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基于转录组学的白扁豆总皂苷抑制前列腺癌细胞系PC-3细胞生长的机制研究 被引量:2
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作者 袁强华 韩君 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1597-1606,共10页
目的白扁豆总皂苷是中药白扁豆经过提取分离纯化步骤制备得到,关于白扁豆的总皂苷成分如何影响前列腺癌细胞系PC-3细胞的生长情况缺少研究。因此,有必要探讨白扁豆总皂苷对前列腺癌细胞系PC-3细胞生长的机制研究。方法本研究采用CCK8方... 目的白扁豆总皂苷是中药白扁豆经过提取分离纯化步骤制备得到,关于白扁豆的总皂苷成分如何影响前列腺癌细胞系PC-3细胞的生长情况缺少研究。因此,有必要探讨白扁豆总皂苷对前列腺癌细胞系PC-3细胞生长的机制研究。方法本研究采用CCK8方法检测不同浓度的白扁豆总皂苷对前列腺癌细胞系PC-3细胞生长的影响。利用转录组学分析白扁豆总皂苷抑制前列腺癌细胞系PC-3细胞生长的分子机制,并且进一步通过实时定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)实验对相关差异基因的表达进行验证。利用Western blot和CCK8检测白扁豆总皂苷处理过表达醛脱氢酶7家族成员A1(ALDH7A1)的PC-3细胞存活率。结果随着白扁豆总皂苷浓度升高,前列腺癌细胞PC-3的存活率显著下降,白扁豆总皂苷的IC50值为1086 mg/L。转录组学测序结果显示,与对照组相比,白扁豆总皂苷处理的细胞中有2360个差异表达基因,其中1982个基因上调,378个基因下调。基因功能注释(GO)结果显示,差异表达基因显著富集到与有丝分裂纺锤体检查点(mitotic spindle checkpoint)、纺锤体组装检查点(spindle assembly checkpoint)等一系列跟癌症的发生发展密切相关的生物学过程。此外,基因组京都百科全书(KEGG)分析结果也显示,差异表达基因富集在肿瘤代谢等信号通路。进一步对其中的差异基因进行验证,结果显示,与对照组相比,白扁豆总皂苷处理的前列腺癌细胞中ALDH7A1、甘氨酸C-乙酰转移酶(GCAT)和磷酸甘油酸变位酶家族成员4(PGAM4)的蛋白质表达水平明显降低(P<0.05),而二甲基甘氨酸脱氢酶(DMGDH)和胱硫醚β合成酶样(CBSL)的蛋白质表达水平显著升高(P<0.001)。体外细胞实验结果表明,白扁豆总皂苷通过下调前列腺癌细胞中ALDH7A1的表达抑制PC-3细胞生长。结论白扁豆总皂苷可能通过下调ALDH7A1表达从而在体外抑制前列腺癌细胞的生长。 展开更多
关键词 前列腺癌 白扁豆总皂苷 转录组学测序
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中药口服固体制剂原辅料近红外光谱数据库的构建及应用 被引量:13
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作者 张坤峰 王政 +3 位作者 曹君杰 张志强 乔延江 徐冰 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期1-9,共9页
建立了中药口服固体制剂原辅料近红外(NIR)光谱数据库,采用模式识别方法研究了NIR光谱数据在物料分类和物性预测中的应用。使用便携式近红外光谱仪快速测量149批原辅料粉末的NIR漫反射光谱数据,并录入iTCM数据库。利用主成分分析(PCA)... 建立了中药口服固体制剂原辅料近红外(NIR)光谱数据库,采用模式识别方法研究了NIR光谱数据在物料分类和物性预测中的应用。使用便携式近红外光谱仪快速测量149批原辅料粉末的NIR漫反射光谱数据,并录入iTCM数据库。利用主成分分析(PCA)法探究NIR光谱数据对已知结构物料的分类能力,采用偏最小二乘(PLS)法研究了NIR光谱对原辅料物性参数和直接压片片剂性能的预测能力。经标准正态变量变换(SNV)+Savitzky-Golay(SG)平滑+一阶导数处理后的NIR光谱数据对微晶纤维素、乳糖、乙基纤维素、交联聚维酮和羟丙基甲基纤维素这5类辅料的区分能力较好。NIR光谱数据与原辅料粉末粒径、密度和吸湿性的相关性较强。NIR光谱信息作为物料物理性质的补充,可提高粉末直接压片片剂性能预测模型的性能。NIR光谱数据是iTCM数据库物性参数数据的补充,物性参数与NIR光谱数据的结合能更全面地表征原辅料的性质。 展开更多
关键词 近红外光谱法 数据库 物性表征 模式识别 药用辅料 中药浸膏粉
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基于UHPLC-Q-Exactive-MS技术的猪牙皂化学成分分析 被引量:3
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作者 韩君 《安徽农业科学》 CAS 2020年第24期201-203,共3页
[目的]定性分析猪牙皂的化学成分组成。[方法]采用UHPLC-Q-Exactive-MS技术,对比相关文献,通过Xcalibur软件分析鉴定猪牙皂中化学成分。[结果]鉴定了猪牙皂中17个化合物,包括3个酚类成分、7个黄酮类成分、7个皂苷类成分。[结论]该方法... [目的]定性分析猪牙皂的化学成分组成。[方法]采用UHPLC-Q-Exactive-MS技术,对比相关文献,通过Xcalibur软件分析鉴定猪牙皂中化学成分。[结果]鉴定了猪牙皂中17个化合物,包括3个酚类成分、7个黄酮类成分、7个皂苷类成分。[结论]该方法专属性好、结果可靠,为猪牙皂质量控制及药效物质基础提供参考。 展开更多
关键词 猪牙皂 化学成分 UHPLC-Q-Exactive-MS 皂苷类
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白扁豆总皂苷的含量测定与成分分析 被引量:8
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作者 韩君 《安徽农业科学》 CAS 2021年第8期195-198,共4页
[目的]对白扁豆进行提取分离纯化以及含量测定与成分分析。[方法]用石油醚对粉碎的白扁豆脱脂,80%乙醇进行回流提取,正丁醇萃取,浓缩正丁醇得白扁豆总皂苷。白扁豆总皂苷粗提物通过硅胶柱、中压C_(18)色谱柱进行进一步纯化,用薄层监测... [目的]对白扁豆进行提取分离纯化以及含量测定与成分分析。[方法]用石油醚对粉碎的白扁豆脱脂,80%乙醇进行回流提取,正丁醇萃取,浓缩正丁醇得白扁豆总皂苷。白扁豆总皂苷粗提物通过硅胶柱、中压C_(18)色谱柱进行进一步纯化,用薄层监测收集富集皂苷类成分的洗脱液,得到需要成分。采用紫外可见分光光度计(UV)测定,以0.5%香草酸-冰醋酸溶液和高氯酸为显色剂,测定波长为540 nm,并采用四极杆-静电场轨道肼高分辨质谱仪(UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)在负离子模式下对总皂苷进行成分分析。[结果]白扁豆总皂苷通过硅胶柱、中压C_(18)色谱柱纯化得到较纯的总皂苷。总皂苷UV测定的线性范围为0.0096~0.0192 mg/mL(R^(2)=0.9981);平均回收率为98.15%。白扁豆总皂苷共鉴定出18个化合物。[结论]采用硅胶柱干法上样及中压C_(18)色谱柱分离纯化,该方法纯化度高。UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS技术与UV法可用于白扁豆总皂苷的定性与定量分析,为后续白扁豆总皂苷生物活性研究提供数据支撑。 展开更多
关键词 白扁豆 总皂苷 提取纯化 含量测定 成分分析 紫外可见分光光度计 液相色谱-质谱联用
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制刺猬皮水提取物对DSS诱导小鼠溃疡性结肠炎的保护作用 被引量:2
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作者 夏侯志楷 韩君 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1638-1649,共12页
溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种以肠道黏膜慢性炎症为特征的疾病,其具体发病机制尚未完全明确。制刺猬皮作为中药,在治疗便血和痔疮方面已展现出良好的抗炎效果。然而,其对溃疡性结肠炎的治疗作用尚待深入研究。本研究旨在... 溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种以肠道黏膜慢性炎症为特征的疾病,其具体发病机制尚未完全明确。制刺猬皮作为中药,在治疗便血和痔疮方面已展现出良好的抗炎效果。然而,其对溃疡性结肠炎的治疗作用尚待深入研究。本研究旨在探索制刺猬皮水提取物对葡聚糖硫酸钠盐(dextran sulfate sodium salt,DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎的保护效果及其可能的作用机制。通过给小鼠提供含3%DSS的饮用水,成功模拟出溃疡性结肠炎的病理变化。HE染色结果揭示,制刺猬皮水提取物可以显著减轻DSS引起的结肠损伤。转录物组测序结果鉴别出10个关键的炎症相关基因(IL-6、CSF2、TNF、IL10、IFN-γ、CXCL1、CXCL2、CXCL5、CXCL9、CXCL10),通过qRT-PCR和Western印迹检测验证,这些基因在制刺猬皮水提取物作用下均显著下调(P<0.05)。IF结果进一步表明,制刺猬皮水提取物能够降低DSS诱导的结肠中M1型巨噬细胞比例的增加。利用单细胞测序,深入挖掘了不同细胞类型之间的通讯关系,尤其揭示了M1型巨噬细胞和成纤维细胞间的交流特别强烈。随后的qRT-PCR和Western印迹检测结果显示,制刺猬皮水提取物能够显著降低DSS引发的结肠组织纤维化相关基因的表达(P<0.05)。本研究结果表明,制刺猬皮水提取物通过抑制M1型巨噬细胞极化,降低炎性因子的表达,以及阻止M1型巨噬细胞与成纤维细胞的强烈交流,从而对DSS诱导的溃疡性结肠炎产生保护效果。这些发现不仅揭示了制刺猬皮水提取物对结肠炎的治疗机制,也为其在临床中的应用提供了新的理论基础。 展开更多
关键词 制刺猬皮 转录物组测序 单细胞测序 结肠炎性因子 结肠M1型巨噬细胞
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