转几丁质酶基因水稻根系微生物群落分析 被引量：8

1

作者 杨毓峰 袁红旭 +2 位作者 刘月廉 许新萍 李宝健 《中国生态农业学报》 CAS CSCD 2002年第2期29-31,共3页

采用“直接观察法”和“分离培养法”对转基因水稻根系微生物群落的初步分析结果表明,导入外源水稻几丁质酶基因(RC24)的转基因水稻根内和根表的微生物群落发生显著变化,转基因水稻根部内生真菌总数显著减少,内生细菌总数显著增加,其内... 采用“直接观察法”和“分离培养法”对转基因水稻根系微生物群落的初步分析结果表明,导入外源水稻几丁质酶基因(RC24)的转基因水稻根内和根表的微生物群落发生显著变化,转基因水稻根部内生真菌总数显著减少,内生细菌总数显著增加,其内生细菌总数是未转基因亲本对照的10倍左右。采用“直接观察法”测得2个转基因水稻品种有内生真菌的根段率为55.2％和81.1％,而对照为100％,转基因水稻根系真菌和细菌种类与对照存在显著差异,有VA菌根泡囊的根段率显著降低。 展开更多

关键词 几丁质酶基因 根系 微生物群落 基因工程水稻 转基因水稻

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以玉米幼胚为受体的外源基因转化研究 被引量：9

2

作者 柯遐义 张秀文 +2 位作者 石和平 陈春洪 李宝健 《广东农业科学》 CAS CSCD 1995年第2期14-16,共3页

选用具有较强再生能力的甜玉米品种华农超甜４２的幼胚作转化受体，以自制的脉冲放电式电激仪ＨＰＥＳ３将新霉素磷酸转移酶（ＮＰＴⅡ）基因和β－葡萄糖苷酸酶（ＧＵＳ）基因导入到受体细胞并成功地得到了转基因植株。ＮＰＴⅡ点滴分... 选用具有较强再生能力的甜玉米品种华农超甜４２的幼胚作转化受体，以自制的脉冲放电式电激仪ＨＰＥＳ３将新霉素磷酸转移酶（ＮＰＴⅡ）基因和β－葡萄糖苷酸酶（ＧＵＳ）基因导入到受体细胞并成功地得到了转基因植株。ＮＰＴⅡ点滴分析、ＭＵ荧光检测和ＤＮＡ点杂交的结果都证实了外源基因在转化愈伤组织和植株中的整合与表达。通过对转化条件的摸索，发现幼胚存活率为７０％左右时可得到较好的转化结果；在不同的输出方式中，长脉冲输出校短脉冲输出对转化更有利；其它电激条件、幼胚胚龄与筛选程序对玉米幼胚转化也有很大的影响。 展开更多

关键词 玉米 幼胚 基因转化 电激法

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影响小麦成熟胚培养的几种因素研究 被引量：17

3

作者 柯遐义 陈春洪 +2 位作者 杨芳 李宝健 陈家旺 《广东农业科学》 CSCD 1995年第6期12-14,共3页

选取６个春小麦品种的成熟胚进行培养，着重研究不同基因型、培养基、种子贮藏时间、愈伤组织诱导培养时间等对分化的影响。确定了较好的分化培养基，供试品种中，华农４００有较好的分化性能；不同基因型的小麦诱导愈伤组织产生的能力... 选取６个春小麦品种的成熟胚进行培养，着重研究不同基因型、培养基、种子贮藏时间、愈伤组织诱导培养时间等对分化的影响。确定了较好的分化培养基，供试品种中，华农４００有较好的分化性能；不同基因型的小麦诱导愈伤组织产生的能力差别不大，分化绿点及生根的能力有一定差异，而分化成苗的能力则有很大的变化；种子贮存时间与愈伤组织诱导培养时间对分化有较大的负影响。 展开更多

关键词 小麦 成熟胚:愈伤组织 分化

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用高速微弹轰击技术将外源基因导入甜玉米的研究 被引量：2

4

作者 张秀文 柯遐义 +2 位作者 石和平 陈春洪 丰宝健 《广东农业科学》 CAS CSCD 1994年第6期11-12,38,共3页

利用不至自行研制和设计的高速微弹轰击装置将外源新霉素磷酸转移酶（ＮＰＴⅡ）基因和β－葡萄糖苷酸酶（ＧＵＳ）基因导入甜玉米品种甜１３２８的幼胚细胞中，经筛选培养２０～３０天后得到抗Ｇ４１８的抗性愈伤组织。ＮＰＴⅡ点滴分... 利用不至自行研制和设计的高速微弹轰击装置将外源新霉素磷酸转移酶（ＮＰＴⅡ）基因和β－葡萄糖苷酸酶（ＧＵＳ）基因导入甜玉米品种甜１３２８的幼胚细胞中，经筛选培养２０～３０天后得到抗Ｇ４１８的抗性愈伤组织。ＮＰＴⅡ点滴分析和ＤＮＡ杂交证明了外源基因在抗性愈伤组织细胞中的整合与表达． 展开更多

关键词 甜玉米 高速微弹轰击 外源基因导入 愈伤组织

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苯酚-硫酸法测定灵芝多糖含量的条件研究 被引量：85

5

作者 徐志祥 李刚 李宝健 《食用菌》 2000年第3期6-8,共3页

本文以摇瓶培养的灵芝菌丝体为样品，对利用 苯酚－硫酸法测定灵芝多糖含量时的多糖提取和测定 条件进行了较为详细、系统的研究，最终得到了一个多 糖提取和测定的最佳条件，使得利用苯酚－硫酸法测定 样品多糖含量的结果更加准确和稳定。

关键词 灵芝多糖 苯酚-硫酸法 测定条件 含量测定

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玉米幼胚培养及其影响因素的研究 被引量：7

6

作者 柯遐义 张秀文 +1 位作者 石和平 李宝健 《中山大学学报论丛》 1996年第2期23-29,共7页

选取１０个不同的玉米品种于大田栽种并自花授粉，采其授粉后１４～２４ｄ的幼胚进行培养，筛选出了５个较易诱导体胚而再生植株的品种．在影响玉米幼胚培养的许多重要因素中，如２，４－Ｄ，ＫＴ，ＮＡＡ，６－ＢＡ，ＺＴ，ＺｉＰ，Ａ... 选取１０个不同的玉米品种于大田栽种并自花授粉，采其授粉后１４～２４ｄ的幼胚进行培养，筛选出了５个较易诱导体胚而再生植株的品种．在影响玉米幼胚培养的许多重要因素中，如２，４－Ｄ，ＫＴ，ＮＡＡ，６－ＢＡ，ＺＴ，ＺｉＰ，Ａｇ＋，水解酪蛋白，琼脂糖，脯氨酸和谷氨酰胺等，２，４－Ｄ和Ａｇ＋是最关键的因子．以华农超甜４２号玉米幼胚为材料进行培养时，２，４－Ｄ１５ｍｇ／Ｌ与Ａｇ＋１０ｍｇ／Ｌ浓度下的ＭＳ培养基（再结合其它因子的适当组合）比较易于诱导出胚性愈伤组织，从而有利于其植株再生．以琼脂糖代替琼脂粉对体胚诱导也有较好效果． 展开更多

关键词 玉米 幼胚 组织培养 愈伤组织 体胚发生 植株再生

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主要禾谷类作物原生质体培养研究进展 被引量：2

7

作者 张宏 薛爱群 +2 位作者 谢友菊 戴景瑞 李浚明 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 1996年第S1期97-101,共5页

自１９８０年Ｖａｓｉｌ等人利用珍珠粟幼胚的胚性细胞悬浮培养物分离原生质体，通过胚胎发生途径再生首例禾本科植物原生质体植株以来，随着一系列技术的改进和完善，一直难以培养的水稻、玉米和小麦等重要禾谷类作物的原生质体相继再... 自１９８０年Ｖａｓｉｌ等人利用珍珠粟幼胚的胚性细胞悬浮培养物分离原生质体，通过胚胎发生途径再生首例禾本科植物原生质体植株以来，随着一系列技术的改进和完善，一直难以培养的水稻、玉米和小麦等重要禾谷类作物的原生质体相继再生了完整绿色植株。这里着重介绍几种重要禾谷类作物原生质体的培养技术和方法。 展开更多

关键词 禾谷类作物 原生质体培养 悬浮培养

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水稻耐盐性遗传初步研究 被引量：16

8

作者 祁祖白 李宝健 +1 位作者 杨文广 蔡业统 《广东农业科学》 CAS CSCD 1991年第1期18-21,共4页

对我国水稻的一些籼稻品种苗期耐盐性状的遗传结构、遗传传递动态及遗传力进行了研究,通过对耐盐性品种与中等耐盐性品种及感性品种杂交的8个组合的杂种后代分析表明:水稻苗期的耐盐性状属数量性状,可能受多基因制约;耐盐性状的遗传力较... 对我国水稻的一些籼稻品种苗期耐盐性状的遗传结构、遗传传递动态及遗传力进行了研究,通过对耐盐性品种与中等耐盐性品种及感性品种杂交的8个组合的杂种后代分析表明:水稻苗期的耐盐性状属数量性状,可能受多基因制约;耐盐性状的遗传力较低,易受环境条件影响而变异;F_1的耐盐性水平一般在双亲之间,只有少数组合的F_1能够超过耐盐性亲本的平均抗级。此外,对盐分胁迫下的穗粒性状的相关关系也进行了讨论。 展开更多

关键词 水稻 耐盐性 遗传 研究

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影响籼粳杂种育性诸因素的研究 被引量：4

9

作者 祁祖白 蔡业统 李宝健 《广东农业科学》 CAS CSCD 1993年第2期4-6,共3页

通过用4个广亲和性品种、5个籼稻品种、5个粳稻品种作杂交亲本,研究了 S_5^(?)基因在回交三代中的遗传动态及 S_5^(?)纯合或杂合基因型对籼粳杂种结实率的影响,以及不同杂交组合和环境因素对籼粳杂种一代秕粒率的影响。结果表明,通过用... 通过用4个广亲和性品种、5个籼稻品种、5个粳稻品种作杂交亲本,研究了 S_5^(?)基因在回交三代中的遗传动态及 S_5^(?)纯合或杂合基因型对籼粳杂种结实率的影响,以及不同杂交组合和环境因素对籼粳杂种一代秕粒率的影响。结果表明,通过用广亲和性品种与籼稻或粳稻品种杂交及回交和定向选择后代,S_5^(?)基因在杂种后代中是可以遗传传递下去的;S_5^(?)纯合基因型的籼粳杂种,其结实率在多数杂交组合中仅略高于 S_5^(?)杂合基因型的杂种,初步探讨了不同杂交组合、种植造别及施肥水平对籼粳杂种一代秕粒率的影响。 展开更多

关键词 籼稻 粳稻 杂交育种 杂种 育性

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应用电激法将外源基因导入小麦的研究 被引量：1

10

作者 陈春洪 张秀文 +2 位作者 柯遐义 石和平 李宝健 《广东农业科学》 CAS CSCD 1993年第5期11-13,共3页

建立了以小麦成熟胚为外植体的组织培养系统。应用电激仪HPES-3,摸索了适合小麦种胚外源基因转化的电激条件,并以含有潮霉素磷酸转移酶(HPT)基因的质粒 pLCN_(1055)DNA 直接对萌动的小麦种胚进行电激转化,在含有潮霉素(Hm)的小麦愈伤组... 建立了以小麦成熟胚为外植体的组织培养系统。应用电激仪HPES-3,摸索了适合小麦种胚外源基因转化的电激条件,并以含有潮霉素磷酸转移酶(HPT)基因的质粒 pLCN_(1055)DNA 直接对萌动的小麦种胚进行电激转化,在含有潮霉素(Hm)的小麦愈伤组织培养基中培养,获得了假定的转基因愈伤组织。Southern 杂交初步证明 HPT 基因已整合至小麦愈伤组织的基因组中。将这些转基因愈伤组织培养成苗还在试验之中。 展开更多

关键词 小麦 基因导入 电激法

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水稻小GTP蛋白基因Osrab5B基因的克隆和鉴定 被引量：15

11

作者 林慧贤 刘筱斌 +2 位作者 李发强 罗文永 刘良式 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第3期9-14,共6页

用已知遗传图位的BAC克隆片段 ,对水稻 (Oryzasativa)小穗cDNA文库进行筛选 ,获得一个水稻小GTP结合蛋白 (smallGTP bindingprotein ,SGP)的相关序列 ,序列测定后以该cDNA序列为基础将 4个表达序列标记 (EST)进行了电子克隆 (electronic... 用已知遗传图位的BAC克隆片段 ,对水稻 (Oryzasativa)小穗cDNA文库进行筛选 ,获得一个水稻小GTP结合蛋白 (smallGTP bindingprotein ,SGP)的相关序列 ,序列测定后以该cDNA序列为基础将 4个表达序列标记 (EST)进行了电子克隆 (electroniccloning) ,根据电子克隆结果设计引物 ,利用RT PCR方法获得了一个水稻 (Oryzasati va)中尚未鉴定的cDNA克隆Osrab5B ,长 10 16bp。它与龙船海棠属 (Mesembryan themumcrystallinum)和百脉根属 (Lotusjaponicus)命名为rab5B基因 (序列登录号分别是AJ0 0 62 2 5和Z73939)有着高度同源性 (cDNA核苷酸序列ID值分别大于 74 %和76% ) ,同属rab家族的一个新的亚族。进而根据Osrab5B的cDNA序列设计引物 ,扩增得到Osrab5B的基因组克隆 ,序列分析表明它至少有 7个内含子和 展开更多

关键词 水稻 小GTP结合蛋白 SGP CDNA克隆 基因组序列 鉴定

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影响灵芝原生质体再生的几个因素 被引量：3

12

作者 李刚 李宝健 《食用菌学报》 1998年第3期12-17,共6页

本文比较系统地研究了培养基、酶解时间及单双层培养法等因素对灵芝原生质体再生的影响。结果表明,纤维二糖培养基及双层培养法比较适合灵芝原生质体再生。考虑到灵芝原生质体的得率以及不同酶解时间制备的灵芝原生质体的再生率,酶解2.5... 本文比较系统地研究了培养基、酶解时间及单双层培养法等因素对灵芝原生质体再生的影响。结果表明,纤维二糖培养基及双层培养法比较适合灵芝原生质体再生。考虑到灵芝原生质体的得率以及不同酶解时间制备的灵芝原生质体的再生率,酶解2.5h的灵芝原生质体用于再生比较合适。 展开更多

关键词 灵芝 原生质体 再生

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建兰原球茎发生及其无性繁殖系建立 被引量：8

13

作者 余迪求 杨明兰 李宝健 《中山大学学报论丛》 1996年第2期17-22,共6页

采用建兰未成熟种子为材料，培养于附加ＮＡＡ２ｍｇ／Ｌ的ＭＳ基本培养基上，诱导原球茎形成．然后将原球茎培养于附加ＮＡＡ０５ｍｇ／Ｌ的ＭＳ液体培养基中，形成丛生形原球茎并能不断增殖生长，建立无性繁殖系．将原球茎转移至附... 采用建兰未成熟种子为材料，培养于附加ＮＡＡ２ｍｇ／Ｌ的ＭＳ基本培养基上，诱导原球茎形成．然后将原球茎培养于附加ＮＡＡ０５ｍｇ／Ｌ的ＭＳ液体培养基中，形成丛生形原球茎并能不断增殖生长，建立无性繁殖系．将原球茎转移至附加６－ＢＡ２ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上，分化出幼芽．将幼芽培养于ＭＳ培养基上，分化出根。 展开更多

关键词 建兰 原球茎 无性繁殖系

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玉米6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶基因的克隆 被引量：2

14

作者 胡建广 杨金水 +1 位作者 赵相山 李宝健 《中山大学学报论丛》 1997年第5期72-76,共5页

以玉米Ｆ１减弱表达基因的ｃＤＮＡ片段为探针，从建立的玉米ｃＤＮＡ的文库中分离到相应的ｃＤＮＡ克隆．经测序和序列同源分析证明，该ｃＤＮＡ编码６－磷酸果糖－２－激酶／果糖－２，６－二磷酸酶，其氨基酸序列与人类、大鼠、牛和... 以玉米Ｆ１减弱表达基因的ｃＤＮＡ片段为探针，从建立的玉米ｃＤＮＡ的文库中分离到相应的ｃＤＮＡ克隆．经测序和序列同源分析证明，该ｃＤＮＡ编码６－磷酸果糖－２－激酶／果糖－２，６－二磷酸酶，其氨基酸序列与人类、大鼠、牛和鸡等动物肝脏相同基因对应区段的相似性分为为６５．７％，６３．４％，６３．７％和６１．２％． 展开更多

关键词 玉米 6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2 6-二磷酸酶 基因克隆

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利用低熔点琼脂糖纯化DNA转化粗糙脉孢霉 被引量：1

15

作者 刘秋云 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 1996年第S1期112-113,共2页

本文报道了利用低熔点琼脂糖纯化ＤＮＡ转化粗糙脉孢霉的方法，这个方法快速、高效，纯化ＤＮＡ还可用于限制酶切、修饰反应。

关键词 低熔点琼脂糖 转化 粗糙脉孢霉

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植物基因转化技术的建立和发展

16

作者 李宝健 石和平 +2 位作者 王金发 许耀 吴敏 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1991年第1期1-5,共5页

关键词 植物基因 基因转化 基因工程

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灵芝冬季栽培新技术 被引量：1

17

作者 李刚 《食用菌》 北大核心 1996年第4期34-35,共2页

灵芝是一种名贵的中药材。研究表明,灵芝中含多种人体必需微量元素和14种氨基酸,还含多种维生素、激素、酶类等。尤其是所含的灵芝多糖和苦味三萜具有抗癌作用,已引起国际医学界的重视,目前在欧美、东南亚、日本、香港、台湾等地已掀起... 灵芝是一种名贵的中药材。研究表明,灵芝中含多种人体必需微量元素和14种氨基酸,还含多种维生素、激素、酶类等。尤其是所含的灵芝多糖和苦味三萜具有抗癌作用,已引起国际医学界的重视,目前在欧美、东南亚、日本、香港、台湾等地已掀起一股“灵芝热”。由于野生灵芝很少,而人工栽培多限于夏、秋季节,故目前灵芝产量有供不应求之势。 展开更多

关键词 灵芝 栽培 冬季

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^（60）Coγ辐射对木瓜蛋白酶制剂的杀菌效应 被引量：1

18

作者 丘泉发 许莉萍 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期117-118,共2页

用６０Ｃｏγ辐射对木瓜蛋白酶制剂进行灭菌试验，吸收剂量８ｋＧｙ和１２ｋＧｙ，杀菌率分别达到９８．８％和９９．９％，酶活力相应地下降２６％和３２％。在木瓜蛋白酶制剂中加入碘化钾和维生素Ｃ时（均为０．１％），经８ｋＧｙ剂... 用６０Ｃｏγ辐射对木瓜蛋白酶制剂进行灭菌试验，吸收剂量８ｋＧｙ和１２ｋＧｙ，杀菌率分别达到９８．８％和９９．９％，酶活力相应地下降２６％和３２％。在木瓜蛋白酶制剂中加入碘化钾和维生素Ｃ时（均为０．１％），经８ｋＧｙ剂量照射，酶制剂达到完全灭菌，酶活力下降１５％。 展开更多

关键词 木瓜蛋白酶 酶活力 辐射灭菌

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