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姜黄素衍生物体外抑制结肠癌细胞增殖侵袭作用
被引量：
9
1
作者
何利兵
王险峰
+2 位作者
王红胜
杜军
张继民
《中国癌症杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期17-25,共9页
背景与目的：姜黄素（curcumin）是从天然植物姜黄中提取的酚类化合物，已证实其具有抗恶性肿瘤作用。近年人工合成的姜黄素衍生物被认为抗癌作用和生物利用度优于母体姜黄素，但是对于结肠癌细胞的作用鲜见报道。研究旨在比较天然植物...
背景与目的：姜黄素（curcumin）是从天然植物姜黄中提取的酚类化合物，已证实其具有抗恶性肿瘤作用。近年人工合成的姜黄素衍生物被认为抗癌作用和生物利用度优于母体姜黄素，但是对于结肠癌细胞的作用鲜见报道。研究旨在比较天然植物姜黄素及其4种人工合成的衍生物T316、T62、T63、T6F4对结直肠癌细胞株Lovo和HSW480的细胞毒性作用、增殖迁移抑制作用和核转录因子（NF—κB）活性表达的影响。方法：培养人结肠癌细胞系Lovo和SW480，然后通过MTT分析检测姜黄素及4种衍生物对结肠癌细胞株Lovo和SW480细胞毒性影响；细胞划痕实验检测对结肠癌细胞迁移抑制作用；软琼脂克隆形成实验检测对癌细胞克隆增殖影响；流式细胞技术检测对癌细胞凋亡的影响；并通过荧光素酶双报告基因法检测姜黄素及其衍生物对NF—κB活性表达的影响。结果：姜黄素对Lovo和SW480的半数有效抑制浓度（IC50）分别为（14．2±0．2）μmol／L和（10．6±0．7）μmol／L，分别是4种衍生物对Lovo和NSW480的7．0-8．7倍和5．7～7．8倍（P〈0．01）。不加任何药物时，Lovo24h迁移距离为（160．7±18．4）μm，SW480为（389．9±8．9）μm，但加入姜黄素及4种衍生物后，细胞迁移距离均明显缩短，距离最短是T63作用于Lovo时的（53．2±11．7）μm；T316作用于SW480时的（80．4±9．6）μm。4种衍生物的迁移距离明显短于姜黄素的迁移距离（P〈0．05）。4种衍生物在抑制2株结肠癌细胞克隆形成方面也明显优于姜黄素母体（P〈0．05）。通过流式细胞检测发现，姜黄素及4种衍生物诱导Lovo的凋亡率分别为（10．05±0．54）％、（55．32±2．86）％、（31．83±0．85）％、（26．01±0．44）％、（21．44±3．01）％，高于对照组的凋亡率（6．98±0．23）％（P〈0．05）；且4种衍生物诱导凋亡作用优于姜黄素（P〈0．05）。荧光素酶报告基因检测结果表明，姜黄素及其4种衍生物能下调TNF—α诱导的NF—κB的转录活性。结论：姜黄素和4种衍生物均能抑制结直肠癌细胞的增殖迁移力，促进结直肠癌细胞的凋亡，但4种衍生物的作用明显优于母体姜黄素。
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关键词
姜黄素衍生物
结直肠癌
增殖
迁移
凋亡
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职称材料
人源Nodal成熟肽的原核表达及多克隆抗体的制备
被引量：
4
2
作者
李玲玲
江冠民
+3 位作者
张革
王昊
方瑞
杜军
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第8期880-882,886,共4页
目的:表达人Nodal成熟肽,免疫小鼠制备其多克隆抗体。方法:构建原核表达质粒pReceiver-hNodal,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达His6-hNodal融合蛋白,融合蛋白经Ni-NTA树脂亲和纯化后,回收融合蛋白,免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体...
目的:表达人Nodal成熟肽,免疫小鼠制备其多克隆抗体。方法:构建原核表达质粒pReceiver-hNodal,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达His6-hNodal融合蛋白,融合蛋白经Ni-NTA树脂亲和纯化后,回收融合蛋白,免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体。通过间接ELISA、Westernblot和免疫细胞化学染色和间接免疫荧光等方法检测抗体的效价和特异性。结果:在大肠杆菌中高效表达了与预期理论值大小相符的Mr约13 000的人Nodal成熟肽的融合蛋白,通过免疫小鼠制备的多克隆抗体效价高、特异性强。结论:成功制备了抗人Nodal成熟肽多克隆抗体,为进一步深入研究Nodal在肿瘤发生发展过程中的生物学功能奠定了基础。
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关键词
人Nodal成熟肽
原核表达
纯化
多克隆抗体
肿瘤
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职称材料
曲古抑菌素A下调人肺腺癌细胞A549内IDO表达的分子机制
3
作者
李玲玲
江冠民
杜军
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期752-757,共6页
【目的】研究曲古抑菌素A(TSA)抑制γ干扰素(IFN-γ)诱导的人A549细胞内吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)表达的分子机制。【方法】采用蛋白质免疫印迹技术检测TSA在IFN-γ诱导的A549细胞中IDO的表达、信号转导及转录激活子1(STAT1)的磷酸化和...
【目的】研究曲古抑菌素A(TSA)抑制γ干扰素(IFN-γ)诱导的人A549细胞内吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)表达的分子机制。【方法】采用蛋白质免疫印迹技术检测TSA在IFN-γ诱导的A549细胞中IDO的表达、信号转导及转录激活子1(STAT1)的磷酸化和干扰素调节因子1(IRF-1)的激活等过程中的作用,在激光共聚焦显微镜下观察TSA对STAT1核转位的影响,利用双荧光素酶报告基因系统检测TSA对γ-干扰素激活位点(GAS)、干扰素刺激应答元件(ISRE)和核因子-κB(NF-κB)的激活的影响。【结果】TSA以浓度依赖方式下调A549细胞中IFN-γ诱导的IDO表达,并能明显抑制STAT1第701位酪氨酸的磷酸化和STAT1的核转位。双荧光素酶报告基因分析和Western blot结果表明:TSA能显著抑制GAS、ISRE和IRF-1的激活却不能抑制NF-κB的激活。【结论】TSA能下调IFN-γ诱导的A549细胞中IDO的表达,其机制可能是与其抑制STAT1的磷酸化和核转位,以及抑制STAT1与GAS的结合有关。
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关键词
TSA
人肺腺癌细胞A549
IDO
STAT1
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职称材料
题名
姜黄素衍生物体外抑制结肠癌细胞增殖侵袭作用
被引量：
9
1
作者
何利兵
王险峰
王红胜
杜军
张继民
机构
广州医
学院
第二附属医院胃肠外科
中山大学药学院微生物与生化制药实验室
出处
《中国癌症杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期17-25,共9页
基金
国家自然科学基金(No:81071883
No:30873032)
文摘
背景与目的：姜黄素（curcumin）是从天然植物姜黄中提取的酚类化合物，已证实其具有抗恶性肿瘤作用。近年人工合成的姜黄素衍生物被认为抗癌作用和生物利用度优于母体姜黄素，但是对于结肠癌细胞的作用鲜见报道。研究旨在比较天然植物姜黄素及其4种人工合成的衍生物T316、T62、T63、T6F4对结直肠癌细胞株Lovo和HSW480的细胞毒性作用、增殖迁移抑制作用和核转录因子（NF—κB）活性表达的影响。方法：培养人结肠癌细胞系Lovo和SW480，然后通过MTT分析检测姜黄素及4种衍生物对结肠癌细胞株Lovo和SW480细胞毒性影响；细胞划痕实验检测对结肠癌细胞迁移抑制作用；软琼脂克隆形成实验检测对癌细胞克隆增殖影响；流式细胞技术检测对癌细胞凋亡的影响；并通过荧光素酶双报告基因法检测姜黄素及其衍生物对NF—κB活性表达的影响。结果：姜黄素对Lovo和SW480的半数有效抑制浓度（IC50）分别为（14．2±0．2）μmol／L和（10．6±0．7）μmol／L，分别是4种衍生物对Lovo和NSW480的7．0-8．7倍和5．7～7．8倍（P〈0．01）。不加任何药物时，Lovo24h迁移距离为（160．7±18．4）μm，SW480为（389．9±8．9）μm，但加入姜黄素及4种衍生物后，细胞迁移距离均明显缩短，距离最短是T63作用于Lovo时的（53．2±11．7）μm；T316作用于SW480时的（80．4±9．6）μm。4种衍生物的迁移距离明显短于姜黄素的迁移距离（P〈0．05）。4种衍生物在抑制2株结肠癌细胞克隆形成方面也明显优于姜黄素母体（P〈0．05）。通过流式细胞检测发现，姜黄素及4种衍生物诱导Lovo的凋亡率分别为（10．05±0．54）％、（55．32±2．86）％、（31．83±0．85）％、（26．01±0．44）％、（21．44±3．01）％，高于对照组的凋亡率（6．98±0．23）％（P〈0．05）；且4种衍生物诱导凋亡作用优于姜黄素（P〈0．05）。荧光素酶报告基因检测结果表明，姜黄素及其4种衍生物能下调TNF—α诱导的NF—κB的转录活性。结论：姜黄素和4种衍生物均能抑制结直肠癌细胞的增殖迁移力，促进结直肠癌细胞的凋亡，但4种衍生物的作用明显优于母体姜黄素。
关键词
姜黄素衍生物
结直肠癌
增殖
迁移
凋亡
Keywords
Curcumin derivatives
Colorectal cancer
Proliferation
Migration
Apoptosis
分类号
R735.3 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
人源Nodal成熟肽的原核表达及多克隆抗体的制备
被引量：
4
2
作者
李玲玲
江冠民
张革
王昊
方瑞
杜军
机构
中山大学药学院微生物与生化制药实验室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第8期880-882,886,共4页
基金
中国博士后科学基金项目(20100470976)
国家自然科学基金资助项目(30873032)
文摘
目的:表达人Nodal成熟肽,免疫小鼠制备其多克隆抗体。方法:构建原核表达质粒pReceiver-hNodal,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达His6-hNodal融合蛋白,融合蛋白经Ni-NTA树脂亲和纯化后,回收融合蛋白,免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体。通过间接ELISA、Westernblot和免疫细胞化学染色和间接免疫荧光等方法检测抗体的效价和特异性。结果:在大肠杆菌中高效表达了与预期理论值大小相符的Mr约13 000的人Nodal成熟肽的融合蛋白,通过免疫小鼠制备的多克隆抗体效价高、特异性强。结论:成功制备了抗人Nodal成熟肽多克隆抗体,为进一步深入研究Nodal在肿瘤发生发展过程中的生物学功能奠定了基础。
关键词
人Nodal成熟肽
原核表达
纯化
多克隆抗体
肿瘤
Keywords
human nodal mature peptide
prokaryotic expression
purification
polyclonal antibody
tumor
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
曲古抑菌素A下调人肺腺癌细胞A549内IDO表达的分子机制
3
作者
李玲玲
江冠民
杜军
机构
中山大学药学院微生物与生化制药实验室
出处
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期752-757,共6页
基金
中国博士后科学基金(20100470976)
国家自然科学基金(3087303281071712)
国家"973"计划资助项目(2011CB935800)
文摘
【目的】研究曲古抑菌素A(TSA)抑制γ干扰素(IFN-γ)诱导的人A549细胞内吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)表达的分子机制。【方法】采用蛋白质免疫印迹技术检测TSA在IFN-γ诱导的A549细胞中IDO的表达、信号转导及转录激活子1(STAT1)的磷酸化和干扰素调节因子1(IRF-1)的激活等过程中的作用,在激光共聚焦显微镜下观察TSA对STAT1核转位的影响,利用双荧光素酶报告基因系统检测TSA对γ-干扰素激活位点(GAS)、干扰素刺激应答元件(ISRE)和核因子-κB(NF-κB)的激活的影响。【结果】TSA以浓度依赖方式下调A549细胞中IFN-γ诱导的IDO表达,并能明显抑制STAT1第701位酪氨酸的磷酸化和STAT1的核转位。双荧光素酶报告基因分析和Western blot结果表明:TSA能显著抑制GAS、ISRE和IRF-1的激活却不能抑制NF-κB的激活。【结论】TSA能下调IFN-γ诱导的A549细胞中IDO的表达,其机制可能是与其抑制STAT1的磷酸化和核转位,以及抑制STAT1与GAS的结合有关。
关键词
TSA
人肺腺癌细胞A549
IDO
STAT1
Keywords
Trichostatin A
A549
IDO
STAT1
分类号
R73-3 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
姜黄素衍生物体外抑制结肠癌细胞增殖侵袭作用
何利兵
王险峰
王红胜
杜军
张继民
《中国癌症杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
9
在线阅读
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职称材料
2
人源Nodal成熟肽的原核表达及多克隆抗体的制备
李玲玲
江冠民
张革
王昊
方瑞
杜军
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011
4
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职称材料
3
曲古抑菌素A下调人肺腺癌细胞A549内IDO表达的分子机制
李玲玲
江冠民
杜军
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
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