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昆虫病毒增强蛋白的研究新进展 被引量:33
1
作者 廖玲洁 彭建新 洪华珠 《中国生物防治》 CSCD 1999年第1期41-44,共4页
本文综述近年来对颗粒体病毒增强蛋白基因克隆、生化特性、增效机理的研究,还述及核型多角体病毒基因组中增强蛋白的同源基因以及痘病毒增强蛋白的研究新进展。
关键词 昆虫病毒 增强蛋白 围食膜
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苏云金杆菌δ-内毒素对离体昆虫细胞作用机制的研究 被引量:2
2
作者 周世力 洪华珠 陈曲侯 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期342-345,共4页
利用BacilusthuringienisisHD-1δ-内毒素作用离体培养的昆虫细胞(Px),并测定其对Px细胞葡萄糖、Na+、K+离子吸收的影响.实验表明,δ-内毒素作用Px细胞后0.5min内,细胞对葡萄糖的吸... 利用BacilusthuringienisisHD-1δ-内毒素作用离体培养的昆虫细胞(Px),并测定其对Px细胞葡萄糖、Na+、K+离子吸收的影响.实验表明,δ-内毒素作用Px细胞后0.5min内,细胞对葡萄糖的吸收大量增加,10min后,葡萄糖的吸收基本停止,细胞内Na+含量的快速增加发生在δ-内毒素作用5min后,K+离子的含量在1min后开始增加,但增加缓慢. 展开更多
关键词 苏云金杆菌 δ-内毒素 Px细胞系 昆虫细胞
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苏云金芽孢杆菌晶体毒素感染敏感昆虫离体与活体细胞的病理学比较研究 被引量:1
3
作者 洪华珠 肖明 +2 位作者 魏林 虢华山 陈曲侯 《中国生物防治学报》 CSCD 1990年第S1期39-42,共4页
用苏云金芽孢杆菌蜡螟变种81—6菌株的晶体毒素感染菜青虫幼虫和家蚕离体细胞 感染早期两类细胞的线粒体都发生内脊膨大鼓起,随后细胞质内出现较大的空泡,感染后期线粒体膜和细胞质膜都发生溶解和破裂,细胞解体死亡。研究结果表明:离体... 用苏云金芽孢杆菌蜡螟变种81—6菌株的晶体毒素感染菜青虫幼虫和家蚕离体细胞 感染早期两类细胞的线粒体都发生内脊膨大鼓起,随后细胞质内出现较大的空泡,感染后期线粒体膜和细胞质膜都发生溶解和破裂,细胞解体死亡。研究结果表明:离体细胞和活体细胞在感染苏云金芽孢杆菌晶体毒素后,细胞的病变过程相同。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 细胞病理变化 离体和活体
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昆虫对苏云金杆菌的抗性研究进展 被引量:10
4
作者 鲁晓知 洪华珠 《生物防治通报》 CSCD 1993年第1期36-39,共4页
本文综述了昆虫对苏云金杆菌抗性的产生、抗性稳定性和遗传学基础以及抗性作用机制等方面的研究近况。
关键词 苏云金杆菌 抗性
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抗B.t.制剂昆虫细胞品系的选择及其酯酶同工酶的初步研究 被引量:3
5
作者 朱天新 杨红 洪华珠 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期347-351,共5页
逐代以90%的选择压力选择对B.t.抗性的昆虫细胞品系,结果表明:5B1细胞对B.t.抗性的发展是相当缓慢的.第23代选择细胞的抗性水平突然由原来的3倍上升到10倍以上,此后抗性在8~10倍间波动,一直到第32代.被... 逐代以90%的选择压力选择对B.t.抗性的昆虫细胞品系,结果表明:5B1细胞对B.t.抗性的发展是相当缓慢的.第23代选择细胞的抗性水平突然由原来的3倍上升到10倍以上,此后抗性在8~10倍间波动,一直到第32代.被选择细胞(R5B1)和正常细胞(S5B1)酯酶同工酶的分析结果表明两种品系细胞有3条共同的酶带.另外,二者也分别拥有2条特异性酶带.被选择细胞(R5B1)的细胞酯酶同工酶有些酶带的活力明显高于正常细胞(S5B1)的酯酶同工酶活力,证明了抗性细胞品系在生理和代谢上已经发生了一些变化. 展开更多
关键词 昆虫离体细胞 苏云金杆菌 抗B.t.制剂 生物防治
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昆虫差异蛋白质组:进展和展望 被引量:6
6
作者 刘凯于 邱宝国 +1 位作者 洪华珠 彭建新 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期680-686,共7页
黑腹果蝇Drosophilamelanogaster、家蚕Bombyxmori、意大利蜜蜂Apismellifera和冈比亚按蚊Anophelesgambiae等昆虫的基因组测序已经基本完成,蛋白质组学技术将是阐明这些基因组功能的重要工具。本文综述了应用差异蛋白质组学技术在昆虫... 黑腹果蝇Drosophilamelanogaster、家蚕Bombyxmori、意大利蜜蜂Apismellifera和冈比亚按蚊Anophelesgambiae等昆虫的基因组测序已经基本完成,蛋白质组学技术将是阐明这些基因组功能的重要工具。本文综述了应用差异蛋白质组学技术在昆虫诱导性免疫、抗性机制和分子病理研究方面取得的一些成果:(1)细菌、真菌、脂多糖或机械损伤诱导的昆虫血淋巴或血细胞来源细胞系的蛋白质表达的改变;(2)Bt抗性昆虫中肠刷状缘膜和抗锥虫采采蝇Glossinamorsitans唾液腺多种蛋白质表达的改变;(3)化学农药处理和姬蜂Chelonusinanitus携带的多分DNA病毒引起的昆虫蛋白质组的变化。最后讨论了昆虫差异蛋白质组学研究的瓶颈与对策。 展开更多
关键词 昆虫 差异蛋白质组 免疫 抗性 病理
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基因工程菌中重组质粒的稳定性研究进展 被引量:21
7
作者 肖硕 洪华珠 彭建新 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第4期9-12,共4页
基因工程菌(细胞)是现代生物工程中的微型生物反应器,是基因工程的研究主体之一。获得使外源基因高效稳定表达的基因工程菌或细胞是基因工程的核心步骤与最终目的。基因工程菌重组质粒稳定性问题是基因工程菌工业化生产与实验研究中的... 基因工程菌(细胞)是现代生物工程中的微型生物反应器,是基因工程的研究主体之一。获得使外源基因高效稳定表达的基因工程菌或细胞是基因工程的核心步骤与最终目的。基因工程菌重组质粒稳定性问题是基因工程菌工业化生产与实验研究中的最主要问题,就其在基因工程中的重要性、影响因素及提高稳定性策略方面作简要介绍并展开综述。 展开更多
关键词 基因工程 重组质粒 稳定性 策略
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农药生物测定新方法的研究 Ⅱ.杀虫剂细胞生测体系的建立及改进 被引量:10
8
作者 周青春 杨红 +1 位作者 汪虹 洪华珠 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期456-459,共4页
通过改进MTT方法,以中国棉铃虫细胞系为供试细胞,建立起一种适应化学农药毒力测定的新方法.实验结果表明:改进后的方法灵敏度高,可读出每孔仅500细胞的OD值;溶解蓝紫色结晶物(甲)吸收峰在550~570nm之间,参... 通过改进MTT方法,以中国棉铃虫细胞系为供试细胞,建立起一种适应化学农药毒力测定的新方法.实验结果表明:改进后的方法灵敏度高,可读出每孔仅500细胞的OD值;溶解蓝紫色结晶物(甲)吸收峰在550~570nm之间,参考波长为590nm;测定昆虫细胞范围为每孔500~60000细胞,这一范围能满足细胞生测及基础研究中多种测定的需要. 展开更多
关键词 细胞生测 MTT 杀虫剂 毒性 农药 生物测定
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对虾白斑症病毒体内外感染的研究 被引量:2
9
作者 余泽华 刘凯于 +5 位作者 杨凯 王家坤 虢华珊 邱宝国 姚汉超 陈曲侯 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期64-67,共4页
WSSV可经注射、投喂或共居感染克氏螯虾和日本沼虾 ,病毒感染的组织匀浆物注射后发病很快 ,但蔗糖介质纯化的 WSSV注射后发病较慢 ,Ficoll-4 0 0介质纯化的 WSSV注射后发病时间介于前二者之间 .中国对虾细胞内 WSSV一般每个囊膜只含一... WSSV可经注射、投喂或共居感染克氏螯虾和日本沼虾 ,病毒感染的组织匀浆物注射后发病很快 ,但蔗糖介质纯化的 WSSV注射后发病较慢 ,Ficoll-4 0 0介质纯化的 WSSV注射后发病时间介于前二者之间 .中国对虾细胞内 WSSV一般每个囊膜只含一个核衣壳 ,但此毒种经克氏螯虾反复增殖后 ,多粒包埋的病毒粒子明显增多 .从病虾的每克鳃可提出约 0 .66mg的 WSSV.含WSSV的血淋巴或组织匀浆液感染 8种昆虫细胞后 ,传代 展开更多
关键词 对虾白斑症病毒 WSSV 体内感染 体外感染 病毒感染 感染液 发病情况
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昆虫离体细胞对Bt.晶体毒素的抗性选择及抗性测定 被引量:3
10
作者 杨红 洪华珠 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1996年第1期77-80,共4页
用粉纹夜蛾(Trichoplusiani)建立的一株细胞系BTI-TN-SB1对苏云金杆菌库斯塔克变种(Bacillusthuringiensisvarkurstaki,H3血清型)和蜡螟变种(Bt.var.gall... 用粉纹夜蛾(Trichoplusiani)建立的一株细胞系BTI-TN-SB1对苏云金杆菌库斯塔克变种(Bacillusthuringiensisvarkurstaki,H3血清型)和蜡螟变种(Bt.var.galleriae,H5血清型)的晶体毒素进行了抗性选择。实验结果表明:BTI-TN-5Bl细胞系对蜡螟变种的敏感性更高.进一步用Bt.-H5型晶体毒素对该细胞系进行抗性选择,经MTT法测得连续处理细胞至第15代时,抗性达到2. 展开更多
关键词 苏云金杆菌 晶体毒素 抗体 测定 微生物杀虫剂
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苏云金芽孢杆菌Cry1A毒素抗性相关受体类钙粘蛋白的研究进展 被引量:2
11
作者 刘凯于 郑进 +1 位作者 彭蓉 洪华珠 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2004年第3期145-149,共5页
综述了Cry1A毒素的受体类钙粘蛋白的结构 ,受体与毒素的结合特性 ,受体基因在离体细胞中的表达和表达产物介导Cry1A毒素裂解细胞的功能 ,以及受体基因的突变与抗性的关系 。
关键词 CDr1A毒素 类钙粘蛋白 基因表达 突变 抗性
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斜纹夜蛾核型多角体病毒DNA诱导同源昆虫细胞的凋亡 被引量:1
12
作者 杜昌升 彭建新 洪华珠 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第4期592-596,共5页
发现野生型斜纹夜蛾核型多角体病毒 (Spodopteralituranuclearpolyhedrosisvirus ,SpltNPV)DNA转染SL 1细胞能诱导细胞凋亡 .SpltNPV DNA转染其同源细胞系斜纹夜蛾核SL 1细胞 6h后 ,光镜下即可见细胞膜表面突出或形成小泡 ,细胞碎裂成... 发现野生型斜纹夜蛾核型多角体病毒 (Spodopteralituranuclearpolyhedrosisvirus ,SpltNPV)DNA转染SL 1细胞能诱导细胞凋亡 .SpltNPV DNA转染其同源细胞系斜纹夜蛾核SL 1细胞 6h后 ,光镜下即可见细胞膜表面突出或形成小泡 ,细胞碎裂成凋亡小体 ,18h后 ,细胞 10 0 %碎裂成凋亡小体 .DAPI荧光染色显示感染细胞核渐呈半月形 ,直至碎裂被凋亡小体包裹 .被转染的SL 1细胞DNA琼脂糖凝胶电泳呈典型梯形谱带 .野生型SpltNPV病毒粒子感染的SL 1细胞既无多角体的出现 ,也无凋亡现象的发生 . 展开更多
关键词 斜纹夜蛾核多角体病毒 DNA 诱导 同源昆虫细胞 斜纹夜蛾细胞系 细胞凋亡
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农药生物测定新方法的研究Ⅰ.几种有机溶剂对中国棉铃虫(Heliothis armigera)细胞生长的影响 被引量:1
13
作者 周青春 汪虹 +1 位作者 洪华珠 彭建新 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期92-95,共4页
将溶解蓝紫色结晶物(Formazan)的溶剂改为pH4.5的3%SDS异丙醇,实验结果更为准确、可靠.用改进的MTT方法研究了丙酮、二甲亚砜、N,N-二甲基甲酰胺、乙酸乙酯、乙醇、二甲苯等有机溶剂对中国棉铃虫细胞系(... 将溶解蓝紫色结晶物(Formazan)的溶剂改为pH4.5的3%SDS异丙醇,实验结果更为准确、可靠.用改进的MTT方法研究了丙酮、二甲亚砜、N,N-二甲基甲酰胺、乙酸乙酯、乙醇、二甲苯等有机溶剂对中国棉铃虫细胞系(BCIRL-HA-AMI)生长的影响,结果表明,除二甲苯外,用0.5%浓度(体积比)处理24h,其细胞存活率与空白对照无显著差异;1%浓度时,其细胞存活率仍在90%以上,依次为:95.8%,92.5%,94.6%,91.3%,111%.乙醇在1%~2%时。 展开更多
关键词 有机溶剂 棉铃虫 MTT法 农药 生物测定 细胞生长
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三种苏云金芽孢杆菌晶体蛋白火箭免疫电泳的研究 被引量:1
14
作者 洪华珠 李星 《中国生物防治学报》 CSCD 1990年第S1期43-46,共4页
本文以火箭免疫电泳技术检测HD—1、81—6、187三种苏云金芽孢杆菌的晶体蛋白,结果表明:这种方法可以快速、特异性地检测晶体蛋白的含量。在抗血清浓度为3%的凝胶上抗原抗体所形成的免疫沉淀线峰高与晶体蛋白的浓度呈明显的线性关系。... 本文以火箭免疫电泳技术检测HD—1、81—6、187三种苏云金芽孢杆菌的晶体蛋白,结果表明:这种方法可以快速、特异性地检测晶体蛋白的含量。在抗血清浓度为3%的凝胶上抗原抗体所形成的免疫沉淀线峰高与晶体蛋白的浓度呈明显的线性关系。本文还就火箭免疫电泳沉淀线峰高与一些条件的关系进行了讨论。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 晶体蛋白 火筋免疫电泳
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湿地松愈伤组织的诱导研究初报 被引量:3
15
作者 郑进 康薇 +1 位作者 洪华珠 甘晓红 《湖北林业科技》 2005年第4期9-11,共3页
取湿地松成熟胚作为外植体,在添加不同BA、NAA浓度配比的MS培养基上,诱导愈伤组织的最适培养基是MS+BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L+0.6%琼脂+25g/L蔗糖。实验同时证明,NAA是胚诱导愈伤组织的必需因子。
关键词 湿地松 组织培养 愈伤组织 研究初报 诱导 MS培养基 最适培养基 浓度配比 成熟胚
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刺槐遗传转化研究进展 被引量:6
16
作者 郑进 康薇 洪华珠 《湖北林业科技》 2005年第6期37-41,共5页
本文介绍了刺槐遗传转化的愈伤组织受体系统、直接分化芽受体系统、原生质体受体系统和胚状体受体系统,从外源基因、转化方法、抗生素选择等方面对刺槐遗传转化进行了综述,分析了刺槐基因工程中存在的一些问题,并探讨了今后的研究方向。
关键词 刺槐 组织培养 受体系统 基因工程
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口服感染昆虫纯化重组杆状病毒
17
作者 施先宗 陈曲侯 +2 位作者 王珣章 庞义 龙綮新 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1996年第2期207-211,共5页
构建可使重组杆状病毒产生多角体的重组转移载体质粒,并将共转染产物喂昆虫幼虫,收集典型病变幼虫血淋巴进行空斑分析,发现子代病毒中约90%为重组病毒.再进行一轮空斑纯化即可获得纯净的重组病毒,较之传统的空斑纯化方法,节省... 构建可使重组杆状病毒产生多角体的重组转移载体质粒,并将共转染产物喂昆虫幼虫,收集典型病变幼虫血淋巴进行空斑分析,发现子代病毒中约90%为重组病毒.再进行一轮空斑纯化即可获得纯净的重组病毒,较之传统的空斑纯化方法,节省了人力、物力和时间. 展开更多
关键词 口服感染 昆虫幼虫 杆状病毒 纯化效率 重组病毒
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中国棉铃虫多粒包埋型核多角体病毒几丁质酶基因的研究
18
作者 余泽华 贾放 徐佳 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期369-375,共7页
中国棉铃虫多粒包埋型核多角体病毒VHA273毒株的几丁质酶基因的开放阅读框大小为1713bp,编码570个氨基酸残基,分子量约60kDa.氨基酸序列分析显示,杆状病毒与原核生物特别是细菌的几丁质酶具高度同源性,暗示杆状病毒的几丁质酶基因与细... 中国棉铃虫多粒包埋型核多角体病毒VHA273毒株的几丁质酶基因的开放阅读框大小为1713bp,编码570个氨基酸残基,分子量约60kDa.氨基酸序列分析显示,杆状病毒与原核生物特别是细菌的几丁质酶具高度同源性,暗示杆状病毒的几丁质酶基因与细菌的几丁质酶基因有更为接近的进化关系,可能源于共同的祖先. 展开更多
关键词 中国棉铃虫多粒包埋型核多角体病毒 几丁质酶基因 PCR扩增 克隆 序列分析 同源性分析
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伪狂犬病病毒鄂A株囊膜蛋白gD基因在杆状病毒载体系统中的表达研究
19
作者 陈新华 杨林 +4 位作者 龙綮新 王章 陈曲侯 洪文洲 陈焕春 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第3期415-419,共5页
克隆了伪狂犬病病毒鄂A株囊膜蛋白gD基因并进行了序列分析 ,与国际标准毒株Rice株相比 ,两者之间核苷酸序列同源性为 98% ,推导氨基酸序列同源性为 97% .利用杆状病毒GST融合载体系统对其进行了高效表达 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白... 克隆了伪狂犬病病毒鄂A株囊膜蛋白gD基因并进行了序列分析 ,与国际标准毒株Rice株相比 ,两者之间核苷酸序列同源性为 98% ,推导氨基酸序列同源性为 97% .利用杆状病毒GST融合载体系统对其进行了高效表达 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白质印迹均证明了表达产物为 71ku的GST gD融合蛋白 ,其产量占细胞不溶蛋白量的 2 0 %左右 .以GST gD融合蛋白作为抗原进行小鼠免疫保护实验 ,结果表明表达的GST gD融合蛋白具有较好的免疫原性 ,不仅能诱导小鼠产生血清抗体 (1∶12 8) 。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 鄂A株 囊膜蛋白gD基因 杆状病毒载体系统 表达 免疫原性
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两种方法转染狂犬病毒糖蛋白基因的比较研究
20
作者 李萍萍 吴柏春 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1995年第1期104-105,共2页
两种方法转染狂犬病毒糖蛋白基因的比较研究李萍萍,吴柏春(武汉生物制品研究所)(华中师范大学昆虫学研究所)关键词转染;Lipofectin ̄TMReagent;重组病毒中图分类号Q785转染是分子生物学中常用的重要技术... 两种方法转染狂犬病毒糖蛋白基因的比较研究李萍萍,吴柏春(武汉生物制品研究所)(华中师范大学昆虫学研究所)关键词转染;Lipofectin ̄TMReagent;重组病毒中图分类号Q785转染是分子生物学中常用的重要技术之一.目前较为普遍使用的转染方法有... 展开更多
关键词 重组病毒 转染 狂犬病毒 糖蛋白 基因
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