目的对两种肝脏全器官脱细胞基质制备方法进行比较,为筛选更为有效的制备方法提供依据。方法选取两种脱细胞方案[分别以十二烷基硫酸钠(SDS)和Triton X-100+SDS(Tx+SDS)为主要洗涤剂]制备肝脏全器官脱细胞基质,制备完成后进行三维形态...目的对两种肝脏全器官脱细胞基质制备方法进行比较,为筛选更为有效的制备方法提供依据。方法选取两种脱细胞方案[分别以十二烷基硫酸钠(SDS)和Triton X-100+SDS(Tx+SDS)为主要洗涤剂]制备肝脏全器官脱细胞基质,制备完成后进行三维形态、脉管结构及组织学、免疫荧光染色观察,并对脱细胞基质中的DNA残留量、胶原含量及生长因子[肝细胞生长因子(HGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)]含量进行检测。结果两种方法均成功制备出肝脏全器官脱细胞基质。组织学和DNA含量检测显示两种方案均可成功移除细胞和细胞核组分,保留细胞外基质(ECM)蛋白;Tx+SDS方案可以维持肝脏的天然脉管结构,而SDS方案则会损坏脉管结构;与SDS方案比较,Tx+SDS方案能保留更多的ECM蛋白成分(7.76±0.15μg/mg vs 4.23±0.05μg/mg),更多的HGF含量(44.5±2.9ng/g vs 11.3±1.8ng/g)和bFGF含量(15.9±0.4ng/g vs 6.1±0.7ng/g)。结论以Tx+SDS为主要洗涤剂的脱细胞方法成功制备出了较好的肝脏全器官脱细胞基质,可为肝组织工程和再生医学提供优良的支架材料。展开更多
文摘目的对两种肝脏全器官脱细胞基质制备方法进行比较,为筛选更为有效的制备方法提供依据。方法选取两种脱细胞方案[分别以十二烷基硫酸钠(SDS)和Triton X-100+SDS(Tx+SDS)为主要洗涤剂]制备肝脏全器官脱细胞基质,制备完成后进行三维形态、脉管结构及组织学、免疫荧光染色观察,并对脱细胞基质中的DNA残留量、胶原含量及生长因子[肝细胞生长因子(HGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)]含量进行检测。结果两种方法均成功制备出肝脏全器官脱细胞基质。组织学和DNA含量检测显示两种方案均可成功移除细胞和细胞核组分,保留细胞外基质(ECM)蛋白;Tx+SDS方案可以维持肝脏的天然脉管结构,而SDS方案则会损坏脉管结构;与SDS方案比较,Tx+SDS方案能保留更多的ECM蛋白成分(7.76±0.15μg/mg vs 4.23±0.05μg/mg),更多的HGF含量(44.5±2.9ng/g vs 11.3±1.8ng/g)和bFGF含量(15.9±0.4ng/g vs 6.1±0.7ng/g)。结论以Tx+SDS为主要洗涤剂的脱细胞方法成功制备出了较好的肝脏全器官脱细胞基质,可为肝组织工程和再生医学提供优良的支架材料。
