聚乙二醇化合物在输血研究中的应用

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作者 季守平 章扬培 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1999年第1期20-23,共4页

聚乙二醇及其衍生物是一类具有重要应用前景的化合物。本文综述了用聚乙二醇沉淀提高血型和病原微生物抗原检测的灵敏度及用甲氧基聚乙二醇遮蔽红细胞血型抗原决定簇和制备通用型血的研究,并综述了用聚乙二醇修饰血红蛋白及用含聚乙二... 聚乙二醇及其衍生物是一类具有重要应用前景的化合物。本文综述了用聚乙二醇沉淀提高血型和病原微生物抗原检测的灵敏度及用甲氧基聚乙二醇遮蔽红细胞血型抗原决定簇和制备通用型血的研究,并综述了用聚乙二醇修饰血红蛋白及用含聚乙二醇衍生物的脂质体包封血红蛋白生产血液代用品等方面的研究。 展开更多

关键词 聚乙二醇 抗原检测 通用型血 血液代用品

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聚乙二醇修饰猪血红蛋白的计算机模拟研究 被引量：2

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作者 胡远东 白坚石 +2 位作者 焦克芳 卜凤荣 李松 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第3期263-267,共5页

对猪血红蛋白αβ二聚晶体结构的分析和氨基酸残基溶剂可及表面积的计算表明 ,猪血红蛋白表面赖氨酸 (Lys)上的氨基适合进行聚乙二醇 (PEG)修饰 ,对其修饰不会影响血红蛋白的携氧能力 ,在此基础上设计了连接物连接PEG和猪血红蛋白。猪... 对猪血红蛋白αβ二聚晶体结构的分析和氨基酸残基溶剂可及表面积的计算表明 ,猪血红蛋白表面赖氨酸 (Lys)上的氨基适合进行聚乙二醇 (PEG)修饰 ,对其修饰不会影响血红蛋白的携氧能力 ,在此基础上设计了连接物连接PEG和猪血红蛋白。猪血红蛋白和牛血红蛋白赖氨酸的保守性及其氨基可及性的差异表明 ,同源的蛋白质性质相似 ,但依据同源性分析单个氨基酸残基的性质时可能会有一定的偏差。分子模拟研究结果显示 。 展开更多

关键词 猪血红蛋白 聚乙二醇 血液代用品 PEG 计算机模拟 溶剂可及表面积

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甲氧基聚乙二醇修饰脐血淋巴细胞抗原的实验研究 被引量：2

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作者 张全 季守平 +1 位作者 李素波 熊砚芳 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期525-526,共2页

用甲氧基聚乙二醇(mPEG)修饰脐血单个核细胞 ,并观察修饰后对淋巴细胞表面某些抗原的遮蔽作用及造血干祖细胞体外集落形成能力的影响。流式细胞仪分析结果表明 ,修饰后的脐血淋巴细胞CD3、CD4和CD8抗原与修饰前相比其相对荧光强度明显下... 用甲氧基聚乙二醇(mPEG)修饰脐血单个核细胞 ,并观察修饰后对淋巴细胞表面某些抗原的遮蔽作用及造血干祖细胞体外集落形成能力的影响。流式细胞仪分析结果表明 ,修饰后的脐血淋巴细胞CD3、CD4和CD8抗原与修饰前相比其相对荧光强度明显下降(P <0 0 1) ,剂量越大 ,遮蔽效果越好。当mPEG的浓度达到 12mg/ml时 ,CD3、CD4和CD8表面抗原被遮蔽达 96 %以上。用 3mg/ml、6mg/ml和 12mg/mlmPEG修饰单个核细胞后在体外人干细胞培养基中培养发现 ,形成CFU GM的数量分别为 2 2 83± 14 4 7、2 2 6 7± 14 6 1和2 5 83± 9 99。与对照组 (2 4 0 0±18 4 2 )相比差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。提示mPEG修饰脐血淋巴细胞后几乎可以完全遮蔽其表面抗原 ,但不影响干祖细胞在体外的增殖、分化能力。 展开更多

关键词 甲氧基聚乙二醇 脐血 淋巴细胞抗原 实验研究 脐血干祖细胞 MPEG 化学修饰

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冷冻干燥血小板保存技术研究 被引量：7

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作者 曹伟 王艳 +5 位作者 靳鹏 刘安 裴海云 祝瑞泉 叶初燕 韩颖 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第5期883-888,共6页

为了探索新的血小板保存方法,对血小板进行了冷冻干燥的研究。采用乙醛对血小板做预处理,在冷冻干燥过程中为了稳定血小板的结构,加入了人白蛋白或海藻糖作为保护剂,并对再水化液进行了筛选。对冷冻干燥后的血小板进行了形态学观察和表... 为了探索新的血小板保存方法,对血小板进行了冷冻干燥的研究。采用乙醛对血小板做预处理,在冷冻干燥过程中为了稳定血小板的结构,加入了人白蛋白或海藻糖作为保护剂,并对再水化液进行了筛选。对冷冻干燥后的血小板进行了形态学观察和表面膜糖蛋白表达的检测。结果表明,乙醛处理后血小板的回收率基本稳定在60%以上,血小板的聚集活性与处理前相比有轻微的降低;5%人血白蛋白冷冻干燥保护液的保存效果明显优于40mmol/L海藻糖冷冻干燥保护液,在血小板聚集活性保持方面,用贫血小板血浆(PPP)再水化结果明显优于磷酸缓冲盐溶液(PBS)。透射电子显微观察显示,冷冻干燥后血小板胞内细胞器和颗粒物质清晰可见,其中包括线粒体和各种分泌颗粒。乙醛处理后血小板膜糖蛋白的表达与新鲜血小板相比明显降低。结论:乙醛作为一种新的保护剂,对血小板冷冻干燥有良好的效果,值得进一步研究。 展开更多

关键词 血小板 乙醛 冷冻保存 人白蛋白 海藻糖

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血液中ATP含量随保存温度和保存时间变化的规律性研究及数学建模 被引量：4

5

作者 任素萍 李成岳 +3 位作者 刘安 郑建弘 钟仕增 韩颖 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第5期896-900,共5页

为了研究血液中ATP含量随保存温度和保存时间变化的规律性并建立数学模型,以ATP含量作为血液质量的评判指标,对4-32℃区间不同保存温度条件下血液的质量变化进行了系统的研究,得出系列经验数据。结果表明:假设ATP的浓度y=f(d,t,s)是时间... 为了研究血液中ATP含量随保存温度和保存时间变化的规律性并建立数学模型,以ATP含量作为血液质量的评判指标,对4-32℃区间不同保存温度条件下血液的质量变化进行了系统的研究,得出系列经验数据。结果表明:假设ATP的浓度y=f(d,t,s)是时间d、温度t和起始浓度s的连续函数,利用数理统计中的线性回归理论对模型加以拟合,得到了ATP浓度随保存温度和保存时间变化的一般数学物理方程,根据方程推算在4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30和32℃温度下,以CPDA1保存的全血分别可以有效保存35、35、29、22、18、18、13、8、7、6、6、5、4、4和3天。结论:本研究首次系统揭示了保存温度变化时血液质量变化的一般性规律,为准确判断变温血质量、指导临床合理用血提供科学参考。 展开更多

关键词 血液保存 ATP 线性回归 数学模型

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回输的血小板在体内清除机制研究进展 被引量：3

6

作者 郭永 韩颖 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第5期1049-1052,共4页

生理学,病理学方面的研究发现血小板在体内清除主要发生在肝脏和脾脏,但衰老和损伤的血小板被体内清除系统识别和清除的机制还并不清楚。这一机制研究的深入将有助于解决血小板低温保存后体内存活期短,不能较长期发挥作用的难题,为血小... 生理学,病理学方面的研究发现血小板在体内清除主要发生在肝脏和脾脏,但衰老和损伤的血小板被体内清除系统识别和清除的机制还并不清楚。这一机制研究的深入将有助于解决血小板低温保存后体内存活期短,不能较长期发挥作用的难题,为血小板保存提出新的策略。本文就血小板回输体内后的清除机制,包括P-选择蛋白,GPⅠbα及其受体Mac-1和内源性金属蛋白酶在血小板清除进程中的作用等的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 血小板 血小板保存 清除机制 P-选择蛋白 GPIbα 内源性金属蛋白酶

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化学修饰的牛血红蛋白初步研究——与葡聚糖共价交联<英文>

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作者 王瑾 王鹤尧 卜凤荣 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1999年第2期152-155,共4页

本研究用牛血红蛋白为原料,探索牛血红蛋白与葡聚糖进行共价连接的途径,成功地建立了聚合牛血红蛋白方法。实验结果表明牛血红蛋白能有效地与葡聚糖交联,增加了血红蛋白分子量,稳定了血红蛋白的结构,同时也保持了修饰后牛血红蛋白较好... 本研究用牛血红蛋白为原料,探索牛血红蛋白与葡聚糖进行共价连接的途径,成功地建立了聚合牛血红蛋白方法。实验结果表明牛血红蛋白能有效地与葡聚糖交联,增加了血红蛋白分子量,稳定了血红蛋白的结构,同时也保持了修饰后牛血红蛋白较好的氧亲和力,从而为血液代用品的研究开辟了一条途径。 展开更多

关键词 牛血红蛋白 葡聚糖 化学修饰 共价交联

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定点突变人α_(99)、β_(82)位的血红蛋白及在大肠杆菌中的表达 被引量：1

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作者 张浩 毛秉智 +3 位作者 冯健男 王全立 冯起 董波 《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第3期330-334,共5页

模拟分析发现血红蛋白两条α珠蛋白链上 99位的 Lys突变为 Cys后 ,它们之间可以形成二硫键 ,两条β珠蛋白链上 82位的 Lys突变为 Cys后可以增加血红蛋白四聚体间氢键的作用 ,分别起到稳定四聚体的作用 .利用寡核苷酸介导的定点突变技术... 模拟分析发现血红蛋白两条α珠蛋白链上 99位的 Lys突变为 Cys后 ,它们之间可以形成二硫键 ,两条β珠蛋白链上 82位的 Lys突变为 Cys后可以增加血红蛋白四聚体间氢键的作用 ,分别起到稳定四聚体的作用 .利用寡核苷酸介导的定点突变技术将α99、β82 位的 Lys突变为 Cys.将突变后的血红蛋白插入 p BV2 2 0载体 ,在大肠杆菌中获得了高效表达 ,其表达产物达细菌总蛋白的2 0 %左右 ,并经 展开更多

关键词 血红蛋白 大肠杆菌 定点突变 稳定性 氢键

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胎儿间充质干细胞cDNA扣除文库的构建 被引量：1

9

作者 杨莉 王冬梅 +4 位作者 李梁 白慈贤 曹华 李廷玉 裴雪涛 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第2期89-92,共4页

为了获得胎儿和成人间充质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSC)的差异表达基因 ,尤其是在胎儿MSC中特异表达的基因 ,应用抑制扣除杂交技术构建了胎儿和成人MSCcDNA扣除文库。首先 ,分别从胎儿和成人MSC中提取总RNA ,按照SMARTPCR方法依... 为了获得胎儿和成人间充质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSC)的差异表达基因 ,尤其是在胎儿MSC中特异表达的基因 ,应用抑制扣除杂交技术构建了胎儿和成人MSCcDNA扣除文库。首先 ,分别从胎儿和成人MSC中提取总RNA ,按照SMARTPCR方法依次合成单链和双链cDNA ,经RsaⅠ酶切后 ,胎儿MSCcDNA分别与两种不同的接头连接 ,再与成人MSCcDNA经过两次扣除杂交及两轮抑制性PCR扩增后 ,将产物与T载体连接构建成cDNA扣除文库 ,并转染大肠杆菌进行文库扩增。结果 :文库扩增后共获得 890个克隆 ,对所获得的克隆进行PCR扩增鉴定 ,获得 76 8个阳性克隆 ,阳性率为 86 .3%。插入片段大小分布在 0 .2 - 1kb ,平均为 4 0 0 - 6 0 0bp。结论 :抑制扣除杂交技术是一种简便、有效的筛选差异表达基因的方法。胎儿MSCcDNA扣除文库的构建为进一步筛选、克隆胎儿MSC中特异性表达的功能相关基因奠定了基础。 展开更多

关键词 间充质干细胞 抑制扣除杂交 cDNA扣除文库 胎儿 构建 文库扩增 骨髓 成人 特异表达基因

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血型转变 被引量：15

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作者 章扬培 季守平 +2 位作者 杨军 宫锋 由英 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1998年第2期91-97,共7页

本文描述了人血红细胞表面分子结构及其基因,介绍了有关血型转变的研究进展。从绿色咖啡豆中制备的α-半乳糖苷酶可以将B型血转变为O型血。体外研究证明了转型后的红细胞的完整性,正常活存率,呈现O型血的免疫特征。人Ⅰ期临床实验证明,... 本文描述了人血红细胞表面分子结构及其基因,介绍了有关血型转变的研究进展。从绿色咖啡豆中制备的α-半乳糖苷酶可以将B型血转变为O型血。体外研究证明了转型后的红细胞的完整性,正常活存率,呈现O型血的免疫特征。人Ⅰ期临床实验证明,转型后的B型红细胞可以安全地输给A型和O型血的自愿受试者。用mPEG包裹人血红细胞制备的通用型血,也能应用于临床输血。 展开更多

关键词 输血 血型 血型转变 Α-半乳糖苷酶 mPEG包裹

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4℃延期保存红细胞超微结构的动态变化 被引量：4

11

作者 任素萍 马恩普 +3 位作者 刘秀珍 韩颖 刘安 靳鹏 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第5期524-526,共3页

为了探讨SOD保养液延期保存过程中红细胞超微结构的动态变化 ,应用透射电镜对SOD保养液 4℃保存全血于保存第 0 ,42 ,75及 85天动态观察红细胞的形态学变化。以GMA液同期保存的标本作为对照 ,应用SAS软件对数据进行具有重复测量的三因... 为了探讨SOD保养液延期保存过程中红细胞超微结构的动态变化 ,应用透射电镜对SOD保养液 4℃保存全血于保存第 0 ,42 ,75及 85天动态观察红细胞的形态学变化。以GMA液同期保存的标本作为对照 ,应用SAS软件对数据进行具有重复测量的三因素设计方差分析。结果表明 ,保存第 42 ,75及 85天 3个时间点下 ,SOD保养液组红细胞形变率均低于GMA组 (P <0 .0 1)。SOD保养液组 42 ,75和 85天的红细胞形变率与GMA液保存 42天的红细胞形变率无显著性差别 ,甚至更低。结论 :SOD保养液在 展开更多

关键词 血液保存 红细胞 超微结构 超氧化物歧化酶

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用基因工程方法生产重组人血红蛋白 被引量：1

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作者 宫锋 章扬培 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1998年第4期246-248,共3页

本文概述了研制重组人血红蛋白(rhHb)的发展过程、存在问题与解决方法,回顾了在原核系统中高效表达rhHb的几种途径及人们从不同种类脊椎动物的Hb得到的启示。

关键词 重组人血红蛋白 基因工程 血液代用品

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纳米通道技术及应用 被引量：1

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作者 贾帅争 孙红琰 王全立 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期202-205,共4页

纳米通道技术是近年来发展的一种直接解读核酸分子编码信息的新方法 ,它通过将单链核酸上的核苷酸序列直接转化为电信号 ,能以每秒超过 10 0 0个碱基的速度对其进行超快速序列分析 ,较现有测序方法更简便快速和省钱 .该技术除可用于核... 纳米通道技术是近年来发展的一种直接解读核酸分子编码信息的新方法 ,它通过将单链核酸上的核苷酸序列直接转化为电信号 ,能以每秒超过 10 0 0个碱基的速度对其进行超快速序列分析 ,较现有测序方法更简便快速和省钱 .该技术除可用于核酸超快速外 ,还在病原体基因诊断、单核苷酸多态性和样品多成分的快速检测等多个领域有重要用途 . 展开更多

关键词 纳米通道 α溶血素 核酸测序 传感器

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应用PCR-SSP法分析中国人血小板抗原基因型频率(英文) 被引量：1

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作者 张克强 王波 +1 位作者 王字玲 李娅 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第3期256-259,共4页

本研究建立了在同一PCR反应条件下同时检测人血小板抗原 (humanplateletantigen ,HPA)系统HPA 1到HPA 5的PCR SSP检测法。应用该方法分析了 110例健康献血员的HPA 1到HPA 5的基因型 ,并以此为依据推算了中国人HPA 1到HPA 5各亚型的基因... 本研究建立了在同一PCR反应条件下同时检测人血小板抗原 (humanplateletantigen ,HPA)系统HPA 1到HPA 5的PCR SSP检测法。应用该方法分析了 110例健康献血员的HPA 1到HPA 5的基因型 ,并以此为依据推算了中国人HPA 1到HPA 5各亚型的基因频率。结果表明HPA 1a和HPA 1b的基因频率分别为 0 .91和 0 .0 9,HPA 2a和HPA 2的基因频率分别为 0 .86和 0 .14,HPA 3a和HPA 3b的基因频率分别为 0 .60和 0 .4 0 ,HPA 4a和HPA 4b的基因频率分别为 0 .92和 0 .0 8,HPA 5a和HPA 5b的基因频率分别为 0 .85和 0 .15。结论 :基因组DNA的血小板抗原PCR SSP分型法切实可行 。 展开更多

关键词 人血小板抗原 基因分型 基因型频率 PCR-SSP

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