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2012年-2013年我国养猪重点省份猪流感的血清学调查 被引量:15
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作者 刘丽萍 乔传玲 +7 位作者 杨焕良 隋金钰 王昌建 陈艳 邱立新 唐小明 何世成 陈化兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期431-434,共4页
为进一步了解我国猪流感病毒(SIV)的流行现状,本研究于2012年10月至2013年12月从全国养猪重点省份的养殖场、屠宰场采集猪血清样品共计5 856份,以类禽型H1N1(EA H1N1)、2009甲型H1N1(pdm/09 H1N1)和H3N2亚型SIV 抗原作为标准抗... 为进一步了解我国猪流感病毒(SIV)的流行现状,本研究于2012年10月至2013年12月从全国养猪重点省份的养殖场、屠宰场采集猪血清样品共计5 856份,以类禽型H1N1(EA H1N1)、2009甲型H1N1(pdm/09 H1N1)和H3N2亚型SIV 抗原作为标准抗原,采用血凝抑制(HI)试验方法进行抗体检测。结果显示,我国猪群中SIV抗体阳性率分别为55.52 %、13.92 %和2.00 %,其中EA H1N1 SIV抗体平均阳性率高于其它亚型。2013年1月和3月份,又集中在广东和湖南两个省份的部分养殖场和屠宰场采集猪血清样品共计9 910份,采用ELISA进行抗体检测。结果共检出阳性血清3 518份,平均阳性率分别为36.14 %和34.89 %。本实验结果表明2012年~2013年我国猪群中SIV感染比较普遍。 展开更多
关键词 猪流感 血清学抗体 血凝抑制 ELISA
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防治禽流感复方中药的安全性实验 被引量:1
2
作者 李艳华 胡守萍 +4 位作者 闫清波 田国彬 付德霞 佟恒敏 于康震 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2005年第7期30-31,共2页
关键词 禽流感 复方中药 安全性 急性毒性 病理变化 体重
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动物流感病毒与人流感流行株起源变异关系的探讨 被引量:5
3
作者 包红梅 陈化兰 《畜牧兽医科技信息》 2004年第3期4-6,共3页
关键词 动物流感病毒 人流感流行株 起源 变异
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中国猪源H5N1和H9N2亚型流感病毒的分离鉴定 被引量:106
4
作者 李海燕 于康震 +5 位作者 杨焕良 辛晓光 陈君彦 赵朴 毕英佐 陈化兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期1-6,共6页
猪是禽流感病毒"禽_猪_人"传播链中重要的中间宿主,了解猪流感的疫情动态将为动物流感及人流感的疾病预测及防制提供重要依据。1999~2001年间进行的血清学和病毒学监测发现我国猪群存在大范围的H1和H3亚型猪流感感染(李海... 猪是禽流感病毒"禽_猪_人"传播链中重要的中间宿主,了解猪流感的疫情动态将为动物流感及人流感的疾病预测及防制提供重要依据。1999~2001年间进行的血清学和病毒学监测发现我国猪群存在大范围的H1和H3亚型猪流感感染(李海燕等,2002)。2002~2003年,我们进一步对来自全国14个省市的1936份血清进行了H9亚型猪流感的检测,同时在广东、福建等省进行了H5亚型猪流感的检测。2002年辽宁、广东、山东及重庆猪血清中出现H9亚型流感抗体,阳性率分别为7.3%、6.8%、5.1%和1.6%。2003年采集的猪血清H9亚型流感抗体均为阴性,同时发现广东、福建两省2003年出现H5亚型流感阳性猪群,阳性率分别为4.7%和8.2%。从2001~2003年收集和送检的样品中分离鉴定了6株H9N2亚型和2株H5N1亚型猪流感病毒,部分序列分析发现H9和H5亚型猪流感病毒均与我国分离的禽流感病毒高度同源。本研究进一步确证了我国猪群中存在H9N2亚型流感病毒,并且首次发现我国猪群已出现H5N1亚型流感病毒,为人类流感及动物流感的防制敲响了警钟。对这两个亚型流感病毒所具有的公共卫生和兽医公共卫生危害性应予以高度重视。 展开更多
关键词 猪流感病毒 H5亚型 H9亚型 病毒分离 病毒鉴定 血清学 病毒学
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猪流感病毒H1N1、H1N2和H3N2亚型多重RT-PCR诊断方法的建立 被引量:23
5
作者 杨焕良 乔传玲 +3 位作者 陈艳 辛晓光 李一经 陈化兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期714-718,共5页
对我国分离到的猪流感病毒和GenBank数据库中已有的猪流感病毒H1N1、H1N2和H3N2亚型毒株的HA、NA基因核苷酸序列进行分析,分别选出各个病毒亚型HA和NA基因中高度保守且特异的核苷酸区域,设计扩增猪流感病毒H1和H3、N1和N2亚型的2套多重... 对我国分离到的猪流感病毒和GenBank数据库中已有的猪流感病毒H1N1、H1N2和H3N2亚型毒株的HA、NA基因核苷酸序列进行分析,分别选出各个病毒亚型HA和NA基因中高度保守且特异的核苷酸区域,设计扩增猪流感病毒H1和H3、N1和N2亚型的2套多重PCR特异性引物,建立了猪流感H1N1、H1N2和H3N2亚型病毒多重RT-PCR诊断方法。采用该方法对H1N1、H1N2、H3N2亚型猪流感病毒标准参考株进行RT-PCR检测,结果均呈阳性,对扩增得到的片段进行序列测定和BLAST比较,表明为目的基因片段。其它几种常见猪病病毒和其它亚型猪流感病毒的RT-PCR扩增结果都呈阴性。对107EID50/0.1mL病毒进行稀释,提取RNA进行敏感性试验,RT-PCR最少可检测到102EID50的病毒量核酸。对40份阳性临床样品的检测结果是H1N1、H1N2和H3N2亚型分别为16份、1份和20份,其它3份样品同时含有H1N1和H3N2亚型猪流感病毒,和鸡胚分离病毒结果100%一致。试验证明建立的猪流感病毒H1N1、H1N2和H3N2亚型多重RT-PCR诊断方法是一种特异敏感的诊断方法,可用于临床样品的早期快速诊断和分型。 展开更多
关键词 猪流感 病毒 HIN1 HIN2 H3N2 多重RT-PCR
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SYBR Green I荧光RT-PCR方法检测禽流感病毒 被引量:13
6
作者 刘丽玲 姜永萍 +2 位作者 王秀荣 陈化兰 魏萍 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1189-1193,共5页
为建立检测禽流感病毒(AIV)的SYBR Green I荧光RT-PCR方法,根据AIV的M基因保守区的核苷酸序列设计引物。用4株不同亚型的AIV感染MDCK细胞,收集感染6、12、24、48、72 h的病毒。另外采取169份鸡的泄殖腔拭子和咽喉拭子。对上述样品的M基... 为建立检测禽流感病毒(AIV)的SYBR Green I荧光RT-PCR方法,根据AIV的M基因保守区的核苷酸序列设计引物。用4株不同亚型的AIV感染MDCK细胞,收集感染6、12、24、48、72 h的病毒。另外采取169份鸡的泄殖腔拭子和咽喉拭子。对上述样品的M基因进行检测,试图建立快速检测AIV的SYBR Green I荧光RT-PCR方法,并与普通RT-PCR方法和传统的病毒滴定方法进行比较。结果表明:此次建立的检测AIV的SYBRGreen I荧光RT-PCR方法能检测到感染MDCK细胞后72 h的AIV,对169份泄殖腔拭子和咽喉拭子中的AIV检出率为5.33%(9/169),而普通RT-PCR方法检出率为6.51%(11/169),病毒滴定检出率为5.62(9/160)。对其他病毒(NDVI、BDVI、BV、VA)则未检测到,且整个检测过程只需4 h,表明该方法特异、准确、快速。 展开更多
关键词 禽流感病毒 SYBR Green RT—PCR RT—PCR 病毒滴定 检测
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H1N1亚型猪流感病毒中国分离株血凝素基因分子演化的研究 被引量:20
7
作者 陈君彦 李海燕 +3 位作者 申之义 陈化兰 于康震 毕英佐 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期13-17,共5页
对 2 0 0 1年中国华南及东北地区的 15株H1N1亚型猪流感病毒 (SIV)分离株的血凝素 (HA)基因进行了序列测定和分析 ,并绘制了进化树。研究结果表明 ,15株H1N1SIV和HA基因核苷酸全长为 1778bp ,共编码 5 6 6个氨基酸 ;而且 ,15株H1N1亚型... 对 2 0 0 1年中国华南及东北地区的 15株H1N1亚型猪流感病毒 (SIV)分离株的血凝素 (HA)基因进行了序列测定和分析 ,并绘制了进化树。研究结果表明 ,15株H1N1SIV和HA基因核苷酸全长为 1778bp ,共编码 5 6 6个氨基酸 ;而且 ,15株H1N1亚型SIV的HAI蛋白在 10、11、2 3、87、2 87位都存在高度保守的糖基化位点 ,此外 ,在 2 76位多了一个“_NTT_”糖基化位点 ,与参考毒株SW /IW / 93/ 0 1一致 ,这可能是近期H1N1亚型SIV的一个分子特征。本研究进一步发现 ,15株H1N1亚型SIV的HA基因切割位点氨基酸组成为IPSIQSR↓G ,具有非高致病力毒株分子特征 ;而其受体结合位点在HA蛋白上第 2 2 6位是Q ,第 2 2 8位是G ,可能具有感染禽的潜力。经同源性比较 ,15株H1N1亚型SIV的HA基因与古典型H1N1猪谱系中的WIS/ 4 75 4 / 94的同源性相对最高 ,核苷酸和氨基酸序列同源性分别达到 95 7%~ 96 1%和96 5 %~ 97 2 %。由同源性比较结果和进化树分析可见 。 展开更多
关键词 H1N1亚型 猪流感病毒 中国分离株 血凝素基因 分子演化 序列分析
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两株鸭源H6N2亚型禽流感病毒的序列分析及对鸡的致病性研究 被引量:16
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作者 丁晴微 邓国华 +7 位作者 施建忠 李印 崔鹏飞 齐瑛琳 于杨 崔佳莹 邱伯根 陈化兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期270-275,共6页
为了解鸭源H6N2亚型禽流感病毒(AIV)的生物学特性,本研究对两株鸭源H6N2亚型AIV[A/duck/Hubei/Sd061/2008(HB/061/08)和A/duck/Fujian/S2080/2009(FJ/080/09)]进行序列分析和致病性试验。序列分析显示:两株病毒的HA和NA基因均来源于我... 为了解鸭源H6N2亚型禽流感病毒(AIV)的生物学特性,本研究对两株鸭源H6N2亚型AIV[A/duck/Hubei/Sd061/2008(HB/061/08)和A/duck/Fujian/S2080/2009(FJ/080/09)]进行序列分析和致病性试验。序列分析显示:两株病毒的HA和NA基因均来源于我国近年流行的H6亚型病毒株,但是HB/061/08株的内部基因可能来源于H9、H5等其他亚型。与病毒株HB/061/08NP、PA、PB2基因的核苷酸同源性最高的病毒株为A/environment/Hunan/2-84/2007(H9N2);与M、PB1和NS基因的核苷酸同源性最高的病毒株分别为A/duck/Zhejiang/11/2000(H5N1)、A/chicken/Hebei/7/2008(H9N2)和A/chicken/Henan/L1/2008(H9N2)。两株病毒的抗原差异性较显著,相关系数为0.49;用106EID50病毒剂量感染4周龄SPF鸡,结果显示FJ/080/09株不能感染鸡,而HB/061/08株在鸡体内能够高效复制,并通过咽喉和泄殖腔持续排毒。鸡群感染后第3d采取脏器样品,在气管和肺部能够检测到病毒存在,部分脏器和器官的组织学观察显示存在一定程度的病理变化。以上数据表明,H6亚型AIV在跨越不同宿主感染的传播过程中,对新宿主适应能力的差异导致对其致病性的差异。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H6N2 基因组分析 抗原分析 致病性
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影响禽流感病毒致病性和传播的关键氨基酸位点的研究进展 被引量:21
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作者 徐晓龙 包红梅 +1 位作者 陈化兰 王秀荣 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期165-168,共4页
A型流感病毒根据其血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)的不同分为不同亚型,目前已鉴定出有17种HA亚型和10种NA亚型。禽流感(AvianInfluenza,AI)是由A型流感病毒引起的急性或慢性呼吸道传染病,
关键词 禽流感病毒 神经氨酸酶 致病性 慢性呼吸道传染病 A型流感病毒 酸位 传播 亚型
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禽流感、新城疫可目视化诊断蛋白芯片的制备及初步应用 被引量:14
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作者 石霖 王秀荣 +6 位作者 杨忠苹 陶启蒙 王煜 武嘉男 蔡冬冬 包红梅 陈化兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期60-64,共5页
本研究制备了可以同时鉴别诊断禽流感(AI)、新城疫(ND)2种禽病血清抗体的可视化蛋白芯片。以超速离心法和蔗糖密度梯度法分别纯化了2种病毒蛋白抗原,用点样缓冲液稀释后点于醛基修饰的片基上,制备蛋白芯片;将芯片与待检血清杂交后,再与... 本研究制备了可以同时鉴别诊断禽流感(AI)、新城疫(ND)2种禽病血清抗体的可视化蛋白芯片。以超速离心法和蔗糖密度梯度法分别纯化了2种病毒蛋白抗原,用点样缓冲液稀释后点于醛基修饰的片基上,制备蛋白芯片;将芯片与待检血清杂交后,再与胶体金标记的二抗杂交,银染显色后根据灰度值判定结果,从而建立了2种禽病的可视化蛋白芯片鉴别诊断方法。采用该方法对18份现地血清样品进行初步检测,结果显示该芯片可特异性的与相应的抗体杂交,无交叉反应,而且呈现较强的杂交信号,其信号灰度值在阳性血清浓度为50μg/mL~300μg/mL范围内成线性关系(Y=0.426X+4.225)。用该芯片方法和琼扩(AGP)抗体检测方法对18份现地样品进行符合率检测,结果表明该可视化蛋白芯片具有很好的特异性,并且检测灵敏度为是AGP方法的400倍以上。研究表明该方法可用于同步鉴别2种禽病,是一种有效的抗体检测新方法。 展开更多
关键词 禽流感 新城疫 可视化 诊断 蛋白芯片
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一株人源H1N1亚型猪流感病毒的进化分析与生物学特性研究 被引量:16
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作者 唐续 杨焕良 +8 位作者 鄢明华 李秀丽 陈艳 孟沙沙 尹航 辛晓光 步志高 乔传玲 陈化兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期270-273,336,共5页
为了解猪流感病毒(SIV)的变异情况,我们2009年11月从河北某养殖场采集呈流感症状的猪鼻拭子40份,接种10日龄SPF鸡胚,分离到一株猪流感病毒,通过RT-PCR和血凝抑制试验鉴定为H1N1亚型,命名为A/swine/Hebei/15/2009(H1N1),其全基因序列测... 为了解猪流感病毒(SIV)的变异情况,我们2009年11月从河北某养殖场采集呈流感症状的猪鼻拭子40份,接种10日龄SPF鸡胚,分离到一株猪流感病毒,通过RT-PCR和血凝抑制试验鉴定为H1N1亚型,命名为A/swine/Hebei/15/2009(H1N1),其全基因序列测定及同源性分析发现,8个基因片段均与2000年左右H1N1人流感病毒有较高的同源性。系统遗传演化显示,该病毒分离株是由2000年人源H1N1流感病毒A/Dunedin/2/2000(H1N1)进化而来。抗原性分析显示该株与甲型H1N1流感病毒和经典H1N1病毒株抗原性差异较大。对小鼠致病性试验表明该病毒株可以直接感染小鼠并导致小鼠轻微临床症状和组织病理学变化,但不致死小鼠,表现为低致病性。 展开更多
关键词 猪流感病毒 人源H1N1亚型 遗传演化分析 抗原性分析 致病性
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H1N1猪流感广东株血凝素基因的克隆与序列分析 被引量:7
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作者 胡永浩 姚学萍 +3 位作者 李海燕 赵有淑 杨焕良 陈化兰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期172-176,共5页
用RT- PCR方法扩增H1N1亚型猪流感病毒广东分离株 A/Swine/GuangDong/711/2001 HA基因,对其进行了克隆和测序。结果显示,HA基因全长 1 771 bp,共编码 579 个氨基酸。A/Swine/GuangDong/711/2001HA基因编码的氨基酸序列中有 8 个糖基化... 用RT- PCR方法扩增H1N1亚型猪流感病毒广东分离株 A/Swine/GuangDong/711/2001 HA基因,对其进行了克隆和测序。结果显示,HA基因全长 1 771 bp,共编码 579 个氨基酸。A/Swine/GuangDong/711/2001HA基因编码的氨基酸序列中有 8 个糖基化位点,5 个位于 HA1 基因的第 27、28、40、104 和 287 位点,3 个位于HA2基因的21、153和213位点。与H1N1亚型猪流感经典毒株比较后发现,血凝素糖基化位点并不是高度保守的。将A/Swine/GuangDong/711/2001与自GenBank读取的1918年人流感毒株 A/South Carolina/1/18、1991 年人流感毒株A/MD/12/91和1997年猪流感毒株 A/Swine/Wisconsin/238/97 等进行核苷酸同源性比较分析,A/Swine/GuangDong/711/2001与A/South Carolina/1/18、A/MD/12/91和 A/Swine/Wisconsin/238/97 等毒株的核苷酸同源性分别为 93. 9%、94. 7%和 93. 9%。从系统发生树来看, A/Swine/GuangDong/711/2001 与 A/SouthCarolina/1/18和A/Swine/Wisconsin/238/97的亲缘关系相近。 展开更多
关键词 猪流感病毒 HA基因 位点 毒株 广东株 l基因 序列分析 人流感 血凝素基因 亚型
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猪流感抗体间接ELISA检测方法的建立 被引量:20
13
作者 陈艳 辛晓光 +4 位作者 杨焕良 李婷 李海燕 乔传玲 陈化兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期308-311,共4页
猪流感病毒A/Swine/Fujian/668/2001(H3N2)株感染的鸡胚尿囊液,经差速离心后,再经蔗糖密度梯度离心,提纯、纯化的猪流感病毒经NP-40处理并反复冻融,作为猪流感间接ELISA抗原,确立了间接ELISA检测方法。对29份HI试验猪流感为阴性的血清... 猪流感病毒A/Swine/Fujian/668/2001(H3N2)株感染的鸡胚尿囊液,经差速离心后,再经蔗糖密度梯度离心,提纯、纯化的猪流感病毒经NP-40处理并反复冻融,作为猪流感间接ELISA抗原,确立了间接ELISA检测方法。对29份HI试验猪流感为阴性的血清进行了检测,经统计学分析,确定间接ELISA判定标准,被检血清OD_(490nm)值≥0.20判定为阳性。该方法对猪瘟等11种猪疫病阳性血清无交叉反应,批内和批间重复试验的吸收变异系数分别在3.34%~8.12%和6.2%~9.04%之间。与HI的符合率达到92.8%,经卡方检验(P<0.01)比HI试验敏感。为猪流感抗体检测提供了快速、准确、简便的方法。 展开更多
关键词 猪流感 猪流感病毒 间接ELISA
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A型流感病毒逃避免疫应答的策略 被引量:8
14
作者 赵朴 郑玉姝 +2 位作者 乔传玲 贾贝贝 刘兴友 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1137-1141,共5页
综述了IAV逃避抗病毒免疫策略的最新进展.A型流感病毒(IAV)感染是人和多种动物呼吸系统疾病的主要原因,然而不管是IAV引起的季节性流感暴发还是周期性的全球流感大流行,主要归因于IAV逃避宿主免疫反应的策略.越来越多的证据表明,IAV已... 综述了IAV逃避抗病毒免疫策略的最新进展.A型流感病毒(IAV)感染是人和多种动物呼吸系统疾病的主要原因,然而不管是IAV引起的季节性流感暴发还是周期性的全球流感大流行,主要归因于IAV逃避宿主免疫反应的策略.越来越多的证据表明,IAV已经进化出高超的策略克服宿主的抗病毒信号,如抗原变异和编码辅助蛋白(NS1和PB1-F2).深入理解IAV逃避宿主免疫的策略,有助于揭示IAV感染的机制和发现针对IAV的抗病毒药物的靶标. 展开更多
关键词 A犁流感病毒 免疫逃避 抗原变异 NS1 PB1-F2
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H7亚型禽流感病毒血凝素基因重组鸡痘病毒活载体疫苗免疫原性评估 被引量:7
15
作者 马文军 陈化兰 +3 位作者 于康震 张建林 田国彬 唐秀英 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期7-9,共3页
本研究以细胞感染_转染技术构建了一株表达H7亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)基因的重组鸡痘病毒rFPV_HA。以5×105PFU的rFPV_HA经翅下刺种免疫8周龄SPF鸡,免疫后第3周用100CID50的HA基因同源AIVA/ArfiStar/Eng_Q/983/79(H7N1)... 本研究以细胞感染_转染技术构建了一株表达H7亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)基因的重组鸡痘病毒rFPV_HA。以5×105PFU的rFPV_HA经翅下刺种免疫8周龄SPF鸡,免疫后第3周用100CID50的HA基因同源AIVA/ArfiStar/Eng_Q/983/79(H7N1)进行人工感染,1周后采集泄殖腔棉拭子进行病毒分离。免疫后第三周及攻毒后第1、2周对所有动物进行静脉采血,检测血凝抑制(HI)抗体和免疫沉淀(AGP)抗体。结果,攻毒前部分rFPV_HA免疫鸡可检测到HI抗体,但检测不到AGP抗体,野生型病毒(F017)接种组和空白对照组HI抗体和AGP抗体均为阴性。攻毒后rFPV_HA免疫组的HI抗体上升速度明显高于野生型病毒接种组和空白对照组。rFPV_HA免疫组有6/8的鸡为流感病毒分离阴性,野生型病毒接种组和空白对照组的试验鸡病毒分离全部为阳性。结果表明rFPV_HA可诱导鸡产生有效的免疫保护反应,阻止或降低消化道病毒排泄。rFPV_HA的成功构建为研制开发H7亚型禽流感活载体疫苗奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H7亚型 血凝素基因 重组鸡痘病毒 疫苗 免疫原性评估 免疫保护反应
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猪流感病毒M基因实时荧光定量PCR诊断方法的建立 被引量:21
16
作者 张春明 乔传玲 +4 位作者 陈艳 杨焕良 辛晓光 陈化兰 冉多良 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期805-810,共6页
根据猪流感病毒(SIV)M基因的保守序列,设计并合成一对特异性引物和TaqManMGB探针,建立了SIVM基因实时荧光定量PCR检测方法。使用含有M基因的重组质粒pMD-M作为标准品绘制标准曲线,其相关系数为0.999,检测结果表明:该方法的敏感性可达到1... 根据猪流感病毒(SIV)M基因的保守序列,设计并合成一对特异性引物和TaqManMGB探针,建立了SIVM基因实时荧光定量PCR检测方法。使用含有M基因的重组质粒pMD-M作为标准品绘制标准曲线,其相关系数为0.999,检测结果表明:该方法的敏感性可达到1个EID50,组间与组内重复试验变异系数分别为0.21%和0.65%,除SIV外,其他5种猪病病毒检测均为阴性,样品检测与病毒滴定及病毒分离结果的符合率均达到100%,该方法特异性强、重复性好,有望成为SIV的一种特异、敏感、快速的定量检测方法。 展开更多
关键词 SIV TAQ Man MGB探针 实时荧光定量PCR
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H5亚型禽流感病毒A/Duck/Anhui/1/2006(Clade 2.3)密码子优化HA基因DNA疫苗的免疫保护效力研究 被引量:9
17
作者 王国俊 熊杰 +6 位作者 李俊平 曾显营 田国彬 李雁冰 施建忠 姜永萍 陈化兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期116-120,共5页
为了进一步评价基于HA基因的DNA疫苗的开发应用前景,本研究将表达H5亚型禽流感水禽群代表株A/Duck/Anhui/1/2006(H5N1)[DKAH/1/06(H5N1)]HA基因的DNA疫苗pCAGGoAHHA的免疫保护效力进行了评估,以5μg、10μg、20μg、50μg和100μg剂量免... 为了进一步评价基于HA基因的DNA疫苗的开发应用前景,本研究将表达H5亚型禽流感水禽群代表株A/Duck/Anhui/1/2006(H5N1)[DKAH/1/06(H5N1)]HA基因的DNA疫苗pCAGGoAHHA的免疫保护效力进行了评估,以5μg、10μg、20μg、50μg和100μg剂量免疫3周龄SPF鸡,首次免疫后3周再加强免疫一次,加强免疫后2周用106EID50的高致病力禽流感病毒(HPAIV)A/Duck/Fujian/31/2007(H5N1)[DKFJ/31/07(H5N1)]鼻腔途径进行攻毒,观察发病与死亡情况。分别于攻毒后第3d、5d、7d天采集喉头及泄殖腔拭子进行病毒分离、滴定检测攻毒鸡排毒情况,同时检测免疫及攻毒后血清HI抗体、NT抗体的动态变化。结果,20μg、50μg、100μg组的pCAGGoAHHA均可对免疫鸡产生100%完全保护(不发病、不致死、不排毒),而5μg和10μg剂量组则可对免疫鸡分别形成25%和75%的保护。结果表明,H5亚型禽流感水禽群DNA疫苗质粒pCAGGoAHHA具有良好的免疫保护性,有望成为预防H5亚型HPAIV的技术储备候选疫苗。 展开更多
关键词 禽流感 H5亚型 水禽群 DNA疫苗 保护效力
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表达禽流感HA和NP双基因重组禽痘病毒的免疫保护性 被引量:8
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作者 乔传玲 姜永萍 +4 位作者 田国斌 邓国华 王秀荣 陈化兰 于康震 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期178-181,共4页
将分别来自禽流感病毒A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)毒株的HA基因和A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)NP基因重组到禽痘病毒基因组中,获得了能同时高效表达这两种蛋白的重组禽痘病毒(rFPV HA NP)。将rFPV HA NP经翅膀刺种途径接种8周龄SPF鸡... 将分别来自禽流感病毒A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)毒株的HA基因和A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)NP基因重组到禽痘病毒基因组中,获得了能同时高效表达这两种蛋白的重组禽痘病毒(rFPV HA NP)。将rFPV HA NP经翅膀刺种途径接种8周龄SPF鸡,并设亲本禽痘病毒免疫和非免疫对照组。免疫后4周分别用10LD50的高致病力禽流感病毒(HPAIV)A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)和A/FPV/Rostock/34(H7N1)毒株进行攻击。结果重组禽痘病毒rFPV HA NP免疫鸡群后能够诱导产生高水平的特异性抗体,可完全抵抗H5N1毒株的致死性攻击,并可有效阻止H7N1病毒攻击后病毒在泄殖腔的排出。而禽痘病毒免疫组和非免疫对照组在攻毒后全部发病并死亡。结果表明NP在与HA共同表达时,在诱导交叉保护性方面有一定的免疫增强功能。 展开更多
关键词 基因表达 禽流感 HA NP 双基因重组 禽痘病毒 免疫保护性
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禽流感病毒H5N1变异株灭活疫苗(Re-4株)对鸡、鸭和鹅的免疫效果研究 被引量:14
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作者 曾显营 钟功勋 +7 位作者 李雁冰 施建忠 姜永萍 王彦妮 万晓鹏 毛胜刚 田国彬 陈化兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期800-803,共4页
为系统评估禽流感病毒(AIV)H5N1变异株灭活疫苗(Re-4株)对家禽的免疫效果,本研究将Re-4株油乳剂灭活疫苗免疫SPF鸡和商品蛋鸡、商品鸭及商品鹅。免疫后每周采集血清测定HI抗体,绘制抗体消长曲线,免疫SPF鸡在免疫后2周、3周和50周时以105... 为系统评估禽流感病毒(AIV)H5N1变异株灭活疫苗(Re-4株)对家禽的免疫效果,本研究将Re-4株油乳剂灭活疫苗免疫SPF鸡和商品蛋鸡、商品鸭及商品鹅。免疫后每周采集血清测定HI抗体,绘制抗体消长曲线,免疫SPF鸡在免疫后2周、3周和50周时以105EID50剂量的强毒株(CK/SX/2/06)进行攻毒。研究结果显示,该疫苗对蛋鸡、鸭、鹅均具有良好的免疫效果,而且SPF免疫鸡血清HI抗体在4log2以上时能够完全抵抗CK/SX/2/06强毒的攻击。因此,根据实验结果推荐该油乳剂灭活疫苗的对上述禽类的免疫程序:商品蛋鸡10日龄颈部皮下注射0.3mL,60日龄和110日龄(开产前)时依次胸肌注射0.5mL和1.0mL进行免疫;商品鸭、鹅在2周龄均以0.5mL首免,5周龄和4月龄左右时以1mL的剂量肌肉注射方式进行加强免疫。 展开更多
关键词 禽流感 H5N1 变异株 灭活疫苗 免疫效果
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某复方中药抗禽流感病毒的免疫机制 被引量:9
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作者 李艳华 田国彬 +4 位作者 李雁冰 刘永刚 陈化兰 佟恒敏 于康震 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期416-419,共4页
通过SPF鸡服用某复方中药后,了解免疫器官指数、外周血液中CD+3、CD+4、CD+8及TCR+1T淋巴细胞百分比含量及IgG的变化,探索某复方中药对禽流感病毒作用的免疫机理。结果表明:给药组免疫器官指数、外周血液中CD+3、CD+4、CD+8及TCR+1T淋... 通过SPF鸡服用某复方中药后,了解免疫器官指数、外周血液中CD+3、CD+4、CD+8及TCR+1T淋巴细胞百分比含量及IgG的变化,探索某复方中药对禽流感病毒作用的免疫机理。结果表明:给药组免疫器官指数、外周血液中CD+3、CD+4、CD+8及TCR+1T淋巴细胞百分比含量及IgG均比对照组高。所以,该复方中药可促进SPF雏鸡免疫器官的发育和迅速成熟,提高SPF鸡的细胞免疫及体液免疫功能。 展开更多
关键词 某复方中药 SPF鸡 禽流感病毒 免疫机理
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