原花青素体外清除自由基活性的研究 被引量：47

1

作者 余莹 粟武 魏东芝 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期318-320,共3页

从葡萄籽中提取高纯度的原花青素 ,测得其对稳定自由基 1 ,1 -联苯 -β-苦基偕腙肼( DPPH)的半数抑制浓度 ( EC50 )为 44mg/L ;又利用 2 -脱氧 - D-核糖法产生· OH,在原花青素浓度为 1 0 g/L时可清除该体系中 80 %的· OH。

关键词 原花青素 自由基 活性 葡萄籽 DPPH 抗氧剂 植物药

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大豆异黄酮提取条件的研究 被引量：19

2

作者 朱仕房 王善利 +1 位作者 魏东芝 杨曜中 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第3期54-57,共4页

本文主要研究了乙醇-水体系提取大豆异黄酮的工艺条件，经单因子实验与L9（34）正交实验，最终得到了该体系的最佳提取条件。如以总异黄酮作为提取目的，最佳条件为：80%的乙醇浓度，不小于18:1的物料比（溶剂:原料），时间1h，温度不超... 本文主要研究了乙醇-水体系提取大豆异黄酮的工艺条件，经单因子实验与L9（34）正交实验，最终得到了该体系的最佳提取条件。如以总异黄酮作为提取目的，最佳条件为：80%的乙醇浓度，不小于18:1的物料比（溶剂:原料），时间1h，温度不超过50℃；如以genistin作为目的产物，则温度宜升高至70℃。 展开更多

关键词 提取 异黄酮 工艺条件 大豆

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苯氧乙酸类浮选抑制剂性能的量子化学计算 被引量：8

3

作者 张剑锋 胡岳华 +1 位作者 徐競 王淀佐 《中国有色金属学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第8期1437-1441,共5页

运用密度泛函理论(DFT)B3LYP方法,取6 31G 基组,对苯氧乙酸类浮选抑制剂分子进行了量子化学计算。通过官能团羧基的键电荷密度及其比值ρ(O—H)/ρ(C—O)的计算,比较了各药剂分子离解成一价负离子的难易。根据各分子的前线轨道能量差ΔE... 运用密度泛函理论(DFT)B3LYP方法,取6 31G 基组,对苯氧乙酸类浮选抑制剂分子进行了量子化学计算。通过官能团羧基的键电荷密度及其比值ρ(O—H)/ρ(C—O)的计算,比较了各药剂分子离解成一价负离子的难易。根据各分子的前线轨道能量差ΔEHOMO LUMO和一价负离子的HOMO能级,对分子的反应活性、一价负离子与矿物表面不同金属离子作用的强弱进行了比较。从药剂与矿物表面作用前后的能量变化,比较了各药剂的一价负离子与不同矿物表面发生作用的稳定性,并通过对比矿物与捕收剂作用后的能量变化,证明苯氧乙酸类抑制剂对方解石的抑制作用是靠抑制剂在矿物表面强烈的化学吸附而形成的。 展开更多

关键词 苯氧乙酸 密度泛函理论 键电荷密度 量子化学计算

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中枢神经系统靶向性Mn-SOD的克隆和在大肠杆菌中的表达研究 被引量：4

4

作者 张艳红 贺华君 +2 位作者 袁勤生 杨卫东 吴祥甫 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第6期895-899,共5页

靶向性超氧化物歧化酶 (SOD)是治疗氧自由基引起神经细胞损伤所致疾病等的有效途径 .将破伤风毒素C部分 (tetanustoxinfragmentC ,TTC)基因与编码Mn SOD的cDNA融合克隆进pET 2 2b(+)载体 ,1mmol/L异丙基 D 硫代半乳糖 (IPTG)诱导在大... 靶向性超氧化物歧化酶 (SOD)是治疗氧自由基引起神经细胞损伤所致疾病等的有效途径 .将破伤风毒素C部分 (tetanustoxinfragmentC ,TTC)基因与编码Mn SOD的cDNA融合克隆进pET 2 2b(+)载体 ,1mmol/L异丙基 D 硫代半乳糖 (IPTG)诱导在大肠杆菌中表达 .SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)图谱可见约 71ku有表达产物条带 ,与理论计算值相符 ;蛋白质印迹 (Westernblot)分析显示 ,表达产物与抗Mn SOD及破伤风毒素的多抗有免疫反应 ,而且表达产物用邻苯三酚自氧化法测定具有SOD活性 .融合蛋白可作为有效的试剂靶向性输送Mn SOD到神经元细胞 。 展开更多

关键词 锰超氧化物歧化酶 破伤风毒C部分 融合表达 中枢神经系统 靶向性运输 人Mn-SOD 克隆 表达

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重组大肠杆菌催化合成谷胱甘肽的研究 被引量：9

5

作者 沈立新 魏东芝 尧辉 《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期554-557,共4页

利用PCR技术扩增编码γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GSH )及谷胱甘肽合成酶(GSH )的基因,并进行了部分序列分析,分别构建了表达质粒pTrc-gsh 和pTrc-gsh ,它们在E.coliBL21中的稳定性很好。在E.coliBL21(pTrc-gsh )∶E.coliBL21(pTrc-gsh )=3... 利用PCR技术扩增编码γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GSH )及谷胱甘肽合成酶(GSH )的基因,并进行了部分序列分析,分别构建了表达质粒pTrc-gsh 和pTrc-gsh ,它们在E.coliBL21中的稳定性很好。在E.coliBL21(pTrc-gsh )∶E.coliBL21(pTrc-gsh )=3∶1的情况下,谷胱甘肽的合成达3.31g/L,高于工程菌E.coliBL21(pTrc-gsh)催化合成的谷胱甘肽的量(2.51g/L)。利用E.coliBL21(pTrc-gsh )与E.coliBL21(pTrc-gsh )将γ-谷氨酰半胱氨酸的合成与谷胱甘肽的合成分步进行,谷胱甘肽的合成达3.78g/L,比利用E.coliBL21(pTrc-gsh)采用两步法合成的谷胱甘肽高42.1%,解决了GSH对GHI的反馈抑制,并降低了ADP对第二步反应的抑制程度。 展开更多

关键词 Γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶 谷胱甘肽合成酶 克隆 谷胱甘肽合成

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苯氧乙酸类化合物的酸离解常数测定及其量子化学计算 被引量：2

6

作者 张剑锋 胡岳华 +1 位作者 王淀佐 魏东芝 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期766-769,共4页

用电位滴定法测定了 7种苯氧乙酸类化合物的酸离解常数 ,其酸性均强于乙酸和苯甲酸 ,且其酸性变化规律与经典的有机化学理论完全相符 ,氧原子的诱导效应和对苯环的共轭效应使苯氧乙酸类化合物容易离解出质子 ,而氧原子对苯环的供电子作... 用电位滴定法测定了 7种苯氧乙酸类化合物的酸离解常数 ,其酸性均强于乙酸和苯甲酸 ,且其酸性变化规律与经典的有机化学理论完全相符 ,氧原子的诱导效应和对苯环的共轭效应使苯氧乙酸类化合物容易离解出质子 ,而氧原子对苯环的供电子作用使得含有 2个或 2个以上—OCH2 COOH基团的苯氧乙酸类化合物的酸性比苯氧乙酸弱。用半经验量子化学CNDO/2方法 ,分别计算了 7种苯氧乙酸化合物分子中各个羧基的O—H键和C—O单键的键电荷密度 ,计算了键电荷密度比 :f =ρO—H/ρC—O。结果表明 ,苯氧乙酸的羧基f值大小及其它 6种苯氧乙酸类化合物最易发生离解的羧基 f值大小顺序 ,分别与它们的pKa 或 pKa1值的大小顺序相对应 ,故 f值可以作为苯氧乙酸类化合物酸性强弱的判据。 展开更多

关键词 苯氧乙酸 酸离解常数 键电荷密度 量子化学计算

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有机相酶促酯化反应中水分调控技术的研究 被引量：2

7

作者 崔玉敏 魏东芝 俞俊棠 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第6期539-542,562,共5页

在有机相酶促反应中，水含量是影响酶活力的关键因素．对异辛烷／正辛醇体系中柱状假丝酵母脂肪酶催化萘普森酯化反应中的水分调控技术进行了研究．结果表明：水合盐对———Ｎａ２ＳＯ４·１０Ｈ２Ｏ／Ｎａ２ＳＯ４对系统水分的变... 在有机相酶促反应中，水含量是影响酶活力的关键因素．对异辛烷／正辛醇体系中柱状假丝酵母脂肪酶催化萘普森酯化反应中的水分调控技术进行了研究．结果表明：水合盐对———Ｎａ２ＳＯ４·１０Ｈ２Ｏ／Ｎａ２ＳＯ４对系统水分的变化具有有效的缓冲作用；非极性硅藻土吸附固定酶，使之对水分的敏感性得到缓解；另外，加入分子筛去除副产物———“水” 展开更多

关键词 有机相酶催化 酯化反应 萘普森 水分调控

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Quorum Sensing及其研究进展

8

作者 陶金莉 沈亚领 +1 位作者 迟莉丽 魏东芝 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第1期93-93,共1页

关键词 细菌群体 行为调控机制 Quommsensing 发病机制 细菌代谢产物

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鸡卵黄免疫球蛋白Y的性质 被引量：13

9

作者 那红 杨曜中 +2 位作者 欧伶 袁勤生 朱威 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期172-175,180,共5页

用ＥＬＩＳＡ技术研究了鸡卵黄免疫球蛋白Ｙ（ＩｇＹ）对温度、酸碱度、胃蛋白酶、胰蛋白酶及反复冻融的稳定性。结果表明：ＩｇＹ具有良好的热稳定性，对酸碱具有一定的耐受力，对胃蛋白酶具有良好的抵抗能力（ｐＨ＞４）。对胰蛋白酶... 用ＥＬＩＳＡ技术研究了鸡卵黄免疫球蛋白Ｙ（ＩｇＹ）对温度、酸碱度、胃蛋白酶、胰蛋白酶及反复冻融的稳定性。结果表明：ＩｇＹ具有良好的热稳定性，对酸碱具有一定的耐受力，对胃蛋白酶具有良好的抵抗能力（ｐＨ＞４）。对胰蛋白酶非常敏感，经１ｈ酶解处理，ＩｇＹ的结合活性完全丧失。ＩｇＹ具有很好的耐反复冻融的特性，即使经过５次反复冻融，其抗原结合活性也几乎未受损失。 展开更多

关键词 IGY ELISA技术 胃蛋白酶 胰蛋白酶 鸡卵黄

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酪蛋白磷酸肽的制备及性质 被引量：5

10

作者 杨曜中 欧伶 +1 位作者 葛轶群 宋聿文 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期574-577,共4页

用不同的蛋白水解酶水解牛乳酪蛋白，通过钙－乙醇沉淀法和离子交换法从水解产物中提取酪蛋白磷酸肽（ＣＰＰｓ），并对ＣＰＰｓ进行体外化学分析及体内生物学功能鉴定，结果表明：用双酶法（胰蛋白酶和Ａｌｃａｌａｓｅ）制得的ＣＰＰ... 用不同的蛋白水解酶水解牛乳酪蛋白，通过钙－乙醇沉淀法和离子交换法从水解产物中提取酪蛋白磷酸肽（ＣＰＰｓ），并对ＣＰＰｓ进行体外化学分析及体内生物学功能鉴定，结果表明：用双酶法（胰蛋白酶和Ａｌｃａｌａｓｅ）制得的ＣＰＰｓ３（平均相对分子质量为４ ０６６，摩尔Ｎ／Ｐ为５．４８）在体外的持钙能力最强，连续喂食该样品的小鼠对钙的吸收明显提高（吸收率达５６％ ）。 展开更多

关键词 酪蛋白磷酸肽 胰蛋白酶 ALCALASE 制备 性质

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固定化木瓜蛋白酶的制备及性质 被引量：5

11

作者 欧伶 翁清清 +1 位作者 宋聿文 杨曜中 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期49-52,共4页

用硫酸铵分级沉淀法从木瓜粉提取液中分离木瓜蛋白酶，将其偶联在对氨基苯磺酰乙基（ＡＢＳＥ）－交联琼脂上，制得固定化木瓜蛋白酶。实验结果表明：木瓜蛋白酶与ＡＢＳＥ－交联琼脂的最佳结合量是每克干交联琼脂１４．０μｍｏｌ／ｓ... 用硫酸铵分级沉淀法从木瓜粉提取液中分离木瓜蛋白酶，将其偶联在对氨基苯磺酰乙基（ＡＢＳＥ）－交联琼脂上，制得固定化木瓜蛋白酶。实验结果表明：木瓜蛋白酶与ＡＢＳＥ－交联琼脂的最佳结合量是每克干交联琼脂１４．０μｍｏｌ／ｓ，固定化酶的最适反应ｐＨ为８．０，最适反应温度为７５℃，Ｋｍ（ａｐｐ）为６７．６ｍｍｏｌ／Ｌ。固定化酶对尿素的稳定性较高，用６ｍｍｏｌ／Ｌ脲处理过夜能保存８２％的活力，而游离酶在同样条件下将失去全部活性。 展开更多

关键词 木瓜蛋白酶 固定化 蛋白酶 制备

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含汞树脂分离提纯谷胱甘肽 被引量：11

12

作者 王辉 冯万祥 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1996年第6期717-721,共5页

对氨基苯汞乙酸连接到聚苯乙烯。二乙烯苯载体上，形成含汞树脂，用于提取谷胱甘肽，其操作吸附容量为每立升树脂吸附谷胱甘肽０．１６ｍｏｌ。ｐＨ影响树脂对谷胱甘肽的吸附，适宜的ｐＨ为３～９。高浓度盐对洗脱有直接的影响。树脂对... 对氨基苯汞乙酸连接到聚苯乙烯。二乙烯苯载体上，形成含汞树脂，用于提取谷胱甘肽，其操作吸附容量为每立升树脂吸附谷胱甘肽０．１６ｍｏｌ。ｐＨ影响树脂对谷胱甘肽的吸附，适宜的ｐＨ为３～９。高浓度盐对洗脱有直接的影响。树脂对其它的物质也有不同程度的吸收。在高浓度盐的条件下，易使汞从树脂上断开，从而影响产品的纯度。当树脂用于提取酵母提取液中的谷胱甘肽时，控制ｐＨ在３．０～４．０时能得到很好的分离结果。 展开更多

关键词 谷胱甘肽 化学亲和树脂 氨基苯汞乙酸

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复合氨基酸营养价值及对小鼠体内酶活性的影响 被引量：3

13

作者 李永丰 李群 +2 位作者 俞花 潘轩宇 田漪 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期315-320,共6页

以豆类蛋白水解液中提取的复合氨基酸为原料，小白鼠为对象，研究复合氨基酸的营养价值及对小鼠体内酶活性的影响。结果表明它有调节小鼠体内酶活性的作用。可使ＳＯＤ、过氧化氢酶和精氨酸酶的活性升高，乳酸脱氢酶活性降低，蛋白质的... 以豆类蛋白水解液中提取的复合氨基酸为原料，小白鼠为对象，研究复合氨基酸的营养价值及对小鼠体内酶活性的影响。结果表明它有调节小鼠体内酶活性的作用。可使ＳＯＤ、过氧化氢酶和精氨酸酶的活性升高，乳酸脱氢酶活性降低，蛋白质的表观消化率、食物转化效能及血红蛋白和血清蛋白总量提高。 展开更多

关键词 复合氨基酸 营养价值 酶 活性 SOD 氨基酸

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分泌癌胚抗原肿瘤靶向性Cu,Zn-SOD的基因克隆及表达

14

作者 贺华君 杨卫东 +2 位作者 施惠娟 吴祥甫 袁勤生 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期124-127,共4页

将 Cu,Zn- SOD与抗癌胚抗原 ( CEA)单链抗体基因 ( Sc Fv gene)融合 ,重组到含 T7启动子的表达载体 p ET- 2 2 b( + )中 ,构建表达质粒 p ETSOD- Sc Fv,并转化大肠杆菌 BL2 1 ( DE3) ,进行高效表达 ,表达物占菌体可溶性总蛋白的 1 8%。S... 将 Cu,Zn- SOD与抗癌胚抗原 ( CEA)单链抗体基因 ( Sc Fv gene)融合 ,重组到含 T7启动子的表达载体 p ET- 2 2 b( + )中 ,构建表达质粒 p ETSOD- Sc Fv,并转化大肠杆菌 BL2 1 ( DE3) ,进行高效表达 ,表达物占菌体可溶性总蛋白的 1 8%。SDS- PAGE和蛋白质印迹图谱显示表达物相对分子质量为 41 k D,与融合基因编码蛋白质的理论值相符。该蛋白质在大肠杆菌中为分泌型表达 ,有利于纯化。RIA测定表明表达产物能特异性地与抗原 CEA结合 ,邻苯三酚法测定也表明表达产物具有 SOD酶的活性 ,该融合蛋白为分泌 CEA肿瘤的靶向性治疗及放疗。 展开更多

关键词 癌胚抗原 单链抗体 Cu Zn-SOD 融合表达 基因表达 克隆

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重组人碱性成纤维细胞生长因子基因工程菌的高密度培养 被引量：1

15

作者 沈林南 魏东芝 俞俊棠 《微生物学杂志》 CAS CSCD 1999年第4期11-14,共4页

根据重组人碱性成纤维细胞生长因子基因工程菌的生长特点，对其高密度发酵工艺条件进行研究和改进，采用“平衡DO-State”控制策略进行分批补料培养中的葡萄糖流加，有效地控制了培养过程中代谢副产物-乙酸的产生及其对工程菌生长的抑... 根据重组人碱性成纤维细胞生长因子基因工程菌的生长特点，对其高密度发酵工艺条件进行研究和改进，采用“平衡DO-State”控制策略进行分批补料培养中的葡萄糖流加，有效地控制了培养过程中代谢副产物-乙酸的产生及其对工程菌生长的抑制作用，使发酵终了时乙酸浓度由15．6g/L下降为2.6g/L，而菌体密度则由15．2gDCW/L提高到30．2gDCW/L。 展开更多

关键词 人碱性成纤维细胞生长因子 基因工程菌

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