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基于SIRT1研究HSYA激活神经元自噬保护脑缺血再灌注损伤
1
作者 宋丽娟 魏汝恒 +8 位作者 戴瑶瑶 滑键林 戎梦玮 但存燕 温春丽 夏天晴 张策 肖保国 马存根 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第6期1350-1357,共8页
目的:体内外实验结合探讨羟基红花黄色素A(HSYA)激活神经元自噬对脑缺血再灌注损伤的作用及机制。方法:改良线栓法建立SD大鼠大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)模型,随机分为假手术(Sham)组、MCAO/R组和MCAO/R+HSYA组,检测如下指标明确脑缺... 目的:体内外实验结合探讨羟基红花黄色素A(HSYA)激活神经元自噬对脑缺血再灌注损伤的作用及机制。方法:改良线栓法建立SD大鼠大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)模型,随机分为假手术(Sham)组、MCAO/R组和MCAO/R+HSYA组,检测如下指标明确脑缺血再灌注神经损伤情况:检测神经功能评分(Z-Longa),TTC染色检测脑梗死面积,TUNEL染色检测细胞凋亡;Western blot检测大鼠脑组织自噬相关指标LC3、Beclin1、P62及SIRT1蛋白表达;免疫荧光染色观察LC3与神经元共定位的表达。建立人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y糖氧剥夺复糖氧(OGD/R)损伤模型,随机分为Normal组、OGD/R组、OGD/R+HSYA组、OGD/R+SIRT1抑制剂(EX-527)组、OGD/R+EX-527+HSYA组,Western blot检测LC3、Beclin1、P62和SIRT1表达。结果:与Sham组相比,模型组大鼠神经功能受损,神经行为学评分显著增加,脑组织出现大范围梗死,神经元细胞凋亡数显著增加,自噬相关蛋白Beclin1表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ显著升高,P62表达明显降低,LC3/NeuN共染细胞数明显增多,SIRT1表达下降;与模型组相比,HSYA干预组大鼠神经功能学评分明显下降,脑梗死面积显著缩小,神经元细胞凋亡数显著下降,Beclin1表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ进一步升高,P62表达进一步降低,LC3/NeuN共染细胞数进一步增多,SIRT1表达显著升高。正常对照组、模型组及HSYA干预组细胞Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、P62及SIRT1表达趋势同动物实验;与模型组相比,OGD/R+EX-527组细胞SIRT1、Beclin1和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达明显降低,P62表达显著升高;与OGD/R+EX-527组相比,OGD/R+EX-527+HSYA组细胞SIRT1表达无明显变化,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin1表达显著升高,P62表达明显降低。结论:HSYA能显著改善脑缺血再灌注后大鼠神经功能缺损,减少脑梗死面积,降低神经元细胞凋亡率,HSYA的神经保护作用可能与其激活SIRT1而显著增强神经元自噬有关。 展开更多
关键词 羟基红花黄色素A 神经元自噬 SIRT1 脑缺血再灌注损伤
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缺血性脑血管病神经保护药转化医学的现状 被引量：7
2
作者 刘小蒙 罗玉敏 陈俊 《中国脑血管病杂志》 CAS 2012年第10期550-555,共6页
重组组织型纤溶酶原激活剂是目前唯一被国际认可的治疗急性期脑缺血有效的药物。然而，因溶栓时间窗及溶栓禁忌证的限制，能成功进行溶栓的患者极少。即使成功溶栓后恢复脑血流，因重组组织型纤溶酶原激活剂并无神经保护作用，且本身存... 重组组织型纤溶酶原激活剂是目前唯一被国际认可的治疗急性期脑缺血有效的药物。然而，因溶栓时间窗及溶栓禁忌证的限制，能成功进行溶栓的患者极少。即使成功溶栓后恢复脑血流，因重组组织型纤溶酶原激活剂并无神经保护作用，且本身存在神经毒性，还需要其他神经保护药物进行治疗。抗栓治疗虽可降低卒中的复发率及栓塞并发症的发生率，但并不能降低患者的病死率，且可增加出血性转化的风险。 展开更多
关键词 脑缺血 神经保护药 转化医学
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海马注射β-淀粉样蛋白前体蛋白抗体诱导神经元的退行性变及学习记忆障碍(英文) 被引量：12
3
作者 许玉霞 王洪权 +2 位作者 赵红 郭景春 朱粹青 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2011年第10期908-918,共11页
探讨海马内注射淀粉样蛋白前体蛋白(APP)抗体诱导细胞表面APP的铰链是否影响大鼠的水迷宫行为学以及是否诱导神经元的退行性改变,并进一步探讨其可能的机制.成年雄性SD大鼠海马内分别注射生理盐水、对照IgG和APP抗体.水迷宫行为学检测... 探讨海马内注射淀粉样蛋白前体蛋白(APP)抗体诱导细胞表面APP的铰链是否影响大鼠的水迷宫行为学以及是否诱导神经元的退行性改变,并进一步探讨其可能的机制.成年雄性SD大鼠海马内分别注射生理盐水、对照IgG和APP抗体.水迷宫行为学检测测试动物的学习和记忆能力.Cresyl Violet(CV)和Fluoro-Jade B染色观察神经元的退行性变.免疫组织化学方法检测MAP-2和磷酸化paxillin及磷酸化tau蛋白在海马的异常表达和分布.海马内注射APP抗体可延长动物的寻台潜伏期,减少大鼠在平台所在象限的探索时间和穿梭次数.CV和Fluoro Jade-B染色结果显示,海马注射APP抗体可导致海马锥体细胞的死亡和退变.同时伴MAP2免疫染色的减少和磷酸化paxillin及磷酸化tau的免疫染色的增加.上述结果表明,海马内注射APP抗体可诱导学习和记忆功能障碍及神经元的退行性改变,其机制可能与MAP-2和磷酸化paxillin及磷酸化tau的异常表达分布有关. 展开更多
关键词 淀粉样蛋白前体蛋白 水迷宫 神经元退行性变 海马 PAXILLIN tau
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社区三级康复改善脑卒中患者神经功能的疗效观察 被引量：25
4
作者 崔立军 胡永善 +8 位作者 沈国光 张安蒙 章亚萍 陈惠芳 沈炜珍 郑钢 于健君 徐一鸣 陈颖 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期800-803,共4页
目的:探讨社区三级康复改善脑卒中患者神经功能的疗效。方法:将49例脑卒中患者按社区随机分为康复组和对照组,康复组在常规内科治疗的基础上给予规范的社区三级康复治疗,对照组给予常规内科治疗,没有进行规范的社区康复治疗。分别在入... 目的:探讨社区三级康复改善脑卒中患者神经功能的疗效。方法:将49例脑卒中患者按社区随机分为康复组和对照组,康复组在常规内科治疗的基础上给予规范的社区三级康复治疗,对照组给予常规内科治疗,没有进行规范的社区康复治疗。分别在入组时和第2个月末进行临床神经功能缺损程度(NIM)评定。结果:规范的社区三级康复治疗2个月后,康复组患者的临床神经功能缺损程度评分平均降低了3.26分,对照组平均降低了1.08分,康复组患者改善程度显著优于对照组(P<0.01)。结论:社区三级康复治疗可显著改善脑卒中患者神经功能缺损程度,促进神经功能的恢复。 展开更多
关键词 社区三级康复 随机对照 脑卒中 神经功能
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小鼠睡眠生物解析系统与应用 被引量：14
5
作者 邱梅红 岳小芳 +1 位作者 徐昕红 黄志力 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期20-23,共4页
目的建立高度自动化小鼠睡眠生物解析系统,并考察作用于多巴胺D1/D2受体的左旋千金藤啶碱(L-stepholi-dine,SPD)对小鼠睡眠的影响。方法动物饲养在恒温、恒湿、隔音、静电屏蔽、12h/12h明暗光照环境下,利用Sleep-Sign软件,连续48h记录... 目的建立高度自动化小鼠睡眠生物解析系统,并考察作用于多巴胺D1/D2受体的左旋千金藤啶碱(L-stepholi-dine,SPD)对小鼠睡眠的影响。方法动物饲养在恒温、恒湿、隔音、静电屏蔽、12h/12h明暗光照环境下,利用Sleep-Sign软件,连续48h记录自由运动小鼠的脑电和肌电,分别在d121:00点腹腔注射生理盐水和d2同一时间注射SPD;并用此软件对脑电和肌电进行分析,自动判断睡眠-觉醒时相。结果该系统能高度自动化和高效率地记录与解析小鼠睡眠-觉醒行为。小鼠觉醒期腹腔注射SPD能增加睡眠量,延长非快动眼睡眠波的时程,降低觉醒量及觉醒期脑电波的强度,但不影响快动眼睡眠。结论作用于多巴胺受体的SPD能促进非快动眼睡眠,抑制觉醒。 展开更多
关键词 睡眠 脑电图 肌电图 L-stepholidine 多巴胺受体拮抗剂
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利用MPprimer设计引物并优化扩增条件以提高多重PCR效率的实验研究 被引量：27
6
作者 王稳 屈武斌 +3 位作者 申志勇 任长虹 刘虎岐 张成岗 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第3期342-346,共5页
多重PCR技术广泛应用于多个研究领域,其中引物设计及扩增条件是提高多重PCR实验效率的关键因素.为探讨优化多重PCR实验的方法,以小鼠5个看家基因为研究对象,使用实验室新近开发的MPprimer程序设计多重PCR引物,并通过改变多种反应条件来... 多重PCR技术广泛应用于多个研究领域,其中引物设计及扩增条件是提高多重PCR实验效率的关键因素.为探讨优化多重PCR实验的方法,以小鼠5个看家基因为研究对象,使用实验室新近开发的MPprimer程序设计多重PCR引物,并通过改变多种反应条件来优化多重PCR实验.结果表明,MPprimer程序能够设计出理想的多重PCR引物,并且通过对退火温度及延伸时间进行优化,可显著提高多重PCR实验效率,对于提高基因表达的规模化检测能力具有积极的促进作用. 展开更多
关键词 PCR 多重PCR 引物设计 MPprimer
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共聚焦激光扫描显微镜技术在研究大鼠海马神经元胞内钙超载中的应用 被引量：4
7
作者 黄娅林 赵鹏 程介士 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期98-100,104,F003,共5页
目的 观察抑制性氨基酸牛磺酸对兴奋性氨基酸谷氨酸所致胞内钙超载的影响。方法 选择Fluo-3／ AM对培养的海马神经元进行着色后,用共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)实时 扫描,动态显示海马神经元二维图像... 目的 观察抑制性氨基酸牛磺酸对兴奋性氨基酸谷氨酸所致胞内钙超载的影响。方法 选择Fluo-3／ AM对培养的海马神经元进行着色后,用共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)实时 扫描,动态显示海马神经元二维图像,以计算机相应软件对胞内钙的荧光强度变化进行分析统计。结果 在 0.5 mmol／L谷氨酸作用下,胞内钙荧光强度迅速升高(P<0.001);0.5 mmol／L谷氨酸与3 mmol／L牛磺酸共同 作用于海马神经元时,胞内钙荧光强度明显降低(P<0.001);灌流液中去除牛磺酸后,胞内钙荧光强度上升(P <0.001)。结论 抑制性氨基酸牛磺酸可抑制由兴奋性氨基酸谷氨酸所致神经元的胞内钙超载;CLSM以其独 特的优势,在高清晰度地显示海马神经元形态的同时,也可动态地观察活细胞在不同环境下胞内钙的快速变化 以及定量分析。该技术在动态观察和二维图像的高分辨率上比传统测钙方法有更大的优越性。 展开更多
关键词 钙超载 海马神经元 共聚焦激光扫描显微镜 牛磺酸 谷氨酸 CLSM 大鼠海马 荧光强度 活细胞 Fluo-3/AM
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线粒体动力学改变在神经变性疾病中的地位 被引量：10
8
作者 李文伟 朱敏 吕传真 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期347-352,共6页
线粒体是一种处于高度运动状态的细胞器,频繁地出现分裂和融合,线粒体分裂和融合的动态过程被称为线粒体动力学。对于神经元来说,线粒体的动力学过程具有十分重要的生物学意义。已知线粒体融合介导蛋白的功能缺失性突变可以导致常染色... 线粒体是一种处于高度运动状态的细胞器,频繁地出现分裂和融合,线粒体分裂和融合的动态过程被称为线粒体动力学。对于神经元来说,线粒体的动力学过程具有十分重要的生物学意义。已知线粒体融合介导蛋白的功能缺失性突变可以导致常染色体显性遗传性视神经萎缩和Charcot-Marie-Tooth病等神经变性疾病。近来发现,在迟发性神经变性疾病中,线粒体动力学的改变也具有重要地位。本文将在线粒体动力学的分子调控以及与细胞死亡的关系、在神经变性疾病中的地位等方面综述这一领域的最新进展。 展开更多
关键词 线粒体分裂 线粒体融合 程序性死亡 神经变性
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一氧化氮在脑缺血时的神经毒作用 被引量：11
9
作者 应赛霞 程介士 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第6期415-417,共3页
一氧化氮在脑缺血时的神经毒作用应赛霞，程介士（上海医科大学医学神经生物学国家重点实验室，上海２０００３２）一氧化氮（ＮＯ）是一种具有自由基化学特性的简单气体。近年来，越来越多的证据表明，ＮＯ可能是中枢神经系统中一种非... 一氧化氮在脑缺血时的神经毒作用应赛霞，程介士（上海医科大学医学神经生物学国家重点实验室，上海２０００３２）一氧化氮（ＮＯ）是一种具有自由基化学特性的简单气体。近年来，越来越多的证据表明，ＮＯ可能是中枢神经系统中一种非经典的神经递质，在人体的生理功能及... 展开更多
关键词 脑缺血 一氧化氮 神经毒作用
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δ-阿片受体在脑缺血神经保护及神经发生中的作用 被引量：1
10
作者 田雪松 周飞 +2 位作者 夏萤 吴根诚 郭景春 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期227-230,共4页
关键词 神经发生 神经保护 阿片受体 脑缺血 缺血性脑损伤 G蛋白偶联受体 常见疾病 人类健康
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谷氨酸载体和神经元退化 被引量：2
11
作者 晏义平 孙凤艳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期485-488,共4页
谷氨酸载体和神经元退化晏义平孙凤艳（上海医科大学医学神经生物学国家重点实验室，上海２０００３２）１９９６－１１－１３收稿作者简介：晏义平，男，３２岁，博士研究生；孙凤艳，女，４２岁，教授，博士生导师，主要从事脑缺血致... 谷氨酸载体和神经元退化晏义平孙凤艳（上海医科大学医学神经生物学国家重点实验室，上海２０００３２）１９９６－１１－１３收稿作者简介：晏义平，男，３２岁，博士研究生；孙凤艳，女，４２岁，教授，博士生导师，主要从事脑缺血致神经细胞死亡及其预防机制的研究中国... 展开更多
关键词 EPSP 谷氨酸载体 神经元退化 分子克隆 摄取功能
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神经胶质瘤中前体mRNA可变剪接研究进展
12
作者 彭正羽 张薇 +1 位作者 陈献华 徐平 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1025-1032,共8页
胶质瘤是最常见的脑肿瘤,前体mRNA可变剪接可能在不同类型胶质瘤的发生、恶化以及侵入中发挥作用.参与调控胶质瘤中前体mRNA可变剪接的因素包括顺式元件如内含子剪接抑制序列(ISS)、外显子剪接抑制序列(ESS)等,反式因子包括SRp55、SC35... 胶质瘤是最常见的脑肿瘤,前体mRNA可变剪接可能在不同类型胶质瘤的发生、恶化以及侵入中发挥作用.参与调控胶质瘤中前体mRNA可变剪接的因素包括顺式元件如内含子剪接抑制序列(ISS)、外显子剪接抑制序列(ESS)等,反式因子包括SRp55、SC35、SF2/ASF、PTB等剪接调节因子.近期的研究进展发现,有多种与胶质瘤相关的基因受到可变剪接的调控,包括肿瘤抑制因子、肿瘤促进因子、酶、受体、离子通道等.因此,研究胶质瘤中的前体mRNA可变剪接将有利于深入了解胶质瘤发生的分子机制、有利于为胶质瘤的早期诊断和治疗提供新的潜在靶点. 展开更多
关键词 胶质瘤 前体MRNA 可变剪接 顺式元件 反式因子
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早老蛋白-1过度表达对神经母细胞瘤NG-108的tau蛋白磷酸化的影响(英文)
13
作者 陈波 程敏 +2 位作者 王寅 孙凤艳 朱粹青 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期651-656,共6页
目的观察早老蛋白-1(Presenilin-1,PS1)的过度表达对tau蛋白磷酸化的影响。方法在NG-108细胞上转染不同的PS1质粒,利用免疫双标,免疫印记,免疫细胞化学,MTT,Western blot等方法,观察早老蛋白-1的过度表达对tau蛋白磷酸化的影响。结果免... 目的观察早老蛋白-1(Presenilin-1,PS1)的过度表达对tau蛋白磷酸化的影响。方法在NG-108细胞上转染不同的PS1质粒,利用免疫双标,免疫印记,免疫细胞化学,MTT,Western blot等方法,观察早老蛋白-1的过度表达对tau蛋白磷酸化的影响。结果免疫双标显示,在散发性AD(sporadic Alzheimer disease)患者脑内,PS1主要分布于神经元,并与磷酸化tau蛋白部分共存。免疫印迹显示,与空质粒组相比,转染野生型PS1组和转染一种家族性AD(familial Alzheimer disease,FAD)突变型早老蛋白-1(mPS1)质粒组的NG-108细胞中磷酸化的tau蛋白均增加。MTT方法未检测到这两组的转染细胞与对照组有显著差异。用Confocal显微镜观察PS1-EGFP质粒转染组,发现在转染后早期12 h,PS1-EGFP主要分布在细胞膜表面或细胞器上,随后PS1-EGFP主要在细胞浆中弥散分布。同时,免疫细胞化学检测显示,部分PS1-EGFP转染细胞中有明显的tau蛋白磷酸化,并且这些磷酸化tau蛋白能与PS1-EGFP蛋白一起形成聚集体。在给予磷酸酯酶抑制剂岗田酸后,PS1-EGFP转染细胞比未转染细胞含有更多的磷酸化的tau蛋白。结论野生型PS1可能参与了散发性阿茨海默氏病中的tau蛋白的病理改变。 展开更多
关键词 早老蛋白-1 TAU蛋白磷酸化 阿茨海默氏病
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PGC-1α在海人酸(KA)诱导培养大鼠海马神经元氧化应激损伤中的作用
14
作者 唐海燕 杜鹏 +5 位作者 李鑫 林豪杰 刘剑英 马昱 范薇 汪昕 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期575-579,共5页
目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子(peroxisome proliferator-activated receptor-γcoactivator,PGC)-1α在海人酸(kainic acid,KA)诱导的培养大鼠海马神经元氧化应激及神经损伤中的作用。方法离体培养大鼠海马神经元,采... 目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子(peroxisome proliferator-activated receptor-γcoactivator,PGC)-1α在海人酸(kainic acid,KA)诱导的培养大鼠海马神经元氧化应激及神经损伤中的作用。方法离体培养大鼠海马神经元,采用电穿孔基因转染技术分别转染PGC-1αshRNA质粒和空载体质粒。培养7天后,用KA刺激上述海马神经元24h,检测转染空载体质粒海马神经元(空白对照组,n=10)、KA刺激的转染PGC-1αshRNA质粒(实验组,n=11)和KA刺激的空载体质粒海马神经元(KA对照组,n=10)的谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量、超氧化物歧化酶(superoxidase dismutase,SOD)和乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)活性变化。FJB染色检测KA刺激24h后实验组和KA对照组培养大鼠海马神经元神经损伤情况。结果KA刺激24h,培养的大鼠海马神经元GSH含量和SOD活性分别为(5.74±0.54)μmol.L-1.μg-1 protein和(10.57±1.25)U/mg protein,较空白对照组显著降低[(9.38±0.72)μmol.L-1.μg-1 protein,P<0.01;(23.12±3.23)U/mg protein,P<0.01];LDH活性为(2.21±0.18)mmol NADH,H+/min/100mg protein,较空白对照组海马神经元显著增高[(1.29±0.09)mmol NADH,H+/min/100mg protein,P<0.01]。转染PGC-1αshRNA质粒组,KA刺激24h海马神经元GSH含量和SOD活性分别为(3.37±0.42)μmol.L-1.μg-1protein和(4.54±0.91)U/mg protein,较KA对照组海马神经元明显降低(P均<0.05);LDH活性为(2.74±0.19)mol/NADH+/min/mg protein,较KA对照组海马神经元显著增加(P<0.01)。FJB染色显示转染PGC-1αshRNA质粒组,KA刺激24h培养大鼠海马神经元损伤较KA对照组明显增加(P<0.05)。结论 PGC-1α基因下调加重KA刺激后培养大鼠海马神经元损伤,可能与其加重氧化应激损伤有关。 展开更多
关键词 过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子(PGC-1α) 海马神经元 氧化应激 谷胱甘肽
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实验性癫癎时海马内兴奋性氨基酸受体对内阿片肽基因表达的影响
15
作者 任今鹏 黄志农 程介士 《上海医科大学学报》 CSCD 1999年第1期33-36,共4页
目的阐明在癫发作与发展中起着重要作用的脑内兴奋性氨基酸类递质和内阿片肽之间的关系。方法应用原位杂交方法观察了青霉素致及海马内微量注射ＮＭＤＡ受体阻断剂ＭＫ－８０１（５－ｍｅｔｈｙ１－１０，１１－ｄｉｈｙｄｒｏ－５... 目的阐明在癫发作与发展中起着重要作用的脑内兴奋性氨基酸类递质和内阿片肽之间的关系。方法应用原位杂交方法观察了青霉素致及海马内微量注射ＮＭＤＡ受体阻断剂ＭＫ－８０１（５－ｍｅｔｈｙ１－１０，１１－ｄｉｈｙｄｒｏ－５Ｈ－ｄｉｂｅｎｚｏ［ａ，ｄ］ｃｙｃｌｏｈｅｐｔａｎ－５，１０－ｉｍｉｎｅｍａｌｅａｔｅ）和非ＮＭＤＡ受体阻断剂ＤＮＱＸ（６，７－ｄｉｎｉｔｒｏｑｕｉｎｏｘａｌｉｎｅ－２，３－ｄｉｏｎｅ）后，大鼠海马内前脑啡肽原和前强啡肽原ｍＲＮＡ表达的变化。结果在青霉素致４ｈ后，海马ＣＡ１区、ＣＡ３区、齿状回前脑啡肽原ｍＲＮＡ和海马ＣＡ３区、齿状回前强啡肽原ｍＲＮＡ的表达明显增加。在青霉素致前分别在海马内微量注射ＭＫ８０１（６μｇ）和ＤＮＱＸ（４μｇ），则在减弱发作的同时，海马内前脑啡肽原ｍＲＮＡ的表达明显减少，而前强啡肽原ｍＲＮＡ的表达继续增加。 展开更多
关键词 癫痫 内阿片肽 氨基酸受体 基因表达
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辩证分析兴奋性氨基酸对神经细胞的双重作用
16
作者 张玉秋 梅俊 《医学与哲学》 1999年第12期4-6,共3页
兴奋性氨基酸（ＥＡＡｓ） 广泛分布于中枢神经系统，参与多种生理过程包括学习、记忆和伤害感受等。然而，ＥＡＡｓ 受体的过度兴奋却可引发一系列细胞事件，最终导致神经元的损伤与死亡。许多神经退行性疾病如早老性痴呆、癫痫和肌侧... 兴奋性氨基酸（ＥＡＡｓ） 广泛分布于中枢神经系统，参与多种生理过程包括学习、记忆和伤害感受等。然而，ＥＡＡｓ 受体的过度兴奋却可引发一系列细胞事件，最终导致神经元的损伤与死亡。许多神经退行性疾病如早老性痴呆、癫痫和肌侧索硬化症等都与ＥＡＡｓ 的兴奋毒作用有关。目前的研究表明，由ＥＡＡｓ 展开更多
关键词 兴奋性氨基酸 兴奋毒作用 钙超载
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基于SLC7A11/GPX4信号通路探讨HSYA抑制LCN2诱导的HT22细胞铁死亡
17
作者 戎梦玮 但存燕 +6 位作者 夏天晴 杨依 楼秀 姬晨翔 肖保国 马存根 宋丽娟 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第11期2097-2105,共9页
目的 探讨羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)对脂质运载蛋白2(lipocalin 2,LCN2)诱导的HT22细胞铁死亡的作用及机制。方法 使用30只SD雄性大鼠采用线栓法制作MCAO/R模型,随机分为Sham组、MCAO/R组、MCAO/R+HSYA组。TTC染... 目的 探讨羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)对脂质运载蛋白2(lipocalin 2,LCN2)诱导的HT22细胞铁死亡的作用及机制。方法 使用30只SD雄性大鼠采用线栓法制作MCAO/R模型,随机分为Sham组、MCAO/R组、MCAO/R+HSYA组。TTC染色测定梗死面积,Z-Longa评分法评估神经功能缺损程度,Western blot检测脑组织中LCN2、24P3R表达。在HT-22细胞中加入LCN2蛋白,分为Normal、LCN2组、LCN2+HSYA组。LDH、Western blot筛选LCN2诱导神经元铁死亡最佳浓度,检测Ferritin、FPN1、GPX4、SLC7A11、COX2、24P3R表达水平。siRNA转染敲低LCN2,检测GPX4与Ferritin。比色法测定GSH、MDA、GPX4、Fe^(2+)含量,免疫荧光检测GPX4表达。分子对接技术分析HSYA与LCN2的结合力。结果 动物实验结果显示:HSYA可减少脑梗死面积,降低MCAO/R大鼠神经功能评分,与Sham组相比,MCAO/R组LCN2和24P3R水平增加,HSYA抑制其表达。细胞实验显示:LCN2诱导HT22细胞铁死亡最佳浓度为2μmol·L^(-1),使用siRNA转染敲低LCN2后,与LCN2组相比,siLCN2组GPX4与Ferritin表达量明显增高;与Normal相比,LCN2组SLC7 A11、GPX4、FPN1、Ferritin和GSH表达明显降低,而Fe^(2+)浓度、MDA、COX2、24P3R的表达增加。HSYA可增加SLC7A11、GPX4、FPN1、Ferritin与GSH的表达,降低Fe^(2+)、MDA含量,抑制COX2与24P3R的表达。分子对接显示HSYA与LCN2的结合能为-8.0 kJ·mol^(-1)。结论 HSYA能够通过SLC7A11/GPX4信号通路抑制LCN2诱导的HT22细胞铁死亡。 展开更多
关键词 羟基红花黄色素A LCN2 神经元 铁死亡 缺血性脑卒中 SLC7A11/GPX4
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大鼠胚胎神经干细胞单克隆化及单层化培养和鉴定 被引量：9
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作者 丁道芳 邢三丽 +1 位作者 周鸣鸣 宋后燕 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第1期72-76,共5页
采用原代培养SD胎鼠神经干细胞,在形成神经球之后,传代至0.1%明胶包被的培养皿,显微镜下挑取一个神经球贴壁后的细胞团,吹打后贴壁培养.同样方法挑细胞团并传代培养5～6次,得到纯化的由一个神经干细胞扩增的克隆,对得到的神经干细胞进... 采用原代培养SD胎鼠神经干细胞,在形成神经球之后,传代至0.1%明胶包被的培养皿,显微镜下挑取一个神经球贴壁后的细胞团,吹打后贴壁培养.同样方法挑细胞团并传代培养5～6次,得到纯化的由一个神经干细胞扩增的克隆,对得到的神经干细胞进行鉴定以及分化能力的评估,证明得到的细胞就是神经干细胞.结果表明,成功分离了SD胎鼠的神经干细胞,进行单克隆化单层培养,神经干细胞和分化后的细胞标志基因都可以检测到.上述工作为疾病模型大鼠治疗及相关基础研究提供细胞来源及形态标准. 展开更多
关键词 神经干细胞 单克隆化 NESTIN SOX2 GFAP Tuji
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caspase-3限制小鼠脑卒中恢复期齿状回神经前体细胞增殖 被引量：4
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作者 朱西民 戴义芹 +3 位作者 徐昊辰 孙春刚 范文英 赵冰樵 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期280-285,共6页
目的探讨caspase-3对脑卒中恢复期海马齿状回(dentate gyrus,DG)神经前体细胞(neuronal precursor cells,NPCs)增殖的作用。方法构建小鼠大脑中动脉远端堵塞(distal middle cerebral artery occlusion,dMCAO)缺血模型,取缺血手术后第7... 目的探讨caspase-3对脑卒中恢复期海马齿状回(dentate gyrus,DG)神经前体细胞(neuronal precursor cells,NPCs)增殖的作用。方法构建小鼠大脑中动脉远端堵塞(distal middle cerebral artery occlusion,dMCAO)缺血模型,取缺血手术后第7天缺血侧DG进行体外细胞培养。研究分为对照组和给药组(caspase-3抑制剂给药组);采用Western blot、免疫细胞化学、流式细胞仪和TUNEL染色检测DG NPCs中caspase-3的表达及NPCs的凋亡和增殖情况。在小鼠脑卒中后第14天,采用免疫组织化学方法检测caspase-3抑制对DG NPCs增殖的影响。结果体外培养的源自脑缺血后DG的神经球NPCs大量表达激活型caspase-3,但是超过87%的caspase-3阳性细胞与TUNEL阳性没有共定位关系。caspase-3限制了DG NPCs的自我更新,但并未参与细胞的凋亡过程。抑制caspase-3可促进脑卒中恢复期DG NPCs的增殖。结论 caspase-3可通过细胞凋亡之外的途径调控缺血性脑损伤后的神经再生。 展开更多
关键词 脑卒中 神经再生 CASPASE-3 齿状回 神经前体细胞 小鼠
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低氧激活海马神经元上ATP敏感性钾通道 被引量：2
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作者 单红蕖 郑平 程介士 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期257-259,共3页
目的观察ＡＴＰ敏感性钾通道（ＫＡＴＰ通道）在低氧时的状态及细胞内高浓度ＡＴＰ对它的影响。方法采用膜片钳全细胞及单通道两种方法直接证实低氧时ＫＡＴＰ通道的开放。结果低氧时ＫＡＴＰ通道开放，且这种开放状态可被细胞内注射５... 目的观察ＡＴＰ敏感性钾通道（ＫＡＴＰ通道）在低氧时的状态及细胞内高浓度ＡＴＰ对它的影响。方法采用膜片钳全细胞及单通道两种方法直接证实低氧时ＫＡＴＰ通道的开放。结果低氧时ＫＡＴＰ通道开放，且这种开放状态可被细胞内注射５ｍｍｏｌ·Ｌ－１ＡＴＰ所阻断。ＫＡＴＰ通道开放剂与低氧时激活的通道类似。单通道记录发现，低氧后通道开放的频率、幅度明显加大。结论低氧时外向钾电流明显增加，它来源于ＫＡＴＰ通道的开放。 展开更多
关键词 低氧 KATP通道 膜片钳 海马 神经元 脑缺血
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