不同蛋壳颜色鸡蛋品质及矿物元素含量分析

1

作者 张晶晶 方芳 +3 位作者 贾良曦 魏紫嫣 倪香艳 孙志文 《中国家禽》 北大核心 2025年第6期108-114,共7页

试验旨在研究不同蛋壳颜色鸡蛋品质和矿物元素间关系,为不同品种蛋鸡的科学养殖提供数据支撑。试验选取白壳蛋、绿壳蛋、粉壳蛋和褐壳蛋,微波消解前处理-电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)测定矿物元素含量。采用Pearson法分析蛋壳和鸡蛋... 试验旨在研究不同蛋壳颜色鸡蛋品质和矿物元素间关系,为不同品种蛋鸡的科学养殖提供数据支撑。试验选取白壳蛋、绿壳蛋、粉壳蛋和褐壳蛋,微波消解前处理-电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)测定矿物元素含量。采用Pearson法分析蛋壳和鸡蛋中各元素含量及相关性,并绘制矿物元素指纹图谱。结果显示:不同蛋壳颜色的鸡蛋和蛋壳中矿物元素含量差异显著(P<0.05);不同蛋壳颜色的鸡蛋蛋壳厚度差异显著(P<0.05);蛋壳中Zn含量与蛋壳强度、Cu含量蛋壳厚度显著相关(P<0.05);不同蛋壳颜色鸡蛋中Ca、Mg、Fe、Zn、Cu、Mn、Se含量显著相关(P<0.05)。研究表明:不同蛋壳颜色鸡蛋和蛋壳中矿物元素含量及蛋壳厚度存在显著差异(P<0.05);蛋壳质量与矿物元素含量存在相关性,应科学配比蛋鸡日粮中元素种类及含量,提高鸡蛋品质和营养价值。 展开更多

关键词 蛋壳 鸡蛋 矿物元素 相关性 指纹图谱

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鸡蛋中氟苯尼考残留的AlphaLISA检测方法的建立

2

作者 孙志文 王忠 +5 位作者 于莹 赵营 张晶晶 魏紫嫣 方芳 马立才 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第4期11-19,共9页

本试验旨在建立可检测鸡蛋中氟苯尼考(FF)残留的均相光激化学发光免疫分析方法(AlphaLISA)。通过化学方法合成FF生物素半抗原,利用O-羧甲基羟胺法偶联FF抗体与受体微球,通过筛选确定鸡蛋样品稀释倍数,采用棋盘法确定FF抗体标记受体微球... 本试验旨在建立可检测鸡蛋中氟苯尼考(FF)残留的均相光激化学发光免疫分析方法(AlphaLISA)。通过化学方法合成FF生物素半抗原,利用O-羧甲基羟胺法偶联FF抗体与受体微球,通过筛选确定鸡蛋样品稀释倍数,采用棋盘法确定FF抗体标记受体微球和FF生物素半抗原的浓度,最后基于FF抗体标记受体微球、FF生物素半抗原和链霉亲和素修饰供体微球,优化建立了检测鸡蛋中FF残留的AlphaLISA检测方法,并评价其灵敏度、特异性、准确性和重复性,及与国家标准方法GB 31658.20—2022《动物性食品中酰胺醇类药物及其代谢物残留量的测定液相色谱-串联质谱法》的一致性。质谱分析结果显示,FF生物素半抗原与目标分子的分子量一致(636 Da)。经评估,鸡蛋样品离心上清液采用25倍稀释方案。建立的AlphaLISA方法对鸡蛋中FF的检测限为0.57μg/kg,定量限为0.92μg/kg;添标回收率介于87.00%~99.50%,日内和日间变异系数均低于5%;与氟苯尼考胺的交叉反应率较高(93.27%),与12种常见兽药的交叉反应率极低(<0.1%);与国家标准方法比较,2种方法在5个添加浓度点的检测结果高度一致(R2=0.997)。结果表明,本试验建立的AlphaLISA具有高灵敏度、准确性、重复性和操作简便等优点,适用于鸡蛋中FF残留的快速检测,为鸡蛋安全监测提供了高效且可行的方案。 展开更多

关键词 鸡蛋 氟苯尼考 均相光激化学发光免疫分析方法(AlphaLISA) 半抗原

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牛乳中庆大霉素间接竞争酶联免疫吸附测定法的建立

3

作者 刘颖沙 雷红梅 +1 位作者 邢维维 吕紫怡 《热带农业科学》 2025年第5期98-103,共6页

庆大霉素作为一种氨基糖苷类抗生素,常被用于禽畜疾病防治,但过量使用会导致其在牛乳中残留,威胁人体健康。文章旨在优化庆大霉素间接竞争酶联免疫吸附测定法(ELISA),建立适用于生鲜乳现场检测的最佳反应体系。通过方阵滴定法确定包被... 庆大霉素作为一种氨基糖苷类抗生素,常被用于禽畜疾病防治,但过量使用会导致其在牛乳中残留,威胁人体健康。文章旨在优化庆大霉素间接竞争酶联免疫吸附测定法(ELISA),建立适用于生鲜乳现场检测的最佳反应体系。通过方阵滴定法确定包被原和单抗最佳稀释浓度,优化包被条件、包被液、一抗孵育条件、二抗稀释度等多种反应条件,并以生鲜乳为样品进行添加回收试验、准确度和特异性研究。结果显示,最佳包被原稀释倍数为1∶40000,最佳单抗稀释倍数为1∶10000;最佳反应条件下,线性检测范围为0~5 ng/mL,生鲜乳中庆大霉素检测限为15μg/L,加标回收率在72.3%~96.5%,与其他抗生素无交叉反应,检测结果与高效液相色谱法符合率良好。本研究建立的庆大霉素间接竞争ELISA方法灵敏度高、特异性好、准确度高,为生鲜乳中庆大霉素的快速检测提供了有效手段,后续将进一步扩大样品量探究试剂盒精确度,以提升其应用价值。 展开更多

关键词 庆大霉素 间接竞争ELISA法 生鲜乳 快速检测

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生物样本中莱克多巴胺检测方法的研究进展 被引量：6

4

作者 王文珺 李阳 +1 位作者 叶云锋 江海洋 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第1期140-146,共7页

莱克多巴胺(ractopamine,RAC)是一种常用的β-兴奋剂,近年来,人们发展了许多方法检测其在食用动物中的残留情况,以期达到对其使用的有效监控。作者在介绍RAC基本理化性质和作用机理的基础上,论述了国内外检测生物样本中RAC的分析方法,... 莱克多巴胺(ractopamine,RAC)是一种常用的β-兴奋剂,近年来,人们发展了许多方法检测其在食用动物中的残留情况,以期达到对其使用的有效监控。作者在介绍RAC基本理化性质和作用机理的基础上,论述了国内外检测生物样本中RAC的分析方法,并对这些方法的优缺点进行了分析,进一步说明无论仪器分析方法还是免疫分析方法都有其固有的特性和优缺点,彼此是无法完全替代的,并在此基础上,对未来RAC分析方法的发展方向进行了展望。 展开更多

关键词 莱克多巴胺 残留检测 仪器分析 免疫分析

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猪痢疾发病机理及诊断技术研究进展 被引量：3

5

作者 Burrough ER 刘河冰 《中国猪业》 2018年第5期41-43,46,共4页

猪痢疾是以出血性黏液样腹泻为特征的一种严重的肠道疾病。该疾病是由短螺旋体感染引起的,最常见于生长育肥猪。易感猪主要以黏膜出血性盲肠结肠炎为主要临床特征,严重的可以引起死亡,即使恢复健康后也会降低生长性能,给养殖业造成严重... 猪痢疾是以出血性黏液样腹泻为特征的一种严重的肠道疾病。该疾病是由短螺旋体感染引起的,最常见于生长育肥猪。易感猪主要以黏膜出血性盲肠结肠炎为主要临床特征,严重的可以引起死亡,即使恢复健康后也会降低生长性能,给养殖业造成严重的经济损失。本文综述了猪痢疾的病因、发病机制和诊断知识,以期为该病的风险防控提供科学依据。 展开更多

关键词 猪痢疾 短螺旋体 消化系统疾病

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利用时间分辨荧光免疫层析法同时定量检测玉米中的伏马毒素B_(1)、B_(2)和B_(3)

6

作者 张佳林 马立才 +3 位作者 侯璐 孟和那仁 温凯 侯晓林 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第13期265-271,共7页

建立了一种可同时定量检测玉米中伏马毒素B_(1)、B_(2)和B_(3)的时间分辨荧光免疫层析方法。利用活化酯法制备时间分辨荧光微球和伏马毒素抗体的偶联物,将伏马毒素抗原包被到硝酸纤维素膜上作为T线,通过优化不同T线包被条数,最终建立伏... 建立了一种可同时定量检测玉米中伏马毒素B_(1)、B_(2)和B_(3)的时间分辨荧光免疫层析方法。利用活化酯法制备时间分辨荧光微球和伏马毒素抗体的偶联物,将伏马毒素抗原包被到硝酸纤维素膜上作为T线,通过优化不同T线包被条数,最终建立伏马毒素竞争性免疫层析方法。并对所建立方法的灵敏度、特异性、准确度、精密度和与国标方法分析结果的相关性进行评价。包被两条T线建立的检测方法检出限为107.68~168.28μg/kg,定量限为283.46~444.63μg/kg;与伏马毒素B_(1)、伏马毒素B_(2)和伏马毒素B_(3)的交叉反应率分别为100%、85.59%和72.72%,与其它5种常见的真菌毒素均无明显交叉;加标回收率范围88.37%~117.42%,变异系数小于10%;该方法与国标方法GB 5009.240-2016中规定的免疫亲和柱净化-高效液相色谱法(IAC-HPLC)检测结果的符合度在92.17%~107.21%之间。建立的时间分辨荧光免疫层析检测方法能满足对玉米中伏马毒素B_(1)、B_(2)和B_(3)的现场快速定量检测。 展开更多

关键词 时间分辨荧光微球 伏马毒素B_(1) 伏马毒素B_(2) 伏马毒素B_(3) 玉米 定量检测

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牛奶中喹诺酮类药物残留的AlphaLISA检测方法的研究 被引量：1

7

作者 马立才 邢维维 +4 位作者 于莹 贾良曦 秦誉 金兴 丁亚芳 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第14期264-270,共7页

本文旨在建立一种可检测牛奶中喹诺酮类药物(Quinolones,QNS)残留的均相光激化学发光免疫分析方法(Amplifiedluminescent proximity homogeneous assay linkedimmune sorbent assay,AlphaLISA)。采用EDC/NHS活泼酯法在诺氟沙星分子连接6... 本文旨在建立一种可检测牛奶中喹诺酮类药物(Quinolones,QNS)残留的均相光激化学发光免疫分析方法(Amplifiedluminescent proximity homogeneous assay linkedimmune sorbent assay,AlphaLISA)。采用EDC/NHS活泼酯法在诺氟沙星分子连接6-氨基己酸作为间隔臂,制备生物素修饰诺氟沙星半抗原(Biotin-6AS-NOR),并在受体微球上偶联QNS单克隆抗体,Biotin-6AS-NOR可与牛奶样品中的QNS竞争结合喹诺酮抗体;通过优化受体微球的QNS抗体偶联量,Biotin-6AS-NOR及供/受体微球的用量等参数,以及牛奶样品的稀释方案,建立了牛奶中QNS残留的AlphaLISA检测方法。采用1:5牛奶样品稀释方案,所建立牛奶中QNS残留的AlphaLISA检测方法的检出限和定量限分别为0.19 ng/mL和0.46 ng/mL,回收率在85.97%~110.11%之间,日内和日间变异系数均小于10%,与诺氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、氧氟沙星、培氟沙星、达氟沙星和洛美沙星的交叉反应率均高于70%。本研究所建立AlphaLISA检测方法具有灵敏度和准确度高、重复性好等优点,且在整个检测过程中不需要繁琐洗涤操作,具有较高的应用和推广价值。 展开更多

关键词 喹诺酮类 半抗原 生物素 AlphaLISA

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肉脯加工工艺及保藏研究进展

8

作者 梁雪微 邢维维 +1 位作者 刘士健 陶晓奇 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期349-356,共8页

肉脯是中国特色传统小吃,在我国有着悠久的食用历史及丰富的营养价值,也是肉制品精深加工中不可或缺的品类。肉脯风味独特,便于保存携带,近年来深受市场的喜爱,围绕肉脯展开的创新工艺研究发展迅速,针对传统肉脯的品质改善与保藏研究也... 肉脯是中国特色传统小吃,在我国有着悠久的食用历史及丰富的营养价值,也是肉制品精深加工中不可或缺的品类。肉脯风味独特,便于保存携带,近年来深受市场的喜爱,围绕肉脯展开的创新工艺研究发展迅速,针对传统肉脯的品质改善与保藏研究也成为近年来的热点。该文综述了近年来国内外肉脯相关的文献,根据原料对肉脯进行分类,并总结了具有代表性的肉脯创新工艺、品质改善及保藏等方向的研究情况,为后续肉脯产品加工方向提供参考,尤其为延缓肉脯氧化研究方向提供理论依据。 展开更多

关键词 肉脯 原料创新 品质 保藏 抗氧化

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一种检测奶样中布鲁氏菌抗体免疫层析方法的建立 被引量：8

9

作者 肖妍 李蓉蓉 +5 位作者 霍蕾 董志珍 张俊哲 赵丹 杨若松 郭鹏 《中国动物检疫》 CAS 2019年第5期68-73,共6页

通过制备脂多糖(LPS)并将其作为检测抗原,建立了一种检测奶样中布鲁氏菌抗体的酶联免疫层析方法。通过对处理方法和反应条件的优化,制备出敏感性高、特异性强的布鲁氏菌抗体检测试纸条。该试纸条敏感性为98.0%,抗体滴度为1:2~1:8,特异性... 通过制备脂多糖(LPS)并将其作为检测抗原,建立了一种检测奶样中布鲁氏菌抗体的酶联免疫层析方法。通过对处理方法和反应条件的优化,制备出敏感性高、特异性强的布鲁氏菌抗体检测试纸条。该试纸条敏感性为98.0%,抗体滴度为1:2~1:8,特异性为96.0%,且与其他常见病原无交叉反应,批内、批间重复性良好。保存期加速试验显示,该试纸条在2~30℃下可保存12个月;符合率验证显示,该方法与标准奶样的符合率达94.9%。上述结果表明,该检测方法具有敏感性高、特异性强以及方便、快捷等优点,适用于现场大批量检测,因而可应用于奶牛场布鲁氏菌病的快速诊断。 展开更多

关键词 布鲁氏菌 免疫层析 抗体 奶样

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兽药制剂中氯霉素的ELISA检测方法的研究 被引量：6

10

作者 张连彦 王亚芳 +4 位作者 李应超 李蓉蓉 邢维维 杨柳 陶晓奇 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第2期85-88,共4页

为了检测兽药制剂中氯霉素的非法添加,优化反应条件和前处理方法,建立直接竞争ELISA方法。该方法检出限为1 mg/kg,添加回收率为81.00%~112.00%,批内和批间变异系数均小于10%,与国标仪器方法检测结果一致性好。本文建立的氯霉素直接竞争E... 为了检测兽药制剂中氯霉素的非法添加,优化反应条件和前处理方法,建立直接竞争ELISA方法。该方法检出限为1 mg/kg,添加回收率为81.00%~112.00%,批内和批间变异系数均小于10%,与国标仪器方法检测结果一致性好。本文建立的氯霉素直接竞争ELISA方法具有较高的精确度和稳定性,操作简单,检测时间短,可满足兽药制剂中氯霉素的检测。 展开更多

关键词 氯霉素 兽药制剂 直接竞争酶联免疫方法

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牦牛肉中阿维菌素残留的时间分辨荧光免疫层析检测方法的建立 被引量：6

11

作者 张正英 崔乃元 +4 位作者 高海燕 刘海珍 黄文颖 郝云晴 马立才 《肉类研究》 北大核心 2020年第8期57-62,共6页

为建立定量检测牦牛肉中阿维菌素残留的时间分辨荧光免疫层析方法,以羧基化铕微球作为荧光标记物,与阿维菌素鼠单克隆抗体G10703进行共价偶联后喷涂于释放垫上,将阿维菌素抗原和羊抗鼠免疫球蛋白G分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线(T... 为建立定量检测牦牛肉中阿维菌素残留的时间分辨荧光免疫层析方法,以羧基化铕微球作为荧光标记物,与阿维菌素鼠单克隆抗体G10703进行共价偶联后喷涂于释放垫上,将阿维菌素抗原和羊抗鼠免疫球蛋白G分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线(T)和质控线(C),制备免疫层析试纸条;利用牦牛肉样本阿维菌素添加量和对应的T线与C线荧光信号峰值比值(T/C)拟合得到四参数标准曲线,建立牦牛肉中阿维菌素残留的时间分辨荧光免疫层析检测方法,并对所建立方法的灵敏度、准确度、特异性、精密度和稳定性等进行评价,用液相色谱-串联质谱方法对所建立方法的性能进行确证。结果表明:本方法对牦牛肉中阿维菌素的定量限为1.0μg/kg,加标回收率为86.9%~105.2%,与阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素及依普菌素的交叉反应率分别为100.0%、73.1%、42.6%和97.5%,批内变异系数为5.4%~9.5%,批间变异系数为7.5%~11.2%,该方法准确度、精密度、灵敏度均较高,且性能稳定。 展开更多

关键词 牦牛肉 阿维菌素 时间分辨荧光免疫层析

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磺胺类药物广谱性多克隆抗体的制备 被引量：3

12

作者 魏镭 王战辉 +3 位作者 江海洋 杨光 徐飞 李娜 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2012年第12期67-70,I0007,共5页

基于磺胺类药物(Sulfonamides,SAs)公共母环(对氨基苯磺酰胺)结构,合成了两种具有该结构的半抗原:2-(对氨基苯磺酸氨基)-4-噻唑乙酸(TS)和对氨基苯磺酰胺基苯甲酸(SS)。采用碳二亚胺法合成了免疫原和包被原,分别免疫10只新西兰大白兔,... 基于磺胺类药物(Sulfonamides,SAs)公共母环(对氨基苯磺酰胺)结构,合成了两种具有该结构的半抗原:2-(对氨基苯磺酸氨基)-4-噻唑乙酸(TS)和对氨基苯磺酰胺基苯甲酸(SS)。采用碳二亚胺法合成了免疫原和包被原,分别免疫10只新西兰大白兔,制备广谱性磺胺类药物抗体。应用间接竞争酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血清的灵敏度和特异性,发现所有兔子对TS-BSA和SS-BSA均产生较高效价和特异性。其中SS-1号和TS-6号兔的血清灵敏度最好,效价分别为1∶80 000和1∶160 000,对10种磺胺类药物均有不同程度的识别能力。SS-BSA组IC50为257.9～6 590.9ng/mL,而TS-BSA组IC50为12.9～586.1ng/mL。结果表明,具有磺胺母环结构的半抗原TS和SS,可以应用于广谱性磺胺类抗体的制备。通过10只兔子免疫试验证明,应用SS获得的血清具有较高的簇特异性、相似的亲和性,优于TS。 展开更多

关键词 磺胺类药物 半抗原 多克隆抗体 ELISA

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高灵敏度酶联免疫法快速检测动物源性产品中氯霉素残留的研究 被引量：11

13

作者 陈霞 杨晓霞 +1 位作者 骆朋辉 骆鹏杰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第6期233-236,共4页

本试验旨在应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测动物组织中氯霉素的残留。根据试剂盒操作说明对样本进行前处理,样品中的氯霉素与氯霉素酶结合物竞争结合酶标板微孔中固相化的氯霉素特异性抗体,根据酶催化显色剂显色的深浅来判断样品中氯霉... 本试验旨在应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测动物组织中氯霉素的残留。根据试剂盒操作说明对样本进行前处理,样品中的氯霉素与氯霉素酶结合物竞争结合酶标板微孔中固相化的氯霉素特异性抗体,根据酶催化显色剂显色的深浅来判断样品中氯霉素含量。试验结果显示,该方法对样品的检测限在0.1μg/kg以下;以20～300ng/kg浓度的氯霉素添加到动物源性产品中,其回收率范围74.4%～105.4%;变异系数在15%以下。结果表明建立的ELISA试剂盒能满足检测动物源性产品中氯霉素残留的需要。 展开更多

关键词 氯霉素 酶联免疫吸附法 动物源性产品 残留

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禽肉中氯霉素残留化学发光酶免疫分析方法的建立 被引量：1

14

作者 顾华兵 陈银辉 +7 位作者 樊凌翰 雷江红 邢佑尚 苏丽芳 姚琳 吴小平 王文珺 王照鹏 《中国家禽》 北大核心 2014年第23期25-28,共4页

研究旨在建立检测禽肉中氯霉素残留的化学发光酶免疫分析方法（CLEIA）;通过方阵法确定包被抗体及酶标抗原的浓度,建立了氯霉素直接竞争性CLEIA的标准曲线,用CLEIA与液相色谱串联方法（LC-MS/MS）检测禽肉中氯霉素的含量.结果表明,建立... 研究旨在建立检测禽肉中氯霉素残留的化学发光酶免疫分析方法（CLEIA）;通过方阵法确定包被抗体及酶标抗原的浓度,建立了氯霉素直接竞争性CLEIA的标准曲线,用CLEIA与液相色谱串联方法（LC-MS/MS）检测禽肉中氯霉素的含量.结果表明,建立的检测鸡肉和鸭肉中氯霉素残留的CLEIA法,检测限分别为13.4 pg/g和12.8 pg/g,CLEIA法的回收率为74.7％～107.8％,变异系数为4.5％～11.5％,CLEIA和LC-MS/MS两种方法分析结果无显著性差异（P＞0.05）. 展开更多

关键词 氯霉素 化学发光酶免疫分析 禽肉

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时间分辨荧光免疫层析定量检测牦牛肉中喹诺酮类药物 被引量：13

15

作者 赵维章 崔乃元 +4 位作者 张汉青 贺敏华 张正英 王云平 马立才 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第18期239-243,251,共6页

目的:本研究旨在建立一种简单、快速、高灵敏的牦牛肉中喹诺酮类药物(环丙沙星、恩诺沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、达氟沙星等)残留的荧光定量免疫层析检测方法。方法:将环丙沙星鼠单克隆抗体G10785与羧基化铕微球进行偶联标记,环丙沙星... 目的:本研究旨在建立一种简单、快速、高灵敏的牦牛肉中喹诺酮类药物(环丙沙星、恩诺沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、达氟沙星等)残留的荧光定量免疫层析检测方法。方法:将环丙沙星鼠单克隆抗体G10785与羧基化铕微球进行偶联标记,环丙沙星抗原和羊抗鼠二抗分别包被于硝酸纤维素膜(NC)上作为检测线(T)和控制线(C);根据T线荧光信号值与C线荧光信号值的比值(T/C)和样本中喹诺酮类药物浓度建立定量标准曲线;对所建立方法的灵敏度、准确度、精密度等进行评价,并将其与LC-MS/MS方法进行对比。结果:本研究所建立方法的定量限<0.96μg/kg,批内回收率为82.94%~111.27%,变异系数为4.13%~9.90%,批间回收率为88.86%~107.05%,变异系数为3.86%~9.39%。与环丙沙星、恩诺沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、达氟沙星的交叉反应率分别为100%、77.36%、107.66%、93.55%和50.92%。结论:本研究所建立的时间分辨荧光免疫层析检测方法准确度、精密度、灵敏度较高,性能稳定,具有良好的应用前景。 展开更多

关键词 牦牛肉 喹诺酮类药物 时间分辨 荧光微球 食品安全

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牛奶及奶粉中三聚氰胺残留酶联免疫检测方法的研究 被引量：3

16

作者 张建勋 王战辉 +5 位作者 王亚辉 吴小平 李建成 王照鹏 江海洋 沈建忠 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2012年第7期74-76,共3页

通过4,6-二氨基-2-氯-1,3,5-三嗪与对氨基苯丁酸反应获得三聚氰胺半抗原,再以活性酯法与载体蛋白偶联制备三聚氰胺免疫原或包被原。免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术制备出针对三聚氰胺的特异性单克隆抗体。采用间接竞争酶联免疫吸附法(ci... 通过4,6-二氨基-2-氯-1,3,5-三嗪与对氨基苯丁酸反应获得三聚氰胺半抗原,再以活性酯法与载体蛋白偶联制备三聚氰胺免疫原或包被原。免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术制备出针对三聚氰胺的特异性单克隆抗体。采用间接竞争酶联免疫吸附法(ciELISA)建立检测三聚氰胺的标准曲线,线性范围是17.4～345.5ng/mL,50%抑制浓度(IC50)61.3ng/mL。牛奶和奶粉加标回收率在68.1%～91.0%,变异系数在2.4%～14.5%。结果表明,该方法可以满足牛奶和奶粉中三聚氰胺残留分析要求。 展开更多

关键词 牛奶 奶粉 三聚氰胺 CIELISA

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大观霉素人工抗原的合成及其多克隆抗体制备 被引量：4

17

作者 王照鹏 李向梅 +4 位作者 徐飞 王文珺 苏丽芳 温凯 吴小平 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第2期54-57,共4页

以大观霉素(SPE)、盐酸羧甲基羟胺(CMO)、乙二醇二环氧甘油醚(EDE)、牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)等为原料,采用活泼酯法和EDE双功能团活泼试剂方法分别合成2种免疫原和2种包被原。以免疫原免疫家兔制备多克隆抗体,以建立的间... 以大观霉素(SPE)、盐酸羧甲基羟胺(CMO)、乙二醇二环氧甘油醚(EDE)、牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)等为原料,采用活泼酯法和EDE双功能团活泼试剂方法分别合成2种免疫原和2种包被原。以免疫原免疫家兔制备多克隆抗体,以建立的间接ELISA方法来测定多克隆抗体效价及灵敏度。结果表明,免疫原SPE-CMO-BSA具有良好的免疫原性,制备的多克隆抗体经ELISA检测效价可达1∶160000,IC50为0.484ng/mL。本研究结果为下一步SPE残留快速检测试剂盒的研制奠定了基础。 展开更多

关键词 大观霉素 免疫原 多克隆抗体 效价

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ELISA一步法快速检测牛奶中三聚氰胺的研究 被引量：9

18

作者 赵宁 徐飞 +4 位作者 吴小平 王战辉 李杰超 朱景慧 潘净茹 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第4期124-126,共3页

在制备三聚氰胺单克隆抗体的基础上建立了一种用于检测牛奶中三聚氰胺含量的间接竞争酶联免疫检测方法,采用一步法操作,评估了方法的回收率、准确度、精密度和特异性,并利用液相色谱？串联质谱法进行了盲样确证试验。结果显示,该方法的... 在制备三聚氰胺单克隆抗体的基础上建立了一种用于检测牛奶中三聚氰胺含量的间接竞争酶联免疫检测方法,采用一步法操作,评估了方法的回收率、准确度、精密度和特异性,并利用液相色谱？串联质谱法进行了盲样确证试验。结果显示,该方法的线性检测范围为10~810 ng/mL,灵敏度为10 ng/mL,回收率为84.0%~90.0%,同类似物交叉反应率均小于0.1%。本试验建立的ELISA一步法能满足牛奶中三聚氰胺的检测要求。 展开更多

关键词 三聚氰胺 牛奶 ELISA 一步法

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荧光免疫分析法检测食品中黄曲霉毒素的研究进展 被引量：18

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作者 左晓维 雷琳 +1 位作者 刘河冰 陶晓奇 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期236-245,共10页

黄曲霉毒素是迄今发现的真菌毒素中毒性最强的一类,是公认的I类致癌物,在粮食、坚果、油脂、乳及其制品等多种食品中均有发现。因此,研究出准确、快速、便捷的检测方法对保障食品安全和人类健康具有重要意义。荧光免疫分析法具有灵敏度... 黄曲霉毒素是迄今发现的真菌毒素中毒性最强的一类,是公认的I类致癌物,在粮食、坚果、油脂、乳及其制品等多种食品中均有发现。因此,研究出准确、快速、便捷的检测方法对保障食品安全和人类健康具有重要意义。荧光免疫分析法具有灵敏度高、准确性好、检测速度快、操作简单等优势,适合现场高通量快速筛查,近年来被广泛地用于检测食品中的黄曲霉毒素。该文介绍了4类常用的荧光标记物(荧光素、量子点、上转换纳米粒子和稀土离子螯合物),并详细阐述了5种荧光免疫分析法(荧光免疫吸附法、荧光免疫层析法、荧光偏振免疫分析、荧光共振能量转移免疫分析和时间分辨免疫分析)的检测原理,以及上述方法应用于检测食品中黄曲霉毒素的国内外最新研究进展,为今后的研究提供借鉴。 展开更多

关键词 黄曲霉毒素 食品 荧光标记物 荧光免疫分析法

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玉米赤霉烯酮一步ELISA法的建立及应用 被引量：13

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作者 王文珺 刘怡菲 +4 位作者 韩霄 王照鹏 苏丽芳 敖海阔 吴雨洋 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2016年第14期78-82,89,共6页

为了建立一种快速、准确的检测饲料及其原料中玉米赤霉烯酮的酶联免疫一步法。在制备玉米赤酶烯酮半抗原、免疫原及单克隆抗体的基础上,运用方阵法确定包被抗原、抗体的浓度,筛选稳定的ELISA检测体系,并在此基础上考察了抗体的特异性。... 为了建立一种快速、准确的检测饲料及其原料中玉米赤霉烯酮的酶联免疫一步法。在制备玉米赤酶烯酮半抗原、免疫原及单克隆抗体的基础上,运用方阵法确定包被抗原、抗体的浓度,筛选稳定的ELISA检测体系,并在此基础上考察了抗体的特异性。建立了检测饲料及其原料中玉米赤霉烯酮的方法,猪饲料、牛饲料、玉米渣和麦麸的检测限分别为96.2、92.7、80.5和86.7μg/kg。在饲料及原料中定量添加玉米赤霉烯酮,酶联免疫的回收率为79.4%~104.9%,开发的酶联免疫试剂盒与德国拜发试剂盒对实际样本进行检测,两种试剂盒对样本阴阳性判定一致。本研究为饲料及其原料中玉米赤酶烯酮的监管提供了技术支撑。 展开更多

关键词 玉米赤霉烯酮 半抗原 单克隆抗体 酶联免疫吸附分析法(ELISA) 饲料及其原料

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