不同浓度神经肽P物质刺激对内蒙古白绒山羊皮肤干细胞BMP2、BMP4基因表达的影响 被引量：2

1

作者 王亚娟 高峰 +1 位作者 刘迎春 周欢敏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第9期2298-2302,共5页

本研究旨在探讨不同浓度的神经肽P物质(SP)刺激对内蒙古白绒山羊皮肤干细胞BMP2、BMP4基因表达的影响。本研究分别采用0(对照组)、1×10-6、1×10-7、1×10-8、1×10-9 mol/L 5个浓度梯度的SP对内蒙古白绒山羊皮肤干细... 本研究旨在探讨不同浓度的神经肽P物质(SP)刺激对内蒙古白绒山羊皮肤干细胞BMP2、BMP4基因表达的影响。本研究分别采用0(对照组)、1×10-6、1×10-7、1×10-8、1×10-9 mol/L 5个浓度梯度的SP对内蒙古白绒山羊皮肤干细胞进行刺激处理,并分别于第0、7、14及21天采用实时荧光定量PCR方法鉴定BMP2和BMP4基因的表达量。结果显示,1×10-6和1×10-8 mol/L的SP促进BMP2、BMP4的表达;在7和14d时,SP1×10-8 mol/L组BMP2的表达量显著高于SP 1×10-6 mol/L组(P<0.05),SP 1×10-6 mol/L组BMP4的表达量与SP 1×10-8 mol/L组差异不显著(P>0.05);在21d时,SP 1×10-8 mol/L、SP 1×10-6 mol/L组BMP2、BMP4的表达量都明显降低,其中SP 1×10-8 mol/L组BMP2的表达量显著高于1×10-6 mol/L组(P<0.05),SP1×10-6 mol/L组BMP4的表达量与SP 1×10-8 mol/L组差异不显著(P>0.05)。结果表明,SP 1×10-6和1×10-8 mol/L不仅对内蒙古白绒山羊皮肤干细胞BMP2、BMP4基因的表达量有影响,而且为皮肤干细胞的定向分化提供理论基础。 展开更多

关键词 皮肤干细胞 神经肽P物质 BMP 表达

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不同浓度褪黑素刺激对内蒙古绒山羊毛囊干细胞增殖活性的影响 被引量：5

2

作者 曹春花 高峰 +3 位作者 王宏 王亚娟 刘迎春 周欢敏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第2期438-443,共6页

试验旨在探究不同浓度褪黑素刺激对内蒙古绒山毛囊干细胞增殖活性的影响。采用0(对照组)、100、300、500、700pg/mL 5个浓度梯度分别对内蒙古绒山羊毛囊干细胞连续刺激5d,MTT法分别检测各组细胞活性。结果表明,不同浓度褪黑素刺激2d后,... 试验旨在探究不同浓度褪黑素刺激对内蒙古绒山毛囊干细胞增殖活性的影响。采用0(对照组)、100、300、500、700pg/mL 5个浓度梯度分别对内蒙古绒山羊毛囊干细胞连续刺激5d,MTT法分别检测各组细胞活性。结果表明,不同浓度褪黑素刺激2d后,相较于对照组(0pg/mL),褪黑素刺激组未见成团细胞出现,开始出现长梭形细胞且细胞生长不再均一,各刺激组均表现出较高的增殖活性;刺激4d后,500pg/mL褪黑素刺激组毛囊干细胞增殖活性显著高于0、100pg/mL(P<0.01;P<0.05),但与700pg/mL褪黑素刺激组差异不显著(P>0.05)。因此,500pg/mL是内蒙古绒山羊毛囊干细胞增殖的最适浓度。 展开更多

关键词 内蒙古绒山羊 毛囊干细胞 褪黑素 细胞增殖

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蒙古羊骨髓间充质干细胞的分离培养及多向诱导分化 被引量：6

3

作者 韦林盖 刘宗正 +2 位作者 高晋芳 周欢敏 张焱如 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第8期7-12,共6页

本研究旨在建立蒙古羊骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)体外分离、纯化、增殖方法,诱导其向脂肪细胞、成骨细胞及软骨细胞分化。穿刺法抽取蒙古羊骨髓组织,采用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离纯化BMSC,增殖... 本研究旨在建立蒙古羊骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)体外分离、纯化、增殖方法,诱导其向脂肪细胞、成骨细胞及软骨细胞分化。穿刺法抽取蒙古羊骨髓组织,采用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离纯化BMSC,增殖,并测定其生长曲线及细胞倍增时间。对第3代蒙古羊BMSC进行成脂、成骨及成软骨诱导,观察诱导后的细胞形态。采用油红O、茜素红、HE等染色法在组织学水平对BMSC进行成脂、成骨和成软骨分化鉴定。结果显示,蒙古羊BMSC呈现均一梭形成纤维细胞样生长,生长曲线呈S型,生长增殖能力良好。在不同分化诱导之后,细胞呈现脂肪细胞、成骨细胞及软骨细胞的表型特征。表明获得的蒙古羊BMSC具有多向分化潜能,所分离细胞确为骨髓间充质干细胞。 展开更多

关键词 蒙古羊 骨髓间充质干细胞 细胞培养 多向分化

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经皮椎体成形术和经皮椎体后凸成形术治疗骨质疏松性椎体骨折的临床疗效分析 被引量：95

4

作者 吴耀 王峰 +2 位作者 周建强 刘彩云 武瑞星 《中国骨伤》 CAS 2014年第5期385-389,共5页

目的：探讨经皮椎体成形术（percutaneousvertebroplasty，PVP）和经皮椎体后凸成形术（percutaneouskyphoplasty，PKP）治疗骨质疏松性椎体骨折（osteoporoticvertebralcompressionfractures，OVCF）的临床疗效。方法：对2007年1月至2... 目的：探讨经皮椎体成形术（percutaneousvertebroplasty，PVP）和经皮椎体后凸成形术（percutaneouskyphoplasty，PKP）治疗骨质疏松性椎体骨折（osteoporoticvertebralcompressionfractures，OVCF）的临床疗效。方法：对2007年1月至2010年2月收治的0VCF的患者进行回顾性分析，其中采用PVP治疗20例（PVP组），男8例，女12例，年龄54~81岁，平均（66．37±2．34）岁；采用PKP治疗20例（PKP组），男11例，女9例，年龄56-79岁，平均（65．12±3．21）岁。术后1、12周及1年采用疼痛视觉模拟评分（visualanalogueSCale，VAS）法、巴塞尔（Barthelindex，BI）评分方法对术后患者疼痛缓解程度及日常生活功能的改善情况进行评定；通过影像学资料观察责任椎的前缘高度、后凸角度（Cobb角）的变化。结果：PVP组出现椎体后缘骨水泥渗漏1例，但无任何·临床症状，渗漏的骨水泥未用手术方法处理。两组均无切口感染、深静脉血栓等并发症。所有患者获得1年以上随访。术后两组VAS、BI评分均较术前明显下降（P〈0．01），疼痛缓解明显，日常生活功能改善显著。术后l、12周及1年各时间段的VAS、BI评分差异无统计学意义（P〉0．05），两组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。术前，术后1、12周及1年的责任椎体前缘高度、Cobb角变化在PVP组差异无统计学意义（P〉0．05）；在PKP组差异有统计学意义（P〈0．01），术后1、12周及1年比较差异无统计学意义（P〉0．05）。两组术后各时间段的责任椎前缘高度及Cobb角变化有统计学意义（P〈0．01）。结论：PVP和PKP均能明显缓解OVCF患者的疼痛，完全或部分恢复患者的日常生活功能；PKP在恢复责任椎前缘高度和矫正椎体后凸畸形方面具有明显的优势，尤其是对压缩程度较大的椎体高度恢复更明显。 展开更多

关键词 骨质疏松 脊柱骨折 经皮椎体成形术 经皮椎体后凸成形术

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拟蜘蛛牵丝蛋白基因细毛羊毛囊特异表达载体的构建及其转基因细胞株的筛选 被引量：2

5

作者 王海涛 孟凡华 +1 位作者 房君 周欢敏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第6期1-6,共6页

试验旨在获得具有毛囊表达特性的转蜘蛛牵丝蛋白基因细胞株。根据GenBank上发表的棒络新妇属蜘蛛的cDNA片段合成拟蜘蛛牵丝蛋白基因单体S,加倍后连入pEGFP-N1框架载体以构建真核表达载体pK-2S,转染新疆美利奴细毛羊皮肤成纤维细胞后筛... 试验旨在获得具有毛囊表达特性的转蜘蛛牵丝蛋白基因细胞株。根据GenBank上发表的棒络新妇属蜘蛛的cDNA片段合成拟蜘蛛牵丝蛋白基因单体S,加倍后连入pEGFP-N1框架载体以构建真核表达载体pK-2S,转染新疆美利奴细毛羊皮肤成纤维细胞后筛选单克隆,并通过PCR在DNA、RNA水平检测阳性克隆。基因合成后测序结果显示序列正确,酶切得到正确目的条带,筛选出阳性克隆并且可以在基因组及cDNA上扩增出目的片段。本研究成功将蜘蛛牵丝蛋白基因转入新疆美利奴细毛羊细胞,并在RNA水平表达,为培育毛囊特异表达蜘蛛牵丝蛋白基因并具有更高机械性能羊毛的新型细毛羊品种奠定基础。 展开更多

关键词 细毛羊 拟蜘蛛牵丝蛋白基因 毛囊特异表达

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绒山羊毛囊干细胞的分离培养及诱导分化鉴定 被引量：2

6

作者 王宏 高峰 +1 位作者 刘迎春 周欢敏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第10期139-144,共6页

试验旨在建立绒山羊毛囊干细胞体外分离培养方法,并对其生物学特性和多向分化潜能进行鉴定。利用两步酶消化法和差速贴壁法分离纯化毛囊干细胞,对其进行传代培养,测定生长曲线和克隆形成率,采用油红O和茜素红染色法对第5代毛囊干细胞向... 试验旨在建立绒山羊毛囊干细胞体外分离培养方法,并对其生物学特性和多向分化潜能进行鉴定。利用两步酶消化法和差速贴壁法分离纯化毛囊干细胞,对其进行传代培养,测定生长曲线和克隆形成率,采用油红O和茜素红染色法对第5代毛囊干细胞向成脂和成骨分化情况进行鉴定。结果显示,分离得到的毛囊干细胞形态均一,体积小,呈典型的铺路石状生长,生长曲线呈S型,克隆形成能力强。成脂诱导后,细胞体积增大,细胞质增多,胞内出现小脂滴,诱导12d后,脂滴逐渐增多,油红O染色呈阳性;成骨诱导后,细胞边缘模糊,出现颗粒状结节,经茜素红染色呈阳性。表明获得的绒山羊毛囊干细胞具有多向分化的潜能。 展开更多

关键词 绒山羊 毛囊干细胞 诱导分化

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荷斯坦奶牛乳腺干细胞的成神经诱导鉴定及催乳素对其增殖活性的影响 被引量：1

7

作者 刘迎春 陈钰萌 +2 位作者 韩哲先 高峰 周欢敏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期542-548,共7页

本研究旨在探究荷斯坦奶牛乳腺干细胞的多向分化潜能及催乳素对其增殖活性的影响。采用尼氏染色法对乳腺干细胞向神经细胞分化的情况进行鉴定,利用RT-PCR技术对诱导后的乳腺干细胞进行基因水平检测;MTT法检测催乳素对乳腺干细胞增殖活... 本研究旨在探究荷斯坦奶牛乳腺干细胞的多向分化潜能及催乳素对其增殖活性的影响。采用尼氏染色法对乳腺干细胞向神经细胞分化的情况进行鉴定,利用RT-PCR技术对诱导后的乳腺干细胞进行基因水平检测;MTT法检测催乳素对乳腺干细胞增殖活性的影响。结果表明:荷斯坦奶牛乳腺干细胞经成神经诱导后,细胞中有类似神经元的细胞出现,并且细胞周围出现许多微管样的结构,经尼氏染色呈阳性。诱导后神经细胞标记基因NSE和β-Tubulin Ⅲ呈阳性表达。催乳素刺激可促进乳腺干细胞的增殖,低浓度时乳腺干细胞的活力较好,且100ng·mL^(-1)为增殖最适浓度。 展开更多

关键词 荷斯坦奶牛 乳腺干细胞 分化 RT-PCR 催乳素 增殖活性

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转拟蜘蛛牵丝蛋白基因新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系的建立及初步鉴定 被引量：1

8

作者 房君 孟凡华 +1 位作者 王海涛 周欢敏 《安徽农业科学》 CAS 2013年第22期9305-9308,共4页

[目的]建立含有拟蜘蛛牵丝蛋白基因的新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系。[方法]采用脂质体转染,将表达拟蜘蛛牵丝基因的质粒pKap-EGFP4S转入新疆美利奴细毛羊成纤维细胞,通过G418毒性筛选获得阳性细胞系,并采用PCR、RT-PCR检测重组细胞中... [目的]建立含有拟蜘蛛牵丝蛋白基因的新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系。[方法]采用脂质体转染,将表达拟蜘蛛牵丝基因的质粒pKap-EGFP4S转入新疆美利奴细毛羊成纤维细胞,通过G418毒性筛选获得阳性细胞系,并采用PCR、RT-PCR检测重组细胞中的目的基因表达。[结果]对体外分离培养的成纤维细胞观察表明细胞形态均为长梭形、活性良好(细胞生长曲线呈S型)、染色体数目为2n=54;通过G418筛选出共43株单克隆细胞系,经PCR鉴定拟蜘蛛牵丝蛋白基因随机整合的细胞系15株,其中挑选4个阳性细胞系经过RT-PCR检测目的基因已转录为mRNA。[结论]成功建立了拟蜘蛛牵丝蛋白基因的新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系,为进一步通过体细胞核移植技术制备被毛含转拟蜘蛛牵丝蛋白基因克隆羊奠定基础。 展开更多

关键词 拟蜘蛛牵丝蛋白基因 细毛羊成纤维细胞 脂质体转染 鉴定

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硬脂酰辅酶A去饱和酶1基因表达对草原安格斯牛血液脂肪酸组成的影响 被引量：1

9

作者 王圆圆 李新淼 +6 位作者 HESHUOTE Mailisi 白玉廷 包音都古荣·金花 呼格吉勒图 侯荣伦 薛强 敖日格勒 《肉类研究》 2022年第2期9-14,共6页

研究硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-coenzyme A desaturase 1,SCD1)基因表达对草原安格斯牛血液脂肪酸组成的影响,采集38头平均体质量(698±34)kg、48月龄草原安格斯牛血液样品,测定其脂肪酸组成与含量,采用实时荧光定量聚合酶链... 研究硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-coenzyme A desaturase 1,SCD1)基因表达对草原安格斯牛血液脂肪酸组成的影响,采集38头平均体质量(698±34)kg、48月龄草原安格斯牛血液样品,测定其脂肪酸组成与含量,采用实时荧光定量聚合酶链式反应测定SCD1基因表达量,一代测序技术检测SCD1基因在C878T位点的突变对实验牛血液脂肪酸组成的影响,分析SCD1基因表达与脂肪酸组成间的相关性。结果表明:血液样品中共测得36种主要脂肪酸,饱和脂肪酸(saturated fatty acids,SFA)以棕榈酸(C_(16:0))和硬脂酸(C_(18:0))为主,含量分别达22.53%和26.95%,单不饱和脂肪酸(monounsaturated fatty acids,MUFA)中油酸(C_(18:1 n-9c))含量最高(15.09%);由SCD1基因表达与脂肪酸组成的显著性分析结果可知,SCD1基因表达对肉豆蔻酸(C_(14:0))、肉豆蔻油酸(C_(14:1))、C_(16:0)、棕榈油酸(C_(16:1))、C_(18:0)、C_(18:1 n-9c)、亚油酸(C_(18:2 n-6c))、MUFA和MUFA/SFA以及C_(14)指数、C_(18)指数、脂肪酸总不饱和指数和伸长指数均影响显著;相关性分析结果显示,SCD1基因表达量与C_(16:0)、C_(16:1)、C_(18:0)、C_(18:1 n-9c)和MUFA含量均呈正相关;SCD1基因在878位点处出现了C/T突变,有CC、TT和CT 3种基因型,不同基因型与脂肪酸组成之间均无显著相关性。综上所述,草原安格斯牛血液中的SCD1基因表达对其脂肪酸组成具有调控作用,可作为遗传标记参考基因。 展开更多

关键词 草原安格斯牛 血液脂肪酸组成 硬脂酰辅酶A去饱和酶1基因表达量 相关性 硬脂酰辅酶A去饱和酶1基因分型

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骨髓间充质干细胞为核供体的克隆绵羊的生产与鉴定

10

作者 郭园 刘宗正 +4 位作者 刘乐 孟凡华 张焱如 周欢敏 刘春霞 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第11期3011-3018,共8页

本研究旨在采用骨髓间充质干细胞(BMSCs)为核供体进行体细胞核移植,以获得成体干细胞克隆绵羊。选择幼体绵羊BMSCs为核供体,构建重构胚进行克隆胚胎移植,克隆绵羊诞生后,选取IASG上公布的绵羊10个微卫星标记位点,PCR扩增克隆羊、供体细... 本研究旨在采用骨髓间充质干细胞(BMSCs)为核供体进行体细胞核移植,以获得成体干细胞克隆绵羊。选择幼体绵羊BMSCs为核供体,构建重构胚进行克隆胚胎移植,克隆绵羊诞生后,选取IASG上公布的绵羊10个微卫星标记位点,PCR扩增克隆羊、供体细胞及代孕母羊微卫星DNA,利用Quantity One软件进行基因分型,计算供体细胞与克隆羊之间的父子关系相对机会(RCP)值。结果显示,以幼体绵羊BMSCs为核供体,与去核成熟卵母细胞进行核移植,构建重构胚进行电融合,其融合率达80.62%,重构胚发育至桑椹胚阶段,经手术植入20只代孕母羊,获得克隆绵羊5只,成活3只。克隆羊基因型与供体细胞一致,供体细胞与克隆羊之间的RCP≥99.999%,证明克隆羊来自幼体绵羊BMSCs。本试验最终成功获得了首例以BMSCs为核供体的克隆绵羊。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 体细胞核移植 克隆绵羊

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玻璃化冻存对驴卵母细胞超微结构的影响 被引量：2

11

作者 庞玉娟 杜兴雨 +4 位作者 李强 张志鹏 张焱如 潘庆杰 曹俊伟 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第1期147-153,共7页

试验旨在探究玻璃化冷冻对驴卵母细胞发育的影响,寻求驴卵母细胞冷冻的最佳条件。通过对不同发育时期的驴卵母细胞进行玻璃化冷冻,冷冻复苏后分别进行成熟培养和孤雌激活,并对GV期未冷冻组(对照组)、GV期冷冻组、IVM-MⅡ冷冻组卵母细胞... 试验旨在探究玻璃化冷冻对驴卵母细胞发育的影响,寻求驴卵母细胞冷冻的最佳条件。通过对不同发育时期的驴卵母细胞进行玻璃化冷冻,冷冻复苏后分别进行成熟培养和孤雌激活,并对GV期未冷冻组(对照组)、GV期冷冻组、IVM-MⅡ冷冻组卵母细胞微丝和线粒体超微结构进行免疫荧光标记,统计冷冻复苏后卵母细胞形态正常率、成熟率、孤雌激活卵裂率、超微结构正常率。结果表明,GV期冷冻组卵母细胞的形态正常率与GV期未冷冻组(对照组)间无显著差异(P>0.05),成熟率和卵裂率均显著低于对照组(P<0.05);IVM-MⅡ冷冻组的卵裂率显著低于对照组(P<0.05),且卵裂后细胞发育受到阻滞。冷冻组微丝在皮质区分布明显减少的卵母细胞数目增多,冷冻组卵母细胞的线粒体数量明显低于对照组,由此可以说明冷冻对卵母细胞超微结构有损伤,从而导致复苏后成熟率下降,影响卵母细胞的受精和体外发育,且GV期冷冻组较IVM-MⅡ冷冻组在微丝与线粒体结构上有较小损伤,发育状态较好。 展开更多

关键词 驴 卵母细胞 玻璃化冷冻 微丝 线粒体

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Sox2基因真核表达载体的构建及转Sox2基因绵羊骨髓间充质干细胞系的建立 被引量：2

12

作者 刘怀禹 李浩天 +4 位作者 苏小虎 孟凡华 刘春霞 张焱如 曹俊伟 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第1期16-22,共7页

Sox2是多能干细胞的主要标记之一,有研究发现高表达Sox2基因的神经干细胞作为供体细胞进行核移植时具有较高的重编程能力。本研究旨在通过对绵羊骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)Sox2基因进行外源性增强表达... Sox2是多能干细胞的主要标记之一,有研究发现高表达Sox2基因的神经干细胞作为供体细胞进行核移植时具有较高的重编程能力。本研究旨在通过对绵羊骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)Sox2基因进行外源性增强表达,以期提高其重编程能力,从而改善动物体细胞克隆效率。试验提取绵羊胎儿生殖腺组织RNA,以其为模板克隆Sox2基因cDNA序列,装入真核表达载体pEGFP-N1,构建出pEGFP-N1-Sox2表达载体。经脂质体转染将重组质粒转染入绵羊BMSC,经G418与荧光标记双筛选后挑选单克隆并扩增培养。测序鉴定表明,克隆得到绵羊Sox2基因CDS区全长,重组质粒构建成功;荧光检测表明,成功建立表达Sox2基因的绵羊BMSC系。本研究得到了高表达Sox2基因的绵羊BMSC系,为提高体细胞克隆过程中的重编程效率提供了新思路。 展开更多

关键词 Sox2基因 骨髓间充质干细胞 重编程

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马骨髓间充质干细胞向软骨细胞的诱导分化 被引量：1

13

作者 刘乐 王彦妮 +6 位作者 庞玉娟 张婷婷 刘紫佳 朱梦 曹俊伟 张焱如 刘春霞 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第2期417-424,共8页

试验旨在建立马骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)细胞系,并诱导其向软骨细胞分化。通过获取马BMSCs,进行细胞培养和纯化,对第3代(P3)细胞进行干细胞特性鉴定,并诱导其向软骨细胞分化,对分化后的细胞染色,并... 试验旨在建立马骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)细胞系,并诱导其向软骨细胞分化。通过获取马BMSCs,进行细胞培养和纯化,对第3代(P3)细胞进行干细胞特性鉴定,并诱导其向软骨细胞分化,对分化后的细胞染色,并检测其软骨细胞特异性基因的表达。结果显示,获得的马BMSCs表达标记基因Sox2和Nanog,并表达间充质干细胞表面标记因子CD44、CD90和CD105,不表达造血细胞表面标志物CD34和CD45。P3代细胞经诱导培养后形态发生改变,阿尔新蓝染色为阳性,并表达软骨细胞特异基因Col,且其表达量随着诱导分化时间的增加而增高。综上表明,本试验建立了马BMSC细胞系,并成功诱导其分化为软骨细胞,为软骨损伤的干细胞治疗提供了试验依据。 展开更多

关键词 马 骨髓间充质干细胞 诱导分化 软骨细胞

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端粒逆转录酶基因修饰对绵羊骨髓间充质干细胞端粒酶活性影响的研究 被引量：1

14

作者 崔岩 李浩天 +2 位作者 刘宗正 曹俊伟 张焱如 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第6期1362-1369,共8页

骨髓间充质干细胞(BMSC)具有多向分化的特性,但其生命周期有限,为进一步探讨端粒逆转录酶(TERT)对端粒酶活性的影响,本试验利用将外源性TERT导入间充质干细胞技术,构建重组表达载体pcDNA3.1-EGFP-TERT,将其转染BMSC,通过筛选及鉴定,结... 骨髓间充质干细胞(BMSC)具有多向分化的特性,但其生命周期有限,为进一步探讨端粒逆转录酶(TERT)对端粒酶活性的影响,本试验利用将外源性TERT导入间充质干细胞技术,构建重组表达载体pcDNA3.1-EGFP-TERT,将其转染BMSC,通过筛选及鉴定,结果显示成功构建了重组表达载体pcDNA3.1-EGFP-TERT。将TERT-BMSCs在体外进行传代培养及生长曲线的测定,利用PCR技术对其原有干细胞因子的表达情况进行了鉴定。结果显示,TERT-BMSC具有快速扩增的能力,细胞形态良好,且仍具有干细胞特性。本试验结果揭示了外源性TERT基因的表达能激活绵羊BMSC的端粒酶活性。 展开更多

关键词 端粒逆转录酶 载体构建 骨髓间充质干细胞

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绒山羊毛囊发育中非编码RNA的研究进展 被引量：2

15

作者 王东 梁加越 +4 位作者 王笑冰 冯娟 张茹 夏慧岩 肖红梅 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第5期1817-1827,共11页

非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)是指从基因组上转录而来,不编码蛋白质,但在RNA水平上能行使一定生物学功能的RNA。非编码RNA的种类较多,种类的不同造成功能的差异。毛囊是绒山羊皮肤特殊的附属物,位于皮肤的真皮层,发生于绒山羊胚胎... 非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)是指从基因组上转录而来,不编码蛋白质,但在RNA水平上能行使一定生物学功能的RNA。非编码RNA的种类较多,种类的不同造成功能的差异。毛囊是绒山羊皮肤特殊的附属物,位于皮肤的真皮层,发生于绒山羊胚胎期。由于真皮细胞和上皮细胞间的信号分子传递,使其发育呈周期性变化,历经生长期、退行期和休止期。近年来,有关ncRNA在绒山羊毛囊发育中作用报道较多。文章就其中的微小RNA(miRNA)、长链非编码RNA(lncRNA)及环状RNA(circRNA)的生物发生及其在绒山羊毛囊发育中的作用机制进行了归纳、总结。miRNA是真核生物中存在的一种长18~25 nt的ncRNA分子,可通过与靶信使核糖核酸mRNA特异结合,抑制转录后基因表达。在绒山羊毛囊发育中,miRNA通过抑制相关基因及相关信号通路中关键分子的表达而调控毛囊的发育周期以及毛囊的再生能力。lncRNA是长度超过200 nt的ncRNA,经过剪接,具有polyA尾巴与启动子结构,在绒山羊毛囊发育中能促进毛囊细胞增殖与分化,通过调控基因的靶向表达与多种信号通路互作调节毛囊发育及绒毛生长的周期活动。circRNA是与传统的线性RNA不同的封闭环状RNA,含有许多miRNA结合位点,在绒山羊毛囊发育与绒毛生长中起miRNA分子海绵的作用,即通过miRNA的介导,调控靶基因的表达,促进毛囊干细胞向次级毛囊分化,进而解除与毛囊发育与绒毛生长相关的miRNA对其靶基因的抑制作用提高靶基因的表达水平。笔者通过对miRNA、lncRNA及circRNA的研究进行综述,以期为构建毛囊生长发育的分子调控网络及深入探讨绒山羊毛囊发育的调控机制提供借鉴,为今后更好地利用现代分子生物学技术改善绒毛品质提供理论依据。 展开更多

关键词 MIRNA lncRNA circRNA 绒山羊 毛囊发育

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高寒草原地区安格斯和西门塔尔母牛血液及肌内脂肪酸组成特性 被引量：1

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作者 李新淼 王圆圆 +6 位作者 Heshuote MAILISI 白玉廷 包音都古荣·金花 呼格吉勒图 敖日格勒 侯荣伦 薛强 《肉类研究》 2021年第8期42-47,共6页

随机采集48月龄安格斯和西门塔尔母牛各37头血液样品以及用于肉质分析的各5头母牛背最长肌肉样。样品经过前处理和甲酯化后,利用气相色谱-质谱联用仪测定脂肪酸组成和含量,对血液和肌内脂肪酸组成特性进行分析。结果表明:安格斯和西门... 随机采集48月龄安格斯和西门塔尔母牛各37头血液样品以及用于肉质分析的各5头母牛背最长肌肉样。样品经过前处理和甲酯化后,利用气相色谱-质谱联用仪测定脂肪酸组成和含量,对血液和肌内脂肪酸组成特性进行分析。结果表明:安格斯和西门塔尔母牛血液和肌内脂肪中均测得36种脂肪酸,样品中均含有51%以上的高含量饱和脂肪酸(saturated fatty acids,SFA),且具有以棕榈酸和硬脂酸为主的组成特点,二者总含量分别约占血液和肌内脂肪SFA的92%和89%;不饱和脂肪酸(unsaturated fatty acids,UFA)中油酸相对含量最高,其次为亚油酸;血液和肌内脂肪的油酸含量均约占单不饱和脂肪酸总量的87%,UFA中各主要脂肪酸组成在血液中有显著性差异,而在肌内脂肪中无显著性差异;血液和肌内脂肪中n-6/n-3 PUFA均符合联合国粮农组织(United Nations Food Agriculture Organization,FAO)推荐比例(5~10),血液中P/S高于世界卫生组织(World Health Organization,WHO)推荐标准(≥0.4)。综上所述,高寒草原饲养的纯种安格斯和西门塔尔母牛血液和肌内脂肪酸组成特性相似,UFA符合FAO和WHO理想比值及推荐标准,具有较高的营养价值。 展开更多

关键词 高寒草原饲养 安格斯母牛 西门塔尔母牛 血液脂肪酸 肌内脂肪酸

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纳米抗体在口蹄疫防治中的研究进展

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作者 靳慧茹 武艺 +9 位作者 贾婷 张宏亮 王申元 凌宇 刘羿羿 刘春霞 周欢敏 李璐 张焱如 曹俊伟 《中国动物检疫》 CAS 2022年第11期89-95,共7页

口蹄疫作为一种急性、热性和高度传染性疫病,目前尚缺乏长期有效且能完全抑制其病原的药物或疫苗。纳米抗体是一种新型基因工程抗体,具有生产成本低、与抗原亲和力高、特异性强、相对分子质量小等优点,且结构独特,因而成为对抗病毒的抗... 口蹄疫作为一种急性、热性和高度传染性疫病,目前尚缺乏长期有效且能完全抑制其病原的药物或疫苗。纳米抗体是一种新型基因工程抗体,具有生产成本低、与抗原亲和力高、特异性强、相对分子质量小等优点,且结构独特,因而成为对抗病毒的抗体之一,被用于某些病毒性疾病的预防及治疗。本文从纳米抗体的结构与特性、在口蹄疫诊断中的应用、在中和口蹄疫病毒中的作用以及在口蹄疫治疗中的展望等方面进行综述,探索其作为“探针”来诊断疾病的能力,以及将药物传递到机体内部,作为免疫抑制剂或治疗药物来中和病毒毒力的能力,以期为纳米抗体用于口蹄疫预防提供研发基础及创新思路。 展开更多

关键词 口蹄疫病毒 纳米抗体 诊断 治疗应用

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低温保存对猪精子的损伤研究

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作者 黄清松 韩雪峻 +8 位作者 张宏亮 王申元 凌宇 刘羿羿 刘春霞 张焱如 周欢敏 李璐 曹俊伟 《猪业科学》 2022年第9期104-109,共6页

1前言目前生猪养殖业人工授精主要使用的是鲜精,冻精使用比例仅占1%左右。猪精液的低温保存研究早在18世纪60年代就开始了,研究初期复苏精子的活力仅达到30%,随着研究的不断进行,20世纪初冷冻后复苏猪精子活力可达到60%,但仍然达不到生... 1前言目前生猪养殖业人工授精主要使用的是鲜精,冻精使用比例仅占1%左右。猪精液的低温保存研究早在18世纪60年代就开始了,研究初期复苏精子的活力仅达到30%,随着研究的不断进行,20世纪初冷冻后复苏猪精子活力可达到60%,但仍然达不到生产要求,无法应用于商品猪养殖。 展开更多

关键词 低温保存 生猪养殖业 精子活力 猪精液 猪精子 商品猪 鲜精 人工授精

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