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水牛YY1基因克隆及其shRNA片段的筛选被引量：7: 1; 作者龚云乔树叶 +3 位作者林浪王梦石德顺李湘萍《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期62-68,共7页; 本试验旨在克隆水牛阴阳因子1(YY1)基因,并筛选获得可有效抑制水牛YY1基因表达的shRNA干扰片段。以水牛成纤维细胞cDNA为模板,采用RT-PCR方法,扩增水牛YY1基因CDS序列,将其连接插入到pMD18-T载体中,进行序列测序并分析。采用Xho I和Eco... 展开更多; 关键词水牛YY1基因 SHRNA 慢病毒表达载体基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

超高效液相色谱-串联质谱同时测定加味左金丸中的9种有效成分被引量：12: 2; 作者覃莎王锦徐远金《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1153-1158,共6页; 建立了同时测定加味左金丸中9种药效成分含量的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法。采用Zorbax RRHD Eclipse Plus C18色谱柱,以含0.2%甲酸的水-甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL/min,在电喷雾电离(ESI)正离子模式下,采... 展开更多; 关键词超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS MS) 有效成分加味左金丸中成药; 在线阅读下载PDF 职称材料

超高效液相色谱-串联质谱双内标法同时测定复方杏香兔耳风胶囊中的10种有效成分被引量：5: 3; 作者范晓苏庞倩徐远金《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期216-223,共8页; 建立了同时测定复方杏香兔耳风胶囊中原儿茶酸、原儿茶醛、绿原酸、野黄芩苷、异绿原酸 C、黄芩苷、木犀草素、芹菜素、白术内酯 III 和白术内酯 I 等10种有效成分含量的超高效液相色谱-串联质谱（ UPLC-MS / MS）双内标分析方法。以咖... 展开更多; 关键词超高效液相色谱-串联质谱有效成分复方杏香兔耳风胶囊 ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry( UPLC-MS MS); 在线阅读下载PDF 职称材料

肠膜明串珠菌ATCC 12291蔗糖磷酸化酶的酶学性质及转糖苷分子改造被引量：7: 4; 作者何贺贺林厚民 +4 位作者寇力丹覃凤兰韦宇拓黄日波杜丽琴《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第20期122-129,共8页; 根据GenBank数据库公布的肠膜明串珠菌ATCC 12291中蔗糖磷酸化酶基因序列,构建重组表达质粒pQE-lmsp.在大肠杆菌Escherichia coli M15/pREP4中诱导表达,镍亲和层析纯化蛋白,进行酶学性质测定和重组酶转糖苷活性的研究.以蔗糖为底物对LMs... 展开更多; 关键词肠膜明串珠菌蔗糖磷酸化酶酶学性质转糖苷功能分子改造; 在线阅读下载PDF 职称材料

黑曲霉H9-30全细胞催化合成低聚异麦芽糖被引量：4: 5; 作者黄楠周波 +3 位作者叶童陈桂光梁智群曾伟《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期36-41,共6页; 以黑曲霉H9-30全细胞为催化剂转化麦芽糖生产低聚异麦芽糖,通过单因素实验确定其摇瓶最佳转化条件为:温度48 ℃,初始pH值4.2,麦芽糖质量浓度为600 g/L,黑曲霉细胞添加量为15 g/L。此条件下,有效三糖(异麦芽糖、潘糖和异麦芽三糖)占总糖... 展开更多; 关键词低聚异麦芽糖全细胞催化黑曲霉; 在线阅读下载PDF 职称材料

美国甘蔗亲本在国内甘蔗高糖育种上的应用分析被引量：2: 6; 作者魏乙斌许誉芝张木清《中国糖料》 2023年第3期7-20,共14页; 甘蔗是世界上最重要的糖料作物之一,高糖育种是甘蔗育种的主要目标,我国甘蔗产业可持续发展的关键在于优良品种的培育和推广应用。本文以1952年以来,我国已审(鉴)定、登记或有一定推广面积且对我国甘蔗产业发展具有一定作用的352个甘蔗... 展开更多; 关键词甘蔗美国甘蔗亲本中国育种程序; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名水牛YY1基因克隆及其shRNA片段的筛选被引量：7: 1; 作者龚云乔树叶林浪王梦石德顺李湘萍; 机构亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室广西大学; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期62-68,共7页; 基金科技部“863”计划项目(2011AA100607) 广西自然科学基金回国基金重点项目(2012GXNSFCB053002) 国家留学回国基金项目(BLH120499); 文摘本试验旨在克隆水牛阴阳因子1(YY1)基因,并筛选获得可有效抑制水牛YY1基因表达的shRNA干扰片段。以水牛成纤维细胞cDNA为模板,采用RT-PCR方法,扩增水牛YY1基因CDS序列,将其连接插入到pMD18-T载体中,进行序列测序并分析。采用Xho I和EcoR I双酶切,将水牛YY1基因编码区定向克隆至pEGFP-N1载体中,构建其真核表达载体pYY1-EGFP-N1。设计2条靶向水牛YY1基因的shRNA序列并构建其慢病毒表达载体,命名为pSicoR-GFP-YY1 shRNA1/2。以pSicoR-GFP和pSieoR-GFP-1864分别为空白对照和阴性对照质粒,采用脂质体转染方法,将YY1真核表达载体分别与2条shRNA慢病毒表达载体共转染293T细胞,48h后观察绿色荧光蛋白EGFP表达情况;72h收集共转染细胞样品,采用qRT-PCR和western-blot方法分析YY1基因的表达水平。结果表明,克隆得到1248 bp的水牛YY1基因CDS序列,其与牛YY1基因的同源性达99%。构建的水牛YY1基因真核表达载体pYY1-EGFP-N1能在水牛胎儿成纤维细胞(BFF)中瞬时表达。酶切分析及序列测定结果表明,所构建的shRNA慢病毒表达载体pSieoR-GFP-YY1 shRNA1/2为阳性克隆。质粒共转染293T细胞48h后,可观察到绿色荧光蛋白EGFP的表达。qRT-PCR结果显示,设计合成的2条shRNA对水牛YY1基因的表达均有抑制效果,其中YY1 shRNA2的抑制效果(93.64%)显著高于YY1 shRNA1(50.77%)(P<0.05),Western-blot分析结果显示,2条shRNA对YY1蛋白表达均有抑制效果。以上结果说明克隆得到水牛YY1基因编码区序列,并获得2条有效抑制其表达的shRNA片段,为进一步阐明YY1基因在水牛早期胚胎发育过程中的作用奠定了基础。; 关键词水牛YY1基因 SHRNA 慢病毒表达载体基因表达; Keywords buffalo YY1 gene shRNA lentiviral expression vector gene expression; 分类号 S823.83 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名超高效液相色谱-串联质谱同时测定加味左金丸中的9种有效成分被引量：12: 2; 作者覃莎王锦徐远金; 机构亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室广西大学化学化工学院; 出处《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1153-1158,共6页; 基金广西自然科学基金项目(桂科自0832034); 文摘建立了同时测定加味左金丸中9种药效成分含量的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法。采用Zorbax RRHD Eclipse Plus C18色谱柱,以含0.2%甲酸的水-甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL/min,在电喷雾电离(ESI)正离子模式下,采用多重反应监测模式进行检测。结果表明,芍药苷、延胡索乙素、药根碱、小檗碱、巴马汀、吴茱萸碱、柴胡皂苷C、柴胡皂苷A、柴胡皂苷D的线性范围分别为0.025～5.0 mg/L、0.001 0～2.0 mg/L、0.002 3～7.2 mg/L、0.002 7～28.9 mg/L、0.002 3～9.1 mg/L、0.005 0～1.0 mg/L、0.050～10 mg/L、0.005～1.0mg/L、0.007 5～1.5 mg/L;检出限分别为5.0、0.20、0.45、0.54、0.45、1.0、10、1.0、1.5μg/L。9种成分的加样回收率为99.3%～105%,相对标准偏差均不大于2.6%。该法快捷、准确、重复性好,已成功用于实际样品的分析。; 关键词超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS MS) 有效成分加味左金丸中成药; Keywords ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry（UPLC-MS/MS） effective components Jiaweizuojin Pills Chinese patent drug; 分类号 O658 [理学—分析化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名超高效液相色谱-串联质谱双内标法同时测定复方杏香兔耳风胶囊中的10种有效成分被引量：5: 3; 作者范晓苏庞倩徐远金; 机构亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室广西大学化学化工学院; 出处《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期216-223,共8页; 基金广西自然科学基金项目(桂科自0832034); 文摘建立了同时测定复方杏香兔耳风胶囊中原儿茶酸、原儿茶醛、绿原酸、野黄芩苷、异绿原酸 C、黄芩苷、木犀草素、芹菜素、白术内酯 III 和白术内酯 I 等10种有效成分含量的超高效液相色谱-串联质谱（ UPLC-MS / MS）双内标分析方法。以咖啡酸和淫羊藿苷为内标（IS），在 ZORBAX RRHD Eclipse Plus C 18色谱柱上，以甲醇和含0.3％甲酸的水为流动相进行梯度洗脱分离，流速为0.3 mL / min。在电喷雾电离（ESI）正、负离子切换模式下，采用多重反应监测模式进行检测。结果表明，原儿茶酸、原儿茶醛、绿原酸、野黄芩苷、异绿原酸 C、黄芩苷、木犀草素、芹菜素、白术内酯 III、白术内酯 I 的线性范围分别为0.00300～24.0 mg / L、0.0170～2.00 mg / L、0.0150～30.0 mg / L、0.00400～30.0 mg / L、0.0105～24.0 mg / L、0.00300～30.0 mg / L、0.00300～5.00 mg / L、0.00600～5.00 mg / L、0.00150～4.00 mg / L、0.000600～0.900 mg / L；检出限分别为1.0、11、5.0、1.5、3.5、1.0、1.0、2.0、0.50、0.20μg / L。10种成分的加样回收率为92.5％～106％，相对标准偏差均不大于3.2％。该方法快速简便、灵敏度高、重复性好，已成功用于实际样品的分析。; 关键词超高效液相色谱-串联质谱有效成分复方杏香兔耳风胶囊 ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry( UPLC-MS MS); Keywords effective components Fufangxingxiangtu’erfeng capsules; 分类号 O658 [理学—分析化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名肠膜明串珠菌ATCC 12291蔗糖磷酸化酶的酶学性质及转糖苷分子改造被引量：7: 4; 作者何贺贺林厚民寇力丹覃凤兰韦宇拓黄日波杜丽琴; 机构亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室广西大学生命科学与技术学院; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第20期122-129,共8页; 基金国家自然科学基金地区科学基金项目（21566003）广西自然科学基金项目(2018GXNSFAA138103); 文摘根据GenBank数据库公布的肠膜明串珠菌ATCC 12291中蔗糖磷酸化酶基因序列,构建重组表达质粒pQE-lmsp.在大肠杆菌Escherichia coli M15/pREP4中诱导表达,镍亲和层析纯化蛋白,进行酶学性质测定和重组酶转糖苷活性的研究.以蔗糖为底物对LMsp进行酶学性质分析,其最适温度和最适pH值分别为40℃和6.5;Km值和Vmax值分别为(34.16±1.219)mmol/L和(370.5±6.049)μmol/(mg·min).当以葡萄糖-1-磷酸为供体时,对于大多数单糖及其糖醇类受体均具有转糖苷活性,尤其对L-阿拉伯糖具有75%的转化效率.然后通过对LMsp进行同源建模和氨基酸序列比对分析,进行分子改造,并比较酶学性质及转糖苷活性的变化.获得7个单点和联合的突变体T180A、T219V、P236S、T180A-T219V、T180A-P236S、T219V-P236S、T180A-T219V-P236S,其中突变体T180A、P236S对L-山梨糖的转糖苷活性分别有13.7%和15%的提高.本研究通过对LMsp的研究,发现其具有良好的酸碱稳定性和对L-阿拉伯糖的高转糖苷活性,并且获得了对于L-山梨糖转糖苷活性提高的突变体,丰富了有关于蔗糖磷酸化酶的性质,并且对该酶的分子改造提供了经验依据.; 关键词肠膜明串珠菌蔗糖磷酸化酶酶学性质转糖苷功能分子改造; Keywords Leuconostoc mesenteroides sucrose phosphorylase enzymatic properties transglycoside molecular modification; 分类号 Q814 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名黑曲霉H9-30全细胞催化合成低聚异麦芽糖被引量：4: 5; 作者黄楠周波叶童陈桂光梁智群曾伟; 机构亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室(广西大学) 广西大学生命科学与技术学院; 出处《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期36-41,共6页; 基金国家自然科学基金(31560448) 广西自然科学基金(2016GXNSFAA380130); 文摘以黑曲霉H9-30全细胞为催化剂转化麦芽糖生产低聚异麦芽糖,通过单因素实验确定其摇瓶最佳转化条件为:温度48 ℃,初始pH值4.2,麦芽糖质量浓度为600 g/L,黑曲霉细胞添加量为15 g/L。此条件下,有效三糖(异麦芽糖、潘糖和异麦芽三糖)占总糖质量分数的50.5%,总低聚异麦芽糖含量为63.3%,达到低聚异麦芽糖工业生产标准。研究结果表明,利用黑曲霉全细胞催化生产低聚异麦芽糖具有较好的操作稳定性,生产IMO-50的半衰期达到20批次(10 d),有望应用于工业化生产低聚异麦芽糖。; 关键词低聚异麦芽糖全细胞催化黑曲霉; Keywords isomaltooligosaccharides whole-cell catalysis Aspergillus niger; 分类号 TS245.5 [轻工技术与工程—制糖工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名美国甘蔗亲本在国内甘蔗高糖育种上的应用分析被引量：2: 6; 作者魏乙斌许誉芝张木清; 机构广西生物学重点实验室/亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室; 出处《中国糖料》 2023年第3期7-20,共14页; 基金财政部和农业农村部国家现代农业产业技术体系(糖料)专项(CARS170109)资助。; 文摘甘蔗是世界上最重要的糖料作物之一,高糖育种是甘蔗育种的主要目标,我国甘蔗产业可持续发展的关键在于优良品种的培育和推广应用。本文以1952年以来,我国已审(鉴)定、登记或有一定推广面积且对我国甘蔗产业发展具有一定作用的352个甘蔗品种为材料,分析其亲本构成,并统计由美国品种直接或间接作为亲本育成甘蔗品种的数目及美国品种作为亲本的使用情况,分析美国品种的来源、分布与特点,总结美国甘蔗亲本对我国甘蔗高糖育种的贡献,以期为甘蔗产业发展提供有益参考。; 关键词甘蔗美国甘蔗亲本中国育种程序; Keywords sugarcane American sugarcane parents breeding program in China; 分类号 S566.1 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	水牛YY1基因克隆及其shRNA片段的筛选	龚云乔树叶林浪王梦石德顺李湘萍	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2014	7	在线阅读下载PDF 职称材料
2	超高效液相色谱-串联质谱同时测定加味左金丸中的9种有效成分	覃莎王锦徐远金	《色谱》 CAS CSCD 北大核心	2012	12	在线阅读下载PDF 职称材料
3	超高效液相色谱-串联质谱双内标法同时测定复方杏香兔耳风胶囊中的10种有效成分	范晓苏庞倩徐远金	《色谱》 CAS CSCD 北大核心	2014	5	在线阅读下载PDF 职称材料
4	肠膜明串珠菌ATCC 12291蔗糖磷酸化酶的酶学性质及转糖苷分子改造	何贺贺林厚民寇力丹覃凤兰韦宇拓黄日波杜丽琴	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2019	7	在线阅读下载PDF 职称材料
5	黑曲霉H9-30全细胞催化合成低聚异麦芽糖	黄楠周波叶童陈桂光梁智群曾伟	《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心	2019	4	在线阅读下载PDF 职称材料
6	美国甘蔗亲本在国内甘蔗高糖育种上的应用分析	魏乙斌许誉芝张木清	《中国糖料》	2023	2	在线阅读下载PDF 职称材料