植物基因工程在农业中的应用

1

作者 陈章良 《高技术通讯》 CSCD 1992年第1期1-5,共5页

植物基因工程是近几年发展起来的生物技术。利用植物基因工程技术,改良作物蛋白质成份,提高作物中必需的氨基酸含量,培育抗病毒、抗虫害、抗除草剂工程植株及抗盐、抗旱等抗逆境植株,在当前农业生产中已显示出巨大的经济效益,并展示了... 植物基因工程是近几年发展起来的生物技术。利用植物基因工程技术,改良作物蛋白质成份,提高作物中必需的氨基酸含量,培育抗病毒、抗虫害、抗除草剂工程植株及抗盐、抗旱等抗逆境植株,在当前农业生产中已显示出巨大的经济效益,并展示了植物基因工程在未来农业生产中的诱人前景。 展开更多

关键词 必需氨基酸 植物基因工程 改良作物 农业

在线阅读 下载PDF 职称材料

苏云金杆菌毒性蛋白基因5′端的PCR合成、克隆及序列测定

2

作者 郑琦 刘中柱 陈章良 《福建省农科院学报》 CAS 1993年第3期1-7,共7页

以苏云金杆菌戈尔斯德亚种(Bacillus thuringiensis var.kurstaki HD-1)的总DNA为模板,用多聚酶链反应(PCR)的方法,成功合成了该菌毒性蛋白基因5′端片段,并克隆到大肠杆菌Bluescript质粒载体上,获得了重组质粒pQC20。核酸限制酶谱分析... 以苏云金杆菌戈尔斯德亚种(Bacillus thuringiensis var.kurstaki HD-1)的总DNA为模板,用多聚酶链反应(PCR)的方法,成功合成了该菌毒性蛋白基因5′端片段,并克隆到大肠杆菌Bluescript质粒载体上,获得了重组质粒pQC20。核酸限制酶谱分析表明,pQC20的重组片段属于Kronstad的毒性蛋白基因限制酶片段长度多型性分类系统中5.3 Kb类型基因。对该基因片段的全序列分析结果证明,在以PCR合成的1959个核苷酸中与国外已发表的5.3 Kb类型基因的相应片段仅有一个核苷酸差异。该基因片段具有表达有生物活性的毒性蛋白所必需的全部核苷酸序列。 展开更多

关键词 苏云金杆菌 基因 DNA序列

在线阅读 下载PDF 职称材料

一种导向性溶栓剂的基因构建及其在大肠杆菌中的表达 被引量：4

3

作者 杨嘉树 蒋朋宸 茹炳根 《北京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期487-495,共9页

以针对人活化血小板表面糖蛋白ＧＭＰ１４０的单克隆抗体ＳＺ５１的单链抗体作为导向分子，以单链尿激酶３２ｋｄ变体（ｓｃｕＰＡ３２ｋ）作为效应分子，构建了一种新型的导向性溶栓剂。通过聚合酶链式反应（ＰＣＲ），分别从ＳＺ... 以针对人活化血小板表面糖蛋白ＧＭＰ１４０的单克隆抗体ＳＺ５１的单链抗体作为导向分子，以单链尿激酶３２ｋｄ变体（ｓｃｕＰＡ３２ｋ）作为效应分子，构建了一种新型的导向性溶栓剂。通过聚合酶链式反应（ＰＣＲ），分别从ＳＺ５１的Ｆａｂ片段基因中扩增出ＶＫ和ＶＨ区；从尿激酶原基因中扩增出ｓｃｕＰＡ３２ｋ基因。通过合适的ｌｉｎｋｅｒ及酶切位点，将ＶＫ，ＶＨ及ｓｃｕＰＡ３２ｋ基因相连接并装入表达载体ｐＥＴ５ａ中的ＮｄｅＩ位点，在大肠杆菌中经ＩＰＴＧ诱导表达了重组蛋白。ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔｔｉｎｇ检测到在８ｍｏｌ／Ｌ尿素存在下，该重组蛋白与抗尿激酶的多克隆抗体之间仍有弱的结合反应。表达产物经变复性处理和部分分离纯化后，在纤维蛋白平板上表现有较好的纤溶活性，且这种活性是通过激活纤维蛋白溶酶原为纤溶酶而实现的。重组蛋白纤溶活性的比活达到１７５００ＩＵ／ｍｇ，较好地保留了尿激酶的纤溶活性，重组蛋白的产率约每１００ｇ湿菌为１５ｍｇ。 展开更多

关键词 单克隆抗体 导向性溶栓剂 基因构建 基因表达

在线阅读 下载PDF 职称材料

多肽诱导的大肠杆菌DegP(HtrA)蛋白酶的构象变化(英文)

4

作者 张雪峰 郑益新 昌增益 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第2期183-189,共7页

具有分子伴侣和蛋白酶双重活性的大肠杆菌DegP蛋白,在热休克和其他应激条件下,对于降解和清除膜间质中变性或损伤的蛋白质起着十分重要的作用.到目前为止,已有几种蛋白质被鉴定出是DegP的天然底物.以前的研究表明,DegP的体内底物之一,P... 具有分子伴侣和蛋白酶双重活性的大肠杆菌DegP蛋白,在热休克和其他应激条件下,对于降解和清除膜间质中变性或损伤的蛋白质起着十分重要的作用.到目前为止,已有几种蛋白质被鉴定出是DegP的天然底物.以前的研究表明,DegP的体内底物之一,PapG菌毛蛋白的羧基端多肽能够激活DegP的蛋白酶活性.然而这种激活的机制及生理意义均未见报道.用合成的PapG菌毛蛋白的羧基端多肽对这种激活的机制进行了初步研究.结果表明,DegP与多肽结合后发生了可检测的构象变化.圆二色性光谱结果显示,结合多肽后DegP的二级结构和三级结构均发生了一定的变化.凝胶排阻层析和动态光散射实验也揭示出DegP分子在一定程度上变小.进一步实验表明,DegP在多肽存在下,其疏水表面和催化位点均有所暴露.荧光各向异性结果显示出DegP在结合多肽后其构象柔性降低.对上述结果的意义进行了探讨. 展开更多

关键词 DegP 构象变化 多肽 机制

在线阅读 下载PDF 职称材料

基因组数据库简介 被引量：2

5

作者 方刚 陈蕴佳 +5 位作者 高歌 刘翟 何坤 吴昕 顾孝诚 罗静初 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期440-444,共5页

本文以北京大学生物信息中心安装的3个国际著名基因组数据库GDB、GenoList和Ensembl为基础,介绍目前常用的基因组数据库,包括这些数据数据库的内容、数据格式、使用方法,以及用于构建上述数据库的数据库管理系统。

关键词 微生物基因组 人类基因组 数据库系统 生物信息

在线阅读 下载PDF 职称材料

凋亡相关基因的整合分析及基因表达芯片的制备

6

作者 黄茉莉 孙道春 +8 位作者 娄雅欣 尹燕斌 李川昀 张勇 高歌 王升启 伯晓晨 魏丽萍 李松岗 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1451-1460,共10页

利用IPI和GenBank,收集了与凋亡相关的5333条基因序列,用一定的标准,整合筛选得到1384个凋亡相关的基因.通过亚细胞定位、组织表达差异显著性分析、自然正义/反义RNA对预测、基因簇在pathway上的定位、蛋白质/蛋白质相互作用等方面的分... 利用IPI和GenBank,收集了与凋亡相关的5333条基因序列,用一定的标准,整合筛选得到1384个凋亡相关的基因.通过亚细胞定位、组织表达差异显著性分析、自然正义/反义RNA对预测、基因簇在pathway上的定位、蛋白质/蛋白质相互作用等方面的分析发现,一些基因只在一个组织里显著差异表达,一些基因存在自然正义/反义RNA对现象,一些基因簇同时位于多条pathway等重要信息.同时,制作了一张凋亡相关基因的寡核苷酸芯片,并且对于一对NAIF1表达质粒转染前后的HeLa样品,通过该芯片的筛选,得到24个差异表达的基因.发现NAIF1过表达诱导的细胞凋亡,伴随了PAX2、PDCD8、PDCD10、DFFA、CASP7等基因表达的显著变化,同时还发现,U58668,该mRNA没有任何基因或蛋白质的注释信息,当camptothecin诱导U937细胞系凋亡时上调,在这里的NAIF1过表达诱导的HeLa细胞系中也上调(上述数据结果见http://gpcrome.cbi.pku.edu.cn:2005/chip). 展开更多

关键词 凋亡 生物信息 NAIF1 生物芯片

在线阅读 下载PDF 职称材料

分子生物信息镜象系统和数据库 被引量：7

7

作者 罗静初 江涛 +7 位作者 李兵 陈新 李笑难 潘卫 唐汶 顾红雅 张兴华 顾孝诚 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1998年第10期61-62,53,共3页

介绍了欧洲分子生物学网络组织ＥＭＢＮｅｔ中国节点北京大学分子生物信息镜象系统、数据库及其查询系统。

关键词 分子生物信息 镜象系统 欧洲 数据库 中国

在线阅读 下载PDF 职称材料

分子生物学数据库及相关软件的开发利用 被引量：8

8

作者 李兵 罗静初 +2 位作者 潘卫 唐汶 顾孝诚 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期52-53,共2页

关键词 分子生物学 数据库 软件 开发利用

在线阅读 下载PDF 职称材料

导向性纤溶酶原激活剂的研究 被引量：8

9

作者 杨嘉树 茹炳根 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第5期429-433,共5页

溶栓疗法是血栓治疗中的一种重要措施．研制具有高选择性的导向性纤溶酶原激活剂有着重大的理论意义和实用价值．采用血栓特异的单克隆抗体及其片段来介导溶栓剂已展示出较好的应用前景．双功能抗体以及同时具有抗栓，抗凝活性的小肽正... 溶栓疗法是血栓治疗中的一种重要措施．研制具有高选择性的导向性纤溶酶原激活剂有着重大的理论意义和实用价值．采用血栓特异的单克隆抗体及其片段来介导溶栓剂已展示出较好的应用前景．双功能抗体以及同时具有抗栓，抗凝活性的小肽正逐渐拓宽人们有关导向分子研制的视野． 展开更多

关键词 纤溶酶原激活剂 血栓 纤维蛋白 抗体导向 导向性

在线阅读 下载PDF 职称材料

蚯蚓纤溶酶原激活剂(e-PA)小亚基活性中心的酶学性质及CD光谱的研究 被引量：3

10

作者 杨嘉树 郭亚迁 茹炳根 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第6期721-725,共5页

蚯蚓纤溶酶原激活剂（ｅ－ＰＡ）具有多种底物特异性．对构成其的小亚基的活性中心的研究有利于阐述ｅ－ＰＡ的结构与功能的关系．利用胰蛋白酶的特异性抑制剂ＴＬＣＫ（Ｎ－α－ｐ－ｔｏｓｙｌ－Ｌ－ｌｙｓｉｎｅｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈ... 蚯蚓纤溶酶原激活剂（ｅ－ＰＡ）具有多种底物特异性．对构成其的小亚基的活性中心的研究有利于阐述ｅ－ＰＡ的结构与功能的关系．利用胰蛋白酶的特异性抑制剂ＴＬＣＫ（Ｎ－α－ｐ－ｔｏｓｙｌ－Ｌ－ｌｙｓｉｎｅｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈｙｌｋｅｔｏｎｅ）对小亚基进行抑制活性的研究，结果表明ＴＬＣＫ对酶促反应的抑制曲线与可逆抑制曲线相似，但在抑制剂存在下的最大反应速度与抑制剂不存在时的最大反应速度不同．结合小亚基在ＴＬＣＫ存在下的ＣＤ光谱变化，证明了小亚基分子表面存在两个活性位点，这两个活性位点对ＴＬＣＫ的敏感性不同，从而造成ＴＬＣＫ抑制行为的异常．推测不同的活性结构对应于不同的底物特异性． 展开更多

关键词 TLCK e-PA 抑制作用 纤溶酶原激活剂 活性位点

在线阅读 下载PDF 职称材料

核DNA相减与分子克隆 被引量：1

11

作者 朱玉贤 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1992年第8期38-42,共5页

核DNA的减法(Genomic Subtraction)或核DNA相减后聚合酶链式反应(Subtracting PCR)系国际分子生物学领域90年代初露头角的最新技术,深受科学界重视。应用这一技术可以在没有任何探针材料的情况下,由研究缺失突变体的表现型入手,从亲本... 核DNA的减法(Genomic Subtraction)或核DNA相减后聚合酶链式反应(Subtracting PCR)系国际分子生物学领域90年代初露头角的最新技术,深受科学界重视。应用这一技术可以在没有任何探针材料的情况下,由研究缺失突变体的表现型入手,从亲本材料中克隆与突变体缺失片段相对应的遗传性状,包括许多对高等动植物生长发育影响重大的基因或基因群。 展开更多

关键词 核DNA 减法 分子克隆

在线阅读 下载PDF 职称材料