经脐单孔腹腔镜乳头式输尿管膀胱再植术初步体会 被引量：8

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作者 韩金利 黄健 +7 位作者 许可慰 林天歆 江春 黄海 尹心宝 张彩霞 谢文练 姚友生 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期448-450,共3页

【目的】探讨采用自制多通道套管和常规器械经脐行腹腔镜下乳头式输尿管膀胱再植术的可行性和疗效。【方法】2009年4月至2009年12月对9例输尿管末端狭窄或异位开口的患者行腹腔镜输尿管膀胱再植术。气管内全麻下经脐部切口置入自制多通... 【目的】探讨采用自制多通道套管和常规器械经脐行腹腔镜下乳头式输尿管膀胱再植术的可行性和疗效。【方法】2009年4月至2009年12月对9例输尿管末端狭窄或异位开口的患者行腹腔镜输尿管膀胱再植术。气管内全麻下经脐部切口置入自制多通道套管(用手套和两个弹性橡胶环制作而成)。从髂血管分叉处找到并游离异常输尿管至膀胱壁段处切断,末端1cm纵行切开外翻缝合形成乳头,输尿管内置双J管,从膀胱后顶部切口插入膀胱约1～1.5cm,4-0可吸收线间断吻合6针,检查无渗漏后放置盆腔引流。【结果】全部手术均在单孔腹腔镜下成功完成,无需术中增加套管或开放手术。平均手术时间为87min,平均估计失血量小于30mL,无术中并发症发生,术后1d可起床活动,引流管、尿管、双J管分别在2d、7d、30d拔除,内镜下可见输尿管乳头,术后2～3月静脉尿路造影(IVU)及膀胱尿道造影未见吻合口狭窄和反流,脐部切口美观。【结论】经脐单孔腹腔镜下输尿管膀胱再植术具有创伤小、美观经济、恢复快的优点。输尿管乳头式膀胱再植法狭窄率低、抗反流效果好,镜下操作简便,值得推广应用。 展开更多

关键词 腹腔镜 单孔系统 输尿管膀胱再植术 脐

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输尿管镜钬激光碎石术102例报告 被引量：8

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作者 谢文练 黄健 +4 位作者 韩金利 许可慰 郭正辉 姚友生 胡道琴 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第B06期163-164,共2页

[目的]探讨经输尿管镜钬激光碎石术治疗输尿管结石的临床效果。[方法]102例输尿管结石,经尿道、膀胱置入输尿管镜抵达结石处,将光纤头接触结石,设置工作能量1.0-1.5焦耳,频率8-10 Hz,采用连续脉冲方式粉碎结石。[结果]102例中96例碎石成... [目的]探讨经输尿管镜钬激光碎石术治疗输尿管结石的临床效果。[方法]102例输尿管结石,经尿道、膀胱置入输尿管镜抵达结石处,将光纤头接触结石,设置工作能量1.0-1.5焦耳,频率8-10 Hz,采用连续脉冲方式粉碎结石。[结果]102例中96例碎石成功,成功率94.1%。上段碎石成功率90.3%(28/31),中段碎石成功率96.4%(27/28),下段碎石成功率95.3%(41/43)。6例失败改开放手术或体外冲击波碎石术,其中1例因前列腺增生输尿管镜入镜困难,2例因输尿管扭曲无法接触结石,1例因输尿管穿孔,尿外渗严重,2例因碎石中结石移至肾内,残留较大结石。手术时间20～90min,平均35 min。术中输尿管穿孔4例,无输尿管离断、严重内膜撕脱等术中严重并发症。术后住院2～5 d,平均3.5 d。[结论]经输尿管镜钬激光碎石治疗输尿管结石创伤小、并发症少,能同时处理息肉和狭窄,是输尿管结石的较理想治疗方法。 展开更多

关键词 钬激光 输尿管结石 输尿管镜 碎石术

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急性输尿管结石梗阻合并严重感染的微创治疗 被引量：37

3

作者 韩金利 谢文练 +6 位作者 许可慰 江春 林天歆 郭正辉 姚友生 黄海 黄健 《中国微创外科杂志》 CSCD 2008年第5期435-436,共2页

目的探讨急性输尿管结石梗阻合并严重感染的微创治疗方法与疗效。方法对51例急性上尿路结石梗阻合并严重感染,在积极抗感染、纠正败血症和电解质紊乱的同时,急诊行膀胱镜下逆行插管引流或B超引导下行经皮肾细针穿刺置管引流。感染控制... 目的探讨急性输尿管结石梗阻合并严重感染的微创治疗方法与疗效。方法对51例急性上尿路结石梗阻合并严重感染,在积极抗感染、纠正败血症和电解质紊乱的同时,急诊行膀胱镜下逆行插管引流或B超引导下行经皮肾细针穿刺置管引流。感染控制后行输尿管镜下碎石或体外冲击波碎石术。结果8例膀胱镜下逆行插管成功,其余43例在超声引导下经皮肾微创穿刺造瘘术均一次成功。术中见高压混浊脓性尿液喷出,术后10例有暂时性血尿和腰痛,无气胸、尿外渗、肾周血肿、腹腔脏器损伤等并发症。3例术后造瘘管脱出重新置管。3~7d后所有患者体温和血白细胞数降至正常。结石处理:8例采用体外震波碎石术,35例行输尿管镜下气压弹道碎石术,8例结石上推至肾盂后行体外震波碎石。无输尿管穿孔、输尿管撕裂、严重出血及术后高热等并发症。术后3周内结石全部排净,其中1周内结石排净34例。51例术后随访3~6个月,患肾功能恢复正常。结论经皮肾微创穿刺造瘘引流联合输尿管镜取石或体外震波碎石可迅速控制感染,减少并发症,是急性输尿管结石梗阻伴严重感染的理想微创治疗方法。 展开更多

关键词 尿路梗阻 输尿管结石

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双侧输尿管结石并梗阻性无尿的急诊处理 被引量：2

4

作者 叶运廷 尹心宝 李敏 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第15期2789-2790,共2页

目的:比较不同手术方法急诊处理双侧输尿管结石并梗阻性无尿的疗效。方法:回顾性分析59例因双侧输尿管结石急性梗阻并梗阻性无尿急诊入院患者的临床资料,比较急诊输尿管镜碎石与膀胱镜下逆行插管引流解除梗阻的成功率、肾功能恢复及并... 目的:比较不同手术方法急诊处理双侧输尿管结石并梗阻性无尿的疗效。方法:回顾性分析59例因双侧输尿管结石急性梗阻并梗阻性无尿急诊入院患者的临床资料,比较急诊输尿管镜碎石与膀胱镜下逆行插管引流解除梗阻的成功率、肾功能恢复及并发症发生情况。结果:输尿管镜碎石组解除梗阻的成功率为100%,而膀胱镜下逆行插管组成功率仅为70.8%;术后1周输尿管镜碎石组肾功能完全恢复正常者占85.7%,膀胱镜下逆行插管成功患者中肾功能完全恢复正常者占83.3%;两组病例手术均无输尿管断裂、梗阻性脓肾等重大并发症发生。结论:双侧输尿管结石并梗阻性无尿选择输尿管镜治疗是一种适宜的腔内手术方法,创伤少、成功率高,并可在解除梗阻的同时清除结石。 展开更多

关键词 输尿管结石 梗阻性无尿 输尿管镜 逆行插管

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腹腔镜下膀胱前列腺全切除-原位回肠新膀胱术初步报告 被引量：8

5

作者 黄健 姚友生 +3 位作者 许可慰 郭正辉 江春 韩金利 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期492-495,共4页

【目的】探讨腹腔镜下膀胱前列腺全切除-原位回肠新膀胱手术方法。【方法】为4例52～65岁男性膀胱癌患者施行了手术。采用5个套管针,腹腔镜由脐上或脐下套管针进入,手术者经左侧2个套管针操作,助手经右侧2个套管针操作。游离输精管、精... 【目的】探讨腹腔镜下膀胱前列腺全切除-原位回肠新膀胱手术方法。【方法】为4例52～65岁男性膀胱癌患者施行了手术。采用5个套管针,腹腔镜由脐上或脐下套管针进入,手术者经左侧2个套管针操作,助手经右侧2个套管针操作。游离输精管、精囊,剪开狄氏筋膜分离前列腺后面;游离输尿管下段在其末端切断;剪开前腹壁腹膜反折,游离膀胱前壁;缝扎阴茎背深静脉复合体;游离膀胱侧韧带及前列腺侧韧带;在结扎线近端剪断阴茎背深静脉复合体,紧贴前列腺尖端离断尿道;下腹正中耻骨上作6cm切口,取出切除的膀胱前列腺,将回肠拉出切口外,隔离50cm回肠剖开后“M”形折叠形成贮尿囊,将输尿管末段1cm插入贮尿囊后顶部作吻合,贮尿囊最低位开口与尿道断端6针吻合。【结果】手术时间平均约为8h,出血量平均为650mL。术后3周作腹部平片、静脉尿路造影,以及新膀胱造影检查,显示:新膀胱充盈良好,容量约300mL,无输尿管返流及梗阻,所有患者术后1个月内恢复控尿功能。无排尿困难及残余尿。【结论】腹腔镜下切除膀胱前列腺视野清楚,可减少出血,避免尿道括约肌损伤,保留神经血管束;可减少肠管暴露时间,有利用术后肠道功能恢复,减少肠粘连。作一小切口取出膀胱前列腺,并将肠管拉出体外形成贮尿囊,可大大缩减手术时间。 展开更多

关键词 腹腔镜 膀胱切除术 前列腺切除术 原位回肠新膀胱术

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两种不同入路的腹腔镜肾上腺嗜铬细胞瘤切除术 被引量：8

6

作者 许可慰 黄健 +4 位作者 林天歆 郭正辉 姚友生 谢文练 韩金利 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期88-91,96,共5页

【目的】探讨两种不同入路的腹腔镜肾上腺嗜铬细胞瘤切除术。【方法】本组25例,男性14例,女性11例,平均53.3岁。左侧15例,右侧10例。术前均用苯苄胺等药物准备2～4周。经腹腔入路施行腹腔镜肾上腺嗜铬细胞瘤切除术11例,经腹膜后入路14... 【目的】探讨两种不同入路的腹腔镜肾上腺嗜铬细胞瘤切除术。【方法】本组25例,男性14例,女性11例,平均53.3岁。左侧15例,右侧10例。术前均用苯苄胺等药物准备2～4周。经腹腔入路施行腹腔镜肾上腺嗜铬细胞瘤切除术11例,经腹膜后入路14例。在手术刚开始、建立气腹后、分离肿瘤时、切除肿瘤后分别记录心率、平均动脉压、中心静脉压的变化。【结果】1例早期经腹腔入路手术的病例在术中发现肿瘤粘连紧密改为开放性手术,其余24例在腹腔镜下顺利切除肿瘤。术后病理检查证实均为肾上腺嗜铬细胞瘤。术中脉搏血压没有剧烈波动。术后血压稳定,疼痛较轻,术后5～7d出院。经腹腔入路组与经腹膜后入路组在手术中心率、平均动脉压、中心静脉压以及手术时间和出血量等方面均没有显著差异(P>0.05)。无气胸、腹腔内脏器损伤、肠粘连等并发症。【结论】两种不同的入路施行腹腔镜肾上腺嗜铬细胞瘤切除术都是安全可行,具有操作精细、创伤小、恢复快等优点。 展开更多

关键词 肾上腺 嗜铬细胞瘤 外科学 腹腔镜

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不阻断腹主动脉和下腔静脉的Fish-Lewis大鼠原位肾移植慢性排斥模型的建立 被引量：4

7

作者 姚友生 黄健 +3 位作者 邹和群 宋尔卫 王铭辉 刘珊英 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期521-523,529,共4页

【目的】建立大鼠原位肾移植研究肾移植慢性排斥的模型。【方法】自1998年8月至2003年1月,以Fisher大鼠作为供体,Lewis大鼠为受体。模拟活体供肾肾移植中供受体同步手术的顺序,采用显微外科技术,进行不阻断腹主动脉和下腔静脉的大鼠原... 【目的】建立大鼠原位肾移植研究肾移植慢性排斥的模型。【方法】自1998年8月至2003年1月,以Fisher大鼠作为供体,Lewis大鼠为受体。模拟活体供肾肾移植中供受体同步手术的顺序,采用显微外科技术,进行不阻断腹主动脉和下腔静脉的大鼠原位肾移植,共完成650例。【结果】此模型并发症少,移植肾术后成活率达98.2%。术后第14天;1个月;2个月;3个月;4个月;5个月和6个月成活率分别为96.8%;95.8%;95.4%;95.4%;94%;94%和92.5%。术后10～12周,开始出现蛋白尿,血肌酐升高的典型慢性排斥反应。【结论】此模型具有手术简单、成功率高、影响肾功能因素少、结果稳定等优点。适应于研究肾移植慢性排斥反应。 展开更多

关键词 大鼠 原位肾移植 慢性排斥 下腔静脉 腹主动脉 术后 阻断 研究 模拟 稳定

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13-MTD通过激活MAPK途径和抑制Akt存活途径诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡 被引量：13

8

作者 蔡清清 林天歆 +4 位作者 范新兰 尹心宝 董文 黄立 林桐榆 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期873-876,共4页

目的:探讨侧链饱和脂肪酸13-甲基十四烷酸(13-MTD)诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的作用机制。方法:140mg/L13-MTD处理体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞和人乳腺正常细胞,采用流式细胞仪检测技术观察13-MTD对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响,免疫... 目的:探讨侧链饱和脂肪酸13-甲基十四烷酸(13-MTD)诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的作用机制。方法:140mg/L13-MTD处理体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞和人乳腺正常细胞,采用流式细胞仪检测技术观察13-MTD对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响,免疫印迹法检测13-MTD处理后细胞内c-Jun氨基末端激酶(JNK),p38,Fas相关死亡结构域蛋白(FADD)和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)等蛋白磷酸化变化。结果:流式细胞仪实验结果显示13-MTD能有效地诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡,但不引起正常人乳腺上皮细胞凋亡。免疫印迹检测显示经13-MTD处理后的人乳腺癌MCF-7细胞JNK和p38磷酸化蛋白明显增加,Akt磷酸化蛋白明显减少。结论:13-MTD是一个新的安全高效抗肿瘤药物,其作用机制可能是通过激活MAPK途径和抑制Akt存活途径来诱导肿瘤细胞凋亡。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 细胞凋亡 13-甲基十四烷酸

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13-甲基十四烷酸诱导膀胱癌细胞株T24凋亡的机制研究 被引量：5

9

作者 尹心宝 林天歆 +4 位作者 许可慰 黄海 江春 韩金利 黄健 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1266-1270,共5页

目的:研究13-甲基十四烷酸诱导膀胱癌T24细胞凋亡的作用,探讨其可能的机制。方法:将不同浓度的13-甲基十四烷酸作用于膀胱癌T24细胞,用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期,TUNEL法检测细胞凋亡指数,蛋白免疫印迹法分析参与... 目的:研究13-甲基十四烷酸诱导膀胱癌T24细胞凋亡的作用,探讨其可能的机制。方法:将不同浓度的13-甲基十四烷酸作用于膀胱癌T24细胞,用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期,TUNEL法检测细胞凋亡指数,蛋白免疫印迹法分析参与凋亡的蛋白。结果:药物处理2h后p38、JNK磷酸化增强,AKT磷酸化减弱,8h后线粒体中细胞色素C释放,FADD及磷酸化FADD没有明显变化,caspase酶底物PARP、lamin B、RB在12h出现明显的裂解片段,且药物诱导T24细胞凋亡的过程有时间浓度依赖效应。结论:在13-MTD诱导T24细胞凋亡的过程中p38MAPK和JNK/SAPK信号通路被激活,PI3K/AKT信号通路被抑制,进而激活线粒体凋亡途径,使线粒体内的细胞色素C释放到胞浆,激活caspase酶,裂解相应的凋亡底物laminB、Rb、PARP,促进T24细胞凋亡。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 13-甲基十四烷酸 细胞凋亡 信号转导

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鉴定AP-4是在非激素依赖型前列腺癌中上调L-plastin表达的转录因子 被引量：4

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作者 林天歆 黄健 +5 位作者 许可慰 蔡清清 李泗耀 黄海 尹心宝 江春 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期19-23,共5页

目的鉴定AP-4是在非激素依赖型前列腺癌中调控L-plastin表达的转录因子,进一步阐明非激素依赖型前列腺癌的发病机制。方法在鉴定L-plastin启动子近3′端-216到1序列片段存在明显的转录活性的基础上,利用TFSEARCH软件分析该片段的序列,... 目的鉴定AP-4是在非激素依赖型前列腺癌中调控L-plastin表达的转录因子,进一步阐明非激素依赖型前列腺癌的发病机制。方法在鉴定L-plastin启动子近3′端-216到1序列片段存在明显的转录活性的基础上,利用TFSEARCH软件分析该片段的序列,寻找可能调控L-plastin表达的非甾体激素类转录因子,并用凝胶滞后实验和超滞后实验证实结合于该片段的转录因子,利用PCR定点突变法构建删除该转录因子结合位点的重组子,并检测切除该片段序列后荧光素酶活性,研究该转录因子在非激素依赖型前列腺癌中调控L-plastin表达的作用。结果TFSEARCH软件分析表明在距转录起始点-199～-194bp处含有AP-4转录因子结合位点CAGCTG,凝胶滞后实验和超滞后实验表明AP-4是结合于L-plastin启动子3′端序列CAGCTG的转录因子,删除AP-4结合位点后荧光素酶活性下降。结论AP-4是促进L-plastin在非激素依赖型前列腺癌中表达的重要调控因子。 展开更多

关键词 前列腺癌 L-PLASTIN AP-4 转录因子 非激素依赖

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腹腔镜女性膀胱癌根治性切除-原位回肠新膀胱术初步报告 被引量：8

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作者 黄健 许可慰 +3 位作者 黄海 林天歆 江春 韩金利 《中国微创外科杂志》 CSCD 2008年第4期292-294,共3页

目的探讨腹腔镜女性膀胱癌根治性切除-原位回肠新膀胱术的可行性。方法2003年2月～2006年7月,为8例女性膀胱癌患者施行腹腔镜膀胱、子宫、附件全切除-原位回肠新膀胱术。全麻,仰卧位,头低15°,大腿外展,膝关节屈曲。下腹部置入5个tr... 目的探讨腹腔镜女性膀胱癌根治性切除-原位回肠新膀胱术的可行性。方法2003年2月～2006年7月,为8例女性膀胱癌患者施行腹腔镜膀胱、子宫、附件全切除-原位回肠新膀胱术。全麻,仰卧位,头低15°,大腿外展,膝关节屈曲。下腹部置入5个trocar。在髂血管分叉处剪开腹膜,游离输尿管,切断子宫圆韧带、卵巢韧带。沿盆壁向下游离子宫阔韧带,清扫盆腔淋巴组织。离断主韧带、骶韧带、双侧输尿管及膀胱侧血管蒂。于阔韧带基底部切开腹膜,沿子宫颈两侧游离打开阴道穹隆。切开前腹膜反折,游离膀胱前间隙,切断阴蒂背深静脉复合体,膀胱颈下方0.5cm处切断尿道。靠近阴道穹隆处横断阴道并封闭残端。在下腹正中线上做4～5cm切口,取出标本。切口外构建"M"形去管回肠储尿囊,输尿管"插入式"种植于储尿囊。储尿囊回纳腹腔,在腹腔镜下做储尿囊与尿道吻合。结果8例手术时间(344.5±42.1)min,术中出血(373.9±81.3)ml。术后随访6～46个月,平均26个月,其中>12个月6例,半年内均能自主排尿,1例日间偶有尿失禁,1例夜间尿失禁,1例排尿困难。膀胱容量(333.6±40.4)ml。残余尿量0～183ml,(51.2±18.1)ml。术后输尿管新膀胱吻合口梗阻1例,新膀胱阴道瘘1例。结论腹腔镜行膀胱、子宫、附件全切除能满足女性膀胱癌的肿瘤根治原则,术中操作精细,创伤小,术后大部分患者能自主排尿,但尿失禁及排尿困难发生率略高,术后中远期新膀胱功能及肿瘤根治效果还需进一步临床观察。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 腹腔镜 原位回肠新膀胱术

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改良IME-FICC法检测鼻咽癌患者外周血循环肿瘤细胞及其临床意义分析 被引量：7

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作者 蔡清清 丁颖 +1 位作者 林天歆 黄慧强 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1896-1901,共6页

目的:探索改良免疫磁珠富集联合免疫荧光细胞化学技术(IME-FICC)检测鼻咽癌患者外周血循环肿瘤细胞(CTCs)的临床意义。方法:取76例初治鼻咽癌患者外周血,分离单个核细胞,用与磁珠共价结合的上皮细胞黏附分子(EpCAM)抗体富集外周血中表达... 目的:探索改良免疫磁珠富集联合免疫荧光细胞化学技术(IME-FICC)检测鼻咽癌患者外周血循环肿瘤细胞(CTCs)的临床意义。方法:取76例初治鼻咽癌患者外周血,分离单个核细胞,用与磁珠共价结合的上皮细胞黏附分子(EpCAM)抗体富集外周血中表达EpCAM的肿瘤细胞,再采用宽波段滤板检测细胞角蛋白(CK)8/18阳性的肿瘤细胞。中位随访25个月后,对包括循环肿瘤细胞在内的预后因子做统计分析。结果:20例正常人的外周血中未检测到CK8/18,63例鼻咽癌患者的外周血检测到CK8/18,阳性率为82.9%(63/76,P<0.01)。复发患者治疗前检测到的外周血CK8/18+CTC中位数明显高于不复发患者(P<0.01),两组中位病毒壳蛋白抗原(VCA)-IgA滴度无显著差异(P>0.05)。外周血CK8/18+CTCs个数在3以上,无复发生存率逐渐下降。VCA-IgA滴度不能预测生存。结论:外周血中CK8/18+CTCs是初治鼻咽癌患者的预后不良因素。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 循环肿瘤细胞 免疫磁珠富集 免疫细胞化学

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改良IME-FICC方法对乳腺癌外周血微转移的检测 被引量：5

13

作者 蔡清清 黄慧强 +1 位作者 林天歆 姜文奇 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期596-599,共4页

【目的】探讨一种改良IME-FICC(免疫磁珠富集-免疫荧光细胞化学)法检测乳腺癌外周血微转移癌细胞及其意义。【方法】通过与磁珠共价结合的表皮细胞黏附分子(EpCAM)抗体富集外周血中表达EpCAM的癌细胞,结合免疫荧光化学法检测细胞角蛋白(... 【目的】探讨一种改良IME-FICC(免疫磁珠富集-免疫荧光细胞化学)法检测乳腺癌外周血微转移癌细胞及其意义。【方法】通过与磁珠共价结合的表皮细胞黏附分子(EpCAM)抗体富集外周血中表达EpCAM的癌细胞,结合免疫荧光化学法检测细胞角蛋白(CK)8/18阳性的癌细胞(呈绿荧光)。放置MCF-7乳腺癌细胞于正常人外周血标本中以检验本方法癌细胞回收率及敏感度,检测20例正常女性志愿者及12例Ⅳ期乳腺癌患者治疗前的外周血标本,探索其特异性及临床应用可行性。【结果】免疫磁珠富集后癌细胞回收率达86%～93%,可在107外周血单个核细胞中检测到1个癌细胞,特异性为100%。Ⅳ期乳腺癌患者外周血中CK8/18阳性细胞检出率75%。【结论】改良IME-FICC法是一种简便、省时、敏感性及特异性高的检测方法,有较大的临床应用前景。 展开更多

关键词 乳腺癌 微转移 免疫磁珠富集 免疫细胞化学

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女性腺性膀胱炎膀胱平滑肌层α_(1D)-AR表达的研究 被引量：5

14

作者 林明恩 姚友生 蔡奕川 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期557-561,共5页

【目的】研究α1D-肾上腺素能受体(α1D-Adrenergic receptor,α1D-AR)在女性腺性膀胱炎(cystitisglandularis,CG)患者膀胱三角区及逼尿肌中平滑肌细胞的表达情况;探讨α1D-AR在引起下尿路症状、膀胱过度活动症中的作用机制。【方法】... 【目的】研究α1D-肾上腺素能受体(α1D-Adrenergic receptor,α1D-AR)在女性腺性膀胱炎(cystitisglandularis,CG)患者膀胱三角区及逼尿肌中平滑肌细胞的表达情况;探讨α1D-AR在引起下尿路症状、膀胱过度活动症中的作用机制。【方法】采用免疫组织化学法检测32例女性腺性膀胱炎患者及9例正常女性膀胱逼尿肌及三角区肌层中α1D-AR的表达情况,并结合尿动力学进行分析。【结果】32例腺性膀胱炎患者膀胱逼尿肌及三角区肌层的α1D-AR表达阳性细胞数比正常对照组显著增加,两者具有正相关关系(P<0.0001);32例腺性膀胱炎患者中,尿动力学表现为不稳定膀胱的9例患者的逼尿肌及三角区肌层α1D-AR表达阳性细胞数均比非不稳定膀胱患者的表达显著增加(P<0.0001)。20例膀胱出口梗阻患者的逼尿肌及三角区肌层α1D-AR表达与非膀胱出口梗阻患者无明显差异(P>0.05)。【结论】女性腺性膀胱炎患者膀胱逼尿肌层、三角区肌层的α1D-AR表达存在正相关关系,提示CG可同时引起此两部位α1D-AR表达增加。α1D-AR表达增加可能是引起女性腺性膀胱炎逼尿肌压升高、不稳定膀胱等引起的下尿路症状的原因之一。 展开更多

关键词 腺性膀胱炎 α1D-肾上腺素能受体 逼尿肌 尿流动力学

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Bcl-2 siRNA表达载体的构建及生物活性鉴定 被引量：3

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作者 许可慰 黄健 +4 位作者 林天歆 郭正辉 胡明 尹心宝 潘秋辉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期972-976,共5页

目的:构建bcl-2特异性siRNA真核细胞表达载体,并初步观察其对膀胱癌细胞生长的影响。方法:根据GenBank提供的bcl-2cDNA序列,设计双链小干扰RNA(siRNA),再转化为能表达其小发卡结构RNA(shRNA)的DNA序列,并与含U6启动子的pGenesil-1质粒... 目的:构建bcl-2特异性siRNA真核细胞表达载体,并初步观察其对膀胱癌细胞生长的影响。方法:根据GenBank提供的bcl-2cDNA序列,设计双链小干扰RNA(siRNA),再转化为能表达其小发卡结构RNA(shRNA)的DNA序列,并与含U6启动子的pGenesil-1质粒定向连接,构建真核表达载体pGenesil-1545、pGenesil-1555。经限制性内切酶酶切和DNA测序进行鉴定。转染T24细胞,采用半定量RT-PCR观察重组质粒对bcl-2 mRNA表达的影响;用MTT法观察重组质粒对T24细胞体外生长的抑制作用。结果:构建了bcl-2siRNA的真核表达载体pGenesil-1545、pGenesil-1555,并经限制性内切酶酶切和DNA测序证实与设计完全一致。转染T24细胞72h后,RT-PCR显示bcl-2基因表达下调接近80%;MTT发现T24细胞的体外生长受到明显抑制。结论:bcl-2的特异性siRNA真核细胞表达载体成功构建,有效沉默bcl-2在膀胱癌细胞中的表达,抑制了癌细胞的生长。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 RNA干扰 基因 BCL-2

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肾上腺髓质增生症(附15例报告) 被引量：2

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作者 沈昌理 杨鸿 +4 位作者 李海刚 许可慰 黄健 姚友生 郭正辉 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第B07期369-371,共3页

【目的】总结肾上腺髓质增生症(AMH)的诊断和治疗经验。【方法】回顾1989年1月至2002年12月我院经手术及病理证实的15例AMH患者资料,分析AMH病因学,术前诊断及治疗结果。【结果】15例中有13例经MR检查均有异常影像,其中5例诊断为AMH,5... 【目的】总结肾上腺髓质增生症(AMH)的诊断和治疗经验。【方法】回顾1989年1月至2002年12月我院经手术及病理证实的15例AMH患者资料,分析AMH病因学,术前诊断及治疗结果。【结果】15例中有13例经MR检查均有异常影像,其中5例诊断为AMH,5例诊断为肾上腺瘤,3例为肾上腺占位性病变,131I-MIBG核素扫描4例,均有患侧肾上腺核素浓聚显像,其中3例诊断为AMH,1例嗜铬细胞瘤。14例行单侧肾上腺切除术,1例行一侧肾上腺全切,对侧肾上腺大部切除术。10例经开放切除术,5例采用腹腔镜切除术。13例术后痊愈,2例双侧AMH(行单侧肾上腺切除术)症状改善,仍须药物控制。【结论】AMH应与嗜铬细胞瘤鉴别诊断,根据临床症状和实验室检查做出初步初诊,MR结合131I-MIBG检查有助于AMH的进一步诊断,而最可靠的诊断是术中所见及病理检查,手术是根本的治疗方法,术前按嗜铬细胞瘤准备是必要的。 展开更多

关键词 诊断 AMH 肾上腺髓质增生 嗜铬细胞瘤 单侧 肾上腺切除术 ^131I 根据 根本 目的

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骨髓间充质干细胞过表达IL-10基因对脓毒症的治疗作用(英文) 被引量：2

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作者 毕良宽 唐冰 +6 位作者 朱斌 谢春玲 李爽 林天歆 黄健 张伟 朱家源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第6期678-685,共8页

脓毒症是近年来的医学难题之一,迫切需要探讨新的治疗手段.以往研究发现,骨髓间充质干细胞具有免疫调节作用,免疫细胞因子白介素 10(IL-10)是细胞因子分泌的抑制因子,具有很好的抗炎作用.因此构建了携带小鼠 IL-10(mIL-10)的腺病毒载体... 脓毒症是近年来的医学难题之一,迫切需要探讨新的治疗手段.以往研究发现,骨髓间充质干细胞具有免疫调节作用,免疫细胞因子白介素 10(IL-10)是细胞因子分泌的抑制因子,具有很好的抗炎作用.因此构建了携带小鼠 IL-10(mIL-10)的腺病毒载体,用它来感染骨髓间充质干细胞(BMSC),并通过载体上的绿色荧光蛋白来筛选过表达 mIL-10 基因的骨髓间充质干细胞(BMSC-mIL-10).随后,运用盲肠结扎穿孔法在小鼠体内建立脓毒症模型,并观察 BMSC-mIL-10 在脓毒症中的治疗作用.研究发现,和单纯 BMSC 治疗组相比,BMSC-mIL-10 可以明显降低脓毒症老鼠体内炎症因子的产生,这包括TNF-α、IL-6、IL-1α和 IL-1β等,同时,BMSC-mIL-10 治疗组小鼠的肺部和肾脏炎症反应减轻,体重丢失下降,死亡率明显降低.为进一步探讨 BMSC-mIL-10 治疗机制,运用 Western blot 和免疫荧光染色方法发现 BMSC-mIL-10 组上清液可以抑制巨噬细胞和中性粒细胞中 LPS 引起的 NF-κB的激活.上述结果表明,骨髓间充质干细胞过表达 IL-10 有望成为脓毒症治疗的潜在手段之一. 展开更多

关键词 脓毒症 白介素10 炎症 骨髓间充质干细胞 基因治疗

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构建PSMA shRNA慢病毒载体转染293T细胞后PSMA mRNA和蛋白的表达变化 被引量：2

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作者 郭正辉 黄海 +6 位作者 杜涛 许可慰 尹心宝 李海源 江春 韩金利 黄健 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1886-1890,共5页

目的:利用基因工程技术筛选获得阻断前列腺癌细胞株LNCaP中前列腺癌特异性膜抗原(PSMA)表达的shRNA序列,并构建慢病毒载体。观察转染前列腺癌细胞后对PSMAmRNA和蛋白表达的影响。方法:根据PSMA基因信息,设计siRNA1、siRNA2、siRNA3三条... 目的:利用基因工程技术筛选获得阻断前列腺癌细胞株LNCaP中前列腺癌特异性膜抗原(PSMA)表达的shRNA序列,并构建慢病毒载体。观察转染前列腺癌细胞后对PSMAmRNA和蛋白表达的影响。方法:根据PSMA基因信息,设计siRNA1、siRNA2、siRNA3三条针对PSMA基因cds区的siRNA序列,组建shRNA对应的4对互补的单链DNA,包括siRNA的正义链和反义链;正义链序列按5向3顺序依次为:酶切位点(BamHⅠ)、干扰序列(19bp)、loop环(TTCAAGAGA)、干扰序列的反向互补序列(19bp)、终止信号(TTTTT)、酶切位点(EcoRⅠ)。将合成的序列插入空载体pSIH1-H1-copGFP shRNA vector中,转染前列腺癌细胞后,通过real-timePCR检测对PSMA mRNA表达,通过Western blotting检测PSMA蛋白的表达。结果:设计的3条针对PSMA的序列中第2条的抑制效果最好,目的序列位于PSMA(NM_004476)的1207到1226,茎环序列为5-GATCC GTCT-CAAAGTGCCCTACAA TTCAAGAGA TTGTAGGGCACTTTGAGAC TTTTTG-3。其对前列腺癌细胞株中PSMA mR-NA表达的抑制率为60%,对PSMA蛋白表达的抑制率为86%。转染细胞后,细胞可以稳定低表达PSMA。结论:成功获得阻断前列腺癌细胞株LNCaP PSMA表达的shRNA序列,并构建慢病毒载体,pSIH-PSMA-siRNA2转染前列腺癌细胞后对PSMA mRNA表达的抑制率为60%,对PSMA蛋白表达的抑制率达86%。为后期研究PSMA在前列腺癌发病中的作用机制以及免疫导向治疗等提供了实验基础。 展开更多

关键词 前列腺特异性膜抗原 前列腺肿瘤 RNA干扰 293 T细胞

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女性膀胱癌腹腔镜根治性切除原位回肠新膀胱术术式改进 被引量：2

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作者 黄健 黄海 +9 位作者 许可慰 林天歆 江春 韩金利 姚友生 郭正辉 谢文练 尹心宝 董文 张彩霞 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第13期1258-1260,共3页

目的探讨并改进腹腔镜女性膀胱癌根治性切除-原位回肠新膀胱术的手术方法,随访观察其治疗效果。方法2003年2月至2008年9月,为19例女性膀胱癌患者施行了腹腔镜膀胱全切除-原位回肠新膀胱术,其中13例同时行子宫、卵巢及附件切除,6例行保... 目的探讨并改进腹腔镜女性膀胱癌根治性切除-原位回肠新膀胱术的手术方法,随访观察其治疗效果。方法2003年2月至2008年9月,为19例女性膀胱癌患者施行了腹腔镜膀胱全切除-原位回肠新膀胱术,其中13例同时行子宫、卵巢及附件切除,6例行保留子宫、卵巢附件。主要手术步骤为:①行标准盆腔淋巴结清扫,②行膀胱全切除同时切除或不切除内生殖器,③在下腹正中线上作4～5cm切口,取出标本,并构建"M"形去管回肠储尿囊,④输尿管末端形成半乳头,"插入式"种植于储尿囊;⑤储尿囊回纳腹腔,在腹腔镜下作储尿囊与尿道吻合。术后记录围手术期情况,并对患者进行定期随访,了解患者的生活质量、排尿情况,并检测患者的残余尿量、新膀胱压力等。结果手术时间(340.5±43.1)min,术中出血(353.9±71.3)ml。术后随访2～69个月,半年内均能自主排尿,1例日间偶有尿失禁,2例夜间尿失禁,3例排尿困难。膀胱容量(333.6±45.4)ml,残余尿量0～210(41.2±18.1)ml。术后半年至1年,行静脉尿路造影,除1例单侧肾积液外,其余双肾显影良好,未见肾盂输尿管扩张。膀胱尿道造影,可见膀胱位于盆腔,其形状大小位置于正常膀胱相似,未见膀胱输尿管反流。术后输尿管新膀胱吻合口梗阻1例,新膀胱阴道瘘1例,肿瘤远处转移2例于随访期间死亡。结论腹腔镜女性膀胱全切除-原位回肠新膀胱术,技术上可行,可根据患者情况采用保留或切除内生殖器的手术方法,术中出血较少,创伤较小,术后大部分患者能自主排尿,但尿失禁及排尿困难发生率略高于男性,术后中远期新膀胱功能及肿瘤根治效果还需进一步临床观察。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 腹腔镜 外科手术

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鉴定调控L-plastin在非激素依赖型前列腺癌中表达的转录因子SP-1 被引量：2

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作者 林天歆 黄健 +5 位作者 尹心宝 许可慰 叶枫 李泗耀 黄海 江春 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期1330-1334,共5页

目的:鉴定调控L-plastin在非激素依赖型前列腺癌中表达的转录因子,进一步阐明非激素依赖型前列腺癌的发病机理。方法:在鉴定L-plastin启动子近3’端-216到1序列片段存在明显的转录活性的基础上,利用TFSEARCH软件分析该片段的序列,寻找调... 目的:鉴定调控L-plastin在非激素依赖型前列腺癌中表达的转录因子,进一步阐明非激素依赖型前列腺癌的发病机理。方法:在鉴定L-plastin启动子近3’端-216到1序列片段存在明显的转录活性的基础上,利用TFSEARCH软件分析该片段的序列,寻找调控L-plastin表达的非甾体激素类转录因子,并用凝胶滞后实验和超滞后实验证实结合于该片段的转录因子,利用PCR定点突变法构建删除该转录因子结合位点的重组子,并检测切除该片段序列后荧光素酶活性变化。结果:TFSEARCH软件分析表明在距转录起始点-54--41bp处含有SP-1转录因子结合位点GGTGGGGCGGGGA,凝胶滞后实验和超滞后实验表明SP-1是结合于L-plastin启动子3’端该序列的转录因子,删除SP-1结合位点后荧光素酶活性下降。结论:SP-1是促进L-plastin在非激素依赖型前列腺癌中表达的重要调控因子。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 L—plasfin 启动子 转录因子 Sp1

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