内蒙古典型草原土壤真菌群落结构对季节土层交互的响应

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作者 聂佳明 张晓馥 +6 位作者 张起迪 郭晓冬 蔡思萌 董永旺 刘慧艳 赵鸿彬 无 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期3408-3416,共9页

为探究草原土壤真菌群落结构对季节与土层交互的响应规律及其影响因素,本研究以内蒙古典型草原土壤为研究对象,采用高通量测序测定不同生长季、不同土层的真菌群落结构特征,探讨真菌群落结构变化与土壤理化性质的关系。结果显示,土壤有... 为探究草原土壤真菌群落结构对季节与土层交互的响应规律及其影响因素,本研究以内蒙古典型草原土壤为研究对象,采用高通量测序测定不同生长季、不同土层的真菌群落结构特征,探讨真菌群落结构变化与土壤理化性质的关系。结果显示,土壤有机质、速效氮、速效磷和土壤体积含水量随土层的加深而显著降低(P<0.05),土壤温度随季节更替而显著降低(P<0.05)。季节与土层交互下土壤真菌丰度和多样性差异显著,在0~10 cm土层,真菌丰度OTU在秋季最高(1069.11),而真菌多样性Shannon指数在夏季最高(7.63)。土壤真菌群落结构显著改变,其中,在LDA>4水平上有28种真菌具有显著差异。同时,土壤真菌丰度和多样性与速效氮、速效磷、土壤体积含水量和土壤温度均呈显著正相关(P<0.05),与pH值和土壤有机质呈显著负相关(P<0.05)。本试验结果为草地资源的可持续利用以及草原生态系统的稳定性研究提供数据支持。 展开更多

关键词 土壤真菌群落结构 季节与土层交互变化 土壤理化性质 典型草原

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不同浓度神经肽P物质刺激对内蒙古白绒山羊皮肤干细胞BMP2、BMP4基因表达的影响 被引量：2

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作者 王亚娟 高峰 +1 位作者 刘迎春 周欢敏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第9期2298-2302,共5页

本研究旨在探讨不同浓度的神经肽P物质(SP)刺激对内蒙古白绒山羊皮肤干细胞BMP2、BMP4基因表达的影响。本研究分别采用0(对照组)、1×10-6、1×10-7、1×10-8、1×10-9 mol/L 5个浓度梯度的SP对内蒙古白绒山羊皮肤干细... 本研究旨在探讨不同浓度的神经肽P物质(SP)刺激对内蒙古白绒山羊皮肤干细胞BMP2、BMP4基因表达的影响。本研究分别采用0(对照组)、1×10-6、1×10-7、1×10-8、1×10-9 mol/L 5个浓度梯度的SP对内蒙古白绒山羊皮肤干细胞进行刺激处理,并分别于第0、7、14及21天采用实时荧光定量PCR方法鉴定BMP2和BMP4基因的表达量。结果显示,1×10-6和1×10-8 mol/L的SP促进BMP2、BMP4的表达;在7和14d时,SP1×10-8 mol/L组BMP2的表达量显著高于SP 1×10-6 mol/L组(P<0.05),SP 1×10-6 mol/L组BMP4的表达量与SP 1×10-8 mol/L组差异不显著(P>0.05);在21d时,SP 1×10-8 mol/L、SP 1×10-6 mol/L组BMP2、BMP4的表达量都明显降低,其中SP 1×10-8 mol/L组BMP2的表达量显著高于1×10-6 mol/L组(P<0.05),SP1×10-6 mol/L组BMP4的表达量与SP 1×10-8 mol/L组差异不显著(P>0.05)。结果表明,SP 1×10-6和1×10-8 mol/L不仅对内蒙古白绒山羊皮肤干细胞BMP2、BMP4基因的表达量有影响,而且为皮肤干细胞的定向分化提供理论基础。 展开更多

关键词 皮肤干细胞 神经肽P物质 BMP 表达

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不同浓度褪黑素刺激对内蒙古绒山羊毛囊干细胞增殖活性的影响 被引量：5

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作者 曹春花 高峰 +3 位作者 王宏 王亚娟 刘迎春 周欢敏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第2期438-443,共6页

试验旨在探究不同浓度褪黑素刺激对内蒙古绒山毛囊干细胞增殖活性的影响。采用0(对照组)、100、300、500、700pg/mL 5个浓度梯度分别对内蒙古绒山羊毛囊干细胞连续刺激5d,MTT法分别检测各组细胞活性。结果表明,不同浓度褪黑素刺激2d后,... 试验旨在探究不同浓度褪黑素刺激对内蒙古绒山毛囊干细胞增殖活性的影响。采用0(对照组)、100、300、500、700pg/mL 5个浓度梯度分别对内蒙古绒山羊毛囊干细胞连续刺激5d,MTT法分别检测各组细胞活性。结果表明,不同浓度褪黑素刺激2d后,相较于对照组(0pg/mL),褪黑素刺激组未见成团细胞出现,开始出现长梭形细胞且细胞生长不再均一,各刺激组均表现出较高的增殖活性;刺激4d后,500pg/mL褪黑素刺激组毛囊干细胞增殖活性显著高于0、100pg/mL(P<0.01;P<0.05),但与700pg/mL褪黑素刺激组差异不显著(P>0.05)。因此,500pg/mL是内蒙古绒山羊毛囊干细胞增殖的最适浓度。 展开更多

关键词 内蒙古绒山羊 毛囊干细胞 褪黑素 细胞增殖

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禁牧对内蒙古克氏针茅草原表层土壤细菌群落结构的影响 被引量：4

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作者 张晓馥 白雪 +3 位作者 张起迪 李淑芬 韩冰 赵鸿彬 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期3376-3383,共8页

为探究克氏针茅草原禁牧初期表层土壤细菌的变化情况,本文利用2018—2020年内蒙古克氏针茅草原的细菌高通量数据和土壤理化性质数据,对自然放牧向禁牧转变初期的表层细菌群落和土壤理化性质的变化及其相互关系进行分析。在自然放牧向禁... 为探究克氏针茅草原禁牧初期表层土壤细菌的变化情况,本文利用2018—2020年内蒙古克氏针茅草原的细菌高通量数据和土壤理化性质数据,对自然放牧向禁牧转变初期的表层细菌群落和土壤理化性质的变化及其相互关系进行分析。在自然放牧向禁牧转变初期,细菌相对丰度发生较大变化,但优势菌种组成没有显著变化,其中,相较于2018年,2019年放线菌门和变形菌门相对丰度均增加,2020年变形菌门相对丰度超过了放线菌门。自然放牧条件下,细菌丰度、细菌多样性均与土壤体积含水量存在显著负相关关系,细菌丰度与土壤温度显著正相关;禁牧初期,细菌丰度与pH、土壤有机质、土壤温度显著正相关,与土壤体积含水量显著负相关。细菌丰度比细菌多样性更容易受到禁牧和土壤理化性质的影响。因此,本研究结果为进一步研究禁牧后表层土壤细菌群落变化提供了一定的理论依据。 展开更多

关键词 克氏针茅草原 禁牧 表层土壤 细菌群落 高通量测序

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蒙古羊骨髓间充质干细胞的分离培养及多向诱导分化 被引量：6

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作者 韦林盖 刘宗正 +2 位作者 高晋芳 周欢敏 张焱如 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第8期7-12,共6页

本研究旨在建立蒙古羊骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)体外分离、纯化、增殖方法,诱导其向脂肪细胞、成骨细胞及软骨细胞分化。穿刺法抽取蒙古羊骨髓组织,采用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离纯化BMSC,增殖... 本研究旨在建立蒙古羊骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)体外分离、纯化、增殖方法,诱导其向脂肪细胞、成骨细胞及软骨细胞分化。穿刺法抽取蒙古羊骨髓组织,采用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离纯化BMSC,增殖,并测定其生长曲线及细胞倍增时间。对第3代蒙古羊BMSC进行成脂、成骨及成软骨诱导,观察诱导后的细胞形态。采用油红O、茜素红、HE等染色法在组织学水平对BMSC进行成脂、成骨和成软骨分化鉴定。结果显示,蒙古羊BMSC呈现均一梭形成纤维细胞样生长,生长曲线呈S型,生长增殖能力良好。在不同分化诱导之后,细胞呈现脂肪细胞、成骨细胞及软骨细胞的表型特征。表明获得的蒙古羊BMSC具有多向分化潜能,所分离细胞确为骨髓间充质干细胞。 展开更多

关键词 蒙古羊 骨髓间充质干细胞 细胞培养 多向分化

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退化草原植物生长季土壤微生物群落结构与多样性变化 被引量：11

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作者 郑文玲 赵鸿彬 +4 位作者 韩冰 范宇凤 张涛 张晓馥 白雪 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2021年第10期46-54,共9页

采用高通量测序技术,分析内蒙古退化典型草原植物生长季(春、夏、秋季)土壤微生物群落组成、多样性及其驱动因子。结果表明,获得1301~1312个细菌操作分类单元(Operational taxonomic unit,OTU),细菌群落中占主导的门类为放线菌门(47.25%... 采用高通量测序技术,分析内蒙古退化典型草原植物生长季(春、夏、秋季)土壤微生物群落组成、多样性及其驱动因子。结果表明,获得1301~1312个细菌操作分类单元(Operational taxonomic unit,OTU),细菌群落中占主导的门类为放线菌门(47.25%~50.03%)、变形菌门(17.52%~19.23%)和酸杆菌门(9.23%~10.73%)。获得577~617个真菌OTU,真菌群落中占主导的门类为子囊菌门(70.50%~78.55%)、担子菌门(5.64%~10.30%)和被孢霉门(1.89%~3.95%)。细菌丰度和真菌多样性在季节间差异显著(P<0.05),分别在7月份和9月份最大。夏季(7月)放线菌门的相对丰度最高,酸杆菌门最低。秋季(9月)厚壁菌门和被孢霉门的相对丰度最高,疣微菌门的最低,子囊菌门和担子菌门相对丰度分别随季节推移增加和降低。土壤养分有效性和土壤温度是细菌群落季节变化的主要驱动力。真菌多样性受季节和真菌丰度的显著影响(P<0.05)。综上,微生物的群落组成在季节间总体上保持稳定,但是细菌群落结构和真菌群落多样性(Shannon指数)在季节间存在显著差异,土壤特性是微生物群落季节变化的主要控制因素。 展开更多

关键词 微生物多样性 16S rRNA基因 ITS序列 退化典型草原

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阿拉善蒙古牛的种质资源保护与产业发展建议 被引量：5

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作者 盛聪 澈力木格 +12 位作者 陈泽明 王秀艳 朱莉仙 王申元 吴凯峰 苏雅 陈宁博 张毅 周欢敏 雷初朝 韩建林 李光鹏 佟彬 《中国牛业科学》 2022年第1期60-64,共5页

阿拉善牛是蒙古牛的一个重要群体,作为我国北方地区的优良肉牛品种之一,具有乳肉役兼备的特点,适应干旱寒冷的气候,适合荒漠化草原和沙漠放牧等优异特性,主要分布在腾格里沙漠、巴丹吉林沙漠和乌兰布和沙漠湖泊湿地及其周边地区,现存栏... 阿拉善牛是蒙古牛的一个重要群体,作为我国北方地区的优良肉牛品种之一,具有乳肉役兼备的特点,适应干旱寒冷的气候,适合荒漠化草原和沙漠放牧等优异特性,主要分布在腾格里沙漠、巴丹吉林沙漠和乌兰布和沙漠湖泊湿地及其周边地区,现存栏约3.3万余头,是我国宝贵的肉牛遗传资源。但是阿拉善蒙古牛存在长期近亲繁殖,群体内的遗传变异越来越窄的趋势,加之本身生长速度缓慢、体型小等不足,未来可使阿拉善蒙古牛品种资源不断枯竭。为了保护阿拉善蒙古牛等蒙古牛群体的优异特性和种质资源,本文综述了阿拉善蒙古牛的体貌特征、数量分布以及对阿拉善蒙古牛种质资源的保护措施和产业发展建议。 展开更多

关键词 阿拉善牛 蒙古牛 种质资源保护 产业发展建议

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裸燕麦成熟胚组织培养体系的优化及创伤胚转化体系的初探

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作者 马佳星 李庆华 +4 位作者 刘玉海 南金生 融晓萍 路素香 韩冰 《大麦与谷类科学》 2024年第5期21-28,36,共9页

对8个裸燕麦品种的成熟胚进行诱导愈伤和分化培养,选用出愈率最高的品种裸燕麦1号,进一步对培养基进行优化。结果表明:在ML2诱导培养基中裸燕麦1号出愈率为87.33%,在DM1分化培养基中分化率较高。最佳培养体系为:使用ML2诱导培养基诱导愈... 对8个裸燕麦品种的成熟胚进行诱导愈伤和分化培养,选用出愈率最高的品种裸燕麦1号,进一步对培养基进行优化。结果表明:在ML2诱导培养基中裸燕麦1号出愈率为87.33%,在DM1分化培养基中分化率较高。最佳培养体系为:使用ML2诱导培养基诱导愈伤,约15 d后进行继代培养,继代2次后转移至DM1分化培养基,待分化出叶片后转移至生根培养基。通过农杆菌介导法,使用带有绿色荧光蛋白GFP基因的pBI121质粒对裸燕麦1号创伤胚进行侵染,探究菌液浓度、选择剂浓度及移栽时间对转化率的影响。结果表明,裸燕麦创伤胚转化高效组合培养体系包括:农杆菌菌液OD600为0.8时进行侵染,卡那霉素选择剂的最适浓度为40 mg/L,创伤胚转化培养10 d后进行移栽。本试验以农杆菌侵染裸燕麦创伤胚建立的遗传转化体系具有可行性,为以后裸燕麦再生体系建立提供借鉴。 展开更多

关键词 裸燕麦 组织培养 遗传转化 农杆菌介导

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短花针茅StbCRY1和StbCRY2基因克隆与表达差异分析 被引量：2

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作者 赵鸿彬 白雪 +3 位作者 范宇凤 张晓馥 张涛 李淑芬 《生态环境学报》 CSCD 北大核心 2023年第5期866-877,共12页

短花针茅(Stipa breviflora)是荒漠草原的优势物种,兼具优秀的饲用价值和稳固水土的重要作用,其生殖生长受外界环境的影响较大。探究野外短花针茅生长发育过程中的CRY1、CRY2蛋白对不同环境条件的响应关系,可以为进一步研究蓝光受体隐... 短花针茅(Stipa breviflora)是荒漠草原的优势物种,兼具优秀的饲用价值和稳固水土的重要作用,其生殖生长受外界环境的影响较大。探究野外短花针茅生长发育过程中的CRY1、CRY2蛋白对不同环境条件的响应关系,可以为进一步研究蓝光受体隐花色素在不利环境条件下短花针茅生长发育中的调控机制提供有用的信息。以短花针茅转录组数据为基础,利用RACE技术得到生物钟相关基因StbCRY1和StbCRY2 ORF,其编码区分别为2 695 bp和2 176 bp。二者编码酸性蛋白质,皆是亲水蛋白质。Stb CRY1蛋白具有Phr B结构域和Cry-C结构域,Stb CRY2蛋白具有PhrB结构域。进化树分析表明短花针茅CRY1蛋白与野生二粒小麦(Triticum dicoccoides)和普通小麦(Triticum aestivum)CRY1进化关系较为相近,短花针茅CRY2蛋白与大麦(Hordeum innermongolicum)CRY2蛋白亲缘关系相近。利用生物信息学工具预测蛋白质二级结构,两种蛋白质出现α螺旋、无规线团概率为40%左右,出现β转角、延伸链的概率较小。共聚焦定位分析表明StbCRY1和Stb CRY2主要定位于细胞核,少量定位于细胞质。同时利用实时荧光定量PCR技术对不同环境条件、不同开花时期短花针茅营养枝与生殖枝中StbCRY1和StbCRY2基因的表达差异进行分析发现,在增温施氮处理下,短花针茅生殖枝两种基因在开花期表达水平受增温和施氮处理的影响较大,增温施氮交互作用下影响尤为明显,开花中期表达量下调最为显著;营养枝叶片中StbCRY1和StbCRY2主要对增温处理有较明显的响应,不同开花时期表达量都与对照组表达量存在显著差异。该文可以为进一步探究气候变化情况下荒漠草原短花针茅生长发育的分子响应机制以及提供基础数据。 展开更多

关键词 短花针茅 StbCRY1 StbCRY2 表达分析 亚细胞定位 基因克隆

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拟蜘蛛牵丝蛋白基因细毛羊毛囊特异表达载体的构建及其转基因细胞株的筛选 被引量：2

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作者 王海涛 孟凡华 +1 位作者 房君 周欢敏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第6期1-6,共6页

试验旨在获得具有毛囊表达特性的转蜘蛛牵丝蛋白基因细胞株。根据GenBank上发表的棒络新妇属蜘蛛的cDNA片段合成拟蜘蛛牵丝蛋白基因单体S,加倍后连入pEGFP-N1框架载体以构建真核表达载体pK-2S,转染新疆美利奴细毛羊皮肤成纤维细胞后筛... 试验旨在获得具有毛囊表达特性的转蜘蛛牵丝蛋白基因细胞株。根据GenBank上发表的棒络新妇属蜘蛛的cDNA片段合成拟蜘蛛牵丝蛋白基因单体S,加倍后连入pEGFP-N1框架载体以构建真核表达载体pK-2S,转染新疆美利奴细毛羊皮肤成纤维细胞后筛选单克隆,并通过PCR在DNA、RNA水平检测阳性克隆。基因合成后测序结果显示序列正确,酶切得到正确目的条带,筛选出阳性克隆并且可以在基因组及cDNA上扩增出目的片段。本研究成功将蜘蛛牵丝蛋白基因转入新疆美利奴细毛羊细胞,并在RNA水平表达,为培育毛囊特异表达蜘蛛牵丝蛋白基因并具有更高机械性能羊毛的新型细毛羊品种奠定基础。 展开更多

关键词 细毛羊 拟蜘蛛牵丝蛋白基因 毛囊特异表达

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绒山羊毛囊干细胞的分离培养及诱导分化鉴定 被引量：2

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作者 王宏 高峰 +1 位作者 刘迎春 周欢敏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第10期139-144,共6页

试验旨在建立绒山羊毛囊干细胞体外分离培养方法,并对其生物学特性和多向分化潜能进行鉴定。利用两步酶消化法和差速贴壁法分离纯化毛囊干细胞,对其进行传代培养,测定生长曲线和克隆形成率,采用油红O和茜素红染色法对第5代毛囊干细胞向... 试验旨在建立绒山羊毛囊干细胞体外分离培养方法,并对其生物学特性和多向分化潜能进行鉴定。利用两步酶消化法和差速贴壁法分离纯化毛囊干细胞,对其进行传代培养,测定生长曲线和克隆形成率,采用油红O和茜素红染色法对第5代毛囊干细胞向成脂和成骨分化情况进行鉴定。结果显示,分离得到的毛囊干细胞形态均一,体积小,呈典型的铺路石状生长,生长曲线呈S型,克隆形成能力强。成脂诱导后,细胞体积增大,细胞质增多,胞内出现小脂滴,诱导12d后,脂滴逐渐增多,油红O染色呈阳性;成骨诱导后,细胞边缘模糊,出现颗粒状结节,经茜素红染色呈阳性。表明获得的绒山羊毛囊干细胞具有多向分化的潜能。 展开更多

关键词 绒山羊 毛囊干细胞 诱导分化

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荷斯坦奶牛乳腺干细胞的成神经诱导鉴定及催乳素对其增殖活性的影响 被引量：1

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作者 刘迎春 陈钰萌 +2 位作者 韩哲先 高峰 周欢敏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期542-548,共7页

本研究旨在探究荷斯坦奶牛乳腺干细胞的多向分化潜能及催乳素对其增殖活性的影响。采用尼氏染色法对乳腺干细胞向神经细胞分化的情况进行鉴定,利用RT-PCR技术对诱导后的乳腺干细胞进行基因水平检测;MTT法检测催乳素对乳腺干细胞增殖活... 本研究旨在探究荷斯坦奶牛乳腺干细胞的多向分化潜能及催乳素对其增殖活性的影响。采用尼氏染色法对乳腺干细胞向神经细胞分化的情况进行鉴定,利用RT-PCR技术对诱导后的乳腺干细胞进行基因水平检测;MTT法检测催乳素对乳腺干细胞增殖活性的影响。结果表明:荷斯坦奶牛乳腺干细胞经成神经诱导后,细胞中有类似神经元的细胞出现,并且细胞周围出现许多微管样的结构,经尼氏染色呈阳性。诱导后神经细胞标记基因NSE和β-Tubulin Ⅲ呈阳性表达。催乳素刺激可促进乳腺干细胞的增殖,低浓度时乳腺干细胞的活力较好,且100ng·mL^(-1)为增殖最适浓度。 展开更多

关键词 荷斯坦奶牛 乳腺干细胞 分化 RT-PCR 催乳素 增殖活性

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转拟蜘蛛牵丝蛋白基因新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系的建立及初步鉴定 被引量：1

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作者 房君 孟凡华 +1 位作者 王海涛 周欢敏 《安徽农业科学》 CAS 2013年第22期9305-9308,共4页

[目的]建立含有拟蜘蛛牵丝蛋白基因的新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系。[方法]采用脂质体转染,将表达拟蜘蛛牵丝基因的质粒pKap-EGFP4S转入新疆美利奴细毛羊成纤维细胞,通过G418毒性筛选获得阳性细胞系,并采用PCR、RT-PCR检测重组细胞中... [目的]建立含有拟蜘蛛牵丝蛋白基因的新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系。[方法]采用脂质体转染,将表达拟蜘蛛牵丝基因的质粒pKap-EGFP4S转入新疆美利奴细毛羊成纤维细胞,通过G418毒性筛选获得阳性细胞系,并采用PCR、RT-PCR检测重组细胞中的目的基因表达。[结果]对体外分离培养的成纤维细胞观察表明细胞形态均为长梭形、活性良好(细胞生长曲线呈S型)、染色体数目为2n=54;通过G418筛选出共43株单克隆细胞系,经PCR鉴定拟蜘蛛牵丝蛋白基因随机整合的细胞系15株,其中挑选4个阳性细胞系经过RT-PCR检测目的基因已转录为mRNA。[结论]成功建立了拟蜘蛛牵丝蛋白基因的新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系,为进一步通过体细胞核移植技术制备被毛含转拟蜘蛛牵丝蛋白基因克隆羊奠定基础。 展开更多

关键词 拟蜘蛛牵丝蛋白基因 细毛羊成纤维细胞 脂质体转染 鉴定

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短花针茅StbCO和StbFT基因全长的克隆与表达差异分析 被引量：1

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作者 赵鸿彬 范宇凤 +3 位作者 张晓馥 范月月 张涛 白雪 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2022年第7期1-12,共12页

光周期调控在植物从营养生长到生殖生长的转变过程中起重要作用,CO和FT基因位于光周期途径的关键位点。参照转录组数据对响应短花针茅开花的主要调控基因StbCO和StbFT基因进行了克隆、亚细胞定位和表达分析,研究短花针茅植物开花与气候... 光周期调控在植物从营养生长到生殖生长的转变过程中起重要作用,CO和FT基因位于光周期途径的关键位点。参照转录组数据对响应短花针茅开花的主要调控基因StbCO和StbFT基因进行了克隆、亚细胞定位和表达分析,研究短花针茅植物开花与气候变化的响应规律。结果表明,StbCO和StbFT基因全长分别为2065bp和1389bp,分别包含1179bp和534bp的完整编码区。亚细胞定位发现,StbCO蛋白位于细胞核,StbFT蛋白分布于细胞质和细胞核。增温和施氮处理下,StbCO和StbFT基因在短花针茅开花的不同时期表达量有较大差异,为进一步解析其在短花针茅开花过程中的功能提供了有用的信息。 展开更多

关键词 短花针茅 StbCO StbFT 基因克隆 表达分析

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硬脂酰辅酶A去饱和酶1基因表达对草原安格斯牛血液脂肪酸组成的影响 被引量：1

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作者 王圆圆 李新淼 +6 位作者 HESHUOTE Mailisi 白玉廷 包音都古荣·金花 呼格吉勒图 侯荣伦 薛强 敖日格勒 《肉类研究》 2022年第2期9-14,共6页

研究硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-coenzyme A desaturase 1,SCD1)基因表达对草原安格斯牛血液脂肪酸组成的影响,采集38头平均体质量(698±34)kg、48月龄草原安格斯牛血液样品,测定其脂肪酸组成与含量,采用实时荧光定量聚合酶链... 研究硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-coenzyme A desaturase 1,SCD1)基因表达对草原安格斯牛血液脂肪酸组成的影响,采集38头平均体质量(698±34)kg、48月龄草原安格斯牛血液样品,测定其脂肪酸组成与含量,采用实时荧光定量聚合酶链式反应测定SCD1基因表达量,一代测序技术检测SCD1基因在C878T位点的突变对实验牛血液脂肪酸组成的影响,分析SCD1基因表达与脂肪酸组成间的相关性。结果表明:血液样品中共测得36种主要脂肪酸,饱和脂肪酸(saturated fatty acids,SFA)以棕榈酸(C_(16:0))和硬脂酸(C_(18:0))为主,含量分别达22.53%和26.95%,单不饱和脂肪酸(monounsaturated fatty acids,MUFA)中油酸(C_(18:1 n-9c))含量最高(15.09%);由SCD1基因表达与脂肪酸组成的显著性分析结果可知,SCD1基因表达对肉豆蔻酸(C_(14:0))、肉豆蔻油酸(C_(14:1))、C_(16:0)、棕榈油酸(C_(16:1))、C_(18:0)、C_(18:1 n-9c)、亚油酸(C_(18:2 n-6c))、MUFA和MUFA/SFA以及C_(14)指数、C_(18)指数、脂肪酸总不饱和指数和伸长指数均影响显著;相关性分析结果显示,SCD1基因表达量与C_(16:0)、C_(16:1)、C_(18:0)、C_(18:1 n-9c)和MUFA含量均呈正相关;SCD1基因在878位点处出现了C/T突变,有CC、TT和CT 3种基因型,不同基因型与脂肪酸组成之间均无显著相关性。综上所述,草原安格斯牛血液中的SCD1基因表达对其脂肪酸组成具有调控作用,可作为遗传标记参考基因。 展开更多

关键词 草原安格斯牛 血液脂肪酸组成 硬脂酰辅酶A去饱和酶1基因表达量 相关性 硬脂酰辅酶A去饱和酶1基因分型

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Peg3,Cdkn1c和Gtl2基因在克隆绵羊和自然分娩绵羊中的DNA甲基化水平检测（英文）

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作者 王峰 潘静 +6 位作者 赵丽霞 刘羿羿 张立 王申元 李璐 周欢敏 张东 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2016年第7期706-715,共10页

尽管研究证明很多克隆动物存在DNA甲基化异常的情况,却很少有研究比较克隆绵羊与自然分娩绵羊之间的甲基化情况,可能是由于克隆绵羊的获得、绵羊基因组、绵羊基因组印记等因素的限制.本研究中,为了证明克隆绵羊重编程的状况,克隆了Peg3... 尽管研究证明很多克隆动物存在DNA甲基化异常的情况,却很少有研究比较克隆绵羊与自然分娩绵羊之间的甲基化情况,可能是由于克隆绵羊的获得、绵羊基因组、绵羊基因组印记等因素的限制.本研究中,为了证明克隆绵羊重编程的状况,克隆了Peg3基因的差异甲基化区域(differential methylated region,DMR),并且分析了Peg3、Cdkn1c、Gtl2在克隆绵羊和自然分娩绵羊不同组织中的甲基化水平.研究发现,在克隆绵羊和自然分娩绵羊中Peg3呈现为超甲基化水平,在克隆绵羊的肾脏和肺脏中DNA甲基化水平为95.45%、81.18%,相对于正常分娩的绵羊组织中的98.18%、87.27%无显著性差异,而Cdkn1c在两组实验动物中的肾脏和肺脏中表现为非甲基化水平,分别为0%、0.53%、0.53%和0.53%,Gtl2则是低甲基化水平,并且克隆绵羊与正常分娩绵羊之间的DNA甲基化水平无显著性差异(r^2=0.77).这些结果表明,Peg3、Cdkn1c、Gtl2三个印记基因在克隆绵羊和自然分娩绵羊组织中呈现类似甲基化水平,无显著性差异. 展开更多

关键词 DNA甲基化 Peg3 Cdkn1c Gtl2 克隆绵羊

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绵羊胚胎干细胞的分离与增殖培养

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作者 刘春霞 赵瑞媛 周欢敏 《兰州大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期723-729,共7页

研究了囊胚(胚龄、处理方法)、传代方法(机械法和酶法)及培养液对绵羊类胚胎干细胞生长的影响,建立了绵羊类胚胎干细胞的分离培养体系.结果表明,实验获得的体外受精胚用于类胚胎干细胞的分离,具有较好的增殖及传代能力;囊胚的质量和胚... 研究了囊胚(胚龄、处理方法)、传代方法(机械法和酶法)及培养液对绵羊类胚胎干细胞生长的影响,建立了绵羊类胚胎干细胞的分离培养体系.结果表明,实验获得的体外受精胚用于类胚胎干细胞的分离,具有较好的增殖及传代能力;囊胚的质量和胚龄影响绵羊类胚胎干细胞的贴壁及增殖;机械切割(半胚法)处理囊胚,可获得跟免疫法相近的内细胞团贴壁率(半胚法46%,免疫法53.6%);添加了一定浓度的胎牛血清、细胞生长因子、胰岛素及维生素C的DMEM高糖培养液可一定程度地促进类胚胎干细胞的增殖,适于绵羊类胚胎干细胞的培养. 展开更多

关键词 绵羊 内细胞团 胚胎干细胞 分离 传代

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骨髓间充质干细胞为核供体的克隆绵羊的生产与鉴定

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作者 郭园 刘宗正 +4 位作者 刘乐 孟凡华 张焱如 周欢敏 刘春霞 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第11期3011-3018,共8页

本研究旨在采用骨髓间充质干细胞(BMSCs)为核供体进行体细胞核移植,以获得成体干细胞克隆绵羊。选择幼体绵羊BMSCs为核供体,构建重构胚进行克隆胚胎移植,克隆绵羊诞生后,选取IASG上公布的绵羊10个微卫星标记位点,PCR扩增克隆羊、供体细... 本研究旨在采用骨髓间充质干细胞(BMSCs)为核供体进行体细胞核移植,以获得成体干细胞克隆绵羊。选择幼体绵羊BMSCs为核供体,构建重构胚进行克隆胚胎移植,克隆绵羊诞生后,选取IASG上公布的绵羊10个微卫星标记位点,PCR扩增克隆羊、供体细胞及代孕母羊微卫星DNA,利用Quantity One软件进行基因分型,计算供体细胞与克隆羊之间的父子关系相对机会(RCP)值。结果显示,以幼体绵羊BMSCs为核供体,与去核成熟卵母细胞进行核移植,构建重构胚进行电融合,其融合率达80.62%,重构胚发育至桑椹胚阶段,经手术植入20只代孕母羊,获得克隆绵羊5只,成活3只。克隆羊基因型与供体细胞一致,供体细胞与克隆羊之间的RCP≥99.999%,证明克隆羊来自幼体绵羊BMSCs。本试验最终成功获得了首例以BMSCs为核供体的克隆绵羊。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 体细胞核移植 克隆绵羊

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玻璃化冻存对驴卵母细胞超微结构的影响 被引量：2

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作者 庞玉娟 杜兴雨 +4 位作者 李强 张志鹏 张焱如 潘庆杰 曹俊伟 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第1期147-153,共7页

试验旨在探究玻璃化冷冻对驴卵母细胞发育的影响,寻求驴卵母细胞冷冻的最佳条件。通过对不同发育时期的驴卵母细胞进行玻璃化冷冻,冷冻复苏后分别进行成熟培养和孤雌激活,并对GV期未冷冻组(对照组)、GV期冷冻组、IVM-MⅡ冷冻组卵母细胞... 试验旨在探究玻璃化冷冻对驴卵母细胞发育的影响,寻求驴卵母细胞冷冻的最佳条件。通过对不同发育时期的驴卵母细胞进行玻璃化冷冻,冷冻复苏后分别进行成熟培养和孤雌激活,并对GV期未冷冻组(对照组)、GV期冷冻组、IVM-MⅡ冷冻组卵母细胞微丝和线粒体超微结构进行免疫荧光标记,统计冷冻复苏后卵母细胞形态正常率、成熟率、孤雌激活卵裂率、超微结构正常率。结果表明,GV期冷冻组卵母细胞的形态正常率与GV期未冷冻组(对照组)间无显著差异(P>0.05),成熟率和卵裂率均显著低于对照组(P<0.05);IVM-MⅡ冷冻组的卵裂率显著低于对照组(P<0.05),且卵裂后细胞发育受到阻滞。冷冻组微丝在皮质区分布明显减少的卵母细胞数目增多,冷冻组卵母细胞的线粒体数量明显低于对照组,由此可以说明冷冻对卵母细胞超微结构有损伤,从而导致复苏后成熟率下降,影响卵母细胞的受精和体外发育,且GV期冷冻组较IVM-MⅡ冷冻组在微丝与线粒体结构上有较小损伤,发育状态较好。 展开更多

关键词 驴 卵母细胞 玻璃化冷冻 微丝 线粒体

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Sox2基因真核表达载体的构建及转Sox2基因绵羊骨髓间充质干细胞系的建立 被引量：2

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作者 刘怀禹 李浩天 +4 位作者 苏小虎 孟凡华 刘春霞 张焱如 曹俊伟 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第1期16-22,共7页

Sox2是多能干细胞的主要标记之一,有研究发现高表达Sox2基因的神经干细胞作为供体细胞进行核移植时具有较高的重编程能力。本研究旨在通过对绵羊骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)Sox2基因进行外源性增强表达... Sox2是多能干细胞的主要标记之一,有研究发现高表达Sox2基因的神经干细胞作为供体细胞进行核移植时具有较高的重编程能力。本研究旨在通过对绵羊骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)Sox2基因进行外源性增强表达,以期提高其重编程能力,从而改善动物体细胞克隆效率。试验提取绵羊胎儿生殖腺组织RNA,以其为模板克隆Sox2基因cDNA序列,装入真核表达载体pEGFP-N1,构建出pEGFP-N1-Sox2表达载体。经脂质体转染将重组质粒转染入绵羊BMSC,经G418与荧光标记双筛选后挑选单克隆并扩增培养。测序鉴定表明,克隆得到绵羊Sox2基因CDS区全长,重组质粒构建成功;荧光检测表明,成功建立表达Sox2基因的绵羊BMSC系。本研究得到了高表达Sox2基因的绵羊BMSC系,为提高体细胞克隆过程中的重编程效率提供了新思路。 展开更多

关键词 Sox2基因 骨髓间充质干细胞 重编程

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