睾丸组织异体异位移植生成成熟精子的动物模型建立 被引量：9

1

作者 于洁 叶静 +5 位作者 张芳婷 万汇涓 尹美珺 房家智 桂耀庭 蔡志明 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期591-594,共4页

目的：采用免疫缺陷小鼠作为孵化器，建立小鼠睾丸组织异体异位移植生成精子的实验模型。方法：以新生小鼠睾丸组织为供体，免疫缺陷小鼠为受体进行组织移植；采用反转录-聚合酶链反应(reverse transcriptase pol-ymerase chain reactio... 目的：采用免疫缺陷小鼠作为孵化器，建立小鼠睾丸组织异体异位移植生成精子的实验模型。方法：以新生小鼠睾丸组织为供体，免疫缺陷小鼠为受体进行组织移植；采用反转录-聚合酶链反应(reverse transcriptase pol-ymerase chain reaction，RT-PCR)对移植物中睾丸特异蛋白激酶(testis-specific protein kinase 1，TESK1)mRNA 表达进行检测，并应用组织形态学分析法对生精细胞的发育作进一步的验证。结果：分子生物学及组织学观察显示，移植物组织不仅可像正常小鼠睾丸组织一样表达 TESK1 mRNA，并且富含与正常成年小鼠睾丸组织中类似的精曲小管结构以及各级生精细胞和精子。结论：移植后的生精细胞可在异体异位继续发育生长，完成整个生精过程，最终发育精曲小管及成熟精子。 展开更多

关键词 睾丸组织 精子 生精细胞 异体 异位移植 移植物 动物模型建立 激酶 发育 反转录

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促甲状腺激素受体基因启动子区甲基化与乳头状甲状腺癌的关系研究 被引量：6

2

作者 戴亚丽 张帆 +4 位作者 叶静 林远 吴佩娴 蓝薇 彭卫群 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第24期2194-2196,共3页

目的观察促甲状腺激素受体(TSHR)在乳头状甲状腺癌(PTC)中的表达,分析其基因启动子区甲基化与肿瘤发生的关系。方法选择50例PTC和32例良性甲状腺肿瘤患者(对照组,包括20例结节性甲状腺肿和12例甲状腺腺瘤患者),对两组患者手术获取的标... 目的观察促甲状腺激素受体(TSHR)在乳头状甲状腺癌(PTC)中的表达,分析其基因启动子区甲基化与肿瘤发生的关系。方法选择50例PTC和32例良性甲状腺肿瘤患者(对照组,包括20例结节性甲状腺肿和12例甲状腺腺瘤患者),对两组患者手术获取的标本提取RNA后,逆转录为cDNA,进行PCR,检测TSHR基因的表达情况;运用甲基化特异性PCR(MSP)法检测上述组织中TSHR基因启动子区甲基化的情况。结果PTC组患者中,有34例(68.0%)TSHR基因启动子发生甲基化,16例(32.0%)TSHR基因mRNA表达缺失;对照组患者中,有7例(21.9%)TSHR基因启动子发生甲基化,4例(12.5%)TSHR基因mRNA表达缺失,PTC组织TSHR基因启动子区甲基化率及TSHR基因mRNA表达缺失率均显著高于对照组,差异有统计学意义(χ2值分别为16.61和4.02,P<0.05)。34例发生了TSHR基因启动子区甲基化的PTC患者中,有14例(41.2%)TSHRmRNA表达缺失;16例未发生甲基化的PTC患者中,2例(12.5%)发生了mRNA表达缺失,二者mRNA表达缺失率间差异有统计学意义(χ2=4.11,P<0.05)。结论PTC患者TSHR基因启动子甲基化发生率显著高于良性甲状腺肿瘤患者,而TSHR基因mRNA的表达则较良性甲状腺肿瘤降低;推测TSHR基因启动子区甲基化可能与PTC的发生、发展相关。 展开更多

关键词 甲状腺肿瘤 癌 乳头状 受体 促甲状腺素 甲基化 启动子

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体外模拟肝损伤环境下人脐血细胞向类肝细胞的转化 被引量：5

3

作者 于洁 张芳婷 +3 位作者 万汇涓 叶静 龙霞 房家智 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期402-405,共4页

目的:探讨肝损伤微环境在脐血来源的细胞转化为类肝细胞中的作用。方法:采用双室培养法将分离后的人脐血单个核细胞(mononuclearcells,MNC)与小鼠损伤肝脏共培养;分别采用细胞化学染色、反转录-聚合酶链反应(reversetranscriptionpolyme... 目的:探讨肝损伤微环境在脐血来源的细胞转化为类肝细胞中的作用。方法:采用双室培养法将分离后的人脐血单个核细胞(mononuclearcells,MNC)与小鼠损伤肝脏共培养;分别采用细胞化学染色、反转录-聚合酶链反应(reversetranscriptionpolymerasechainreaction,RT-PCR)和基因序列分析方法对培养的细胞进行检测,以获取人脐血MNC向类肝细胞转化的相关信息。结果:在与小鼠损伤肝脏共培养72h的人脐血MNC中发现大量过碘酸-Schiff染色阳性细胞;RT-PCR显示,与小鼠损伤肝脏共培养48h和72h后的人脐血MNC中含有肝细胞标志物人清蛋白(humanalbumin,hALB)和人哺乳类动物转录因子-4(hGATA-4)mRNA表达阳性细胞,并通过序列分析确认所得到的hALB和hGATA-4目标片段核苷酸序列与Gene-Bank中的参考序列相吻合,而人脐血MNC与正常小鼠肝脏共培养组、单独培养的人脐血MNC组以及小鼠肝脏细胞的同类对比试验均呈阴性结果。结论:在模拟的肝损伤微环境中,人脐血来源的细胞具有向类肝细胞转化的趋向。 展开更多

关键词 胎血 单核细胞 肝损伤 肝细胞 共同培养

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Notch1胞内段在鼻咽癌组织及鼻咽癌细胞株中的表达研究 被引量：6

4

作者 张芳婷 万汇涓 +4 位作者 李明华 刘晓翌 尹美珺 叶静 于洁 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第24期2782-2784,共3页

目的探讨Notch1胞内段(NIC)在非角化性鼻咽癌组织和细胞株中的表达。方法采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组化染色方法对鼻咽癌标本及不同分化程度鼻咽癌细胞株进行检测。结果 RT-PCR检测显示不同鼻咽癌细胞株中NIC基因均有表达,... 目的探讨Notch1胞内段(NIC)在非角化性鼻咽癌组织和细胞株中的表达。方法采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组化染色方法对鼻咽癌标本及不同分化程度鼻咽癌细胞株进行检测。结果 RT-PCR检测显示不同鼻咽癌细胞株中NIC基因均有表达,但分化程度高的CNE1细胞株表达最明显;同期进行的免疫组化染色结果与之相似;对鼻咽癌标本的免疫组化染色结果显示:鼻咽癌组织中NIC的表达高于鼻咽慢性黏膜炎症组织(P=0.005),而且NIC的表达强度与细胞分化程度密切相关(P<0.05),与患者性别、年龄无相关性(P>0.05)。另外,在未分化型鼻咽癌中,癌巢内几乎无阳性表达,淋巴细胞阳性表达多;而在分化型鼻咽癌中癌细胞阳性表达明显,可见于胞膜、胞质及胞核。结论 Notch信号系统参与鼻咽癌的发生,其中Notch1的表达与鼻咽癌的分化程度相关。 展开更多

关键词 非角化性鼻咽癌 Notch1胞内段 免疫组化染色 反转录聚合酶链反应

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小鼠生精细胞体外长期培养及超微结构分析 被引量：2

5

作者 于洁 叶静 +4 位作者 张芳婷 万汇涓 尹美珺 房家智 蔡志明 《中国全科医学》 CAS CSCD 2006年第20期1689-1691,共3页

目的初步探讨新生小鼠睾丸组织中生精细胞在体外培养条件下的增殖分化条件,建立有效的生精细胞体外成熟模型。方法用酶法和Percoll不连续密度梯度法分离纯化新生小鼠睾丸生精细胞,获取富精原细胞层,采用自制小鼠睾丸组织培养液对分离纯... 目的初步探讨新生小鼠睾丸组织中生精细胞在体外培养条件下的增殖分化条件,建立有效的生精细胞体外成熟模型。方法用酶法和Percoll不连续密度梯度法分离纯化新生小鼠睾丸生精细胞,获取富精原细胞层,采用自制小鼠睾丸组织培养液对分离纯化后的细胞进行体外培养。用电子显微镜观察培养的细胞超微结构。结果新生小鼠生精细胞在用成年小鼠睾丸组织提取液配制的培养基中存活达194d。电子显微镜观察可见,培养后的细胞中含有精子细胞顶体样结构。结论采用小鼠睾丸组织制备的培养液培养的小鼠生精细胞可体外长期培养并显示出一定的分化趋势。 展开更多

关键词 生精细胞 体外培养 精子细胞 顶体 超微结构

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复方甘草甜素脂质体干预大鼠非酒精性脂肪性肝炎的疗效观察 被引量：2

6

作者 王慧超 叶红军 +3 位作者 韦始亮 刘晓翌 万汇涓 杜意平 《临床肝胆病杂志》 CAS 2008年第3期199-201,共3页

目的观察复方甘草甜素脂质体对大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的干预作用。方法SD雄性大鼠35只随机分为4组,模型组、复方甘草甜素对照组和复方甘草甜素脂质体治疗组各10只,给予高脂饲料喂养,另设5只普通饲料喂养大鼠作为正常组。8周后开... 目的观察复方甘草甜素脂质体对大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的干预作用。方法SD雄性大鼠35只随机分为4组,模型组、复方甘草甜素对照组和复方甘草甜素脂质体治疗组各10只,给予高脂饲料喂养,另设5只普通饲料喂养大鼠作为正常组。8周后开始腹腔内注射药物干预,16周后处死全部实验大鼠。全自动生化分析仪检测血清ALT、AST及GGT水平,参照2006年2月份的NAFLD诊疗指南中脂肪肝分度和炎症分级(NASH-F(0-4)G(0-3))的组织病理学标准进行量化计分。结果与模型组相比,治疗组血清AST水平明显下降(P<0.05),血清GGT水平与肝组织炎症计分均显著下降(P<0.01);与对照组比较,治疗组肝组织炎症计分及血清GGT水平均显著降低(P>0.01)。结论复方甘草甜素脂质体对高脂饮食诱发的大鼠脂肪性肝炎有一定的防治作用。 展开更多

关键词 非酒精性脂肪性肝炎 复方甘草甜素 脂质体 高脂饮食

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成人睾丸组织在裸鼠体内的存活情况研究 被引量：1

7

作者 万汇涓 于洁 +4 位作者 叶静 张芳婷 尹美珺 房家智 蔡志明 《中国全科医学》 CAS CSCD 2006年第20期1687-1689,共3页

目的以成人睾丸组织为供体,免疫缺陷小鼠为受体,研究成人睾丸组织中生精细胞异种移植后的存活及变化情况。方法将成人正常睾丸组织植入去势裸鼠背部,于移植后110d取出移植物,进行组织形态学观察。结果在一例移植前显示非正常生精上皮结... 目的以成人睾丸组织为供体,免疫缺陷小鼠为受体,研究成人睾丸组织中生精细胞异种移植后的存活及变化情况。方法将成人正常睾丸组织植入去势裸鼠背部,于移植后110d取出移植物,进行组织形态学观察。结果在一例移植前显示非正常生精上皮结构标本的移植物中,大多数生精小管中只含有Sertoli细胞,而另一例移植前显示出正常生精上皮结构的标本,在移植到裸鼠背部110d后,仍然观察到圆形和长形精子细胞存在。结论将成人睾丸组织移植到免疫缺陷小鼠体内,110d后仍观察到有生精细胞的存活。 展开更多

关键词 成人睾丸组织 移植 异位 移植 异种 免疫缺陷 小鼠

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双调蛋白在人体子宫内膜组织中的表达特征 被引量：1

8

作者 桂耀庭 张键荣 +1 位作者 梁婉青 蔡志明 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期241-244,共4页

目的:研究双调蛋白在人体子宫内膜组织中的表达特征。方法:取增殖期和分泌期的人体子宫内膜,采用实时定量RT-PCR方法,检测双调蛋白mRNA在子宫内膜增殖期和分泌期的表达差异;采用原位杂交和免疫组织化学的方法,从基因和蛋白水平检测双调... 目的:研究双调蛋白在人体子宫内膜组织中的表达特征。方法:取增殖期和分泌期的人体子宫内膜,采用实时定量RT-PCR方法,检测双调蛋白mRNA在子宫内膜增殖期和分泌期的表达差异;采用原位杂交和免疫组织化学的方法,从基因和蛋白水平检测双调蛋白在人体子宫内膜组织中的表达特征。结果:定量RT-PCR结果显示,双调蛋白mRNA在增殖期和分泌期的子宫内膜均有表达,在分泌期其表达量显著升高,是增殖期的32倍。原位杂交和免疫组织化学结果显示,双调蛋白主要分布于子宫内膜腺体,定位于细胞浆内;双调蛋白mRNA在增殖期和分泌期子宫内膜的表达分别为0.54±0.22和2.96±0.47(P<0.01);双调蛋白在增殖期和分泌期子宫内膜的表达分别为0.77±0.47和2.60±0.43(P<0.01)。双调蛋白在分泌期子宫内膜中的表达显著升高,与荧光定量RT-PCR分析的结果相符。结论:双调蛋白在子宫内膜分泌期的表达显著增加,提示该蛋白可能与子宫内膜细胞分化或胚胎着床有关。 展开更多

关键词 双调蛋白 子宫内膜 逆转录聚合酶链反应 原位杂交 免疫组织化学

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体外诱导人脐血CD34^+细胞向肝细胞的分化 被引量：1

9

作者 张芳婷 叶静 +4 位作者 万汇涓 龙霞 聂李平 于洁 房家智 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期143-146,共4页

目的探讨在体外培养条件下人脐血CD34+细胞向肝细胞的分化。方法用磁性细胞分选试剂盒(MACS)分离出CD34+细胞后在含50 mL/L FBS,1×ITS,4.7 mg/L亚油酸,10-4mol/L 2-磷酸抗坏血酸的低糖型DMEM中培养,并以FGF4(100μg/L)、HGF(20μg... 目的探讨在体外培养条件下人脐血CD34+细胞向肝细胞的分化。方法用磁性细胞分选试剂盒(MACS)分离出CD34+细胞后在含50 mL/L FBS,1×ITS,4.7 mg/L亚油酸,10-4mol/L 2-磷酸抗坏血酸的低糖型DMEM中培养,并以FGF4(100μg/L)、HGF(20μg/L)进行诱导。分别于生长因子刺激前和刺激8、16 d时留取细胞。通过RT-PCR对ALB、AFP、GATA-4等mRNA的表达水平进行检测;用免疫细胞化学染色检测ALB蛋白的表达,并收集培养液测定ALB的质量浓度。结果流式细胞仪检测结果显示CD34+细胞的平均分离纯度>90%,达到分离要求。RT-PCR检测到诱导后的CD34+细胞表达ALB、AFP、GATA4 mRNA。免疫细胞化学染色可见诱导16 d的CD34+细胞出现ALB阳性表达细胞,ELISA检测表明诱导组8、16 d培养液中的ALB质量浓度明显增高,与诱导前和未诱导组相比均有显著差异(P<0.01)。结论在体外培养条件下,脐血CD34+造血干细胞可分化为表达白蛋白的类肝细胞。 展开更多

关键词 脐血CD34^+细胞 肝细胞 分化

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人脐血细胞移植对高血糖模型小鼠的治疗作用 被引量：1

10

作者 张芳婷 万汇涓 +4 位作者 叶静 房家智 尹美珺 黄春桥 于洁 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第16期1492-1494,共3页

目的探讨尾静脉移植人脐血细胞对糖尿病模型小鼠血糖的影响。方法选择60只昆明小白鼠,随机抽取5只作为对照组,其余55只采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法制备糖尿病鼠模型。成模后将小鼠随机分成移植组(26只)和糖尿病组(12只)。将分离... 目的探讨尾静脉移植人脐血细胞对糖尿病模型小鼠血糖的影响。方法选择60只昆明小白鼠,随机抽取5只作为对照组,其余55只采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法制备糖尿病鼠模型。成模后将小鼠随机分成移植组(26只)和糖尿病组(12只)。将分离的人脐血单个核细胞于对数增长期用PKH26标记后,以2×106/ml经尾静脉注射入移植组小鼠体内。于注射后第4天和第14天观察3组小鼠的血糖和胰岛素水平,并用流式细胞仪和荧光显微镜观察PKH26标记的人脐血单个核细胞在体内的分布。结果人脐血单个核细胞植入第4天,移植组小鼠血糖和胰岛素水平与糖尿病组、对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);移植第14天移植组小鼠血糖水平及胰岛素水平与糖尿病组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。流式细胞检测发现移植第4天的糖尿病小鼠的胰、脾、肝、骨髓组织内均可见PKH26+细胞,而移植第14天上述各部位未发现PKH26+细胞,荧光显微镜观察上述部位的冷冻切片结果也支持这一结果。结论将人脐血细胞移植到未用免疫抑制剂的糖尿病小鼠体内可存活,并可以在一定时间内降低糖尿病小鼠的血糖水平。 展开更多

关键词 脐血干细胞移植 高血糖小鼠 血糖

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SGR4和GFRa-1基因在小鼠睾丸移植物中的表达 被引量：1

11

作者 肖琴 于洁 +5 位作者 龙霞 万汇涓 叶静 张芳婷 尹美珺 房家智 《中国全科医学》 CAS CSCD 2008年第24期2219-2222,共4页

目的检测小鼠睾丸异体异位移植物中SGR4和GFRa-1基因,对采用该动物模型进行睾丸组织移植在生殖医学中应用的可行性进行评估。方法以新生1～2 d小鼠睾丸组织为供体,雄性去势免疫缺陷小鼠为受体进行组织移植;在移植后不同时间段(分为3 d、... 目的检测小鼠睾丸异体异位移植物中SGR4和GFRa-1基因,对采用该动物模型进行睾丸组织移植在生殖医学中应用的可行性进行评估。方法以新生1～2 d小鼠睾丸组织为供体,雄性去势免疫缺陷小鼠为受体进行组织移植;在移植后不同时间段(分为3 d、1～10周共11个组)取出移植物,采用RT-PCR法对移植物中生精阶段特异性基因SGR4和GFRa-1进行检测;分析2种基因在精子发生不同阶段出现的时间及表达情况,并与相应各时期正常小鼠睾丸中的基因表达相比较;同时进行组织形态学观察,对比各种基因出现的时间与小鼠睾丸发育周期的吻合程度。结果在11个时间段取出的移植物中,GFRa-1在出生3 d就开始表达,表达持续恒定;SRG4在出生2周内的小鼠睾丸中呈低表达,直至出生3周,SRG4基因在小鼠睾丸中开始大量表达,以后表达持续恒定在高水平。2种基因表达趋势与正常昆明小鼠睾丸中的表达基本相同,并与小鼠发育周期基本吻合。结论将新生小鼠睾丸组织移植到免疫缺陷小鼠体内后,生精细胞的发育在组织形态和SGR4、GFRa-1基因出现的时间上与正常小鼠相似。 展开更多

关键词 睾丸 移植物 生精阶段特异性基因 SGR4 GFRa-1

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细胞因子短期扩增对造血干／祖细胞黏附和迁移能力的影响 被引量：1

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作者 区文超 鲁树坤 +4 位作者 张芳婷 张立兵 聂李平 周小莹 谭孟群 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期357-360,共4页

目的:探讨干细胞因子(SCF)+白细胞介素-6(IL-6)短期扩增对CD34+造血干/祖细胞黏附和迁移能力的影响。方法:用密度剃度离心的方法分离脐血CD34+细胞,经SCF和IL-6孵育48 h,用CCK-8方法检测CD34+细胞增殖能力;用流式细胞仪检测处理前后的CD... 目的:探讨干细胞因子(SCF)+白细胞介素-6(IL-6)短期扩增对CD34+造血干/祖细胞黏附和迁移能力的影响。方法:用密度剃度离心的方法分离脐血CD34+细胞,经SCF和IL-6孵育48 h,用CCK-8方法检测CD34+细胞增殖能力;用流式细胞仪检测处理前后的CD49d(VLA-4)、CD11 a(LFA-1)、CD62L(L-selectin)及CD184(CXCR4)的表达。用纤连蛋白(FN)包被96孔板,检测经或未经因子扩增的CD34+细胞的黏附能力。扩增的CD34+细胞悬浮于transwell培养板的上层,下层添加基质细胞衍生因子(SDF-1),流式细胞仪检测迁移细胞数,计算迁移率。结果:经SCF+IL-6处理48h后CD34+细胞扩增近3倍;表达CD49d、CD11 a、CD62L及CD184的CD34+细胞的百分数分别由原来的26.34%±5.37%、17.63%±4.57%、46.38%±6.61%和9.58%±1.56%增加到65.67%±8.72%、56.67%±6.34%、84.76%±9.57%和19.32%±3.64%(P<0.01)。扩增后的CD34+细胞对FN的黏附能力及在SDF-1诱导下的迁移作用都显著增强(P<0.01)。结论:SCF+IL-6短期扩增CD34+造血干/祖细胞显著增加细胞的黏附能力,增加SDF-1诱导的迁移作用,可能是SCF+IL-6促进归巢的主要机制之一。 展开更多

关键词 造血干/祖细胞 归巢 细胞黏附分子 细胞运动

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肿瘤基因组学与精准医学 被引量：2

13

作者 桂耀庭 《医药导报》 CAS 2016年第9期911-914,共4页

随着人类基因组计划的完成、肿瘤基因组计划的实施和一系列靶向药物的出现,肿瘤的诊断与治疗已开始迈入精准医学的时代。该文简要回顾了从人类基因组计划到精准医学计划的历史、肿瘤基因组学和靶向治疗的主要成就,并提出了未来肿瘤研究... 随着人类基因组计划的完成、肿瘤基因组计划的实施和一系列靶向药物的出现,肿瘤的诊断与治疗已开始迈入精准医学的时代。该文简要回顾了从人类基因组计划到精准医学计划的历史、肿瘤基因组学和靶向治疗的主要成就,并提出了未来肿瘤研究的方向。 展开更多

关键词 肿瘤基因组学 精准医学 人类基因组计划 肿瘤基因组计划

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新生小鼠睾丸组织异体异位移植物中精子形态及功能的研究

14

作者 张芳婷 于洁 +4 位作者 蔡志明 房家智 万汇涓 叶静 尹美珺 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期220-223,共4页

目的采用卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)技术探讨新生小鼠睾丸组织异体异位移植到裸鼠体内后所生成精子的受精能力。方法将含有原始生精细胞的新生1-2 d小鼠睾丸组织异体异位移植到BALB/c-nu/nu免疫缺陷小鼠背部皮下。8周后取出移植物,... 目的采用卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)技术探讨新生小鼠睾丸组织异体异位移植到裸鼠体内后所生成精子的受精能力。方法将含有原始生精细胞的新生1-2 d小鼠睾丸组织异体异位移植到BALB/c-nu/nu免疫缺陷小鼠背部皮下。8周后取出移植物,通过常规染色和电镜技术对生精小管中生精细胞组成和形态进行观察;以薄层明胶水解法检测精子顶体蛋白酶活性;采用ISCI技术检测移植物中具有成熟形态精子的受精能力。结果移植物的HE染色发现,新生小鼠睾丸组织在裸鼠体内已启动并进行精子发生过程,生精小管中含有包括精子在内的所有类型生精细胞;移植物组织经处理后,可计数到具有镰刀头状的长尾精子约1×103个/mg移植物;透射电镜标本中观察到的精原细胞和精母细胞均具有正常超微结构;薄层明胶水解法检测可观察到顶体蛋白酶呈阳性反应的精子;ICSI结果显示,单纯ICSI处理组与ICSI+电激活组均有受精和卵裂现象发生。结论仅含有原始生精细胞的新生小鼠睾丸组织在异体异位移植到裸鼠体内后,可以产生形态正常并具有受精能力的精子。 展开更多

关键词 睾丸组织 异体异位移植 精子 卵胞浆内单精子显微注射 新生小鼠

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术前检测Cyclin A、E阳性细胞指导胃癌淋巴结清扫术

15

作者 韦伟 朱立元 +4 位作者 于志强 李富荣 吕国庆 贾少微 尹为华 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期449-451,共3页

目的　探讨以细胞周期蛋白A、E (CyclinA、E)阳性细胞比例 (PCP)术前判断和术中指导胃癌淋巴结清扫范围的可行性。方法　 2 9例行“胃癌根治切除术 (D3 )”患者 ,术前自胃镜取病灶活检组织 ,术后自标本获取正常胃粘膜、原发癌肿及淋巴... 目的　探讨以细胞周期蛋白A、E (CyclinA、E)阳性细胞比例 (PCP)术前判断和术中指导胃癌淋巴结清扫范围的可行性。方法　 2 9例行“胃癌根治切除术 (D3 )”患者 ,术前自胃镜取病灶活检组织 ,术后自标本获取正常胃粘膜、原发癌肿及淋巴结组织进行CyclinA、E阳性细胞流式细胞仪检测。无或仅有Ⅰ站淋巴结转移者为实验A组 ,有Ⅱ站或 (和 )Ⅲ站淋巴结转移者为B组。结果　① 2 7例术前与术后获得的原发癌灶组织中CyclinA、E的PCP基本一致。其中实验A组 10例 ,B组 17例。②原发癌灶CyclinE的PCP大于 2 0 0 %者 ,A组为 2 0 0 % (2 / 10 ) ,B组为 76 5 % (13/ 17) ,两组间差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。转移淋巴结的CyclinE明显高于对照组 ;CyclinA的PCP增高改变主要发生于原发癌灶。结论　CyclinE与胃癌进展和淋巴结转移明显相关 ;术前检测病灶活检组织中的CyclinE阳性细胞比例 ,可作为判断淋巴结转移状态的生物学指标 ,指导术中淋巴结清扫范围。 展开更多

关键词 术前检测 CYCLINA E阳性细胞 胃癌 淋巴结清扫术 淋巴转移 细胞周期蛋白

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缰核神经细胞表达的电压门控性离子通道的特性

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作者 孙晓霞 夏映红 +2 位作者 房家智 张学新 王绍 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期91-93,共3页

目的 :探讨缰核神经细胞离子通道的特性。方法 :采用膜片钳技术的全细胞记录方法 ,通过急性分离的大鼠乳鼠缰核神经元观察缰核神经细胞离子通道的特性。结果 :实验在电压钳位 1 0 m V阶跃去极化的条件下分别引导出内向钠电流和两种外向... 目的 :探讨缰核神经细胞离子通道的特性。方法 :采用膜片钳技术的全细胞记录方法 ,通过急性分离的大鼠乳鼠缰核神经元观察缰核神经细胞离子通道的特性。结果 :实验在电压钳位 1 0 m V阶跃去极化的条件下分别引导出内向钠电流和两种外向钾电流。结论 :内侧缰核记录的 K+通道以快速瞬时 K+通道为主 ,外侧缰核以延迟 K+通道为主 ,该结果与内、外侧缰核的组织结构和功能上的差异有关。 展开更多

关键词 钠通道/生理学 钾通道/生理学 神经元/细胞学

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鼻咽癌细胞中ezrin基因启动子上游序列转录调控特性的研究

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作者 郭秀璞 于洁 高书颖 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期8-11,共4页

目的:研究鼻咽癌细胞中ezrin基因启动子上游序列的转录调控特性。方法:构建一系列携带ezrin基因-1541/-706序列的报告基因表达载体,ezrin基因-1541/-706序列以正向和反向分别连接至不含启动子的报告基因上游、ezrin启动子上游、SV40启... 目的:研究鼻咽癌细胞中ezrin基因启动子上游序列的转录调控特性。方法:构建一系列携带ezrin基因-1541/-706序列的报告基因表达载体,ezrin基因-1541/-706序列以正向和反向分别连接至不含启动子的报告基因上游、ezrin启动子上游、SV40启动子上游、ezrin启动子或SV40启动子控制的报告基因下游,将质粒转染CNE2细胞,检测荧光素酶活性。结果:CNE2细胞中,当-1541/-706序列正向位于报告基因上游时表现出启动子活性,其转录激活作用约为ezrin启动子的50%;反向连接时无启动子活性。而且,当-1541/-706序列正向位于ezrin启动子或SV40启动子上游时,显著提高荧光素酶表达;当反向位于启动子下游、正向或反向位于启动子控制的报告基因下游时,转录增强作用消失。结论:CNE2细胞中ezrin基因启动子上游序列具有转录激活和转录增强作用,这种作用具有DNA序列位置和方向依赖性。 展开更多

关键词 鼻咽癌 EZRIN基因 双荧光素酶报告基因分析系统 转录调控

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骨保护素基因单核苷酸多态性与类风湿关节炎发病的相关性研究

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作者 蔡月明 龙霞 +5 位作者 王庆文 王菁 吴志成 王伟光 曾慧萍 张璐 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1204-1208,共5页

目的：探讨骨保护素（OPG）基因163A/G及245T/G单核苷酸多态性（SNPs）与我国汉族人群类风湿关节炎（ RA）发病的相关性。方法：采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（ PCR-RFLP）技术检测我国南方汉族正常人群及RA患者的OPG 163A/G... 目的：探讨骨保护素（OPG）基因163A/G及245T/G单核苷酸多态性（SNPs）与我国汉族人群类风湿关节炎（ RA）发病的相关性。方法：采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（ PCR-RFLP）技术检测我国南方汉族正常人群及RA患者的OPG 163A/G和245T/G 2个SNP位点；进行Hardy-Weinberg平衡检验；计算基因型和等位基因频率，及这2个位点的连锁关系，并分析这2个SNP位点与RA的关系。结果：所研究基因分布符合Har-dy-Weinberg平衡，163A/G位点基因型AA、AG、GG分布频率在2组比较有显著差异（ P＜0．05）；等位基因A、G分布比较在2组有显著差异（P＜0．05），携带163GG基因型者发生RA的危险性是非携带者的1．219倍（OR＝1.219，95％CI：1.066～2．339， P＜0．05）。但245T/G位点各基因型及等位基因频率在2组中均未见差异（P＞0.05）。结论：OPG基因163A/G SNP可能与我国汉族人群RA发病相关，携带G等位基因可能是发病的危险因素。 展开更多

关键词 单核苷酸多态性 关节炎 类风湿 骨保护素

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CBX3在肺腺癌中的表达、预后相关性及对癌细胞生物学行为的影响

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作者 侯清华 钟燕凤 +2 位作者 刘林壮 吴柳盛 刘继先 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期152-160,共9页

背景与目的:作为异染色质重要组分的染色体盒3(chromobox 3,CBX3)参与多种癌症的发生、发展过程,而CBX3基因在肺腺癌中的表达情况和作用尚不清楚。探讨CBX3在肺腺癌中的表达与肺腺癌患者预后的关系,并研究CBX3对A549肺腺癌细胞增殖、迁... 背景与目的:作为异染色质重要组分的染色体盒3(chromobox 3,CBX3)参与多种癌症的发生、发展过程,而CBX3基因在肺腺癌中的表达情况和作用尚不清楚。探讨CBX3在肺腺癌中的表达与肺腺癌患者预后的关系,并研究CBX3对A549肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:下载癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)中的肺腺癌转录组数据和对应的临床数据,应用R软件分析CBX3在肺腺癌中的表达差异和免疫浸润相关性,采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线和Kaplan-Meier分析CBX3在肺腺癌中的预后意义;收集北京大学深圳医院智能化生物样本库-80℃新鲜冻存的2020年8月—2021年1月行肺癌姑息性切除术或根治性切除术的肺腺癌样本20例(已获得知情同意),采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测20例冻存的肺腺癌组织及配对正常肺组织中CBX3的表达;应用小干扰RNA(siRNA)转染A549细胞以沉默CBX3的表达,并根据siRNA转染的类型将A549细胞分为沉默组(si-CBX3组)和阴性对照组(si-NC组),通过用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)实验、克隆形成实验、划痕实验和transwell实验分别研究CBX3对A549肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果:基于TCGA肺腺癌数据的差异分析与采集的肺腺样本RTFQ-PCR实验的结果显示,CBX3在肺腺癌中呈显著的高表达,差异有统计学意义(P<0.05);辅助型T细胞2的浸润与CBX3表达呈正相关,相关系数(r)=0.437,而肥大细胞(r=-0.444)、嗜酸性粒细胞(r=-0.380)等免疫细胞与CBX3表达呈负相关;ROC曲线下面积(area under curve,AUC)值为0.912,表明CBX3对肺腺癌具有很好的诊断价值,Kaplan-Meier分析结果显示,CBX3高表达组生存期更短,提示预后较差;沉默CBX3在A549细胞中的表达后,CCK-8实验和克隆形成实验结果表明,A549细胞的增殖能力显著降低(P<0.01);划痕实验结果表明沉默后的A549细胞的迁移率为(22.68±3.44)%,较阴性对照组迁移能力明显降低(P<0.05);Transwell实验结果表明A549细胞的相对侵袭率为(53.94±5.39)%,侵袭能力显著降低(P<0.01)。结论:CBX3在肺腺癌中显著高表达并提示肺腺癌预后不良,可作为肺腺癌的预后标志物,且CBX3的高表达促进了A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多

关键词 CBX3 肺腺癌 免疫浸润 预后 细胞功能实验

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