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食管癌细胞NGAL基因-152～-60区段存在TPA反应元件
被引量：
3
1
作者
许丽艳
李恩民
+5 位作者
牛永东
蔡唯佳
袁华敏
常静霞
沈忠英
曾毅
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期140-148,共9页
以往研究发现,在TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophilgelatinase-associatedlipocalin,NGAL)基因过表达,但过表达机制不明.最近研究提示,食管癌细胞NGAL启动子及其邻近区域可能存在着TPA反应元件....
以往研究发现,在TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophilgelatinase-associatedlipocalin,NGAL)基因过表达,但过表达机制不明.最近研究提示,食管癌细胞NGAL启动子及其邻近区域可能存在着TPA反应元件.为了对NGAL的这一TPA反应元件进行更准确定位,采用PCR法结合嵌套缺失实验从食管癌细胞中克隆了NGAL5′侧翼区-152～+84、-140～+84、-78～+84、-59～+84、-50～+84、-41～+84、-37～+84、-29～+84和-10～+84等片段,并定向插入pGLB、pGLP或pGLE等萤火虫荧光素酶报告基因表达载体中,构建了pGLB-152、pGLP-152、pGLE-152、pGLB-140、pGLB-78、pGLB-59、pGLB-50、pGLB-41、pGLB-37、pGLB-29和pGLB-10等系列报告基因表达载体.将上述报告基因表达载体分别同pRL-TK共转染食管癌细胞EC109,并用TPA刺激,检测TPA刺激转染EC109的相对荧光素酶活力,综合判定NGAL-152～+84区不同长度片段的TPA反应性,对NGAL启动子区的TPA反应元件给予进一步分段定位.结果表明,NGAL启动子区的TPA反应元件位于-152～-60区段,而且应答TPA刺激的反应能力很强.生物信息学分析结果显示,NGAL启动子区所存在的TPA反应元件很可能是一种新结构类型.研究说明,NGAL在DNA序列上有应答TPA刺激的结构基础,将有助于深入到分子水平揭示TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中NGAL过表达机制,也有助于进一步认识TPA信号细胞内传递途径网络在肿瘤发生发展中的作用.
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关键词
中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白基因
食管癌细胞
基因表达调控
TPA反应元件
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职称材料
食管癌细胞NGAL5′侧翼区存在TPA应答元件
2
作者
许丽艳
李恩民
+6 位作者
王子良
牛永东
蔡唯佳
袁华敏
常静霞
沈忠英
曾毅
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期135-141,共7页
在TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中,NGAL(neutrophil gelatinase-associated lipocalin)过表达,提示食管癌细胞NGAL转录调控区可能存在TPA应答元件.为了对食管癌细胞NGAL的这一TPA应答元件进行分段定位鉴定,首先将NGAL5′侧翼区不同长...
在TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中,NGAL(neutrophil gelatinase-associated lipocalin)过表达,提示食管癌细胞NGAL转录调控区可能存在TPA应答元件.为了对食管癌细胞NGAL的这一TPA应答元件进行分段定位鉴定,首先将NGAL5′侧翼区不同长度片段-1 431^+84-、1 137^+84、-945^+84、-657^+84、-416^+84和-152^+84等依次插入质粒pGLP,构建NGAL/pGLP系列报告基因荧光素酶表达载体pGLP-1431、pGLP-1137、pGLP-945、pGLP-657、pGLP-416和pGLP-152;然后将上述质粒分别同pRL-TK共转染食管癌细胞EC109,最后用5 ng/ml的TPA刺激转染的EC109,检测报告基因荧光素酶活力,综合判定报告基因荧光素酶活力变化趋势,并以此对食管癌细胞NGAL5′侧翼区TPA应答元件进行分段定位.实验结果表明,食管癌细胞NGAL5′侧翼-657^-417区段内存在着较强的TPA应答元件.生物信息学分析显示,NGAL5′侧翼-657^-417区段至少存在3个潜在的TPA应答元件,表明有应答TPA刺激的结构基础.这些研究有助于从分子水平揭示TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中NGAL基因过表达机制.
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关键词
NGAL基因
食管癌细胞
基因表达调控
TPA应答元件
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职称材料
题名
食管癌细胞NGAL基因-152～-60区段存在TPA反应元件
被引量：
3
1
作者
许丽艳
李恩民
牛永东
蔡唯佳
袁华敏
常静霞
沈忠英
曾毅
机构
北京工业大学生命科学与生物工程学院病毒与药理研究室
汕头
大学
医
学院
生物
化学与分子
生物
学教研室
汕头
大学
医
学院
肿瘤病理
研究室
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期140-148,共9页
基金
国家自然科学基金面上资助项目(39900069
30170428
+4 种基金
30370641
30570849)
广东省自然科学基金重点项目(37788
05104541)
广东省自然科学基金面上项目(010431).~~
文摘
以往研究发现,在TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophilgelatinase-associatedlipocalin,NGAL)基因过表达,但过表达机制不明.最近研究提示,食管癌细胞NGAL启动子及其邻近区域可能存在着TPA反应元件.为了对NGAL的这一TPA反应元件进行更准确定位,采用PCR法结合嵌套缺失实验从食管癌细胞中克隆了NGAL5′侧翼区-152～+84、-140～+84、-78～+84、-59～+84、-50～+84、-41～+84、-37～+84、-29～+84和-10～+84等片段,并定向插入pGLB、pGLP或pGLE等萤火虫荧光素酶报告基因表达载体中,构建了pGLB-152、pGLP-152、pGLE-152、pGLB-140、pGLB-78、pGLB-59、pGLB-50、pGLB-41、pGLB-37、pGLB-29和pGLB-10等系列报告基因表达载体.将上述报告基因表达载体分别同pRL-TK共转染食管癌细胞EC109,并用TPA刺激,检测TPA刺激转染EC109的相对荧光素酶活力,综合判定NGAL-152～+84区不同长度片段的TPA反应性,对NGAL启动子区的TPA反应元件给予进一步分段定位.结果表明,NGAL启动子区的TPA反应元件位于-152～-60区段,而且应答TPA刺激的反应能力很强.生物信息学分析结果显示,NGAL启动子区所存在的TPA反应元件很可能是一种新结构类型.研究说明,NGAL在DNA序列上有应答TPA刺激的结构基础,将有助于深入到分子水平揭示TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中NGAL过表达机制,也有助于进一步认识TPA信号细胞内传递途径网络在肿瘤发生发展中的作用.
关键词
中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白基因
食管癌细胞
基因表达调控
TPA反应元件
Keywords
neutrophil gelatinase-associated lipocalin gene, esophageal cancer cells, gene expression regulation ,TPA response element
分类号
Q784 [生物学—分子生物学]
R735.1 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
食管癌细胞NGAL5′侧翼区存在TPA应答元件
2
作者
许丽艳
李恩民
王子良
牛永东
蔡唯佳
袁华敏
常静霞
沈忠英
曾毅
机构
北京工业大学生命科学与生物工程学院病毒与药理研究室
汕头
大学
医
学院
生物
化学与分子
生物
学教研室
汕头
大学
医
学院
肿瘤病理
研究室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期135-141,共7页
基金
国家自然科学基金面上项目(No.39900069
No.30170428
+4 种基金
No.30370641
No.30570849)
广东省自然科学基金重点项目(No.37788
No.05104541)
广东省自然科学基金面上项目(No.010431)~~
文摘
在TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中,NGAL(neutrophil gelatinase-associated lipocalin)过表达,提示食管癌细胞NGAL转录调控区可能存在TPA应答元件.为了对食管癌细胞NGAL的这一TPA应答元件进行分段定位鉴定,首先将NGAL5′侧翼区不同长度片段-1 431^+84-、1 137^+84、-945^+84、-657^+84、-416^+84和-152^+84等依次插入质粒pGLP,构建NGAL/pGLP系列报告基因荧光素酶表达载体pGLP-1431、pGLP-1137、pGLP-945、pGLP-657、pGLP-416和pGLP-152;然后将上述质粒分别同pRL-TK共转染食管癌细胞EC109,最后用5 ng/ml的TPA刺激转染的EC109,检测报告基因荧光素酶活力,综合判定报告基因荧光素酶活力变化趋势,并以此对食管癌细胞NGAL5′侧翼区TPA应答元件进行分段定位.实验结果表明,食管癌细胞NGAL5′侧翼-657^-417区段内存在着较强的TPA应答元件.生物信息学分析显示,NGAL5′侧翼-657^-417区段至少存在3个潜在的TPA应答元件,表明有应答TPA刺激的结构基础.这些研究有助于从分子水平揭示TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中NGAL基因过表达机制.
关键词
NGAL基因
食管癌细胞
基因表达调控
TPA应答元件
Keywords
NGAL gene
esophageal cancer ceils
gene expression regulation
TPA response element
分类号
Q784 [生物学—分子生物学]
R735.1 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
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被引量
操作
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食管癌细胞NGAL基因-152～-60区段存在TPA反应元件
许丽艳
李恩民
牛永东
蔡唯佳
袁华敏
常静霞
沈忠英
曾毅
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2006
3
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食管癌细胞NGAL5′侧翼区存在TPA应答元件
许丽艳
李恩民
王子良
牛永东
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