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溶栓剂蛋白质工程的新进展 被引量:3
1
作者 张彦斌 徐长法 《北京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期286-294,共9页
介绍了国内外溶栓剂蛋白质工程方面的新进展,主要涉及了组织型纤溶酶原激活剂(tPA) 、尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)、链激酶(SK) 、葡萄球菌激酶(SAK) 、DSPA 及TSVPA 的研究进展。一些PA 突变体... 介绍了国内外溶栓剂蛋白质工程方面的新进展,主要涉及了组织型纤溶酶原激活剂(tPA) 、尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)、链激酶(SK) 、葡萄球菌激酶(SAK) 、DSPA 及TSVPA 的研究进展。一些PA 突变体及新型溶栓剂,如K2P、TNKPA和STAR等的临床实验结果表明它们在延长体内半寿期、增强对血纤维蛋白选择性和溶栓效率等方面有较大的改进。但溶栓治疗造成的颅内出血等局部性出血问题仍是目前的难题之一,说明新型溶栓剂的研制有很大潜力。 展开更多
关键词 溶栓剂 纤溶酶原激活剂 蛋白质工程 T-PA U-PA
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植物基因工程的现状与展望 被引量:5
2
作者 朱玉贤 《北京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期261-270,共10页
介绍了80年代以来植物基因工程的历史、现状和发展趋势,对利用转基因植物生产药用蛋白,用工程病毒为载体生产药用蛋白,改进植物品质及逆境适应性,提高光合作用和固氮效率,抗除草剂工程植物及工程微生物与生物医学的关系等作了可行性分... 介绍了80年代以来植物基因工程的历史、现状和发展趋势,对利用转基因植物生产药用蛋白,用工程病毒为载体生产药用蛋白,改进植物品质及逆境适应性,提高光合作用和固氮效率,抗除草剂工程植物及工程微生物与生物医学的关系等作了可行性分析和前景预测。 展开更多
关键词 基因工程 载休 品质改良 植物 组织培养
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APP转基因小鼠与正常小鼠脑蛋白质组双向电泳图谱的比较
3
作者 杨国锋 王鲁宁 +1 位作者 朱明伟 何思志 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2005年第4期269-271,共3页
目的探讨APP转基因小鼠与正常C57小鼠脑蛋白质组双向电泳(2-DE)图谱差异,从蛋白质水平初步探索老年性痴呆发病机制。方法APP转基因小鼠与正常C57小鼠脑组织经蛋白提取后,分别以固相pH梯度等电聚焦为第一向,SDS-PAGE垂直电泳为第二向进行... 目的探讨APP转基因小鼠与正常C57小鼠脑蛋白质组双向电泳(2-DE)图谱差异,从蛋白质水平初步探索老年性痴呆发病机制。方法APP转基因小鼠与正常C57小鼠脑组织经蛋白提取后,分别以固相pH梯度等电聚焦为第一向,SDS-PAGE垂直电泳为第二向进行2-DE。图像分析软件ImageMaster 2D Elite分析电泳图谱。结果APP转基因小鼠与正常小鼠脑组织2-DE图谱分别检测出976和947个蛋白点。对两张电泳图进行匹配后,发现有16个蛋白点仅在APP转基因小鼠脑蛋白2-DE图谱检测到表达,而有7个蛋白点只在正常小鼠检测到。部分蛋白在2组小鼠脑组织中含量发生了明显变化。结论差异点的发现初步建立了差异表达蛋白质组学的技术方法;为研究阿尔茨海默病机制及研发新药提供了有益的线索。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 小鼠 转基因 淀粉样Β蛋白 电泳 蛋白质组
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植物基因工程在农业中的应用
4
作者 陈章良 《高技术通讯》 CSCD 1992年第1期1-5,共5页
植物基因工程是近几年发展起来的生物技术。利用植物基因工程技术,改良作物蛋白质成份,提高作物中必需的氨基酸含量,培育抗病毒、抗虫害、抗除草剂工程植株及抗盐、抗旱等抗逆境植株,在当前农业生产中已显示出巨大的经济效益,并展示了... 植物基因工程是近几年发展起来的生物技术。利用植物基因工程技术,改良作物蛋白质成份,提高作物中必需的氨基酸含量,培育抗病毒、抗虫害、抗除草剂工程植株及抗盐、抗旱等抗逆境植株,在当前农业生产中已显示出巨大的经济效益,并展示了植物基因工程在未来农业生产中的诱人前景。 展开更多
关键词 必需氨基酸 植物基因工程 改良作物 农业
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人脑枕叶区衰老进程的比较蛋白质组学研究 被引量:11
5
作者 周波 杨伟 +4 位作者 张景华 童元鹏 赵锐 纪建国 茹炳根 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2003年第12期2202-2207,共6页
分别从 2 3岁、 64岁、 72岁、 83岁以及 94岁无神经性和精神性疾病史个体大脑皮层枕叶区取样 ,制备蛋白质样品 ,进行双向凝胶电泳 ( 2 -DE)、考马斯亮蓝染色、凝胶扫描和 Image Master2 D Elite软件分析 ,每张胶上平均可检测到 1 0 0 ... 分别从 2 3岁、 64岁、 72岁、 83岁以及 94岁无神经性和精神性疾病史个体大脑皮层枕叶区取样 ,制备蛋白质样品 ,进行双向凝胶电泳 ( 2 -DE)、考马斯亮蓝染色、凝胶扫描和 Image Master2 D Elite软件分析 ,每张胶上平均可检测到 1 0 0 0个以上蛋白质点 .通过软件半定量分析 ,进一步研究了衰老过程中枕叶蛋白质的差异表达 ,发现随年龄增长有 7种蛋白质有一致的显著上升或下降趋势 .应用质谱进行肽质量指纹图谱( PMF)和 /或肽序列标签 ( PST)分析 ,数据库检索共鉴定了 1 1种蛋白质 ,其中有 5种具有一致的上调或下调性 ,包括神经元突触结构蛋白低分子量神经丝蛋白 ( Neurofilamenttriplet L protein,NF-L)、参与抗氧化反应的硫氧还原蛋白过氧化物酶 ( Peroxiredoxin)、三羧酸循环关键酶 (顺 )乌头酸水合酶 ( Aconitate hydratase)和糖代谢途径中的关键酶烯醇化酶 2 ( Enolase2 )以及分子伴侣蛋白 T复合物蛋白 1 ( T-complex protein1 ) .首次建立了正常人脑枕叶区的双向电泳蛋白质表达图谱 ,针对人脑枕叶区蛋白质在衰老过程中的差异表达进行了研究 ,并对差异表达蛋白在衰老进程中可能的生物学意义做了探讨 . 展开更多
关键词 人脑枕叶区 衰老机制 蛋白质组 双向凝胶电脉 质谱
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正常与重金属铅注射的兔脑蛋白质双向电泳图谱比较与鉴定 被引量:4
6
作者 赵锐 纪建国 +4 位作者 郝守进 陈倩 袁洪生 管华诗 茹炳根 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第6期874-879,共6页
重金属污染对人类健康的威胁日益受到关注 ,为了了解大量重金属摄入对脑蛋白质的影响 ,对比研究了正常兔脑组织蛋白质与重金属铅腹腔注射 2周后的兔脑组织在蛋白质双向电泳图谱中的差异 ,分析重金属注射对脑蛋白质表达的可能影响 .通过... 重金属污染对人类健康的威胁日益受到关注 ,为了了解大量重金属摄入对脑蛋白质的影响 ,对比研究了正常兔脑组织蛋白质与重金属铅腹腔注射 2周后的兔脑组织在蛋白质双向电泳图谱中的差异 ,分析重金属注射对脑蛋白质表达的可能影响 .通过对脑组织蛋白质的提取 ,分离出水溶性的蛋白质组分 ,经双向电泳图谱比较正常与注射重金属铅的兔子在脑蛋白质表达上的差异 ,其中 3个蛋白质斑点经提取 ,反相高效液相色谱 (RP HPLC)分离 ,基质辅助激光解析电离质谱 (MALDI TOFMS)确定了分子质量 ,并利用肽质量指纹图谱检索数据库确定蛋白质的归属 . 展开更多
关键词 蛋白质组学 双向电泳 基质辅助激光解析电离质谱 电喷雾质谱 脑蛋白 图谱比较
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植物水孔蛋白研究进展 被引量:35
7
作者 于秋菊 吴锜 +1 位作者 林忠平 李景富 《北京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期855-866,共12页
植物水孔蛋白在植物体内形成水选择性运输通道 ,在植物种子萌发、细胞伸长、气孔运动、受精等过程中调节水分的快速跨膜运输。有些水孔蛋白还在植物逆境应答中起着重要作用 ,因此研究水孔蛋白与植物抗旱性的关系引起了广泛关注。对水孔... 植物水孔蛋白在植物体内形成水选择性运输通道 ,在植物种子萌发、细胞伸长、气孔运动、受精等过程中调节水分的快速跨膜运输。有些水孔蛋白还在植物逆境应答中起着重要作用 ,因此研究水孔蛋白与植物抗旱性的关系引起了广泛关注。对水孔蛋白的发现、结构、分类、分布。 展开更多
关键词 植物水孔蛋白 水分运输 基因表达 结构 分类 分布 调控 抗旱性
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蜘蛛杀虫肽与Bt-Toxin C肽融合蛋白基因转入棉花的研究 被引量:9
8
作者 郑树松 安成才 +1 位作者 李启任 陈章良 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2002年第6期348-351,共4页
通过农杆菌介导法将蜘蛛杀虫肽与Bt毒蛋白C肽的融合蛋白基因导入了陆地棉(GossypiumhirsutumL.)栽培品种中棉所10号,并获得大量小苗。小苗经GUS染色和PCR检测,证明蜘蛛杀虫肽基因已经转入到转化植株的基因组内,检测阳性率分别为27.1%和6... 通过农杆菌介导法将蜘蛛杀虫肽与Bt毒蛋白C肽的融合蛋白基因导入了陆地棉(GossypiumhirsutumL.)栽培品种中棉所10号,并获得大量小苗。小苗经GUS染色和PCR检测,证明蜘蛛杀虫肽基因已经转入到转化植株的基因组内,检测阳性率分别为27.1%和60.42%。 展开更多
关键词 融合蛋白基因 棉花 蜘蛛杀虫肽 遗传转化 植株再生 Bt毒蛋白C肽
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查尔酮合酶基因在植物防御反应中的调控作用 被引量:27
9
作者 廖靖军 安成才 +1 位作者 吴思 陈章良 《北京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期566-575,共10页
论述了查尔酮合酶基因 (chs)在植物防御反应中与病原物的相互关系 ,探讨了与查尔酮合酶基因诱导表达相关的顺式作用元件和反式作用因子及其DNA 蛋白质间的相互作用 ,阐明其在植物抗病性防御反应中的重要作用。
关键词 查尔酮合酶基因 防御反应 调控作用
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核糖体灭活蛋白在植物中的作用 被引量:14
10
作者 王莉江 安成才 陈章良 《生物技术通报》 CAS CSCD 2000年第2期1-4,共4页
植物核糖体灭活蛋白 (ribosome -inactivatingproteins ,RIPs)能够破坏真核或原核细胞的核糖体大亚基RNA ,使核糖体失活而不能与蛋白质合成过程中的延伸因子相结合 ,从而导致蛋白质合成受到抑制。不同的核糖体对不同RIPs的敏感性不同 ,R... 植物核糖体灭活蛋白 (ribosome -inactivatingproteins ,RIPs)能够破坏真核或原核细胞的核糖体大亚基RNA ,使核糖体失活而不能与蛋白质合成过程中的延伸因子相结合 ,从而导致蛋白质合成受到抑制。不同的核糖体对不同RIPs的敏感性不同 ,RIPs对自体或异体核糖体的作用也有很大区别。RIPs对病毒有很强的抑制作用 ,并且有些RIPs表现出对某些真菌和昆虫的抗性 ,因此认为核糖体灭活蛋白在植物的防御反应中扮演重要角色。另外 ,RIPs还可能参与了细胞代谢、细胞死亡等生理调控过程。 展开更多
关键词 核糖体灭活蛋白 防御反应 核糖体 植物
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转小鼠金属硫蛋白-Ⅰ基因聚球藻7002对重金属耐受性的研究 被引量:2
11
作者 曾文炉 赵飞飞 +1 位作者 曹照根 茹炳根 《环境污染与防治》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期66-70,共5页
研究了野生和转小鼠金属硫蛋白-Ⅰ(mMT-Ⅰ)基因聚球藻7002对Pb、Hg、Cd、Mg、Ni、Cu、Co、Zn和As9种重金属元素的耐受性,以及重金属对藻细胞生长的半抑制浓度(IC50),并与相关文献进行了比较,旨在为转基因藻的工业应用提供依据。结果表明... 研究了野生和转小鼠金属硫蛋白-Ⅰ(mMT-Ⅰ)基因聚球藻7002对Pb、Hg、Cd、Mg、Ni、Cu、Co、Zn和As9种重金属元素的耐受性,以及重金属对藻细胞生长的半抑制浓度(IC50),并与相关文献进行了比较,旨在为转基因藻的工业应用提供依据。结果表明:转mMT-Ⅰ基因聚球藻7002每单位OD750最高可耐受4~5mmol/L的Pb2+、0.4~0.6mmol/L的Cd2+和0.8~1.2mmol/L的Hg2+,耐受性系数分别为1712.4~2140.5、92.9~139.4、331.6~497.3mg/g;相比野生聚球藻7002,它对Pb2+、Cd2+的耐受性提高了4~5倍,对Hg2+的耐受性提高了100倍左右。野生聚球藻7002的重金属耐受性系数(mg/g)大小依次为:As(Ⅲ)>Pb2+>Mg2+>Zn2+>Cu2+>Ni2+>Cd2+>Co2+>Hg2+,而转mMT-Ⅰ基因聚球藻7002的重金属耐受性系数(mg/g)大小依次为:As(Ⅲ)>Mg2+>Pb2+>Hg2+>Zn2+>Cu2+>Cd2+>Ni2+>Co2+。转mMT-Ⅰ基因聚球藻7002在重金属溶液中生长的IC50明显大于野生聚球藻7002和其他藻,其对Pb2+、Cd2+和Hg2+的IC50分别为96.60(72h)、3.94(72h)、7.57(96h)mg/L。 展开更多
关键词 小鼠金属硫蛋白-Ⅰ 聚球藻7002 转基因 重金属耐受性 IC50
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固定化转小鼠金属硫蛋白-Ⅰ基因聚球藻去除重金属的研究 被引量:1
12
作者 曾文炉 赵飞飞 +1 位作者 曹照根 茹炳根 《化学工程》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期46-50,共5页
利用海藻酸钠/CaCl2凝胶包埋法固定转小鼠金属硫蛋白-Ⅰ(mMT-Ⅰ)基因聚球藻7002及其野生宿主藻,就固定化藻的生长、对重金属的耐受性及其去除重金属的性能进行了初步研究。结果表明,固定化藻细胞比游离藻细胞生长较慢,培养周期较长,且... 利用海藻酸钠/CaCl2凝胶包埋法固定转小鼠金属硫蛋白-Ⅰ(mMT-Ⅰ)基因聚球藻7002及其野生宿主藻,就固定化藻的生长、对重金属的耐受性及其去除重金属的性能进行了初步研究。结果表明,固定化藻细胞比游离藻细胞生长较慢,培养周期较长,且最大细胞浓度偏低,但固定化可有效提高藻细胞对重金属的耐受性。固定化转mMT-Ⅰ聚球藻对Pb,Cd和Hg的耐受系数(以每单位的细胞吸光值OD750计)分别为6.077,0.610,1.093 mmol/L,而固定化野生聚球藻对于Pb,Cd和Hg的耐受系数分别为1.981,0.170,0.091 mmol/L;固定化转mMT-I聚球藻对重金属的去除效能明显优于游离藻:经3 d的处理,固定化转MT藻对Pb,Cd,Hg的去除率分别为88.09%,81.23%,91.45%,而固定化野生藻在相同的条件下则分别为77.3%,73.47%,85.44%。 展开更多
关键词 小鼠金属硫蛋白-Ⅰ 聚球藻7002 转基因 固定化 重金属
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转小鼠金属硫蛋白-Ⅰ基因聚球藻7002的营养需求 被引量:1
13
作者 曾文炉 赵飞飞 +1 位作者 曹照根 茹炳根 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期538-544,共7页
金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是一类低分子量、富含半胱氨酸的小分子蛋白。自1957年被发现以来,因其具有多种复杂多样的生理活性和功能,而受到广泛关注。研究表明,金属硫蛋白在生物体内,不仅参与必需金属元素如zn、cu等的储存、运... 金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是一类低分子量、富含半胱氨酸的小分子蛋白。自1957年被发现以来,因其具有多种复杂多样的生理活性和功能,而受到广泛关注。研究表明,金属硫蛋白在生物体内,不仅参与必需金属元素如zn、cu等的储存、运输及代谢^[1],还具备清除自由基^[2]、抗辐射^[3]、参与激素调节增进机体对外界刺激的应激反应^[4]和重金属解毒作用^[5-7]。 , 展开更多
关键词 小鼠金属硫蛋白-Ⅰ 聚球藻7002 转基因 光合自养 异养
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外源钙调蛋白对植物细胞分裂增殖作用的研究 被引量:10
14
作者 赵鸿娟 朱玉贤 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第4期413-417,共5页
外源钙调蛋白(Calmodulin,CaM)对胡萝卜悬浮细胞增殖具明显促进作用,不同浓度CaM的促进程度不同,7ug/ml时促进作用最大。CaM抑制剂TFP(Trifluoper-azine)则明显抑制该悬浮细胞的增... 外源钙调蛋白(Calmodulin,CaM)对胡萝卜悬浮细胞增殖具明显促进作用,不同浓度CaM的促进程度不同,7ug/ml时促进作用最大。CaM抑制剂TFP(Trifluoper-azine)则明显抑制该悬浮细胞的增殖,TFP浓度越高则抑制作用越强。另外,外源CaM可以加快珍珠梅花粉第二次有丝分裂,改变生殖细胞有丝分裂各期花粉管的比例,说明外源CaM对植物体细胞和性细胞的增殖和分裂均有促进作用。 展开更多
关键词 植物 细胞 分裂 增殖 调钙蛋白
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人肝金属硫蛋白-I_A基因在鱼腥藻中的克隆与表达 被引量:8
15
作者 任黎 邵强 +2 位作者 施定基 戴继勋 茹炳根 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第4期365-371,共7页
将人工合成的人肝金属硫蛋白(metalothionein,简称MT)-IA基因插入至中间载体pRL-439上强启动子psbA后,再将其与穿梭载体pKT-210相连,得到大肠杆菌-蓝藻穿梭表达载体pKT-MT,用三亲接... 将人工合成的人肝金属硫蛋白(metalothionein,简称MT)-IA基因插入至中间载体pRL-439上强启动子psbA后,再将其与穿梭载体pKT-210相连,得到大肠杆菌-蓝藻穿梭表达载体pKT-MT,用三亲接合转移法将pKT-MT转入丝状体蓝藻-鱼腥藻7120,经链霉素筛选,得到了稳定的转人肝MT-IA基因鱼腥藻.纯化单藻落,液体扩大培养.从鱼腥藻中提取的质粒经Southern印迹分析,确定人肝MT-IA基因已转入鱼腥藻7120中,Western印迹分析表明,金属硫蛋白在转人肝MT-IA基因鱼腥藻中得到了表达.经原子吸收光谱法测定表达量约为700μgMT/g鲜藻,重金属耐受性实验表明,得到了能耐受重金属-镉的转人肝MT-IA基因鱼腥藻,它将在清除水域中重金属污染和医药研究方面发挥重要作用. 展开更多
关键词 转基因蓝藻 鱼腥藻7120 转移 表达 MT-IA基因
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人肝金属硫蛋白突变体β基因通过同源重组在蓝藻中的克隆与表达 被引量:8
16
作者 周杰 施定基 +1 位作者 武宝 茹炳根 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第6期907-911,共5页
将人肝金属硫蛋白(MT)突变体β基因插入到中间载体pRL-439上的强启动子PpsbA 下游,利用载体pRL-β上的PpsbA 和β基因与phasm id pTZ18-8上整合平台PsbB,构建整合表达载体pTZ-β.整... 将人肝金属硫蛋白(MT)突变体β基因插入到中间载体pRL-439上的强启动子PpsbA 下游,利用载体pRL-β上的PpsbA 和β基因与phasm id pTZ18-8上整合平台PsbB,构建整合表达载体pTZ-β.整合平台PsbB与集胞藻(Synechocystissp.PCC6803)染色体DNA 上psbB基因下游片段为同源序列.为了发生单交换同源重组,将外源基因β插入到整合平台PsbB下游的克隆位点.利用自然转化方法将表达载体pTZ-β整合到Synechocystitsp.PCC6803的染色体上.经氨苄青霉素筛选得到遗传性状稳定的转基因蓝藻.Southern blotting 证明β基因已整合到Synechocystis sp.PCC6803的染色体上;Western blotting 表明β基因已在蓝藻中表达.ELISA 测定在Zn2+ 浓度为150 μm l/L时表达量最高,为590 μg/g 鲜藻;原子吸收表明转β基因的藻对Zn2+ 的富集能力约为野生型的2倍. 展开更多
关键词 MT 转基因 蓝藻 Β基因 富集 基因重组 基因
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大豆微粒体油酸盐脱饱和酶FAD2基因的克隆及其植物表达载体的构建 被引量:3
17
作者 陈喜凤 祝建波 +1 位作者 张煜新 胡鸢雷 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2008年第2期216-219,共4页
从大豆种子中提取RNA,通过逆转录PCR的方法扩增出1307bp的大豆微粒体油酸盐脱饱和酶FAD2基因,并将其克隆到pMD18-T vector,DNA测序分析表明克隆的片段与原序列相似性达到99.9%,蛋白质相似性达到100%,显示其与同科植物花生同源性最高,与... 从大豆种子中提取RNA,通过逆转录PCR的方法扩增出1307bp的大豆微粒体油酸盐脱饱和酶FAD2基因,并将其克隆到pMD18-T vector,DNA测序分析表明克隆的片段与原序列相似性达到99.9%,蛋白质相似性达到100%,显示其与同科植物花生同源性最高,与其它植物FAD2的氨基酸序列同源性较低。实验室前期从锦橙中克隆了种子球蛋白基因启动子ssp,转化烟草证明具有种子特异性调控表达的特性。本研究利用ssp启动子和大豆的FAD2基因构建了在种子专一性启动子驱动下的植物表达载体p3300-ssp-FAD2-Tons,为进一步进行油料作物的脂肪酸基因工程奠定了基础。 展开更多
关键词 油酸盐脱饱和酶 大豆 种子专一性启动子 植物表达载体
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苏云金杆菌毒性蛋白基因5′端的PCR合成、克隆及序列测定
18
作者 郑琦 刘中柱 陈章良 《福建省农科院学报》 CAS 1993年第3期1-7,共7页
以苏云金杆菌戈尔斯德亚种(Bacillus thuringiensis var.kurstaki HD-1)的总DNA为模板,用多聚酶链反应(PCR)的方法,成功合成了该菌毒性蛋白基因5′端片段,并克隆到大肠杆菌Bluescript质粒载体上,获得了重组质粒pQC20。核酸限制酶谱分析... 以苏云金杆菌戈尔斯德亚种(Bacillus thuringiensis var.kurstaki HD-1)的总DNA为模板,用多聚酶链反应(PCR)的方法,成功合成了该菌毒性蛋白基因5′端片段,并克隆到大肠杆菌Bluescript质粒载体上,获得了重组质粒pQC20。核酸限制酶谱分析表明,pQC20的重组片段属于Kronstad的毒性蛋白基因限制酶片段长度多型性分类系统中5.3 Kb类型基因。对该基因片段的全序列分析结果证明,在以PCR合成的1959个核苷酸中与国外已发表的5.3 Kb类型基因的相应片段仅有一个核苷酸差异。该基因片段具有表达有生物活性的毒性蛋白所必需的全部核苷酸序列。 展开更多
关键词 苏云金杆菌 基因 DNA序列
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水稻愈伤组织根分化过程相关基因的初步筛选 被引量:6
19
作者 郭蕾 程英豪 +7 位作者 王紫祎 何斌 张军军 柳世庆 刘美华 陈章良 瞿礼嘉 顾红雅 《北京大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第2期175-179,共5页
水稻愈伤组织在N6培养基上可以保持稳定的增殖而不分化,而培养在含有ABA的N6培养基上的愈伤组织就可以被诱导分化,进而形成根。根据这种生理学特征,分别提取了生长在两种不同培养基上的愈伤组织的RNA,与水稻cDNA芯片杂交。通过分析两种... 水稻愈伤组织在N6培养基上可以保持稳定的增殖而不分化,而培养在含有ABA的N6培养基上的愈伤组织就可以被诱导分化,进而形成根。根据这种生理学特征,分别提取了生长在两种不同培养基上的愈伤组织的RNA,与水稻cDNA芯片杂交。通过分析两种愈伤组织基因表达的差异,共找到271个与水稻愈伤组织根分化过程相关的cDNA克隆,其中107个基因表达被诱导,164个基因表达被抑制。这些初步结果为进一步研究愈伤组织分化生根的分子机理提供了研究线索。 展开更多
关键词 水稻eDNA芯片 水稻根分化 ABA 2 4-D 愈伤组织
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厚叶悬蒴苣苔BcWRKY1转录因子基因的克隆及初步的功能分析 被引量:9
20
作者 刘戈宇 胡鸢雷 +2 位作者 赵锋 祝建波 林忠平 《北京大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第4期446-452,共7页
通过RT-PCR程序,从经过SA诱导的厚叶悬蒴苣苔中获得含WRKY家族保守序列的一条cDNA片段。运用RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)技术获得全长1803bp的cDNA克隆,名之为BcWRKY1。序列分析表明:BcWRKY1与甘薯SPF1[D30038]相似性最高,... 通过RT-PCR程序,从经过SA诱导的厚叶悬蒴苣苔中获得含WRKY家族保守序列的一条cDNA片段。运用RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)技术获得全长1803bp的cDNA克隆,名之为BcWRKY1。序列分析表明:BcWRKY1与甘薯SPF1[D30038]相似性最高,保守区同源性达到84%。初步的Northern杂交分析表明:干旱、低温、高盐等逆境胁迫和外加SA、MeJA、JA、ABA等信号分子的诱导均能提高BcWRKY1基因的表达。但是表达情况各不相同。150mmol/L NaCl对BcWRKY1的诱导作用尤为明显和迅速。2168bp的BcWRKY1的基因组DNA克隆亦已获得,序列分析表明它含有4个内含子。 展开更多
关键词 厚叶悬蒴苣苔 WRKY转录因子 功能分析
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