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题名P-糖蛋白的融合表达研究
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作者
王祥卫
杨唐俊
张立新
李春海
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机构
第三军医大学附属新桥医院泌尿外科
军事医学科学院基础医学研究所肿瘤分子生物室
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出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期54-56,共3页
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文摘
目的 对P 糖蛋白胞外段基因进行表达研究。方法 根据P 糖蛋白抗原性分布曲线及mdr1基因结构 ,设计了一对引物 ,PCR扩增产物插入到pGEM T中 ,经测序正确后 ,再克隆入表达载体pGEX 2T ,构建高效表达载体pGEX Pgp ,转化大肠杆菌DH5α ,进行表达、鉴定及纯化。结果 经IPTG诱导 4h ,蛋白表达即达高峰 ,SDS PAGE分析 ,表达出约 3 0kD大小的蛋白。结论 该基因片段的高效表达为进一步制备其抗体或筛选其特异性结合肽 ,进行靶向治疗等工作奠定了基础。
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关键词
多药耐药
P-糖蛋白
表达载体
P-糖蛋白胞外段融合蛋白
肿瘤治疗
膀胱癌
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Keywords
multidrug resistance
P glycoprotein
expression
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分类号
R915
[医药卫生—微生物与生化药学]
R737.14
[医药卫生—肿瘤]
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题名P-糖蛋白抗原表位分析及表达
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作者
王祥卫
张立新
杨唐俊
郭应禄
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机构
第三军医大学第二附属医院泌尿外科
军事医学科学院基础医学研究所肿瘤分子生物室
北京大学泌尿外科研究所
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出处
《中国癌症杂志》
CAS
CSCD
2003年第3期197-200,共4页
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文摘
目的 :研究P 糖蛋白抗原表位和表达。方法 :联合应用多种方法对P 糖蛋白的二级结构和表面特性进行分析 ,设计了一对引物 ,PCR扩增产物插入到 pGEM T中 ,经测序正确后 ,再克隆入表达载体 pGEX 2T ,构建高效表达载体 pGEX Pgp ,转化大肠埃希菌DH5α ,进行表达、鉴定及纯化。 结果 :位于P 糖蛋白胞外段的抗原表位位点仅见于氨基酸残基 82～ 1 1 5(I)、741～ 760 (IV)及 80 0～ 81 6(V)。SDS PAGE分析 ,表达出约 30× 1 0 3(30kDa)大小的蛋白。结论 :该基因片段的高效表达为进一步制备其抗体或筛选其特异性结合肽 ,进行靶向治疗等工作奠定了基础。
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关键词
P-糖蛋白
抗原表位
分析
表达
多药耐药
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Keywords
multidrug resistance
P glycoprotein
antigenic epitopes
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分类号
R730.5
[医药卫生—肿瘤]
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