溶栓剂蛋白质工程的新进展 被引量：3

1

作者 张彦斌 徐长法 《北京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期286-294,共9页

介绍了国内外溶栓剂蛋白质工程方面的新进展，主要涉及了组织型纤溶酶原激活剂（ｔＰＡ） 、尿激酶型纤溶酶原激活剂（ｕＰＡ）、链激酶（ＳＫ） 、葡萄球菌激酶（ＳＡＫ） 、ＤＳＰＡ 及ＴＳＶＰＡ 的研究进展。一些ＰＡ 突变体... 介绍了国内外溶栓剂蛋白质工程方面的新进展，主要涉及了组织型纤溶酶原激活剂（ｔＰＡ） 、尿激酶型纤溶酶原激活剂（ｕＰＡ）、链激酶（ＳＫ） 、葡萄球菌激酶（ＳＡＫ） 、ＤＳＰＡ 及ＴＳＶＰＡ 的研究进展。一些ＰＡ 突变体及新型溶栓剂，如Ｋ２Ｐ、ＴＮＫＰＡ和ＳＴＡＲ等的临床实验结果表明它们在延长体内半寿期、增强对血纤维蛋白选择性和溶栓效率等方面有较大的改进。但溶栓治疗造成的颅内出血等局部性出血问题仍是目前的难题之一，说明新型溶栓剂的研制有很大潜力。 展开更多

关键词 溶栓剂 纤溶酶原激活剂 蛋白质工程 T-PA U-PA

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植物基因工程的现状与展望 被引量：5

2

作者 朱玉贤 《北京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期261-270,共10页

介绍了80年代以来植物基因工程的历史、现状和发展趋势,对利用转基因植物生产药用蛋白,用工程病毒为载体生产药用蛋白,改进植物品质及逆境适应性,提高光合作用和固氮效率,抗除草剂工程植物及工程微生物与生物医学的关系等作了可行性分... 介绍了80年代以来植物基因工程的历史、现状和发展趋势,对利用转基因植物生产药用蛋白,用工程病毒为载体生产药用蛋白,改进植物品质及逆境适应性,提高光合作用和固氮效率,抗除草剂工程植物及工程微生物与生物医学的关系等作了可行性分析和前景预测。 展开更多

关键词 基因工程 载休 品质改良 植物 组织培养

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植物水孔蛋白研究进展 被引量：35

3

作者 于秋菊 吴锜 +1 位作者 林忠平 李景富 《北京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期855-866,共12页

植物水孔蛋白在植物体内形成水选择性运输通道 ,在植物种子萌发、细胞伸长、气孔运动、受精等过程中调节水分的快速跨膜运输。有些水孔蛋白还在植物逆境应答中起着重要作用 ,因此研究水孔蛋白与植物抗旱性的关系引起了广泛关注。对水孔... 植物水孔蛋白在植物体内形成水选择性运输通道 ,在植物种子萌发、细胞伸长、气孔运动、受精等过程中调节水分的快速跨膜运输。有些水孔蛋白还在植物逆境应答中起着重要作用 ,因此研究水孔蛋白与植物抗旱性的关系引起了广泛关注。对水孔蛋白的发现、结构、分类、分布。 展开更多

关键词 植物水孔蛋白 水分运输 基因表达 结构 分类 分布 调控 抗旱性

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外源钙调蛋白对植物细胞分裂增殖作用的研究 被引量：10

4

作者 赵鸿娟 朱玉贤 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第4期413-417,共5页

外源钙调蛋白（Ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ，ＣａＭ）对胡萝卜悬浮细胞增殖具明显促进作用，不同浓度ＣａＭ的促进程度不同，７ｕｇ／ｍｌ时促进作用最大。ＣａＭ抑制剂ＴＦＰ（Ｔｒｉｆｌｕｏｐｅｒ－ａｚｉｎｅ）则明显抑制该悬浮细胞的增... 外源钙调蛋白（Ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ，ＣａＭ）对胡萝卜悬浮细胞增殖具明显促进作用，不同浓度ＣａＭ的促进程度不同，７ｕｇ／ｍｌ时促进作用最大。ＣａＭ抑制剂ＴＦＰ（Ｔｒｉｆｌｕｏｐｅｒ－ａｚｉｎｅ）则明显抑制该悬浮细胞的增殖，ＴＦＰ浓度越高则抑制作用越强。另外，外源ＣａＭ可以加快珍珠梅花粉第二次有丝分裂，改变生殖细胞有丝分裂各期花粉管的比例，说明外源ＣａＭ对植物体细胞和性细胞的增殖和分裂均有促进作用。 展开更多

关键词 植物 细胞 分裂 增殖 调钙蛋白

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人肝金属硫蛋白-I_A基因在鱼腥藻中的克隆与表达 被引量：8

5

作者 任黎 邵强 +2 位作者 施定基 戴继勋 茹炳根 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第4期365-371,共7页

将人工合成的人肝金属硫蛋白（ｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ，简称ＭＴ）－ＩＡ基因插入至中间载体ｐＲＬ－４３９上强启动子ｐｓｂＡ后，再将其与穿梭载体ｐＫＴ－２１０相连，得到大肠杆菌－蓝藻穿梭表达载体ｐＫＴ－ＭＴ，用三亲接... 将人工合成的人肝金属硫蛋白（ｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ，简称ＭＴ）－ＩＡ基因插入至中间载体ｐＲＬ－４３９上强启动子ｐｓｂＡ后，再将其与穿梭载体ｐＫＴ－２１０相连，得到大肠杆菌－蓝藻穿梭表达载体ｐＫＴ－ＭＴ，用三亲接合转移法将ｐＫＴ－ＭＴ转入丝状体蓝藻－鱼腥藻７１２０，经链霉素筛选，得到了稳定的转人肝ＭＴ－ＩＡ基因鱼腥藻．纯化单藻落，液体扩大培养．从鱼腥藻中提取的质粒经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析，确定人肝ＭＴ－ＩＡ基因已转入鱼腥藻７１２０中，Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析表明，金属硫蛋白在转人肝ＭＴ－ＩＡ基因鱼腥藻中得到了表达．经原子吸收光谱法测定表达量约为７００μｇＭＴ／ｇ鲜藻，重金属耐受性实验表明，得到了能耐受重金属－镉的转人肝ＭＴ－ＩＡ基因鱼腥藻，它将在清除水域中重金属污染和医药研究方面发挥重要作用． 展开更多

关键词 转基因蓝藻 鱼腥藻7120 转移 表达 MT-IA基因

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PPF1基因C端片段在大肠杆菌中的融合表达和纯化以及抗体制备 被引量：6

6

作者 徐云剑 苏力坦.阿巴白克力 +1 位作者 吉栩 朱玉贤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期594-599,共6页

PPF1是与G2豌豆短日不衰老现象紧密相关的基因之一 .以pSK PPF1为模板 ,用PCR方法得到了编码该蛋白C端的基因片段 ,称为PPFC .进一步将该基因片段克隆到中间载体pGEM T easy ,再酶切得到PPFC片段插入到pGEX 4T 1载体中 ,构建成表达质粒p... PPF1是与G2豌豆短日不衰老现象紧密相关的基因之一 .以pSK PPF1为模板 ,用PCR方法得到了编码该蛋白C端的基因片段 ,称为PPFC .进一步将该基因片段克隆到中间载体pGEM T easy ,再酶切得到PPFC片段插入到pGEX 4T 1载体中 ,构建成表达质粒pGEX 4T PPFC .在BL2 1细胞中经IPTG诱导表达 ,得到GST PPFC融合蛋白 .用GST亲和柱纯化得到PPFC蛋白 ,将其作为抗原得到兔源的多克隆抗体 .Western杂交分析表明所得到的抗体具有较强的特异性 ,ELISA分析证实其效价为 10 6.该抗体的获得为用免疫沉淀等免疫分析技术研究PPF1与其它蛋白质的相互作用 。 展开更多

关键词 PPF1基因 C端片段 大肠杆菌 融合表达 纯化 抗体制备 多克隆抗体 植物细胞

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聚球藻类金属硫蛋白的纯化及部分性质的研究 被引量：15

7

作者 郭祥学 陈正佳 +2 位作者 但春涛 施定基 茹炳根 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第6期699-703,共5页

单细胞蓝藻（Ｓｙｎｅｃｈｏｃｏｃｕｓｓｐ．ＰＣＣ７９４２）以５０μｍｏｌ／ＬＺｎ２＋诱导８ｄ后收集，破碎取上清液经凝胶过滤、离子交换层析及反相ＨＰＬＣ纯化得到类金属硫蛋白，产率为每升培养液收集１．５ｇ鲜藻，得２．５ｍ... 单细胞蓝藻（Ｓｙｎｅｃｈｏｃｏｃｕｓｓｐ．ＰＣＣ７９４２）以５０μｍｏｌ／ＬＺｎ２＋诱导８ｄ后收集，破碎取上清液经凝胶过滤、离子交换层析及反相ＨＰＬＣ纯化得到类金属硫蛋白，产率为每升培养液收集１．５ｇ鲜藻，得２．５ｍｇ纯品．其单体分子量为８７５０，Ｎ未端测定为缬氨酸，氨基酸组成分析得每分子（５６个氨基酸）含１０个半胱氨酸，疏水氨酸较多，且含有芳香族氨基酸，原子吸收光谱测得每分子蛋白结合４个二价金属．以上表明，该种类金属硫蛋白与哺乳动物金属硫蛋白结构差异很大，可能只是一种进化上的趋同． 展开更多

关键词 聚球藻 类金属硫蛋白 纯化 性质

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DNA水平上的植物系统学研究进展 被引量：13

8

作者 丁士友 张春林 +1 位作者 顾红雅 陈章良 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期446-456,共11页

分子钟假说为在分子水平上研究生物进化提供了理论基础，分子系统学（主要是在ＤＮＡ水平）已成为当前生物学领域中的热门课题，并取得了许多引人注目的进展．本文主要以高等植物为对象，从核ＤＮＡ、叶绿体ＤＮＡ和线粒体ＤＮＡ三方面... 分子钟假说为在分子水平上研究生物进化提供了理论基础，分子系统学（主要是在ＤＮＡ水平）已成为当前生物学领域中的热门课题，并取得了许多引人注目的进展．本文主要以高等植物为对象，从核ＤＮＡ、叶绿体ＤＮＡ和线粒体ＤＮＡ三方面对植物分子系统学进行了综述． 展开更多

关键词 植物分类学 植物分子系统学 DNA

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粪产碱菌nifH启动子与LacZ的融合基因构建及其表达调控 被引量：2

9

作者 张海予 林敏 +1 位作者 萧凤回 朱玉贤 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第5期499-504,共6页

在ｐＲＫ２９０载体上将粪产碱菌固氮酶基因ｎｉｆＨ的启动子与报告基因ＬａｃＺ相融合，获得表达载体ｐＳＫ６，并转导到粪产碱菌Ａ１５０１菌株中，探讨了铵和氧对该启动子的表达调控．结果表明，粪产碱菌ｎｉｆＨ启动子仍受到铵和氧... 在ｐＲＫ２９０载体上将粪产碱菌固氮酶基因ｎｉｆＨ的启动子与报告基因ＬａｃＺ相融合，获得表达载体ｐＳＫ６，并转导到粪产碱菌Ａ１５０１菌株中，探讨了铵和氧对该启动子的表达调控．结果表明，粪产碱菌ｎｉｆＨ启动子仍受到铵和氧的调节．当铵浓度大于３ｍｍｏｌ／Ｌ时，其表达水平大幅度下降，但铵浓度高达４０ｍｍｏｌ／Ｌ，仍有很低水平表达．而且，带有巴西固氮螺菌ｎｉｆＨ∶ｌａｃＺ的粪产碱菌接合子在高铵条件下（４０ｍｍｏｌ／Ｌ）也有低水平表达．此外，氧对粪产碱菌的ｎｉｆＨ启动子有抑制作用，这在无铵条件下表现最为明显． 展开更多

关键词 粪产碱菌 nifH启动子 表达 基因调控 固氮菌

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重组抗人活化血小板单链抗体-尿激酶原导向溶栓剂的基因构建及表达 被引量：2

10

作者 张曼 方巧君 胡美浩 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第5期733-737,共5页

为了获得特异性高的导向溶栓药物,应用PCR技术,得到抗人活化血小板单抗(SZ-51)的Fab′基因片段。再用酶切方法,将Fab′中CH1基因片段替换成合成的连接分子(linker)基因,构建成单链抗体基因,并插入到人尿激酶原分泌肽基因及低分子量单链... 为了获得特异性高的导向溶栓药物,应用PCR技术,得到抗人活化血小板单抗(SZ-51)的Fab′基因片段。再用酶切方法,将Fab′中CH1基因片段替换成合成的连接分子(linker)基因,构建成单链抗体基因,并插入到人尿激酶原分泌肽基因及低分子量单链尿激酶(scu-PA-32k)之间,最终构建成重组抗人活化血小板单链抗体-尿激酶原融合蛋白基因。此融合蛋白基因在昆虫细胞中得到表达。纯化的表达产物SDS-PAGE鉴定,其分子量约为60kD,与预期值相符。其比活为9000IU/mg蛋白。ELISA法初步证明此重组的融合蛋白具有与活化血小板抗原结合特异性。 展开更多

关键词 导向溶栓分子 血小板 单链抗体 尿激酶原 重组

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乙酰乙酰辅酶A还原酶基因phbB克隆及其表达初探

11

作者 苍晶 姜晓娟 +2 位作者 徐志超 林忠平 杜娟 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期37-43,共7页

从真养产碱杆菌(Alcaligenes eutrophus)中克隆得到PHB合成的关键酶基因,NADPH依赖性的乙酰乙酰辅酶A还原酶基因phbB(GenBank ID:KC191672),其DNA长度为741 bp,编码246个氨基酸(aa),与GenBank数据库中的entrophusPhbB(FJ897462.1)的同... 从真养产碱杆菌(Alcaligenes eutrophus)中克隆得到PHB合成的关键酶基因,NADPH依赖性的乙酰乙酰辅酶A还原酶基因phbB(GenBank ID:KC191672),其DNA长度为741 bp,编码246个氨基酸(aa),与GenBank数据库中的entrophusPhbB(FJ897462.1)的同源性为70.99%。属于膜蛋白或分泌蛋白,推测该蛋白可能定位在细胞膜上。成功构建原核表达载体pET28a(+)-phbB-HE。经SDS-PAGE电泳检测获得phbB基因表达蛋白,其分子质量为31 ku,为研究乙酰乙酰辅酶A还原酶活性及后期蛋白功能鉴定奠定基础。 展开更多

关键词 聚-β-羟基丁酸酯 重组表达 基因克隆 纯化 表达载体

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结核分支杆菌HSP65 DNA疫苗的制备和重组蛋白的原核表达 被引量：1

12

作者 赵博 蔡宏 +1 位作者 于大海 朱玉贤 《动物医学进展》 CSCD 2005年第1期62-65,共4页

结核分支杆菌分子量为 65ku的热应激蛋白 (HSP65)是一种非常重要的抗原 ,为了研制结核病核酸疫苗 ,构建编码HSP65DNA ,并将其分别克隆到原核和真核载体中进行了表达。以标准结核分支杆菌H3 7Rv基因组DNA为模板 ,用PCR法扩增出HSP65基因 ... 结核分支杆菌分子量为 65ku的热应激蛋白 (HSP65)是一种非常重要的抗原 ,为了研制结核病核酸疫苗 ,构建编码HSP65DNA ,并将其分别克隆到原核和真核载体中进行了表达。以标准结核分支杆菌H3 7Rv基因组DNA为模板 ,用PCR法扩增出HSP65基因 ,经限制性内切酶消化后 ,插入真核表达载体pJW43 0 3中 ,获得重组质粒pJW HSP65。同时将HSP65基因插入原核表达载体pET 2 2b(+) ,获得重组质粒pET2 2b HSP65。将pET2 2b HSP65重组质粒转化大肠杆菌蛋白酶缺陷型菌株BL2 1 (DE3 ) /PolysS ,用IPTG诱导 ,进行蛋白表达。结果表明 ,经酶切鉴定和序列测定证实插入片断为目的基因HSP65,构建成功了真核重组质粒pJW HSP65即可作为结核病DNA疫苗。经SDS PAGE检验证明可以在大肠杆菌细胞中高效表达 ,将表达蛋白进行纯化 。 展开更多

关键词 结核分支杆菌 HSP65 DNA疫苗 表达与纯化

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牛结核病鉴别诊断的方法研究 被引量：11

13

作者 余大海 韦一然 +1 位作者 蔡宏 朱玉贤 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期932-935,共4页

目的构建含结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)tb10.4基因片断的原核表达载体,在E.coli中诱导表达带组氨酸标记的该融合蛋白。分别以TB10.4蛋白,PPD蛋白以及TB10.4与MPT83混合蛋白为抗原,用间接ELISA法鉴别牛结核病。方法PCR法扩... 目的构建含结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)tb10.4基因片断的原核表达载体,在E.coli中诱导表达带组氨酸标记的该融合蛋白。分别以TB10.4蛋白,PPD蛋白以及TB10.4与MPT83混合蛋白为抗原,用间接ELISA法鉴别牛结核病。方法PCR法扩增tb10.4基因片段,连接到pET-22b(+)原核表达载体中,将重组子转化到大肠杆菌蛋白酶缺陷型菌株BL21(DE3)/PolysS,用IPTG诱导,进行蛋白表达、纯化。之后将TB10.4,PPD,TB10.4及MPT83混合蛋白作为抗原用间接ELISA法检测牛结核病。结果使用结核杆菌早期分泌蛋白TB10.4作为抗原用间接ELISA方法快速检测牛结核病,并区分BCG免疫的健康牛和感染牛的结果显示灵敏度为23%,没有假阳性反应。结论用PPD作为抗原进行检测灵敏度达到48%,但假阳性率达到21%;用TB10.4与MPT83混合抗原检测时灵敏度下降到6%,假阳性率1%。 展开更多

关键词 牛结核病 TB10.4蛋白 间接ELISA法

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结核分枝杆菌四价DNA疫苗免疫原性和保护效率研究 被引量：6

14

作者 顾田园 蔡宏 +2 位作者 田霞 余大海 朱玉贤 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第4期347-352,共6页

对结核杆菌四价DNA疫苗的免疫应答和保护效果进行了评价.用编码结核分枝杆菌Ag85B、MPT64、MPT70和PstS-3等4种抗原蛋白的基因分别构建的单价DNA疫苗混合成四价苗免疫小鼠.3次免疫后21天,四种抗原特异性抗体滴度分别达到1:6 400、1:51 ... 对结核杆菌四价DNA疫苗的免疫应答和保护效果进行了评价.用编码结核分枝杆菌Ag85B、MPT64、MPT70和PstS-3等4种抗原蛋白的基因分别构建的单价DNA疫苗混合成四价苗免疫小鼠.3次免疫后21天,四种抗原特异性抗体滴度分别达到1:6 400、1:51 200、1:6 400、1:6 400.四种蛋白质均能诱导脾脏细胞产生较高水平的抗原特异性IFN-γ,浓度分别为10 582.14 ng/L、13 635.97 ng/L、14 213.15 ng/L和9 657.35 ng/L.三次免疫后经静脉强毒攻击,四价苗组小鼠肺脏和脾脏的载菌数分别减少到阴性组的1/650和1/130.对肺组织的病理形态特征观察表明,空载体免疫的小鼠肺部严重损伤,肺实质干酪样坏死,坏死结节占肺实质的70%～80%,而四价苗免疫的小鼠,肺组织结构正常,肺泡轮廓清晰.研究首次证实,Ag85B、MPT64、MPT70和PstS-3 4种结核杆菌抗原蛋白编码基因组成的四价DNA疫苗,具有很高的免疫应答水平和保护效率. 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 抗原蛋白 四价DNA疫苗 免疫原性 保护效率

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佐剂DDA和MPL对提高结核杆菌组合DNA疫苗免疫效果的比较研究 被引量：8

15

作者 余大海 蔡宏 朱玉贤 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第8期765-770,共6页

编码结核杆菌3种抗原Ag85B,MPT64,MPT83的基因片段插入真核表达载体作为组合疫苗免疫小鼠,DDA和MPL作为佐剂分别提高了此三价苗的免疫原性和免疫保护效果,且相比之下DDA优于MPL.添加DDA后,Ag85B,MPT64,MPT83抗原特异的IFN-γ含量分别为(... 编码结核杆菌3种抗原Ag85B,MPT64,MPT83的基因片段插入真核表达载体作为组合疫苗免疫小鼠,DDA和MPL作为佐剂分别提高了此三价苗的免疫原性和免疫保护效果,且相比之下DDA优于MPL.添加DDA后,Ag85B,MPT64,MPT83抗原特异的IFN-γ含量分别为(265.37±79.2)U/ml,(185.31±58.3)U/ml,(108.13±54.4)U/ml,分别比非佐剂组的高16U/ml,45U/ml和2U/ml,与MPL组3种抗原特异性IFN-γ的含量无显著差异.IL-4的含量在各组中无显著差异.攻毒后细菌计数结果显示,添加佐剂的三价苗组小鼠的肺脏和脾脏的载菌量分别比空载体组降低了2￣3个数量级,且佐剂DDA组显著优于佐剂MPL组和未加佐剂组.病理切片结果与载菌量数据相一致,添加佐剂组,特别是DDA组小鼠肺部淋巴细胞相对减少,巨噬细胞增多.因此,DDA作为佐剂能显著提高核酸疫苗的免疫效率,佐剂MPL不能提高结核杆菌多价核酸疫苗的免疫效率. 展开更多

关键词 结核分支杆菌 组合疫苗 佐剂 DDA MPL 免疫效果

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含RGD的配基与其受体相互作用研究进展 被引量：9

16

作者 孙迎庆 郭雁 茹炳根 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第2期121-126,共6页

RGD配基与其受体相互作用目前已成为一个研究热点 ,许多粘附蛋白是通过RGD序列与其整合素结合的 ,它参与许多生物学过程 .文章主要就RGD序列肽与糖蛋白Ⅱb/Ⅲa的相互作用及其在抑制血小板聚集上进行了较为全面的综述 。

关键词 粘附蛋白 RGD 配基 受体

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生物信息资源的应用与二次开发 被引量：7

17

作者 黄弋 罗静初 顾孝诚 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1999年第1期60-62,34,共4页

概述了利用计算机及分子生物学信息资源进行文献检索、序列分析、蛋白质分子结构模建、药物设计等工作的方法。

关键词 分子生物信息学 信息资源 分子生物学 检索

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蚯蚓体内一种纤溶酶原激活剂(e-PA)对BAEE的降解 被引量：3

18

作者 杨嘉树 李令媛 茹炳根 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第4期417-421,共5页

以苯甲酰－Ｌ－精氨酸乙酯（ｂｅｎｚｏｙｌ－Ｌ－ａｒｇｉｎｉｎｅｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ，ＢＡＥＥ）为底物，研究了蚯蚓体内纤溶酶原激活剂（ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒｆｒｏｍＥｉｓｅｎｉａｆｅｔｉｄａ，ｅ－ＰＡ... 以苯甲酰－Ｌ－精氨酸乙酯（ｂｅｎｚｏｙｌ－Ｌ－ａｒｇｉｎｉｎｅｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ，ＢＡＥＥ）为底物，研究了蚯蚓体内纤溶酶原激活剂（ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒｆｒｏｍＥｉｓｅｎｉａｆｅｔｉｄａ，ｅ－ＰＡ）的酶学性质．酶促反应的最适ｐＨ为８．４，ｅ－ＰＡ降解ＢＡＥＥ的Ｋｍ为１．２４±０．１６×１０－５ｍｏｌ／Ｌ，Ｋｃａｔ为１３．８０±４．０２ｓ－１．测定了构成ｅ－ＰＡ的大，小亚基分别降解ＢＡＥＥ的Ｋｍ和Ｋｃａｔ．结果表明，大亚基的Ｋｍ与全酶的Ｋｍ相差不多，但比小亚基小约１０倍，即对底物的亲和力比小亚基强约一个数量级．大小亚基的Ｋｃａｔ比较接近，分别是全酶的１／６和１／３．研究了８种抑制剂对ｅ－ＰＡ降解ＢＡＥＥ活性的影响，其中ｐｅｐｓｔａｔｉｎ和Ｅ－６４（一种巯基抑制剂）对酶促反应有激活作用，ＴＰＣＫ，ＴＬ－ＣＫ，ＰＭＳＦ，ｃｈｙｍｏｓｔａｔｉｎ和ｌｅｕｐｅｐｔｉｎ对其有不同程度的抑制作用，ＥＤＴＡ对ｅ－ＰＡ的活性没有影响．对ｅ－ＰＡ的ＢＡＥＥ活性和ｅ－ＰＡ的纤溶活性之间作了比较． 展开更多

关键词 蚯蚓 纤溶酶原激活剂 e-PA ATEE PH值 抑制 降解

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蚯蚓体内一种纤溶酶原激活剂（e—PA）对BAWEE的降解 被引量：6

19

作者 杨嘉树 李令媛 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第4期412-416,共5页

以苯甲酰－Ｌ－精氨酸乙酯为氏物，研究了蚯蚓体内纤溶酶原激活剂的酶学性质，酶促反应的最适ｐＨ为８．４，ｅ－ＰＡ降２解ＢＡＥＥ的Ｋｍ为１．２４±０．１６×１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ，Ｋｃａｔ为１３．８０±４．０２ｓ... 以苯甲酰－Ｌ－精氨酸乙酯为氏物，研究了蚯蚓体内纤溶酶原激活剂的酶学性质，酶促反应的最适ｐＨ为８．４，ｅ－ＰＡ降２解ＢＡＥＥ的Ｋｍ为１．２４±０．１６×１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ，Ｋｃａｔ为１３．８０±４．０２ｓ＾１。测定了构成了ｅ－ＰＡ的大，小亚基分别降解ＢＡＥＥ的Ｋｍ和Ｋｃａｔ。。结果表明，大亚基的Ｋｍ与全酶的Ｋｍ相差不多，但比小亚基小约１０倍，即对底物的亲和力比小亚基强约一个数量级。 展开更多

关键词 BAEE e-PA 酶促动力学 降解 蚓激酶 抑制剂 蚯蚓

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多胚发育寄生蜂腰带长体茧蜂在寄主亚洲玉米螟幼虫体内的发育 被引量：4

20

作者 胡建 刘峰 张文庆 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期126-131,共6页

多胚发育的幼虫内寄生蜂腰带长体茧蜂Macrocentrus cingulum的卵、胚胎和幼虫在寄主亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis幼虫血腔内发育,通常1枚卵可以分裂增殖为数百只胚胎。本文通过定时解剖寄生的寄主幼虫,初步了解了腰带长体茧蜂多胚的... 多胚发育的幼虫内寄生蜂腰带长体茧蜂Macrocentrus cingulum的卵、胚胎和幼虫在寄主亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis幼虫血腔内发育,通常1枚卵可以分裂增殖为数百只胚胎。本文通过定时解剖寄生的寄主幼虫,初步了解了腰带长体茧蜂多胚的形成过程及其在寄主体内的发育情况。结果表明:以4龄末期亚洲玉米螟幼虫为寄主时,寄生蜂卵产入寄主体内10min左右开始卵裂,1天左右,初级胚胎从卵壳中被释放出来。之后胚胎在胚外膜内持续分裂产生大量二级胚胎形成桑葚胚。寄生后3天左右,二级胚胎从胚外膜中被释放出来,进入胚胎发育阶段。寄生后6天左右,胚胎进入胚带形成阶段。寄生后8天左右,胚带伸长,头尾形成。寄生后9天左右,身体分节完成,部分幼虫孵化,蜕去胚外膜。寄生后13天左右,蜂幼虫从寄主体内啮出。胚胎在发育初期体积变化不大,但从胚带形成开始,体积则迅速增大。腰带长体茧蜂与另一多胚发育寄生蜂佛州点缘跳小蜂Copidosoma floridanum在胚胎发育进程上明显不同,体现了它们对各自寄主的适应。 展开更多

关键词 腰带长体茧蜂 亚洲玉米螟 内寄生蜂 多胚发育 胚胎

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