblot和免疫共沉淀检测FAK表达水平及其酪氨酸磷酸化程度;以反义FAK寡核苷酸(ODNs)经脂质体转染细胞,观察其对FAK表达和磷酸化、细胞粘附和迁移的影响。结果FN诱导的气道上皮细胞粘附率和迁移速度明显增高,同时FAK表达水平及其酪氨酸磷酸化程度显著增高;经脂质体转染了反义FAK寡核苷酸的气道上皮细胞粘附率和迁移速度明显降低,同时FAK表达水平及其酪氨酸磷酸化程度降低,且与气道上皮细胞粘附率和迁移速度的降低成显著正相关。结论FAK是细胞外基质诱导气道上皮细胞粘附、迁移的重要信号分子,其活化促进气道上皮细胞的粘附和迁移,在气道上皮细胞损伤后修复过程中起重要作用。 展开更多

关键词 粘着斑激酶 寡核苷酸 反义 气道上皮细胞

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慢性低氧对大鼠肺组织电压门控钾通道表达的影响 被引量：1

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作者 樊再雯 张珍祥 徐永健 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期1989-1993,共5页

目的 :探讨慢性低氧对大鼠肺组织电压门控钾通道亚型Kv1 5、Kv2 1、Kv9 3表达的影响。方法 :将12只Wistar大鼠随机分为对照组和慢性低氧组 ,每组 6只。采用RT -PCR和Westernblot对大鼠肺组织匀浆中Kv1 5、Kv2 1、Kv9 3mRNA和Kv1 5蛋... 目的 :探讨慢性低氧对大鼠肺组织电压门控钾通道亚型Kv1 5、Kv2 1、Kv9 3表达的影响。方法 :将12只Wistar大鼠随机分为对照组和慢性低氧组 ,每组 6只。采用RT -PCR和Westernblot对大鼠肺组织匀浆中Kv1 5、Kv2 1、Kv9 3mRNA和Kv1 5蛋白质的表达进行观察。结果 :慢性低氧组大鼠肺组织匀浆中Kv1 5、Kv2 1、Kv9 3mRNA和Kv1 5蛋白质表达明显低于对照组 (P <0 0 1)。结论 :慢性低氧可以从转录、翻译两个水平抑制大鼠肺组织中Kv1 5、Kv2 1Kv9 3的表达 ,Kv1 5、Kv2 1、Kv9 3表达的减少必将导致Kv数目的减少和电流的降低。Kv1 5、Kv2 1、Kv9 展开更多

关键词 钾通道 基因表达 缺氧 肺 大鼠

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哮喘肺组织和外周血淋巴细胞端粒酶逆转录酶表达上调及其意义

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作者 王孝养 莫碧文 +3 位作者 丘小芬 李西融 张珍祥 熊维宁 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期45-49,共5页

目的:研究支气管哮喘(哮喘)肺组织和哮喘病人外周血淋巴细胞端粒酶逆转录酶(TERT)mRNA和蛋白质的表达,并探讨其在哮喘发病机制中的作用及其临床意义。方法:用核酸原位杂交和免疫组织化学方法检测了6只豚鼠哮喘模型组织、6只正常对照组... 目的:研究支气管哮喘(哮喘)肺组织和哮喘病人外周血淋巴细胞端粒酶逆转录酶(TERT)mRNA和蛋白质的表达,并探讨其在哮喘发病机制中的作用及其临床意义。方法:用核酸原位杂交和免疫组织化学方法检测了6只豚鼠哮喘模型组织、6只正常对照组肺组织、16例哮喘发作期和 14例正常人外周血淋巴细胞 TERT mRNA和蛋白质的表达。结果:哮喘豚鼠肺组织中气道上皮细胞和淋巴小结,以及哮喘病人外周血淋巴细胞TERT mRNA和蛋白质表达强度显著高于正常对照组,哮喘病人外周血淋巴细胞 TERT mRNA和蛋白质表达的阳性指数与哮喘病人 FEV1/预计值、MVV/预计值比值呈显著负相关,与血清IgE水平呈显著正相关。结论:(1)TERT在哮喘豚鼠气道上皮、肺淋巴小结和人体外周血淋巴细胞中表达上调;(2)检测人体外周血液中淋巴细胞对TERT表达强度有望可以作为衡量哮喘病情的指标。 展开更多

关键词 支气管哮喘 端粒酶 端粒酶逆转录酶 核酸 原位杂交 免疫染色

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端粒酶逆转录酶、RNA成分和相关蛋白1基因在肺癌组织中的表达及其临床意义

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作者 陈仕新 王孝养 +1 位作者 方慧娟 徐永健 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期287-289,312,共4页

用逆转录 PCR(RT- PCR)法对手术切除的 4 0例肺癌组织 ,9例肺部良性实质性病变和 2 2例癌旁正常组织的端粒酶逆转录酶 (h TERT)、 RNA成分 (h TR)和相关蛋白 1(h TEP1) m RNA表达进行了检测 ,并与肺癌的病理分型、TNM分期进行了比较。... 用逆转录 PCR(RT- PCR)法对手术切除的 4 0例肺癌组织 ,9例肺部良性实质性病变和 2 2例癌旁正常组织的端粒酶逆转录酶 (h TERT)、 RNA成分 (h TR)和相关蛋白 1(h TEP1) m RNA表达进行了检测 ,并与肺癌的病理分型、TNM分期进行了比较。发现肺癌组织、肺部良性实质性病变、癌旁正常组织的 h TR、h TEP1普遍呈阳性表达 ,3组间阳性率比较差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ,而 h TERT基因表达肺癌组织 (32 / 4 0 ,80 % )高于良性实质性病变 (5 / 9,5 6 % ) ,也高于癌旁正常组织 (3/ 2 2 ,13% ) ,3组间差异有极显著性 (P<0 .0 0 1)。h TERT在肺癌组织中的表达率 期 (14 / 14 ,10 0 % )高于 期 (11/ 14 ,78% ) , 期高于 期 (7/ 12 ,5 8% )。鳞、腺癌间 h TERT m RNA表达无显著差异。结果表明 :端粒酶基因表达上调在肺癌发生发展中起重要作用 ,端粒酶也参与部分肺部良性实质性病变发病机制 ;用 RT- PCR检测 h TERT m RNA表达有助于肺癌恶性程度的判断和肺部良。 展开更多

关键词 端粒酶逆转录酶 RNA 相关蛋白1基因 临床意义 端粒酶 肺癌 逆转录聚合酶链反应

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