干预改变细胞容积对有核红细胞富集效果的实验研究

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作者 程宁 刘芳 +2 位作者 徐向红 张丽娜 白亚娜 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期307-310,共4页

目的:通过观察干预脐血细胞K+/Cl-离子转运体(KCC)对细胞调节性容量减少(RVD)的生物学改变,为探讨富集胎儿有核红细胞(NRBC)方法提供线索。方法:流式细胞仪计数观察尿素干预脐血KCC转运体后不同密度介质下离心富集NRBC的效果。结果:在高... 目的:通过观察干预脐血细胞K+/Cl-离子转运体(KCC)对细胞调节性容量减少(RVD)的生物学改变,为探讨富集胎儿有核红细胞(NRBC)方法提供线索。方法:流式细胞仪计数观察尿素干预脐血KCC转运体后不同密度介质下离心富集NRBC的效果。结果:在高渗400mmol/L尿素干预10分钟条件下,红细胞体积缩小最大(P<0.01)。干预脐血后1.065g/ml密度介质离心下层红细胞白膜层(未干预下层)NRBC富集量由12.20%升为69.90%,富集增长差异有统计学意义(u=7.96,P<0.05),单个核上层(未干预上层)NRBC由7.15%降为2.00%,减少量差异有统计学意义(u=5.47,P<0.05)。结论:尿素干预脐血可以增加有核红细胞富集率,较传统富集法的富集量更高。 展开更多

关键词 有核红细胞 脐血 尿素 调节性容量减少 流式细胞术

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自噬在As2O3诱导Burkitt淋巴瘤Raji细胞死亡中的作用及机制研究 被引量：12

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作者 李彩丽 陈静 +5 位作者 王蓓 王菲菲 田宝莹 谢蓓 范临兰 魏虎来 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期719-724,共6页

目的研究自噬在As2O3诱导的Raji细胞死亡中的作用及机制。方法透射电镜和MDC荧光染色观察细胞自噬形态,MTT法测定细胞增殖活性;流式细胞术(FCM)及FITC-Annexin-V/PI染色检测细胞周期和细胞凋亡,Western blot检测细胞LC3-Ⅰ/Ⅱ表达及转换... 目的研究自噬在As2O3诱导的Raji细胞死亡中的作用及机制。方法透射电镜和MDC荧光染色观察细胞自噬形态,MTT法测定细胞增殖活性;流式细胞术(FCM)及FITC-Annexin-V/PI染色检测细胞周期和细胞凋亡,Western blot检测细胞LC3-Ⅰ/Ⅱ表达及转换;RT-PCR检测细胞bcl-2 mRNA和p53 mRNA的表达水平。结果 As2O3明显抑制Raji细胞增殖,诱导其细胞周期G2/M阻滞和凋亡,抑制bcl-2基因和增强p53基因表达。同时,As2O3可同步诱发Raji细胞的自噬活性。自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)抑制As2O3诱导的自噬活性,上调bcl-2基因和下调p53基因表达,抑制As2O3对Raji细胞的杀伤效应、降低Raji细胞对As2O3的敏感性。而自噬诱导剂雷帕霉素(Rapa)的作用则与3-MA的效应正好相反。结论细胞凋亡和自噬性细胞死亡共存于As2O3诱导的Raji淋巴瘤细胞死亡中,Bcl-2和p53可能起着关键的调控作用。 展开更多

关键词 自噬 三氧化二砷 RAJI细胞 细胞凋亡 Bcl-2 p53

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锰超氧化物岐化酶模拟化合物诱导K562细胞凋亡的机制研究 被引量：8

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作者 范临兰 魏虎来 +2 位作者 窦伟 刘伟生 张慧芳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1363-1366,共4页

目的观察锰超氧化物岐化酶模拟化合物（mimics of manganese superoxide dismutase,MnSODm）对人白血病K562细胞凋亡诱导作用,并探讨其分子机制。方法以人白血病K562细胞为靶细胞,四氮唑蓝比色法（MTT法）测定细胞增殖活性;Annexin V/P... 目的观察锰超氧化物岐化酶模拟化合物（mimics of manganese superoxide dismutase,MnSODm）对人白血病K562细胞凋亡诱导作用,并探讨其分子机制。方法以人白血病K562细胞为靶细胞,四氮唑蓝比色法（MTT法）测定细胞增殖活性;Annexin V/PI双标记和细胞形态学法检测细胞凋亡;RT-PCR检测bcl-2和bax基因mRNA的表达水平;流式细胞术（FCM）测定Bcl-2和Bax蛋白表达水平、线粒体跨膜电位（Δψm）、细胞色素C（Cyt C）释放和Caspase-3活性变化。结果0.5~10mg·mL-1MnSODm明显抑制K562细胞增殖（P〈0.01）,Annexin V/PI染色显示凋亡细胞明显增多,光学显微镜和透射电镜观察呈现典型的凋亡形态改变;bcl-2基因mRNA和蛋白表达下调,bax基因mRNA和蛋白表达上调,线粒体Δψm降低,Cyt C释放增多,Caspase-3活性增强。结论MnSODm调控Bax/Bcl-2表达,通过线粒体途径诱导K562细胞凋亡。 展开更多

关键词 MnSOD模拟化合物 K562细胞 凋亡 Bcl-2 BAX 膜电位 细胞色素C CASPASE-3

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异紫堇二酮体内外抗肿瘤活性研究 被引量：1

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作者 卜令娜 赵剑喜 +2 位作者 李文广 柳军玺 刘晔玮 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期832-836,共5页

目的异紫堇二酮的体内外抗肿瘤活性及其作用机制的初步研究。方法通过异紫堇二酮对体外培养肿瘤细胞的生长抑制,体内荷S180瘤和荷H22瘤昆明种小鼠的肿瘤生长抑制、体重以及对小鼠免疫器官的影响(脾脏指数、胸腺指数),对其抗肿瘤活性进... 目的异紫堇二酮的体内外抗肿瘤活性及其作用机制的初步研究。方法通过异紫堇二酮对体外培养肿瘤细胞的生长抑制,体内荷S180瘤和荷H22瘤昆明种小鼠的肿瘤生长抑制、体重以及对小鼠免疫器官的影响(脾脏指数、胸腺指数),对其抗肿瘤活性进行综合评价,并通过流式细胞术检测异紫堇二酮作用下肺腺癌细胞(A549)的细胞凋亡及周期分布情况,初步探讨该化合物的抗肿瘤作用机制。结果异紫堇二酮对9种所选肿瘤细胞具有一定的生长抑制作用,IC50值在1.452×104～2.460×104 mol.L-1之间;流式细胞术检测结果显示异紫堇二酮可诱导A549细胞凋亡,使A549细胞阻滞于G0/G1期并随作用时间延长出现明显的凋亡峰;剂量为100和200 mg.kg-1.d-1时,异紫堇二酮对荷S180瘤和荷H22瘤小鼠的抑瘤率均大于40%,但剂量在200 mg.kg-1.d-1时,荷瘤小鼠的胸腺指数与脾脏指数相比较生理盐水组均有明显降低。结论异紫堇二酮具有一定的抗肿瘤活性,其主要是阻断肿瘤细胞由G0/G1期向S期转变来诱导肿瘤细胞死亡。 展开更多

关键词 抗肿瘤 异紫堇二酮 生物碱 活性评价 细胞周期 诱导凋亡

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Mrg受体家族的研究进展

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作者 常民 李威 王锐 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期841-844,共4页

Mrg(mas related gene)受体家族是新发现的G蛋白偶联受体家族,特异性分布于感觉传入神经元上。研究发现Mrg受体家族参与了痛觉、免疫等生理病理过程;Mrg受体的内源性配体的寻找和构效关系研究对揭示此受体系统的生理学角色有重要意义;... Mrg(mas related gene)受体家族是新发现的G蛋白偶联受体家族,特异性分布于感觉传入神经元上。研究发现Mrg受体家族参与了痛觉、免疫等生理病理过程;Mrg受体的内源性配体的寻找和构效关系研究对揭示此受体系统的生理学角色有重要意义;同时针对Mrg受体及其配体的药理学研究对于相关疾病的治疗提供了一个新靶点。 展开更多

关键词 Mrg受体家族 痛觉 配体

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低频超声诱导改进的PLGA微囊药物释放的体外研究 被引量：2

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作者 辛鹏程 王炜 +3 位作者 周秦武 吴勇杰 王珏 卞正中 《中国康复理论与实践》 CSCD 2009年第7期687-690,共4页

目的研究低频超声对改进的PLGA微囊体外药物释放的影响,探讨以该种微囊作为将阿霉素传递到脑组织的超声靶向药物载体的可行性。方法以水溶性药物阿霉素为模型药,用双乳化/溶剂挥发法制备PLGA微囊,并分别用壳聚糖和明胶进行包衣处理。在... 目的研究低频超声对改进的PLGA微囊体外药物释放的影响,探讨以该种微囊作为将阿霉素传递到脑组织的超声靶向药物载体的可行性。方法以水溶性药物阿霉素为模型药,用双乳化/溶剂挥发法制备PLGA微囊,并分别用壳聚糖和明胶进行包衣处理。在低频脉冲超声场(25 kHz)和连续波超声场(35.1 kHz)中对微囊进行处理,测定超声场中微囊的药物释放量。结果壳聚糖包衣和明胶包衣都能明显降低PLGA微囊的突释效应;明胶包衣的PLGA微囊在超声处理下药物的释放明显增加,且脉冲超声的作用要强于连续波超声。结论明胶包衣的PLGA微囊很好的药物控释能力,其药物释放可被25 kHz脉冲超声触发,可望用作超声靶向药物进入脑组织的药物载体。 展开更多

关键词 低频超声 药物传递 阿霉素 聚合物 聚乙交酯丙交酯共聚物(PLGA) 微囊 明胶 壳聚糖

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2型糖尿病小鼠模型血糖干预评价点的实验观察 被引量：9

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作者 蒲瑞阳 史典 +1 位作者 刘莎 程宁 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期224-229,共6页

目的观察2型糖尿病小鼠模型血糖变化规律,探讨餐后2 h血糖作为血糖干预评价点的可行性。方法选取健康C57BL/6小鼠,用高脂饮食加链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病(T2DM)实验组,并设立正常对照。分别测定两组连续空腹血糖及连续随机血糖,分... 目的观察2型糖尿病小鼠模型血糖变化规律,探讨餐后2 h血糖作为血糖干预评价点的可行性。方法选取健康C57BL/6小鼠,用高脂饮食加链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病(T2DM)实验组,并设立正常对照。分别测定两组连续空腹血糖及连续随机血糖,分析小鼠血糖规律,评估餐后2 h血糖作为T2DM小鼠血糖干预评价点的科学性;通过长期观察糖尿病小鼠餐后2 h血糖波动,验证餐后2 h血糖干预评价点的稳定性。结果T2DM小鼠连续空腹血糖显示,餐后空腹2~3 h期间血糖变化幅度相对稳定,禁食超过4 h后,T2DM组小鼠血糖继续大幅度降低,而正常组却能缓慢上升,并保持血糖相对稳定;7周内T2DM小鼠餐后2 h血糖波动显示,餐后2 h血糖稳定。结论餐后2 h血糖能稳定地反映T2DM小鼠模型的血糖变化规律,具有较好的血糖干预实验评价应用价值。 展开更多

关键词 2型糖尿病模型 C57BL/6小鼠 空腹血糖 随机血糖 餐后2 h血糖

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2-脱氧葡萄糖通过降低有氧糖酵解增强白血病K562/ADM耐药细胞对阿霉素的敏感性 被引量：5

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作者 张雪燕 艾子莺 +4 位作者 苟泽鹏 陈静 易娟 赵怀顺 魏虎来 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期126-132,共7页

目的研究2-脱氧葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)通过抑制糖代谢增强白血病K562/ADM多药耐药细胞对阿霉素(adriamycin,ADM)敏感性的作用及机制。方法以白血病K562/ADM及其亲本K562细胞为靶细胞模型,MTT法检测细胞增殖活性,葡萄糖、乳酸... 目的研究2-脱氧葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)通过抑制糖代谢增强白血病K562/ADM多药耐药细胞对阿霉素(adriamycin,ADM)敏感性的作用及机制。方法以白血病K562/ADM及其亲本K562细胞为靶细胞模型,MTT法检测细胞增殖活性,葡萄糖、乳酸、己糖激酶测试盒分析葡萄糖消耗量、乳酸生成量和己糖激酶(hexokinase,HK)活性。Western blot法检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)表达和磷酸化(p-m TOR)以及葡萄糖转运体-4(glucose transporter-4,GLUT-4)的表达。结果与亲本K562细胞相比,白血病K562/ADM耐药细胞HK活性、GLUT-4表达水平和有氧糖酵解能力增强。2-DG能够明显抑制K562/ADM及K562细胞的HK活性、葡萄糖消耗量和乳酸生成量,呈时间-浓度依赖性地抑制白血病细胞的增殖活性。低剂量2-DG和ADM可诱导K562/ADM细胞mT OR高表达及磷酸化水平增高,但2-DG与ADM联合则可有效对抗ADM诱导的K562/ADM细胞mT OR高表达和磷酸化,并可降低GLUT-4的表达,提高K562/ADM细胞对阿霉素的敏感性。结论 2-DG通过竞争性抑制HK活性和抵抗ADM诱发的代偿性mT OR活化,降低GLUT-4表达,有效阻断有氧糖酵解途径而降低K562/ADM耐药细胞的增殖活性、增强其对化疗药物的敏感性。 展开更多

关键词 2-脱氧葡萄糖 阿霉素 多药耐药性 有氧糖酵解 mTOR GLUT-4 白血病

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锰超氧化物歧化酶模拟化合物通过Fas途径诱导白血病K562细胞凋亡 被引量：6

9

作者 范临兰 李娟 +2 位作者 魏虎来 窦伟 刘伟生 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2010年第8期847-850,共4页

目的:探讨锰超氧化物歧化酶模拟化合物(mi mics of manganese superoxide dismutase,MnSODm)对人白血病K562细胞的凋亡诱导效应及作用机制。方法:应用MTT比色法、An-nexin V/PI双标记和细胞形态学法观察细胞凋亡;流式细胞术(FCM)测定Fa... 目的:探讨锰超氧化物歧化酶模拟化合物(mi mics of manganese superoxide dismutase,MnSODm)对人白血病K562细胞的凋亡诱导效应及作用机制。方法:应用MTT比色法、An-nexin V/PI双标记和细胞形态学法观察细胞凋亡;流式细胞术(FCM)测定Fas蛋白表达水平;RT-PCR检测Caspase-3mRNA的表达水平,比色法测定Caspase-3活性变化。结果:MnSODm作用后K562细胞的增殖受到抑制,Annexin V/PI染色显示凋亡细胞明显增多,透射电镜观察呈现典型的凋亡形态改变。同时,Fas蛋白表达水平显著增高,Caspase-3mRNA表达水平明显升高,活性显著增强。结论:MnSODm可能通过Fas途径诱导白血病K562细胞凋亡。 展开更多

关键词 锰超氧化物歧化酶模拟化合物 白血病 细胞凋亡 FAS蛋白 CASPASE-3

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A型肉毒毒素对P物质引发的大鼠离体幽门平滑肌收缩的抑制作用 被引量：3

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作者 任银祥 廉会娟 +2 位作者 宋焱峰 张雪平 侯一平 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期452-456,共5页

目的观察A型肉毒毒素(BTX-A)对内、外源性P物质(SP)引发的大鼠离体幽门平滑肌收缩的影响及其可能机制。方法①使用电场刺激诱导幽门平滑肌内源性神经递质释放,诱发平滑肌收缩,用阿托品阻断胆碱能神经后分别观察NK1受体拮抗剂[D-Arg1,D-P... 目的观察A型肉毒毒素(BTX-A)对内、外源性P物质(SP)引发的大鼠离体幽门平滑肌收缩的影响及其可能机制。方法①使用电场刺激诱导幽门平滑肌内源性神经递质释放,诱发平滑肌收缩,用阿托品阻断胆碱能神经后分别观察NK1受体拮抗剂[D-Arg1,D-Phe5,D-Trp7,9,Leu11]-SP(APTL-SP)和BTX-A对肌条收缩的影响。②每隔30 min加入SP诱发在不同浓度BTX-A中孵育的幽门平滑肌条收缩,持续记录4 h,观察BTX-A对外源性SP所诱导肌条收缩的抑制作用。结果①电场刺激增加幽门平滑肌收缩振幅、频率和张力,该作用可被阿托品1μmol.L-1不完全抑制,余波可分别被APTL-SP 1μmol.L-1或BTX-A10 kU.L-1抑制,被BTX-A抑制后的余波不能再被APTL-SP进一步抑制。②分别用BTX-A4和10 kU.L-1孵育幽门平滑肌条,每隔30 min加入SP 1μmol.L-1,连续观察4 h,SP诱导的收缩张力均随时间逐渐降低,4 h时BTX-A4kU.L-1组收缩张力为给BTX-A前SP诱发张力的(73.4±11.5)%,10 kU.L-1组为(25.1±8.1)%。结论BTX-A对外源性SP和电场刺激诱发的内源性SP引起的离体幽门平滑肌收缩具有抑制作用。 展开更多

关键词 肉毒杆菌毒素 A型 P物质 幽门 肌 平滑 电刺激

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五味子对去卵巢肥胖大鼠体重及血脂等的影响 被引量：6

11

作者 白延斌 郭娇红 +4 位作者 李旭炯 蔺美玲 张小郁 郑天珍 李伟 《实用医学杂志》 CAS 2007年第13期1965-1967,共3页

目的:观察五味子对去卵巢大鼠体重及血脂的影响。方法:切除3个月龄雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠双侧卵巢,观察五味子对体重、摄食量、饮水量的影响,并测定血浆总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、血糖、胰岛素及雌激素的... 目的:观察五味子对去卵巢大鼠体重及血脂的影响。方法:切除3个月龄雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠双侧卵巢,观察五味子对体重、摄食量、饮水量的影响,并测定血浆总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、血糖、胰岛素及雌激素的水平。结果:体重和摄食量手术组明显高于假手术组(P<0.001),五味子组与手术组相比明显降低(P<0.01)。血浆总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白手术组都明显高于假手术组(P<0.001)。五味子组血浆总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白与手术组相比显著降低(P<0.01)。结论:五味子能明显抑制去卵巢大鼠摄食量和体重的增加,降低血浆总胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白。 展开更多

关键词 肥胖症 五味子 去卵巢大鼠 体重 血脂

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siRNA抑制K562/ADM细胞mdr1基因表达并逆转其耐药性 被引量：4

12

作者 高丽萍 魏虎来 +5 位作者 景涛 吴勇杰 陈静 孙静 易娟 赵怀顺 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2007年第1期58-61,共4页

背景与目的白血病耐药性是白血病治疗中的难点,RNAi技术具有特异、高效、毒性小的特点,可高效、特异地抑制特定基因的过度表达。本文研究小干扰RNA分子(siRNA)对白血病多药耐药K562/ADM细胞mdr1基因表达和耐药性的影响。方法设计、筛选... 背景与目的白血病耐药性是白血病治疗中的难点,RNAi技术具有特异、高效、毒性小的特点,可高效、特异地抑制特定基因的过度表达。本文研究小干扰RNA分子(siRNA)对白血病多药耐药K562/ADM细胞mdr1基因表达和耐药性的影响。方法设计、筛选和合成针对mdr1基因的siRNAs(si-mdr1-1,si-mdr1-2),脂质体介导转染K562/ADM细胞;RT-PCR法检测mdr1mRNA的转录;流式细胞术测定P-糖蛋白(P-gp)表达水平;MTT法检测K562/ADM细胞对多柔比星(阿霉素,ADM)的敏感性。结果si-mdr1-1、si-mdr1-2转染24h和48h,si-mdr1-1的抑制率分别为55.5%和22.5%,而si-mdr1-2则分别为16.0%和57.6%。si-mdr1-1和si-mdr1-2作用72h时,P-gp的表达强度分别下降74%和85%。si-mdr1-1和si-mdr1-2均可提高K562/ADM细胞对多柔比星的敏感性、逆转其耐药性,逆转倍数分别为2.52倍和1.96倍。结论siRNA可特异性地沉默mdr1基因的表达,逆转P-gp介导的白血病细胞耐药性。 展开更多

关键词 SIRNA MDR1基因 白血病 耐药性

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巨自噬与分子伴侣介导的自噬在饥饿诱导的Raji细胞中相继顺序被激活 被引量：2

13

作者 李彩丽 辛英 +3 位作者 魏虎来 陈静 王蓓 李敏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期958-961,共4页

目的 研究巨自噬与分子伴侣介导的自噬在饥饿诱导的Raji细胞中出现的先后顺序及其机制。方法用激光共聚焦显微镜和荧光显微镜观察MDC荧光染色后,Raji细胞内自噬体的形成情况;Western blot检测细胞LC3Ⅰ/Ⅱ、 Beclin-1、Hsc70及Lamp-2a... 目的 研究巨自噬与分子伴侣介导的自噬在饥饿诱导的Raji细胞中出现的先后顺序及其机制。方法用激光共聚焦显微镜和荧光显微镜观察MDC荧光染色后,Raji细胞内自噬体的形成情况;Western blot检测细胞LC3Ⅰ/Ⅱ、 Beclin-1、Hsc70及Lamp-2a等蛋白的表达水平。结果在饥饿诱导的Raji细胞中,巨自噬与分子伴侣介导的自噬是相继顺序,而非同步被激活,巨自噬活性在饥饿诱导的最初几小时快速升高并达到峰值,然后随着饥饿时间的延长逐渐下降,而与巨自噬活性下降相伴随的是分子伴侣介导的自噬活性逐渐增加。结论肿瘤细胞在饥饿诱导的不同阶段通过不同的自噬方式应对压力刺激,巨自噬与分子伴侣介导的自噬之间此消彼长、协调补充的关系更有助于肿瘤细胞适应内外环境的变化,维持自身的生长与增殖。 展开更多

关键词 巨自噬 分子伴侣介导的自噬 RAJI细胞 饥饿诱导 BURKITT淋巴瘤 Hsc70

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三氧化二砷对K562/ADM耐药细胞凋亡抑制的逆转作用 被引量：3

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作者 张亚莉 魏虎来 孙利军 《实用医学杂志》 CAS 2007年第23期3651-3654,共4页

目的:研究三氧化二砷(As2O3)诱导白血病K562/ADM耐药细胞凋亡的分子机制。方法:采用MTT比色法检测K562/ADM耐药细胞增殖活性,细胞形态学和annexinV /PI双染色检测细胞凋亡,RT-PCR检测mdr1、bcl-2和caspase-3基因mRNA的表达水平,流式细胞... 目的:研究三氧化二砷(As2O3)诱导白血病K562/ADM耐药细胞凋亡的分子机制。方法:采用MTT比色法检测K562/ADM耐药细胞增殖活性,细胞形态学和annexinV /PI双染色检测细胞凋亡,RT-PCR检测mdr1、bcl-2和caspase-3基因mRNA的表达水平,流式细胞法(FCM)测定P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)和bcl-2蛋白表达及caspase-3活性。结果:As2O3显著抑制K562/ADM耐药细胞的增殖;经As2O3处理后细胞形态上出现典型的凋亡改变,annexinV /PI双染显示凋亡细胞明显增加;mdr1mRNA表达和P-gp合成明显降低,凋亡抑制基因bcl-2mRNA及其蛋白bcl-2表达下调,caspase-3mRNA表达和caspase-3活性显著增强。结论:As2O3诱导K562/ADM耐药细胞凋亡,其主要机制可能为As2O3抑制mdr1和bcl-2基因表达,逆转耐药白血病细胞因bcl-2和P-gp高表达所介导的凋亡抑制。 展开更多

关键词 白血病 三氧化二砷 细胞凋亡 多药耐药抗药性 多药 凋亡抑制 P-糖蛋白 bcl-2 Caspase-3

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NAC拮抗As2O3对外周血淋巴细胞的毒性作用 被引量：1

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作者 李彩丽 魏虎来 苏海翔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期95-98,共4页

目的探讨N-乙酰-L-半胱氨酸(N acetylcysteine,NAC)拮抗As2O3对人淋巴细胞的毒性作用及机制。方法从正常人外周血中分离淋巴细胞,台盼蓝染色检测细胞活性;FITC-Annexin-V/PI染色检测细胞凋亡;电镜观察形态学改变;流式细胞术观察细胞内RO... 目的探讨N-乙酰-L-半胱氨酸(N acetylcysteine,NAC)拮抗As2O3对人淋巴细胞的毒性作用及机制。方法从正常人外周血中分离淋巴细胞,台盼蓝染色检测细胞活性;FITC-Annexin-V/PI染色检测细胞凋亡;电镜观察形态学改变;流式细胞术观察细胞内ROS水平及Bcl-2表达水平。结果 As2O3抑制人外周血淋巴细胞的增殖,细胞呈现典型的凋亡细胞特征性形态学改变,FITC-Annexin-V/PI染色发现凋亡细胞增多,同时,细胞内ROS水平增高和Bcl-2蛋白的表达水平下降。NAC与As2O3联合作用于淋巴细胞,细胞增殖抑制和凋亡均明显降低,细胞内ROS水平明显降低,Bcl-2蛋白表达水平回升。结论 As2O3对人淋巴细胞有明显的毒性效应,NAC可通过清除细胞内ROS和促进Bcl-2蛋白的表达而拮抗As2O3对淋巴细胞的毒性。 展开更多

关键词 N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC) 三氧化二砷(AS2O3) 淋巴细胞 细胞凋亡 活性氧(ROS) Bcl-2 细胞毒性

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内皮细胞对结肠癌细胞系SW480中CD133^+细胞表达VEGF的影响

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作者 尚立娜 杨爱军 +3 位作者 王晨昱 刘伟 牛云霞 李敏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第16期1740-1744,共5页

目的从结肠癌细胞系SW480中分离结肠癌干细胞,并检测内皮细胞对这些细胞表达血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响。方法分别利用免疫磁珠分选技术和无血清培养法富集CD133+细胞,利用MTT法和平板克隆形成... 目的从结肠癌细胞系SW480中分离结肠癌干细胞,并检测内皮细胞对这些细胞表达血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响。方法分别利用免疫磁珠分选技术和无血清培养法富集CD133+细胞,利用MTT法和平板克隆形成实验检测其生物学特性;采用细胞免疫荧光法检测SW480细胞和CD133+细胞中CD133及VEGF的表达;将SW480细胞或磁珠分选CD133+细胞分别在6种培养条件下进行培养:SW480细胞在含血清培养基(serum-supplied medium,SSM)中培养、SW480细胞在无血清培养基(serum-freemedium,SFM)中培养、磁珠分选CD133+细胞在SFM中培养、SW480细胞与内皮细胞在SSM中共培养、SW480细胞与内皮细胞在SFM共培养、磁珠分选CD133+细胞与内皮细胞在SFM共培养,利用免疫组织化学法检测不同培养条件下结肠癌细胞中CD133及VEGF的表达情况。结果 SW480细胞系中存在少量的CD133+细胞,这些细胞能够连续传代并且表现出更强的增殖潜力以及克隆形成能力。经细胞免疫荧光法检测发现SW480细胞高表达VEGF,低表达CD133,而免疫磁珠分选的CD133+细胞所形成的细胞球低表达VEGF,高表达CD133。无血清培养条件下的SW480细胞随着时间的延长CD133表达率逐渐增加,添加内皮细胞诱导后无血清培养的SW480细胞与前者相比CD133阳性率显著增加(P<0.05)。经过1周的连续培养后,CD133+细胞表达VEGF的比例没有变化,添加内皮细胞诱导1周后,CD133+细胞表达VEGF的比例显著增加(P<0.01)。在无血清培养条件下,SW480细胞表达VEGF的比例随着时间的延长有所降低,但是添加内皮细胞诱导后无血清培养1周的细胞与无内皮诱导培养条件下的细胞相比VEGF表达增加(P<0.01)。结论内皮细胞能够促进CD133+细胞的自我更新维持其未分化状态,并且内皮细胞能够通过诱导CD133+细胞表达VEGF来促进血管的生成。 展开更多

关键词 结肠肿瘤 肿瘤干细胞 CD133 血管内皮生长因子类 内皮细胞 新生血管化 病理性

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嗜酸乳杆菌对人舌癌细胞增殖的影响 被引量：6

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作者 史晓艳 陈骏 +2 位作者 车团结 白德成 何祥一 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期87-92,共6页

目的研究嗜酸乳杆菌对人舌癌细胞Tca8113增殖及细胞周期的影响。方法体外培养Tca8113细胞,分别将不同稀释度(原液和4、16倍稀释)的嗜酸乳杆菌上清液、灭活菌液和无细胞提取物与Tca8113细胞共培养,采用倒置显微镜观察细胞形态并行细胞计... 目的研究嗜酸乳杆菌对人舌癌细胞Tca8113增殖及细胞周期的影响。方法体外培养Tca8113细胞,分别将不同稀释度(原液和4、16倍稀释)的嗜酸乳杆菌上清液、灭活菌液和无细胞提取物与Tca8113细胞共培养,采用倒置显微镜观察细胞形态并行细胞计数,磺酰罗丹明B(SRB)法测定细胞增殖率,流式细胞术分析嗜酸乳杆菌各组分对Tca8113细胞增殖及细胞周期的影响,激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)检测细胞内自由基和Ca2+含量。结果嗜酸乳杆菌各组分作用于Tca8113细胞48 h后,在倒置显微镜下观察,细胞由菱形、多角形、铺路石状变为细长形。细胞计数与SRB实验分析:在不同稀释度同一培养时间与不同培养时间同一稀释度培养条件下,嗜酸乳杆菌各组分均可明显抑制Tca8113细胞增殖,抑制力随稀释度增加而降低,随培养时间延长而增强。流式细胞术分析:嗜酸乳杆菌各组分作用Tca8113细胞48 h后,细胞增殖指数降低(P<0.01)。CLSM检测:嗜酸乳杆菌各组分作用Tca8113细胞48 h后细胞内自由基和Ca2+含量均升高(P<0.01)。结论嗜酸乳杆菌代谢产物、灭活菌液、无细胞提取物均可抑制Tca8113细胞增殖,可能与菌体及其代谢产物引起细胞内自由基含量增多、Ca2+超载有关。 展开更多

关键词 TCA8113细胞 嗜酸乳杆菌 细胞增殖 激光扫描共聚焦显微镜

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多频聚焦超声波对细粒棘球蚴囊壁药物通透性的影响

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作者 孙萃萍 叶华 +5 位作者 刘婧 王炜 高海军 包根书 韩俭 景涛 《兰州大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期516-519,共4页

将人工接种感染的小鼠腹腔细粒棘球蚴包囊90个,随机分为A^E 5组,分别用多频聚焦超声不同功率和组合方式进行超声照射.多频聚焦超声辐照后的各组包囊置于含1 00μg/mL阿苯达唑的RPMI 1640培养液中,经不同时间培养后,高效液相色谱法测定... 将人工接种感染的小鼠腹腔细粒棘球蚴包囊90个,随机分为A^E 5组,分别用多频聚焦超声不同功率和组合方式进行超声照射.多频聚焦超声辐照后的各组包囊置于含1 00μg/mL阿苯达唑的RPMI 1640培养液中,经不同时间培养后,高效液相色谱法测定细粒棘球蚴囊内的药物质量浓度,以评价不同功率及辐照次数、辐照后含药培养液中不同培养时间对囊壁药物通透性的影响.结果显示:多频聚焦超声照射可以改变细粒棘球蚴囊壁的药物通透性.三频联合与单频相比,以及两次以上照射与单次照射相比,细粒棘球蚴囊内药物质量浓度差异均具有统计学意义.照射后包囊继续在含药培养基中培养,可进一步提高囊内药物质量浓度.本研究证实多频聚焦超声照射可使细粒棘球蚴囊壁药物通透性持续增加.多频联合超声作用的效果明显优于单频、多次照射优于单次照射.多频多次照射、适当延长包囊在药物中的培养时间能够最大程度地提高囊内药物质量浓度. 展开更多

关键词 多频聚焦超声波 高效液相色谱法 通透性 细粒棘球绦虫 囊壁

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非白色假丝酵母菌代谢产物对人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞增殖的诱导作用

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作者 陈斌 车团结 +1 位作者 白德成 何祥一 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期186-190,共5页

目的研究3种常见的非白色假丝酵母菌对人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞增殖及细胞周期的影响。方法制备热带假丝酵母菌、克鲁斯假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌上清液并行倍比稀释,设1、4、16倍3个稀释度以及对照组。体外培养ECV304细胞,分别... 目的研究3种常见的非白色假丝酵母菌对人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞增殖及细胞周期的影响。方法制备热带假丝酵母菌、克鲁斯假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌上清液并行倍比稀释,设1、4、16倍3个稀释度以及对照组。体外培养ECV304细胞,分别将3种非白色假丝酵母菌不同稀释度的上清液与ECV304细胞共培养,采用MTT法测定培养24、48、72 h后的细胞增殖率;倒置显微镜观察培养48 h后细胞密度的变化;流式细胞术测定培养48 h后对ECV304细胞周期的影响。结果培养24 h后,3种假丝酵母菌1倍稀释的上清液均可促进细胞增殖,4倍稀释的克鲁斯假丝酵母菌也可促进细胞增殖(P<0.05);培养48、72 h后,克鲁斯假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌上清液仍可促进ECV304细胞增殖,而热带假丝酵母菌上清液无论稀释度高低均不能促进ECV304细胞增殖。培养48 h后,克鲁斯假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌上清液组的细胞密度明显增高,同时其G0/G1期细胞所占比例降低,细胞增殖指数(PI)升高(P<0.05);而热带假丝酵母菌组的细胞密度和PI均无明显变化(P>0.05)。结论克鲁斯假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌的代谢产物对ECV304细胞的增殖有诱导作用,临床上应加强非白色假丝酵母菌感染的检测和治疗。 展开更多

关键词 ECV304细胞 非白色假丝酵母菌 增殖 代谢产物

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α-干扰素增强耐药性白血病K562/ADM细胞及其白血病干细胞对阿霉素的敏感性

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作者 高丽丽 易娟 +1 位作者 陈静 魏虎来 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期500-503,共4页

目的研究α-干扰素(interferon alpha,IFN-α)对白血病多药耐药K562/ADM群体细胞及其白血病干细胞(LSC)对细胞周期特异性药物阿霉素敏感性的影响。方法以K562/ADM耐药细胞为靶细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活性;流式细胞术碘... 目的研究α-干扰素(interferon alpha,IFN-α)对白血病多药耐药K562/ADM群体细胞及其白血病干细胞(LSC)对细胞周期特异性药物阿霉素敏感性的影响。方法以K562/ADM耐药细胞为靶细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活性;流式细胞术碘化丙啶(PI)染色和AnnexinV/PI双染色分别测定细胞周期分布和细胞凋亡;抗CD34、CD38和CD123抗体以及Annexin V共染色检测群体细胞中LSC的含量及凋亡率。结果 IFN-α作用后K562/ADM细胞周期分布发生改变,G0/G1期细胞比例减少,S期细胞比例增高。IFN-α与阿霉素联合作用,明显增强阿霉素对K562/ADM细胞的增殖抑制作用,细胞凋亡率增高。IFN-α可提高K562/ADM细胞群体中LSC的含量(比例),且增加LSC对阿霉素的敏感性,凋亡的LSC数量增高。结论 IFN-α促进K562/ADM群体细胞及其LSC进入细胞增殖周期而提高对细胞周期特异性抗癌药物阿霉素的敏感性。 展开更多

关键词 Α-干扰素 阿霉素 细胞周期 白血病干细胞 凋亡 敏感性

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