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永生化软骨细胞为基础的工程化软骨修复软骨缺损的实验研究
1
作者 方泽强 李慧增 +1 位作者 王常勇 孙远 《中国骨伤》 CAS 2003年第11期664-666,共4页
目的 探讨用永生化软骨细胞作为种子细胞修复羊关节软骨缺损的可行性。方法 把人端粒酶催化亚基(hTERT)转染羊关节软骨细胞,筛选阳性克隆并通过旋转生物反应器-微载体技术进行大量扩增;将扩增的永生化软骨细胞与β-磷酸三钙复合并在体... 目的 探讨用永生化软骨细胞作为种子细胞修复羊关节软骨缺损的可行性。方法 把人端粒酶催化亚基(hTERT)转染羊关节软骨细胞,筛选阳性克隆并通过旋转生物反应器-微载体技术进行大量扩增;将扩增的永生化软骨细胞与β-磷酸三钙复合并在体外培育后,植入羊前肢肱骨头关节面软骨缺损处;3和6个月取材,进行形态学和免疫组织化学评价。结果 实验组,术后6个月,缺损区被新生的软骨组织所充填,Ⅱ型胶原染色呈强阳性,与对照组差别有显著性差异(P<0.01)。在材料组,缺损区边缘可见部分新生软骨组织;空白对照组,缺损区新生软骨组织形成。结论 永生化软骨细胞在软骨组织工程中具有潜在的应用前景。 展开更多
关键词 永生化 组织工程 软骨
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人骨髓间质干细胞体外扩增和向成骨细胞分化的实验研究 被引量：17
2
作者 王永红 王常勇 +3 位作者 郭希民 段翠密 赵强 陈惠华 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期251-255,共5页
骨髓间质干细胞 (mesenchymalstemcell,MSCs)是一类存在于骨髓中的具有多向分化潜能的干细胞 ,在体外不仅可分化为间质类细胞 ,而且可以分化为非间质细胞。本研究探讨人骨髓间质干细胞的体外分离纯化、培养扩增和向成骨细胞诱导分化的... 骨髓间质干细胞 (mesenchymalstemcell,MSCs)是一类存在于骨髓中的具有多向分化潜能的干细胞 ,在体外不仅可分化为间质类细胞 ,而且可以分化为非间质细胞。本研究探讨人骨髓间质干细胞的体外分离纯化、培养扩增和向成骨细胞诱导分化的条件。利用密度为 1.0 73g/ml的Percoll分离骨髓的单个核细胞 ,以含 10 %胎牛血清的低糖DMEM培养基培养与扩增MSCs ,细胞纯度可达 95 %左右。取第二代和第三代的MSCs ,以含有不同浓度的抗坏血酸、β 磷酸甘油、地塞米松的诱导培养基向成骨细胞诱导 ,诱导后的细胞呈现典型的成骨细胞样改变 ,免疫组化技术显示其I型胶原染色阳性 ,ALP染色阳性 ,表明MSCs在体外具有向成骨细胞分化的潜力。 展开更多
关键词 间质干细胞 骨髓 成骨细胞 分化 实验研究
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采用毛细管电泳技术筛选特异识别蓖麻毒素适配子的研究 被引量：6
3
作者 唐吉军 谢剑炜 +2 位作者 邵宁生 郭磊 闫妍 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1840-1843,共4页
采用指数富集配基的系统进化(SELEX)技术从随机寡核苷酸文库中筛选获得特异识别蓖麻毒素靶分子的适配子.将毛细管电泳技术作为分离手段引入到SELEX筛选中,利用毛细管电泳高效的分离能力使得筛选周期大大缩短.酶联免疫和斑点杂交实验结... 采用指数富集配基的系统进化(SELEX)技术从随机寡核苷酸文库中筛选获得特异识别蓖麻毒素靶分子的适配子.将毛细管电泳技术作为分离手段引入到SELEX筛选中,利用毛细管电泳高效的分离能力使得筛选周期大大缩短.酶联免疫和斑点杂交实验结果表明,仅经4轮筛选即可获得特异识别蓖麻毒素蛋白的寡核苷酸适配子. 展开更多
关键词 指数富集配基的系统进化 毛细管电泳 随机单链DNA文库 蓖麻毒素
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壳聚糖-hVEGF_(165)基因微粒的制备及体外转染的实验研究 被引量：5
4
作者 王荣祺 张军 +7 位作者 王常勇 易甫 李保罗 江红 郭希民 董宝军 段翠密 董灵芝 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期14-18,24,共6页
采用复凝聚法制备壳聚糖-hVEGF165基因微粒,观察微粒形态,测定微粒的粒径、基因包封率和载药量,以LipofectamineTM2000转染试剂作为阳性对照,检测微粒对心肌细胞的转染活性及对心肌细胞存活率的影响。结果表明,微粒形态多呈球形,粒径小... 采用复凝聚法制备壳聚糖-hVEGF165基因微粒,观察微粒形态,测定微粒的粒径、基因包封率和载药量,以LipofectamineTM2000转染试剂作为阳性对照,检测微粒对心肌细胞的转染活性及对心肌细胞存活率的影响。结果表明,微粒形态多呈球形,粒径小,基因包封率和载药量均较高,转染活性略低于脂质体,但微粒对心肌细胞的毒性明显低于脂质体。 展开更多
关键词 壳聚糖 微粒 血管内皮生长因子 基因转染 心肌细胞
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神经生长因子对周围神经损伤后再生和修复的实验研究 被引量：10
5
作者 杨琳 李振华 +2 位作者 尹群生 王宏宇 柳川 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期457-461,共5页
手术切除5mm兔的尺神经,在两断端间连接肌桥并套装硅胶管,形成一个封闭腔,向腔内注入神经生长因子.间隔不同时间取尺神经桥接区、桥接区近段、远段、尺神经的脊髓投射节段和相应脊神经节,用光镜和电镜观察神经溃变和再生情况并作图像分... 手术切除5mm兔的尺神经,在两断端间连接肌桥并套装硅胶管,形成一个封闭腔,向腔内注入神经生长因子.间隔不同时间取尺神经桥接区、桥接区近段、远段、尺神经的脊髓投射节段和相应脊神经节,用光镜和电镜观察神经溃变和再生情况并作图像分析;用酶标示踪和电生理方法检测神经通路的重建状况.结果显示,周围神经离断后,肌束桥接并用硅胶管套装后注入外源性神经生长因子,可明显地促进离断神经的再生和修复. 展开更多
关键词 周围神经损伤 神经生长因子 神经再生 神经修复
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γ射线诱发细胞程序性死亡的时间及剂量效应研究 被引量：7
6
作者 童新 董燕 +1 位作者 张双喜 孙志贤 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期111-115,共5页
通过对辐射所致程序性细胞死亡（ＰＣＤ）的研究，揭示了射线诱发小鼠胸腺细胞ＰＣＤ生成的时间及剂量效应规律，采用不同的检测ＰＣＤ方法（ＤＮＡ片段分析法及流式细胞术），比较了不同组织的辐射敏感性差异。结果表明：照射后４～６... 通过对辐射所致程序性细胞死亡（ＰＣＤ）的研究，揭示了射线诱发小鼠胸腺细胞ＰＣＤ生成的时间及剂量效应规律，采用不同的检测ＰＣＤ方法（ＤＮＡ片段分析法及流式细胞术），比较了不同组织的辐射敏感性差异。结果表明：照射后４～６ｈ诱发胸腺细胞ＰＣＤ生成最多。不同剂量照射，照后６ｈ取胸腺，发现２０Ｇｙ时胸腺细胞ＰＣＤ生成最多。脾、胸腺对辐射敏感，小剂量（１Ｇｙ）即可检测到ＰＣＤ形成；而心脏、大脑、肾对射线不敏感，照射１０Ｇｙ以上时，才能检测到ＰＣＤ。 展开更多
关键词 程序性细胞死亡 辐射 剂量 辐射损伤 Γ射线
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低氧诱导因子-1α基因修饰后的成肌细胞移植治疗心肌梗死的研究 被引量：5
7
作者 王凡 吴海涛 +3 位作者 朱玲玲 陈晓萍 范明 刘国树 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2008年第10期772-774,共3页
目的评价低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因修饰骨骼肌成肌细胞(SkMs)治疗心肌梗死的可行性及其疗效。方法将71只Wister大鼠采用结扎冠状动脉左前降支制备心肌梗死模型,通过局部注射法将细胞植入心肌梗死区域。其中将制膜成功的42只成活大... 目的评价低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因修饰骨骼肌成肌细胞(SkMs)治疗心肌梗死的可行性及其疗效。方法将71只Wister大鼠采用结扎冠状动脉左前降支制备心肌梗死模型,通过局部注射法将细胞植入心肌梗死区域。其中将制膜成功的42只成活大鼠随机分为假手术组(SO组,6只)、注射培养液组(DMEM组,6只)、移植SkMs组(SkMs组,10只)、移植感染了携带HIF-1α空载体腺病毒的SkMs组(Ad/GFP组,10只)和移植感染了携带HIF-1α基因腺病毒的SkMs组(Ad/HIF-1α组,10只)。术后28天用免疫组织化学法和血流动力学评价治疗效果。结果28天后SkMs组、Ad/GFP组和Ad/HIF-1α组大鼠梗死心肌周围血管新生明显,以Ad/HIF-1α组最为显著(P<0.05),且胶原沉积最少;SkMs组、Ad/GFP组和Ad/HIF-1α组大鼠左心室收缩功能好转,Ad/HIF-1α组最为显著(P<0.05)。结论HIF-1α基因修饰后的SkMs移植较单纯成肌细胞移植是治疗心肌缺血更为有效的方法。 展开更多
关键词 心肌梗塞 成肌细胞 骨骼肌 腺病毒科 细胞移植 低氧诱导因子-1Α
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原核基因工程中以包涵体形式表达产物的中试分离纯化研究 被引量：4
8
作者 徐明波 董晓杰 +3 位作者 孟文华 朱耀先 张明伟 马贤凯 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1993年第9期11-15,共5页
关键词 蛋白 包涵体 分离 提纯 基因工程
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蓖麻毒素A链(RTA)功能域突变体构效关系的量子化学研究 被引量：3
9
作者 冯健男 裴武红 +2 位作者 吴加金 黎燕 沈倍奋 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1999年第9期1415-1418,共4页
结合对蓖麻毒素A链（RTA）功能域氨基酸（Tyr80，Trr123，Gln177，Arg180）点突变后对其生物活性影响的实验研究，利用半经验量子化学AMI方法对RTA功能域及其点突变进行了理论计算．通过分析前线分子轨道性质和能级，从理论上探讨了其... 结合对蓖麻毒素A链（RTA）功能域氨基酸（Tyr80，Trr123，Gln177，Arg180）点突变后对其生物活性影响的实验研究，利用半经验量子化学AMI方法对RTA功能域及其点突变进行了理论计算．通过分析前线分子轨道性质和能级，从理论上探讨了其功能域点突变对其生物活性的影响，并预测了突变体（Tyr123→TrP）比RTA生物活性高． 展开更多
关键词 蓖麻毒素A链 功能域 RTA 突变体 构效关系
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全反式维甲酸对卵巢癌细胞系作用的研究 被引量：11
10
作者 刘春敏 刘琦 任蕴芳 《医学研究生学报》 CAS 2003年第1期10-12,16,共4页
目的 :探讨全反式维甲酸 (ATRA)对人卵巢癌细胞生长的抑制作用及可能机制。　方法 :应用MTT比色法、LDH检测及流式细胞仪周期分析对药物作用后的人卵巢癌腹水细胞系 (COC1、COC2 )、卵巢癌上皮细胞系(CAOV3 ) 3种卵巢癌细胞系进行检测... 目的 :探讨全反式维甲酸 (ATRA)对人卵巢癌细胞生长的抑制作用及可能机制。　方法 :应用MTT比色法、LDH检测及流式细胞仪周期分析对药物作用后的人卵巢癌腹水细胞系 (COC1、COC2 )、卵巢癌上皮细胞系(CAOV3 ) 3种卵巢癌细胞系进行检测。　结果 :ATRA能抑制卵巢癌细胞生长 ,当浓度达 10 μmol/L时 ,G0 、G1期细胞比例增加 ,G2 M、S期细胞比例下降 ,细胞增殖速度较对照组减缓。MTT及LDH检测提示在ATRA 30 μmol/L时 ,癌细胞抑制率最佳。　结论 :ATRA应用可有效抑制卵巢癌细胞增殖 ,促进细胞分化 ,从而达到抑瘤作用 ,并在ATRA 10～ 30 μmol/L时 。 展开更多
关键词 全反式维甲酸 人卵巢癌细胞系 细胞增殖指数 细胞分化
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人胃癌组织中肽能神经支配的电镜研究 被引量：3
11
作者 王国华 周岩 刘少君 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期717-721,共5页
应用电镜研究手术切除人胃癌组织中肽能神经的支配。取免疫组化显示肽能神经纤维阳性部位胃癌组织制作超薄切片。电镜观察结果表明在胃癌细胞之间可以找到与之相邻或直接接触的无髓鞘末梢神经纤维。二者之间仅以Schwann氏细胞鞘膜以及... 应用电镜研究手术切除人胃癌组织中肽能神经的支配。取免疫组化显示肽能神经纤维阳性部位胃癌组织制作超薄切片。电镜观察结果表明在胃癌细胞之间可以找到与之相邻或直接接触的无髓鞘末梢神经纤维。二者之间仅以Schwann氏细胞鞘膜以及基底膜相隔 ,在一些神经纤维剖面之间还可以查见少数含透明小泡和致密核心小泡的膨体。少数电镜视野中可查见无髓鞘末梢神经中呈现神经肽免疫组化阳性的神经纤维剖面。 展开更多
关键词 胃癌 肽能神经支配 电镜 人 神经纤维
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一种快速敏感检测特异性mRNA的原位杂交技术的研究 被引量：2
12
作者 何彬 范明 +1 位作者 张贺秋 甘思德 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第4期297-300,共4页
:本文介绍一种快速敏感的原位杂交方法。用光敏生物素标记管蛋白cDNA探针,经DNase I酶切成组织渗透性强适合原位杂交的短片段,作快速的原位杂交,再用胶体金标链亲和素系统检测杂交结果。整个过程操作方便,迅速,能保存较多的杂交信号,杂... :本文介绍一种快速敏感的原位杂交方法。用光敏生物素标记管蛋白cDNA探针,经DNase I酶切成组织渗透性强适合原位杂交的短片段,作快速的原位杂交,再用胶体金标链亲和素系统检测杂交结果。整个过程操作方便,迅速,能保存较多的杂交信号,杂交结果清晰。 展开更多
关键词 原位杂交 光敏生物素 胶体金
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西他沙星对小鼠模型耐甲氧西林金黄色葡萄球菌肺炎保护作用的研究 被引量：1
13
作者 高亚萍 黑研 +4 位作者 纪星涉 杨南林 刘玉 沈倍奋 杨光 《抗感染药学》 2015年第3期339-342,共4页
目的:研究西他沙星(sitafloxacin hydrate)对小鼠感染模型耐甲氧西林金黄色葡萄球菌肺炎的保护作用。方法:利用气管注射耐甲氧西林金葡菌,建立小鼠肺部感染的动物模型,并在此基础上,通过腹腔给药的方式,检测不同剂量的西他沙星给药后小... 目的:研究西他沙星(sitafloxacin hydrate)对小鼠感染模型耐甲氧西林金黄色葡萄球菌肺炎的保护作用。方法:利用气管注射耐甲氧西林金葡菌,建立小鼠肺部感染的动物模型,并在此基础上,通过腹腔给药的方式,检测不同剂量的西他沙星给药后小鼠体质量的改变及其肺部病理学的变化。结果:小鼠经气管注射耐甲氧西林金葡菌3 d后,小鼠体质量减轻,其肺脏发生明显的病理学改变;采用西他沙星可有效减缓小鼠体质量及其肺脏的病理学变化。结论:西他沙星可以有效地抑制耐甲氧西林金葡菌引发的感染,具有良好地保护作用。 展开更多
关键词 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 西他沙星 肺炎 保护作用
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西他沙星对小鼠金黄色葡萄球菌感染抑制作用的实验研究 被引量：1
14
作者 高亚萍 黑研 +5 位作者 纪星涉 刘玉 荣志刚 朱浩文 沈倍奋 杨光 《抗感染药学》 2015年第4期497-499,共3页
目的:研究西他沙星对小鼠动物模型金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)的抑制作用。方法:采用体外检测不同浓度西他沙星对SA 8325-4和SA 04018的杀灭作用,同时采用腹腔注射SA建立小鼠腹膜炎感染的动物模型,并在此基础上,通过腹腔... 目的:研究西他沙星对小鼠动物模型金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)的抑制作用。方法:采用体外检测不同浓度西他沙星对SA 8325-4和SA 04018的杀灭作用,同时采用腹腔注射SA建立小鼠腹膜炎感染的动物模型,并在此基础上,通过腹腔给药的方式,检测不同剂量西他沙星给药后小鼠死亡率的变化。结果:西他沙星能够有效抑制SA生长;给予小鼠腹腔注射SA后,能够诱发小鼠急性腹膜炎,24 h后小鼠死亡率达87.5%,给予不同剂量的西他沙星可以有效降低小鼠死亡率。结论:西他沙星可以有效地抑制SA诱发的感染,对小鼠具有良好的保护作用。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 西他沙星 腹膜炎
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免疫毒素细胞内传递途径的免疫金双标记研究
15
作者 郭宁 王国华 +3 位作者 沈倍奋 陈兴 张贺秋 陈德蕙 《电子显微学报》 CAS CSCD 1993年第1期43-43,共1页
应用免疫金双标记技术对免疫毒素在细胞内传递途径进行了亚显微形态研究。采用5nm胶体金颗粒标记羊抗鼠、15nm胶体金颗粒标记兔抗蓖麻毒素以及免疫毒素(由抗CD_5、CD_2、CD_8及抗金T细胞的单抗DS27、JN205、P218、P81和蓖麻毒素构成),... 应用免疫金双标记技术对免疫毒素在细胞内传递途径进行了亚显微形态研究。采用5nm胶体金颗粒标记羊抗鼠、15nm胶体金颗粒标记兔抗蓖麻毒素以及免疫毒素(由抗CD_5、CD_2、CD_8及抗金T细胞的单抗DS27、JN205、P218、P81和蓖麻毒素构成),对免疫毒素与Molt-4细胞(人T淋巴细胞系)的相互作用进行了动态观察及超微结构定位。电镜下,在不同时期的实验动态观察中,两种不同粒径的金颗粒相伴随,共同定位于细胞膜及其突起表面、细胞膜被膜小凹(Coated pit)中,随后进入细胞内,定位于内吞小体(endosome)及其所属小管、小泡、多泡小体及溶酶体,并迅速到达跨高尔基氏复合体网状系统(trans-Golgi network)。 展开更多
关键词 细胞 免疫毒素 传递 免疫金双标记
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海珊瑚在不同酸性条件处理下的微结构研究
16
作者 王大志 杨兰 +7 位作者 罗毅 张万群 修向前 汤洪高 李凡庆 毛天球 陈富林 王会信 《电子显微学报》 CAS CSCD 1999年第6期600-605,共6页
本文利用扫描电镜（ＳＥＭ）观察了滨珊瑚和角孔珊瑚及它们在不同酸性条件处理下的形貌和显微结构变化，并对角孔珊瑚进行了溶解失重分析。实验结果表明，为了保持珊瑚天然的微孔结构，以作为制备人工骨的材料，对其进行处理环境的环境... 本文利用扫描电镜（ＳＥＭ）观察了滨珊瑚和角孔珊瑚及它们在不同酸性条件处理下的形貌和显微结构变化，并对角孔珊瑚进行了溶解失重分析。实验结果表明，为了保持珊瑚天然的微孔结构，以作为制备人工骨的材料，对其进行处理环境的环境ｐＨ 值不能小于 ３。 展开更多
关键词 骨移植材料 海珊瑚 酸性条件 微结构
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小鼠下颌下腺NGF基因表达的性别差异研究
17
作者 陆璐 丁斐 +5 位作者 曹铮 顾静 顾晓松 汪家政 余云开 范明 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期233-238,共6页
实验应用地高辛标记人β神经生长因子DNA探针原位杂交组化技术,研究小鼠下颌下腺神经生长因子(NGF)表达的性别差异.实验结果显示,雄性和雌性小鼠下颌下腺NGF基因表达的部位基本相同,原位杂交反应产物都选择性分布于纹状管和颗粒曲管上... 实验应用地高辛标记人β神经生长因子DNA探针原位杂交组化技术,研究小鼠下颌下腺神经生长因子(NGF)表达的性别差异.实验结果显示,雄性和雌性小鼠下颌下腺NGF基因表达的部位基本相同,原位杂交反应产物都选择性分布于纹状管和颗粒曲管上皮细胞中,但雄性小鼠原位杂交信号强,雌性小鼠杂交信号较弱.原位杂交阳性小管在雄性小鼠以粗大的颗粒曲管为主,在雌性小鼠以细小的纹状管为主,颗粒曲管较少,而且在单位面积中雄性小鼠阳性管道的密度和面积远远大于雌性小鼠.在阳性的纹状管或颗粒曲管上皮细胞之间,雄性小鼠较少看到个别阴性细胞,而雌性小鼠常可见到几个阴性的细胞夹杂在阳性细胞之间.实验结果提示小鼠下颌下腺NGF基因的表达受到雄性激素的调节,这种调节作用很可能发生于转录水平. 展开更多
关键词 神经生长因子 下颌下腺 基因表达 性别差异
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猪骨-rhBMP-2复合重组人工骨的研制及临床应用研究 被引量：2
18
作者 李万民 赵明 +6 位作者 徐杰 刘农乐 周丙怀 王会信 马立志 赵怀川 苏维成 《中国骨伤》 CAS 2001年第12期719-721,共3页
目的　选择猪骨作为rhBMP 2的载体 ,经去抗原处理 ,复合重组人工骨 ,观察该种人工骨临床应用骨缺损修复 ,促进骨折愈合及诱导成骨的能力。方法　选择猪骨经透析冻干法脱脂、脱蛋白及部分脱钙处理后与成品rhBMP 2按一定比例组成具有生物... 目的　选择猪骨作为rhBMP 2的载体 ,经去抗原处理 ,复合重组人工骨 ,观察该种人工骨临床应用骨缺损修复 ,促进骨折愈合及诱导成骨的能力。方法　选择猪骨经透析冻干法脱脂、脱蛋白及部分脱钙处理后与成品rhBMP 2按一定比例组成具有生物活性的猪骨 -rhBMP 2复合人工骨 ,先行动物模型实验 ,随后以自愿随机的原则 ,临床应用 32例 ,术后 1,4,8,12周进行X线检查 ,观察临床表现 ,功能恢复情况。结果　临床 32例 ,34块骨 ,35处植入。随访 31例 ,随访率 96 7% ,最长 2 4个月 ,最短3个月 ;骨的愈合及缺损修复满意 ,临床无不良反应。结论　经透析冻干法处理的猪骨能成为rhBMP 2的理想载体 ,与rhBMP 2复合后具有良好的成骨诱导活性 ,无免疫排斥反应 ,具有广泛的临床应用前景。 展开更多
关键词 骨移植 异种 基因 猪骨 RHBMP-2 重组人工骨
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APE／Ref-1的临床应用研究进展 被引量：3
19
作者 霍文静 范明 +1 位作者 殷仁富 吴丽颖 《医学研究生学报》 CAS 2008年第6期657-660,共4页
脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子-1(APE/Ref-1)是一种多功能的蛋白质,在氧化或烷化物所导致的DNA损伤修复,以及在氧化还原反应的调控等多个生物学过程中都发挥着重要作用。本文综合近几年国内外的众多文献,从APE/Ref-1的结构与功... 脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子-1(APE/Ref-1)是一种多功能的蛋白质,在氧化或烷化物所导致的DNA损伤修复,以及在氧化还原反应的调控等多个生物学过程中都发挥着重要作用。本文综合近几年国内外的众多文献,从APE/Ref-1的结构与功能入手,对其与肿瘤和心脑血管疾病、中枢神经系统疾病等之间关系的临床研究进展进行分析,提示APE/Ref-1作为新标记物,在临床的应用有着良好的发展前景。 展开更多
关键词 脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子-1 调控转录 临床研究
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大鼠脂肪干细胞在纳米羟基磷灰石-壳聚糖-果胶/壳聚糖-明胶支架的成骨向分化研究 被引量：1
20
作者 韩瑞金 张琪 +2 位作者 郝彤 李俊杰 王常勇 《生物医学工程与临床》 CAS 2023年第1期7-14,共8页
目的探索纳米羟基磷灰石-壳聚糖-果胶/壳聚糖-明胶(nHCP/CG)支架对大鼠脂肪干细胞(r ADSC)定向成骨分化的影响,为其临床应用提供理论支持。方法选择SD成年大鼠5只,体质量60~80 g,雌雄不限。从SD成年大鼠两侧腹股沟脂肪组织原代分离、培... 目的探索纳米羟基磷灰石-壳聚糖-果胶/壳聚糖-明胶(nHCP/CG)支架对大鼠脂肪干细胞(r ADSC)定向成骨分化的影响,为其临床应用提供理论支持。方法选择SD成年大鼠5只,体质量60~80 g,雌雄不限。从SD成年大鼠两侧腹股沟脂肪组织原代分离、培养并鉴定r ADSC,然后将其接种在nHCP/CG支架材料上,并以壳聚糖-明胶(CG)支架为对照。通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法、Live/Dead及苏木精-伊红(HE)染色法评价支架的细胞相容性;在添加和不添加成骨诱导剂培养条件下,以碱性磷酸酶(ALP)活性及多种免疫组织化学染色测定r ADSC在nHCP/CG支架中的成骨分化行为。结果r ADSC具有间充质干细胞的特性,其在nHCP/CG复合支架材料上活性较好。nHCP/CG支架较CG支架更利于r ADSC的黏附和增殖;r ADSC在nHCP/CG支架中培养1 d、3 d、7 d时细胞数量明显高于CG支架中的细胞数量(0.432±0.028 vs 0.174±0.004、0.532±0.017 vs 0.291±0.023、0.595±0.014 vs 0.754±0.038)且差异有显著统计学意义(P<0.01)。r ADSC在nHCP/CG支架和CG支架中培养14 d和21 d均表现出较高的ALP活性;第14天时,在CG支架诱导培养细胞的ALP活性大于常规培养(0.298±0.029 vs 0.224±0.008),差异有统计学意义(P<0.05);在nHCP/CG支架中培养14 d和21 d的细胞加入诱导剂(0.224±0.006 vs 0.271±0.010、0.181±0.012 vs 0.209±0.009),ALP活性小于常规培养且差异有统计意义(P<0.05)。无论是否添加成骨诱导剂,接种在nHCP/CG支架上的r ADSC茜素红染色、Von Kossa染色、Ⅰ型胶原及Ⅷ因子免疫组化染色均表达为阳性,说明nHCP/CG支架能够自发促进r ADSC向成骨细胞分化。结论r ADSC可作为骨组织工程的种子细胞;nHCP/CG支架材料能够提供支持r ADSC黏附和生长的微环境,具有良好的生物相容性,更为重要的是能够自发诱导r ADSC定向成骨分化,有望成为一种应用于临床的骨组织工程支架材料。 展开更多
关键词 纳米羟基磷灰石-壳聚糖-果胶/壳聚糖-明胶(nHCP/CG)支架 脂肪干细胞 成骨分化 血管化 鼠
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