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藻胆体核亚基ApcD定点突变及体内重组功能研究: 1; 作者汪星张茜 +2 位作者杨蓓赵开弘周明《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第5期549-557,共9页; 在对Anabaena sp.PCC7120藻胆体核亚基ApcD结合色素PCB的体内重组中,发现色素蛋白在提纯前后最大吸收峰和荧光峰发生了红移,从提纯前的605nm及633nm变为提纯后的650nm及665nm.为了研究该现象的原因,构建了ApcD的8个突变体,重组结果显示... 展开更多; 关键词 ApcD 定点突变体内重组; 在线阅读下载PDF 职称材料

优质能源甜高粱突变体的筛选与鉴定被引量：3: 2; 作者张会邹维华 +5 位作者张友兵张锐丰胜求涂媛苑景海春彭良才《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1-6,共6页; 以甜高粱品种能饲一号为野生型构建EMS化学诱变突变体库,通过分析突变体可溶性糖含量、生物质总量和生物质酶解产糖效率,观察农艺性状,并测定秸秆细胞壁结构组成,筛选得到3份特异突变体材料:SM83、SM197、SM305。3份突变体除生物量皆显... 展开更多; 关键词甜高粱 EMS突变体库植物细胞壁生物质降解能源作物; 在线阅读下载PDF 职称材料

棉花木葡聚糖转移/水解酶基因克隆和分析被引量：1: 3; 作者李先良李居宁 +1 位作者李傲夏涛《湖北农业科学》 2017年第4期756-761,共6页; 为研究XTH基因与棉花(Gossypium spp.)纤维伸长的关系,克隆了两个XTH基因,分别命名为Gh XTH1(Gen Bank:AY189971)和Gh XTH2(Gen Bank:JN968478)。Gh XTH1编码区全长870 bp,编码289个氨基酸,Gh XTH1全长885 bp,编码294个氨基酸。序列分... 展开更多; 关键词棉花(Gossypium spp.)纤维木葡聚糖转移/水解酶克隆表达分析伸长; 在线阅读下载PDF 职称材料

不同预处理方法对芒草酶解效率的影响被引量：1: 4; 作者孙丹涂媛苑《化学与生物工程》 CAS 2019年第4期42-45,共4页; 将芒草秸秆粉碎,分别采用1%H_2SO_4、1%NaOH、蒸汽爆破(SE)、1%Tween-80和SE+1%Tween-80等5种方法对芒草秸秆粉末进行预处理,然后加入纤维素复合酶进行酶解产糖,通过测定酶解上清液中六碳糖的含量来比较不同预处理方法对芒草酶解效率的... 展开更多; 关键词芒草酸/碱预处理蒸汽爆破预处理 Tween-80预处理酶解效率; 在线阅读下载PDF 职称材料

蓝细菌别藻蓝蛋白ApcE与ApcF不形成复合物: 5; 作者汪星潘重 +2 位作者马爱辉赵开弘周明《武汉植物学研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期480-485,共6页; 进行了Anabaena sp.PCC7120的别藻蓝蛋白ApcE与ApcF的体内重组的光谱和apcE和apcF基因的细菌双杂交的研究。在提纯前PCB-ApcE/PCB-ApcF的吸收及荧光光谱峰与PCB-ApcF的峰位置一致,而提纯后PCB-ApcE/PCB-ApcF的吸收及荧光光谱峰与PCB-Apc... 展开更多; 关键词别藻蓝蛋白体内重组相互作用双杂交; 在线阅读下载PDF 职称材料

水稻纤维素合酶多克隆抗体的制备和鉴定被引量：4: 6; 作者张苗苗陶章生 +3 位作者陈婷婷夏涛彭良才丰胜求《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期393-397,共5页; 纤维素合酶是参与纤维素-β1,4-葡聚糖链延伸的主要催化亚基,为进一步研究水稻中纤维素合酶的作用机理,采用DNA重组技术,将纤维素合酶基因CesA1、CesA2、CesA3克隆入表达载体pGEX-4T-3,构建重组质粒。在大肠杆菌JM109中,经异丙基硫代半... 展开更多; 关键词水稻纤维素合酶融合蛋白多克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

拟南芥纤维素合酶的抗体制备与检测被引量：1: 7; 作者陶章生徐雯 +2 位作者张苗苗彭良才丰胜求《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期171-177,共7页; 将拟南芥CesA家族基因的高变区克隆到融合表达载体pGEX-4T-3中,构建重组质粒pGEX-AtCe-sAs,在大肠杆菌JM109中经IPTG诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶融合蛋白(GST-AtCESAs)。采用GST亲和层析法纯化GST-AtCESAs并制备了多克隆抗体。Western-b... 展开更多; 关键词纤维素合酶多克隆抗体交叉反应拟南芥 Western-blotting; 在线阅读下载PDF 职称材料

T载体介导的基于attL核心区LR反应的简化快速Gateway克隆系统（英文）被引量：1: 8; 作者朱晓博张贵粉 +3 位作者王友梅 Staffan Persson 谢国生王令强《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期341-350,共10页; Gateway克隆技术已得到广泛的应用。该技术先通过BP反应将目标片段连到带有完整attL特异识别位点的入门载体,然后与终载体通过LR反应得到表达载体。Gateway克隆方法与传统的酶切连接方法相比有快速简单等优点。但是,BP和LR酶都非常昂贵... 展开更多; 关键词 Gateway克隆技术直接LR反应序列比对特异位点; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名藻胆体核亚基ApcD定点突变及体内重组功能研究: 1; 作者汪星张茜杨蓓赵开弘周明; 机构华中科技大学环境科学与工程学院华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学生物质与生物能源研究中心; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第5期549-557,共9页; 基金国家自然科学基金(30870519,30870541) 教育部高等学校博士学科点专向科研基金(20060487018)资助项目~~; 文摘在对Anabaena sp.PCC7120藻胆体核亚基ApcD结合色素PCB的体内重组中,发现色素蛋白在提纯前后最大吸收峰和荧光峰发生了红移,从提纯前的605nm及633nm变为提纯后的650nm及665nm.为了研究该现象的原因,构建了ApcD的8个突变体,重组结果显示:突变体ApcD(Y88I)色素蛋白在提纯后的吸收光谱和荧光光谱较提纯前均多出一个峰,分别为668nm,690nm;ApcD(W59Q)、ApcD(Y73A)、ApcD(W87E)色素蛋白在提纯前后的吸收光谱和荧光光谱一致;ApcD(M126S)、ApcD(Y116S)、ApcD(M160T)色素蛋白在提纯前后的吸收光谱一致,而提纯后的荧光峰位置较提纯前分别红移了5nm、7nm和10nm;ApcD(M115I)色素蛋白在提纯前后的吸收光谱和荧光光谱均发生了红移,从提纯前的605nm和633nm变为提纯后的638nm和655nm.这些色素蛋白在酸性尿素溶液变性条件下的最大吸收峰始终在662nm,表明辅基色素仍然是藻蓝胆素;在对PCB-ApcD、PCB-ApcD(Y116S)及PCB-ApcD(M160T)的圆二色谱分析发现,该两个氨基酸的突变均对脱辅基蛋白所连接的色素构象产生了一定的影响,而对重组蛋白的二级结构没有影响.; 关键词 ApcD 定点突变体内重组; Keywords ApcD site-directed mutagenesis reconstitution in vivo; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名优质能源甜高粱突变体的筛选与鉴定被引量：3: 2; 作者张会邹维华张友兵张锐丰胜求涂媛苑景海春彭良才; 机构华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室华中农业大学生物质与生物能源研究中心华中农业大学植物科学技术学院华中农业大学生命科学技术学院中国科学院植物研究所; 出处《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1-6,共6页; 基金教育部、国家外国专家局高等学校学科创新引智计划项目(B08032) 国家“973”计划前期研究专项(2010CB134401); 文摘以甜高粱品种能饲一号为野生型构建EMS化学诱变突变体库,通过分析突变体可溶性糖含量、生物质总量和生物质酶解产糖效率,观察农艺性状,并测定秸秆细胞壁结构组成,筛选得到3份特异突变体材料:SM83、SM197、SM305。3份突变体除生物量皆显著提高以外,SM197与SM305半纤维素含量显著升高,而木质素和纤维素含量明显降低,导致生物质酶解产糖效率大大提高。此外,SM83的产糖效率与常规品种(对照)无显著差异,但其可溶性糖含量比野生型增加14.99%。故筛选到的甜高粱突变体是理想的生物能源种质材料,可用于优质能源甜高粱品种的培育。; 关键词甜高粱 EMS突变体库植物细胞壁生物质降解能源作物; Keywords sweet sorghum EMS mutagenesis pool plant cell wall biomass digestibility bioenergy crop; 分类号 S514.52 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名棉花木葡聚糖转移/水解酶基因克隆和分析被引量：1: 3; 作者李先良李居宁李傲夏涛; 机构荆楚理工学院生物工程学院荆楚理工学院科技处华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室华中农业大学生物质与生物能源研究中心华中农业大学植物科学技术学院华中农业大学生命科学技术学院; 出处《湖北农业科学》 2017年第4期756-761,共6页; 基金农业部转基因专项(2009ZX08009-119B) 荆门市科技局项目(110588) 荆楚理工学院博士科研启动基金项目(ZR201502); 文摘为研究XTH基因与棉花(Gossypium spp.)纤维伸长的关系,克隆了两个XTH基因,分别命名为Gh XTH1(Gen Bank:AY189971)和Gh XTH2(Gen Bank:JN968478)。Gh XTH1编码区全长870 bp,编码289个氨基酸,Gh XTH1全长885 bp,编码294个氨基酸。序列分析表明,Gh XTH1和Gh XTH2均存在XTH家族保守序列DEIDFEFLG。生物信息学分析表明,Gh XTH1和Gh XTH2均含有信号肽。跨膜结构预测表明,Gh XTH1和Gh XTH2均在N端存在跨膜螺旋。系统发生学分析表明,Gh XTH1与拟南芥XTH6、XTH7亲缘关系较近,Gh XTH2与拟南芥XTH9亲缘关系较近。半定量分析表明,Gh XTH1和Gh XTH2均随着棉花纤维发育表达量降低,Gh XTH2比Gh XTH1表达量高。; 关键词棉花(Gossypium spp.)纤维木葡聚糖转移/水解酶克隆表达分析伸长; Keywords cotton fiber xyloglucan endotransglucosylase/hydrolase cloning expression analysi elongation; 分类号 S562 [农业科学—作物学] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名不同预处理方法对芒草酶解效率的影响被引量：1: 4; 作者孙丹涂媛苑; 机构湖北工业大学绿色轻工材料湖北省重点实验室绿色轻质材料与加工湖北工业大学协同创新中心华中农业大学生物质与生物能源研究中心; 出处《化学与生物工程》 CAS 2019年第4期42-45,共4页; 基金绿色轻工材料湖北省重点实验室暨绿色轻质材料与加工湖北工业大学协同创新中心开放基金项目(201806B07) 湖北工业大学博士科研启动基金项目(BSQD2017020); 文摘将芒草秸秆粉碎,分别采用1%H_2SO_4、1%NaOH、蒸汽爆破(SE)、1%Tween-80和SE+1%Tween-80等5种方法对芒草秸秆粉末进行预处理,然后加入纤维素复合酶进行酶解产糖,通过测定酶解上清液中六碳糖的含量来比较不同预处理方法对芒草酶解效率的影响。结果表明,采用SE+1%Tween-80预处理,芒草酶解效率最高,可达74.45%,较未处理提高了3.75～11.79倍;采用1%H_2SO_4、1%NaOH、SE或1%Tween-80预处理,芒草酶解效率较未处理分别提高了0.55～3.24倍、2.52～5.60倍、1.30～5.97倍和0～0.96倍,其中1%Tween-80预处理对芒草秸秆的酶解几乎没有任何促进作用。; 关键词芒草酸/碱预处理蒸汽爆破预处理 Tween-80预处理酶解效率; Keywords Miscanthus acid/alkali pretreatment steam-explosionpretreatment Tween-80 pretreatment enzymolysis efficiency; 分类号 TQ35 [化学工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蓝细菌别藻蓝蛋白ApcE与ApcF不形成复合物: 5; 作者汪星潘重马爱辉赵开弘周明; 机构华中科技大学环境科学与工程学院华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学生物质与生物能源研究中心; 出处《武汉植物学研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期480-485,共6页; 基金国家自然科学基金项目(30870519) 教育部高等学校博士学科点专向科研基金(20060487018)资助; 文摘进行了Anabaena sp.PCC7120的别藻蓝蛋白ApcE与ApcF的体内重组的光谱和apcE和apcF基因的细菌双杂交的研究。在提纯前PCB-ApcE/PCB-ApcF的吸收及荧光光谱峰与PCB-ApcF的峰位置一致,而提纯后PCB-ApcE/PCB-ApcF的吸收及荧光光谱峰与PCB-ApcE的峰位置一致,表明ApcE与ApcF不能形成复合物。pBT-apcF与pTRG-apcE的转化细胞能在无3氨基-1,2,4三氮唑(3-AT)的非选择性培养基上生长,而不能在有3AT的选择性培养基上生长,说明在转化过程中未产生能抗3-AT的HIS3报告基因,进一步证实ApcE与ApcF间没有相互作用。; 关键词别藻蓝蛋白体内重组相互作用双杂交; Keywords Allophycocyanin Reconstitution in Escherichia coli Interaction Two-hybrid; 分类号 Q71 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名水稻纤维素合酶多克隆抗体的制备和鉴定被引量：4: 6; 作者张苗苗陶章生陈婷婷夏涛彭良才丰胜求; 机构华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室华中农业大学生物质与生物能源研究中心华中农业大学生命科学技术学院华中农业大学植物科学技术学院; 出处《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期393-397,共5页; 基金国家转基因生物新品种培育科技重大专项(2009ZX08009-119B); 文摘纤维素合酶是参与纤维素-β1,4-葡聚糖链延伸的主要催化亚基,为进一步研究水稻中纤维素合酶的作用机理,采用DNA重组技术,将纤维素合酶基因CesA1、CesA2、CesA3克隆入表达载体pGEX-4T-3,构建重组质粒。在大肠杆菌JM109中,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后在原核细胞中成功表达了3种纤维素合酶的融合蛋白,通过谷胱甘肽巯基转移酶(GST)纯化系统获得融合蛋白,以此作为抗原免疫家兔,制备出效价高、特异性强的多克隆抗体。; 关键词水稻纤维素合酶融合蛋白多克隆抗体; Keywords Oryza sativa cellulose synthase fusion proteins polyclonal antibody; 分类号 Q754 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名拟南芥纤维素合酶的抗体制备与检测被引量：1: 7; 作者陶章生徐雯张苗苗彭良才丰胜求; 机构华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室华中农业大学生物质与生物能源研究中心华中农业大学生命科学技术学院华中农业大学植物科学技术学院; 出处《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期171-177,共7页; 基金国家"973"前期项目(2010CB134401); 文摘将拟南芥CesA家族基因的高变区克隆到融合表达载体pGEX-4T-3中,构建重组质粒pGEX-AtCe-sAs,在大肠杆菌JM109中经IPTG诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶融合蛋白(GST-AtCESAs)。采用GST亲和层析法纯化GST-AtCESAs并制备了多克隆抗体。Western-blotting检测表明,抗体Anti-CESA4和Anti-CE-SA7存在明显的交叉反应,Anti-CESA1、Anti-CESA3、Anti-CESA6、Anti-CESA2、Anti-CESA5、Anti-CESA8均能在拟南芥原生质膜上检测到特异免疫条带,这为进一步深入研究拟南芥纤维素合成机制提供了有利条件。; 关键词纤维素合酶多克隆抗体交叉反应拟南芥 Western-blotting; Keywords cellulose synthase polyclonal antibody cross-reaction Arabidopsis Western-blotting; 分类号 Q754 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名T载体介导的基于attL核心区LR反应的简化快速Gateway克隆系统（英文）被引量：1: 8; 作者朱晓博张贵粉王友梅 Staffan Persson 谢国生王令强; 机构华中农业大学生物质与生物能源研究中心华中农业大学植物科学与技术学院墨尔本大学生物科学学院细胞壁研究中心; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期341-350,共10页; 基金 Supported by Fundamental Research Funds for the Central Universities of China(No.2662015PY009) National Natural Science Foundation of China(No.31171775,No.31171524 and No.31371550); 文摘 Gateway克隆技术已得到广泛的应用。该技术先通过BP反应将目标片段连到带有完整attL特异识别位点的入门载体,然后与终载体通过LR反应得到表达载体。Gateway克隆方法与传统的酶切连接方法相比有快速简单等优点。但是,BP和LR酶都非常昂贵。本研究首先对3个常用Gateway载体的atts特异位点序列比对发现,attL序列核心交换位点"core attL"的21~22 bp长的碱基是保守和必要的。由此,设计含有core-attL序列的引物,通过PCR克隆得到DNA片段并连入p MD18-T载体,然后进行LR反应,可成功得到目标表达载体,并在保守的位点上正确重组。本研究还对其中一个带有绿色荧光蛋白基因的表达载体转化至烟草,能够正常表达该蛋白质。结果表明,通过将含有attL核心位点基因片段连接到p MD18-T载体上,可以省略BP反应而将目标片段连接到终载体上,节约了反应时间和成本。; 关键词 Gateway克隆技术直接LR反应序列比对特异位点; Keywords Gateway cloning direct LR reaction sequences blast site-specific; 分类号 Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	藻胆体核亚基ApcD定点突变及体内重组功能研究	汪星张茜杨蓓赵开弘周明	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	2010	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	优质能源甜高粱突变体的筛选与鉴定	张会邹维华张友兵张锐丰胜求涂媛苑景海春彭良才	《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2015	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	棉花木葡聚糖转移/水解酶基因克隆和分析	李先良李居宁李傲夏涛	《湖北农业科学》	2017	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	不同预处理方法对芒草酶解效率的影响	孙丹涂媛苑	《化学与生物工程》 CAS	2019	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	蓝细菌别藻蓝蛋白ApcE与ApcF不形成复合物	汪星潘重马爱辉赵开弘周明	《武汉植物学研究》 CAS CSCD 北大核心	2010	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	水稻纤维素合酶多克隆抗体的制备和鉴定	张苗苗陶章生陈婷婷夏涛彭良才丰胜求	《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2011	4	在线阅读下载PDF 职称材料
7	拟南芥纤维素合酶的抗体制备与检测	陶章生徐雯张苗苗彭良才丰胜求	《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	1	在线阅读下载PDF 职称材料
8	T载体介导的基于attL核心区LR反应的简化快速Gateway克隆系统（英文）	朱晓博张贵粉王友梅 Staffan Persson 谢国生王令强	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2018	1	在线阅读下载PDF 职称材料