目的：建立水合氯醛去除成骨细胞初级纤毛的细胞模型,并观察去除成骨细胞初级纤毛对电磁场提高成骨细胞ALP染色和钙化结节染色的影响。方法：贴壁法分离培养3只出生3 d,体重6~9 g的雄性SD大鼠的乳鼠颅骨成骨细胞;待上述细胞生长至融合...目的：建立水合氯醛去除成骨细胞初级纤毛的细胞模型,并观察去除成骨细胞初级纤毛对电磁场提高成骨细胞ALP染色和钙化结节染色的影响。方法：贴壁法分离培养3只出生3 d,体重6~9 g的雄性SD大鼠的乳鼠颅骨成骨细胞;待上述细胞生长至融合状态时传代培养并随机分成4组：不加水合氯醛组（对照组）、2 m M、4 m M和8 m M水合氯醛处理组;将上述4组细胞置于37℃、5%CO2的培养箱培养72 h,用激光共聚焦扫描显微镜观察初级纤毛形态,并用Image-Pro Plus 6.0软件分析成骨细胞初级纤毛发生率;筛选出能有效去除成骨细胞初级纤毛的水合氯醛浓度的细胞,并将其分为以下3组：正常对照组（control group,C）,电磁场处理（electromagnetic fields,EMFs）组及电磁场处理＋4 m M水合氯醛组。向上述3组细胞加入含10%FBS的DMEM培养液继续培养9 d,碱性磷酸酶组织化学染色观察ALP的形成;培养12 d,茜素红染色观察钙化结节的形成。结果：与对照组和2 m M水合氯醛组相比,4 m M水合氯醛能有效地去除成骨细胞初级纤毛的发生（P〈0.01）;去除成骨细胞初级纤毛消弱了EMFs促进成骨细胞ALP和钙化结节的形成,具体表现在：与EMFs组相比,EMFs＋水合氯醛组ALP和钙化结节的染色面积明显减少（P〈0.01）。结论：4 m M水合氯醛能有效去除成骨细胞的初级纤毛;初级纤毛部分参与了电磁场促进成骨细胞ALP和钙化结节的形成,为探讨电磁场促进成骨细胞成熟矿化的机理提供新思路。展开更多
文摘目的：建立水合氯醛去除成骨细胞初级纤毛的细胞模型,并观察去除成骨细胞初级纤毛对电磁场提高成骨细胞ALP染色和钙化结节染色的影响。方法：贴壁法分离培养3只出生3 d,体重6~9 g的雄性SD大鼠的乳鼠颅骨成骨细胞;待上述细胞生长至融合状态时传代培养并随机分成4组：不加水合氯醛组（对照组）、2 m M、4 m M和8 m M水合氯醛处理组;将上述4组细胞置于37℃、5%CO2的培养箱培养72 h,用激光共聚焦扫描显微镜观察初级纤毛形态,并用Image-Pro Plus 6.0软件分析成骨细胞初级纤毛发生率;筛选出能有效去除成骨细胞初级纤毛的水合氯醛浓度的细胞,并将其分为以下3组：正常对照组（control group,C）,电磁场处理（electromagnetic fields,EMFs）组及电磁场处理＋4 m M水合氯醛组。向上述3组细胞加入含10%FBS的DMEM培养液继续培养9 d,碱性磷酸酶组织化学染色观察ALP的形成;培养12 d,茜素红染色观察钙化结节的形成。结果：与对照组和2 m M水合氯醛组相比,4 m M水合氯醛能有效地去除成骨细胞初级纤毛的发生（P〈0.01）;去除成骨细胞初级纤毛消弱了EMFs促进成骨细胞ALP和钙化结节的形成,具体表现在：与EMFs组相比,EMFs＋水合氯醛组ALP和钙化结节的染色面积明显减少（P〈0.01）。结论：4 m M水合氯醛能有效去除成骨细胞的初级纤毛;初级纤毛部分参与了电磁场促进成骨细胞ALP和钙化结节的形成,为探讨电磁场促进成骨细胞成熟矿化的机理提供新思路。
