瘢痕性喉狭窄瘢痕组织中弹性纤维和胶原纤维分析 被引量：16

1

作者 吴旋 苏振忠 +2 位作者 蒋爱云 赖英荣 柴丽萍 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期312-315,共4页

【目的】了解喉狭窄瘢痕组织中弹性纤维,Ⅰ型/Ⅲ型胶原纤维的含量和形态特征。【方法】喉部分切除术后瘢痕性喉狭窄13例患者的喉瘢痕组织为实验组及15例正常声带组织为对照组,分别进行苏木精鄄伊红染色,胶原纤维、弹性纤维复合染色,及... 【目的】了解喉狭窄瘢痕组织中弹性纤维,Ⅰ型/Ⅲ型胶原纤维的含量和形态特征。【方法】喉部分切除术后瘢痕性喉狭窄13例患者的喉瘢痕组织为实验组及15例正常声带组织为对照组,分别进行苏木精鄄伊红染色,胶原纤维、弹性纤维复合染色,及Ⅰ、Ⅲ型胶原苦味酸鄄鄄天狼猩红染色,全自动图像分析系统下观察和计算。【结果】喉狭窄瘢痕组织中,细胞外基质排列紊乱,胶原纤维增多,弹性纤维含量(0.178±0.066)较正常声带中弹性纤维含量(0.374±0.055)明显减少(P<0.001);喉狭窄瘢痕组织Ⅰ型胶原的含量(0.382±0.199)较正常声带中Ⅰ型胶原含量(0.147±0.073)增加明显(P<0.05);喉狭窄瘢痕组织Ⅰ型/Ⅲ型比值(3.98±0.88)较正常声带组织(1.01±0.37)大(P<0.001)。【结论】弹性纤维及Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维形态特征和含量改变可能是导致喉部分切除术后瘢痕性喉狭窄的病理基础。 展开更多

关键词 瘢痕 病理学 喉狭窄 弹性纤维 胶原纤维

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奥曲肽调节自身受体2在肝癌上的表达及其影响 被引量：6

2

作者 华赟鹏 李绍强 +3 位作者 赖佳明 梁惠珍 梁力建 黄洁夫 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期2325-2329,共5页

目的观察奥曲肽(OCT)对Bel7402人肝癌细胞上生长抑素受体2(SSTR2)的调节,以及对OCT抑瘤作用的影响。方法以MTT法测量OCT对Bel7402细胞增殖的影响,光镜下观察细胞形态的变化。以细胞迁移实验和粘附实验观察细胞侵袭和粘附能力的影响。以... 目的观察奥曲肽(OCT)对Bel7402人肝癌细胞上生长抑素受体2(SSTR2)的调节,以及对OCT抑瘤作用的影响。方法以MTT法测量OCT对Bel7402细胞增殖的影响,光镜下观察细胞形态的变化。以细胞迁移实验和粘附实验观察细胞侵袭和粘附能力的影响。以流式细胞仪检测细胞表面SSTR2的表达和细胞周期的影响。以裸鼠人肝癌种植模型,观察OCT对种植瘤生长的影响,以免疫组化和半定量RT-PCR观察SSTR2mRNA和蛋白的表达。结果OCT处理的7402细胞增殖能力和细胞形态无明显改变,细胞的侵袭和粘附能力明显下降,细胞生长静止期(G0/G1)的比例显著增加,但未见凋亡峰,细胞表面SSTR2蛋白的表达明显受抑,但SSTR2mRNA的表达与对照组比较无显著差异;裸鼠人肝癌原位种植瘤在OCT治疗后生长受到明显抑制,种植瘤内SSTR2mRNA和蛋白的表达显著增加。结论SSTR2是OCT抑制肝癌的重要介导物,但它同样也受到OCT的调节,即短期OCT处理引起肝癌细胞上SSTR2脱敏、内化,OCT的功效受到部分抑制;长期持续的治疗可以导致肝癌细胞SSTR2表达的增加,有利于OCT抑制肝癌作用的更好发挥。 展开更多

关键词 肝肿瘤 奥曲肽 受体 生长抑素

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免疫活性细胞表达杀伤细胞抑制性受体与造血干细胞移植后移植物抗宿主病的关系(英文) 被引量：6

3

作者 段连宁 陈纯 +6 位作者 黄绍良 方建培 魏菁 包蓉 李艳 韩红星 李树浓 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第6期625-632,共8页

本研究的目的是探讨造血干细胞移植后杀伤细胞抑制性受体 (KIR)CD15 8和CD94与GVHD发生的关系。用流式细胞术检测分析T淋巴细胞和NK细胞表达CD15 8a,CD15 8b和CD94表达状况 ,同时用PCR方法分析供受者HLA Cw配型 ,比较异基因外周血造血... 本研究的目的是探讨造血干细胞移植后杀伤细胞抑制性受体 (KIR)CD15 8和CD94与GVHD发生的关系。用流式细胞术检测分析T淋巴细胞和NK细胞表达CD15 8a,CD15 8b和CD94表达状况 ,同时用PCR方法分析供受者HLA Cw配型 ,比较异基因外周血造血干细胞移植 (allo PBSCT)和脐血移植 (UCBT)后该KIR分子变化和HLA Cw相合或错配与GVHD发生的关系。结果表明 :无论是PBSCT或是UCBT ,移植后CD3+CD15 8a+和CD3+CD15 8b+T细胞均增高并以CD8+CD15 8b+细胞升高为主。发生急性与慢性GVHD组CD3+CD15 8b+细胞均呈不同程度升高 ,在急性GVHD病例中升高最明显。急性GVHD期 (即移植早期 )KIR表达增高 ,慢性GVHD阶段 (即移植后期 )KIR呈减低趋势。CD94主要表达于CD3+CD8+T细胞 ,在UCBT或PBSCT后CD94在CD4 +T细胞和CD8+T细胞均明显增高。 5例HLA Cw相合者无 1例发生重症GVHD ;2例HLA Cw不相合病例 ,有 1例发生急重症GVHD ,并死于间质性肺炎 (IP) ,另 1例为AML(M5) ,完全植入 ,无重度GVHD发生 ,但于 5 3天后复发。 4例相关相合移植中 2例无急性GVHD ,而无关相合者 4例均发生不同程度GVHD。结论 :GVHD的发生与KIR表达有一定关系。CD15 8b分子可能是移植后早期T淋巴细胞活化的负调控分子。从T细胞表达KIR来理解GVHD发生机理 。 展开更多

关键词 杀伤细胞抑制性受体 造血干细胞移植 移植物抗宿主病 T淋巴细胞 免疫活性细胞

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正、反义hTERT基因真核表达载体的构建与鉴定 被引量：6

4

作者 孙来保 李成荣 +1 位作者 文剑明 张萌 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第9期899-902,共4页

目的构建正、反义hTERT基因真核表达载体,为进一步研究端粒酶的活性调节与恶性肿瘤基因治疗作准备。方法根据已发表在Genebank的hTERT cDNA序列,设计并合成了1对两端带特定限制性酶切位点引物,提取子宫颈癌HeLa细胞株总RNA,进行RT-PCR,... 目的构建正、反义hTERT基因真核表达载体,为进一步研究端粒酶的活性调节与恶性肿瘤基因治疗作准备。方法根据已发表在Genebank的hTERT cDNA序列,设计并合成了1对两端带特定限制性酶切位点引物,提取子宫颈癌HeLa细胞株总RNA,进行RT-PCR,并将扩增产物TA首先克隆至pGEMR-T载体,然后双酶切pGEM-T载体回收目的片段再克隆至真核表达质粒pcDNA3.1(±)中,并对重组体进行酶切鉴定和测序分析。结果PCR扩增片段与预期结果相符,双酶切证实构建的正、反义hTERT基因真核表达载体克隆成功,插入片段测序结果与Genebank的hTERT cDNA的部分序列完全一致。结论成功地构建了正、反义hTERT基因真核表达载体,为下一步研究端粒酶的活性调节与恶性肿瘤基因治疗打下了实验基础。 展开更多

关键词 恶性肿瘤 HTERT基因 真核表达载体 构建 鉴定 基因治疗

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阻断CD40-CD40L共刺激途径对T细胞表型及细胞因子分泌的作用研究 被引量：4

5

作者 陈纯 黄绍良 +3 位作者 段连宁 李浩威 温冠媚 魏菁 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期534-537,共4页

目的 :探讨应用抗CD4 0L单克隆抗体阻断CD4 0 CD4 0L共刺激途径后对T细胞表型及其分泌的细胞因子的影响 ,为体外阻断该共刺激途径诱导T细胞对异体移植抗原的免疫耐受提供实验依据。方法 :供鼠 (C5 7BL 6 H 2b)脾T细胞作为反应细胞 ,受... 目的 :探讨应用抗CD4 0L单克隆抗体阻断CD4 0 CD4 0L共刺激途径后对T细胞表型及其分泌的细胞因子的影响 ,为体外阻断该共刺激途径诱导T细胞对异体移植抗原的免疫耐受提供实验依据。方法 :供鼠 (C5 7BL 6 H 2b)脾T细胞作为反应细胞 ,受鼠 (BALB CH 2d)脾细胞作为刺激细胞 ,设单抗组 (加抗CD4 0L单抗 )和对照组 (不加单抗 ) ,初次混合淋巴细胞培养(MLR) 7天 ,在不同时间点采用3H TdR掺入法检测细胞增殖率 ,以ELISA法测定培养上清液中IFN γ、IL 2、IL 4、IL 10等的水平 ,第 5天采用流式细胞仪检测CD4 + T和CD8+ T细胞上CD2 5、CD6 9、CD4 0L和CD4 5RA的表达。再次MLR 5天 ,第 1、3、5天采用3H TdR掺入法测定细胞的增殖情况和ELISA法测定培养上清液中的上述细胞因子的水平。结果 :初次和再次MLR结果均显示 ,单抗组细胞增殖反应率明显低于对照组。初次MLR单抗组中CD4 + T和CD8+ T细胞比例明显低于对照组 (P <0 0 5 ) ;单抗组中CD4 + CD2 5 + T、CD4 + CD6 9+ T、CD8+ CD2 5 + T、CD4 + CD4 0L+ T和CD8+ CD6 9+ T细胞比例明显低于对照组 (P <0 0 5 ) ,而CD8+ CD4 0L+ T和CD4 + CD4 5RA +T细胞的比例与对照组相比无明显差异 (P >0 0 5 )。初次MLR中单抗组和对照组培养上清中IL 4和IL 10几乎无法测出 。 展开更多

关键词 CD40-CD40L T细胞表型 细胞因子 分泌作用 免疫耐受

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转染survivin对HLF细胞增殖及凋亡的影响 被引量：2

6

作者 顾霞 林汉良 +3 位作者 朱有凯 张萌 梁惠珍 沈艳 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期63-66,71,共5页

目的探讨survivin基因表达对人肺纤维母细胞(humanlungfibroblast,HLF)增殖、凋亡的影响。方法构建survivin基因真核表达质粒pcDNA3.1/SVN;利用脂质体转染法将其转入不表达survivinmRNA的HLF细胞系。连续培养10周,筛选出稳定表达的阳性... 目的探讨survivin基因表达对人肺纤维母细胞(humanlungfibroblast,HLF)增殖、凋亡的影响。方法构建survivin基因真核表达质粒pcDNA3.1/SVN;利用脂质体转染法将其转入不表达survivinmRNA的HLF细胞系。连续培养10周,筛选出稳定表达的阳性克隆(HLF/SVN)及转空质粒对照(HLF/K)。用RT-PCR、免疫组化、Westernblot检测细胞中survivin、bcl-2和caspase3mRNA表达;通过观察细胞生长曲线、细胞凋亡指数,探讨转染survivin基因对HLF细胞生长、凋亡的影响。结果转染pcDNA3.1/SVN后,在4、6、8和10周HLF/SVN细胞查见survivinmRNA表达;免疫组化和Westernblot见HLF/SVN细胞survivin阳性表达;转染后caspase3mRNA受到抑制,表达减弱或消失。HLF/SVN细胞凋亡指数(0.3%、1.0%、1.5%)皆低于HLF(0.9%、4.3%、2.1%)及HLF/K(0.8%、1.4%、2.8%)。细胞生长曲线示HLF/SVN细胞生长快于HLF和HLF/K,差异有统计学意义(Р﹤0.05)。结论survivin基因能促进HLF细胞生长,可能通过抑制凋亡和促进细胞分裂而发挥作用。 展开更多

关键词 SURVIVIN蛋白 人肺纤维母细胞 转染 PCDNA3.1

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在不同应激状态下MDM2基因对Jurkat细胞的作用 被引量：2

7

作者 朱有凯 林汉良 +3 位作者 马怡晖 顾霞 吴红阳 廖冰 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期545-548,共4页

【目的】探讨MDM2基因在不同应激状态下对T细胞性白血病细胞株Jurkat增殖、凋亡和基因表达的影响。【方法】采用RNA干扰下调白血病细胞株JurkatMDM2基因表达后,用Westernblot、流式细胞术等方法检测Jurkat细胞在不同应激状态下的变化。... 【目的】探讨MDM2基因在不同应激状态下对T细胞性白血病细胞株Jurkat增殖、凋亡和基因表达的影响。【方法】采用RNA干扰下调白血病细胞株JurkatMDM2基因表达后,用Westernblot、流式细胞术等方法检测Jurkat细胞在不同应激状态下的变化。【结果】无应激状态下,MDM2基因表达下降后,Jurkat细胞增殖减慢,细胞周期表现一定程度的G1-S阻滞;E2F1表达明显降低超过78%,p65表达下调超过58%;细胞损伤后,MDM2表达下调可导致细胞损伤修复减慢,增强紫外线和甲氨喋呤诱导凋亡作用,导致甲氨喋呤作用下Rb和Bax基因的表达相对增加。【结论】在不同应激状态下,MDM2基因表达下降广泛影响Jurkat细胞的增殖、凋亡和基因表达等生物学特性,提示MDM2基因有可能作为T细胞性白血病治疗的潜在新靶点。 展开更多

关键词 MDM2基因 T细胞性白血病 Jurkat RNA干扰

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人胎盘血间质干细胞分离培养 被引量：2

8

作者 朱美玲 胡燕芬 +4 位作者 温冠媚 雷俊霞 李浩威 陈汝光 李树浓 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期1743-1744,共2页

目的分离培养人胎盘血间质干细胞(hMSC),为hMSC探寻新来源。方法采用羟乙基淀粉(HES)方法分离、富集胎盘血有核细胞;DMEM培养液体外培养、纯化、扩增hMSC;流式细胞仪检测细胞表面标记;地塞米松、IBMX、胰岛素和吲哚美辛定向诱导hMSC样... 目的分离培养人胎盘血间质干细胞(hMSC),为hMSC探寻新来源。方法采用羟乙基淀粉(HES)方法分离、富集胎盘血有核细胞;DMEM培养液体外培养、纯化、扩增hMSC;流式细胞仪检测细胞表面标记;地塞米松、IBMX、胰岛素和吲哚美辛定向诱导hMSC样细胞向脂肪细胞分化。结果胎盘血来源有核细胞,在DMEM体外培养条件下,生长出具有塑料粘附特性的梭形细胞,阳性获得率2917%(7/24),该细胞传代培养达6个月以上;流式细胞仪检测结果显示CD29、CD44、CD59、CD90、CD105、CD166表达阳性,CD14、CD34、CD45、CD80、CD86表达阴性;加入脂肪细胞诱导剂,细胞在形态上向脂肪细胞转化,胞内出现脂滴、脂泡,油红O阳性。结论人胎盘血可以分离培养出hMSC,是hMSC的重要来源。 展开更多

关键词 胎血 间质干细胞 细胞培养

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RNA干扰MAGEA3对人肝癌细胞凋亡的影响 被引量：1

9

作者 李文瑜 郭爱林 +2 位作者 杨素清 胡少为 文剑明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期2372-2376,共5页

目的:探讨小发夹RNA(shRNA)载体介导抑制人肝癌细胞中黑色素瘤相关抗原A3(MAGEA3)的表达和对肝癌细胞凋亡的影响。方法:构建pS ilencer-MAGEA3短发夹状siRNA真核基因表达载体,采用脂质体介导的方法将其转染到人肝癌细胞(m el-ed1)中,用W... 目的:探讨小发夹RNA(shRNA)载体介导抑制人肝癌细胞中黑色素瘤相关抗原A3(MAGEA3)的表达和对肝癌细胞凋亡的影响。方法:构建pS ilencer-MAGEA3短发夹状siRNA真核基因表达载体,采用脂质体介导的方法将其转染到人肝癌细胞(m el-ed1)中,用W estern印迹法、RT-PCR检测MAGEA3基因在肝癌细胞中的表达;通过原位末端标记TUNEL法、DNA片段化及Annexin V/PI双标记法检测,观察其对肝癌细胞凋亡的影响。结果:成功构建pS ilencer-MAGEA3短发夹状siRNA真核基因表达载体,转染特异性小发夹RNA质粒表达载体的MEL-ED1细胞中MAGEA3基因表达显著抑制(90%)。与对照组比较,pS ilencer-MAGEA3转染组肝癌细胞培养48 h后,DNA片段化检测出“DNA ladder”、TUNEL法显示细胞典型凋亡特征,Annexin V/PI双标检测转染组细胞凋亡率为21.41%±1.98%,明显高于pS ilencer-neo空载体转染组和未转染组(P<0.01)。结论:MAGEA3小发夹RNA质粒载体可显著抑制MEL-ED1细胞中的MAGEA3基因的表达,促进肝癌细胞的凋亡,MAGEA3基因具有抑制凋亡的作用。该研究为应用RNA i进行肿瘤的基因治疗提供了实验依据。 展开更多

关键词 RNA干扰 黑色素瘤相关抗原A3 肝肿瘤 细胞凋亡

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性激素与男性骨质疏松症 被引量：3

10

作者 廖悦华 王连唐 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2005年第4期529-531,共3页

关键词 性激素 男性 骨质疏松症 糖皮质激素 酒精滥用

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MDM2基因敲低对白血病细胞株K562的影响

11

作者 朱有凯 林汉良 +3 位作者 顾霞 马怡晖 吴红阳 古聪敏 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第B03期118-121,共4页

【目的】研究 MDM2基因对白血病细胞的影响,探讨 MDM2基因在白血病发病机制和治疗方面的意义。【方法】用 pSilencer4.1-CMV neo 构建 MDM2 shRNA 表达载体 pMDM2-shRNA,采用脂质体将载体导入 K562细胞,G418筛选出稳定表达 shRNA 细胞,... 【目的】研究 MDM2基因对白血病细胞的影响,探讨 MDM2基因在白血病发病机制和治疗方面的意义。【方法】用 pSilencer4.1-CMV neo 构建 MDM2 shRNA 表达载体 pMDM2-shRNA,采用脂质体将载体导入 K562细胞,G418筛选出稳定表达 shRNA 细胞,然后用在流式细胞仪检测细胞周期变化和细胞凋亡率,用多重 RT-PCR 和 Western blot 检测细胞基因表达水平。【结果】转染 pMDM2-shRNA 的细胞 MDM2 mRNA 及蛋白质的表达均下降>70%,细胞增殖减慢,G1-S期阻滞,细胞凋亡增加。伴随 MDM2基因表达下调,多种基因表达出现较明显改变,包括 P21表达增加,E2F1和 P65表达下降。【结论】MDM2基因表达下降后,可导致细胞增殖减慢和细胞凋亡;结果表明 MDM2对多种基因的表达具有调控作用,提示 MDM2有可能成为白血病治疗的新靶点。 展开更多

关键词 白血病 MDM2 转染 pSilencer4.1-CMV NEO SHRNA

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大鼠心脏插管留置术的探讨

12

作者 梁成结 钟欢妹 +1 位作者 罗灿峤 杨文敏 《中国比较医学杂志》 CAS 2010年第2期58-61,共4页

目的探讨大鼠右心房插管留置术实验方法。方法20只SD大鼠进行右心房导管置入术,术后随机分为2组(导管穿弹簧正内孔组、导管穿弹簧侧边入内孔组),每组各10只。导管在体内固定后由颈背部引出,穿过弹簧,导管另一端固定于饲养笼外的支架上,... 目的探讨大鼠右心房插管留置术实验方法。方法20只SD大鼠进行右心房导管置入术,术后随机分为2组(导管穿弹簧正内孔组、导管穿弹簧侧边入内孔组),每组各10只。导管在体内固定后由颈背部引出,穿过弹簧,导管另一端固定于饲养笼外的支架上,导管外接三通管等。结果24 h对两组模型进行实验观察。(1)导管穿弹簧正内孔组:只有1只导管弹簧设备未完全破坏,另9只模型的导管被咬断或拉出了出来,10只模型都不能从导管抽取血液样本。(2)导管穿弹簧侧边入内孔组:导管和弹簧设备都完好,其中9只模型都能从导管抽取血液样本。结论导管穿弹簧侧边入内孔组模型方法是成功的,有一定的推广价值。 展开更多

关键词 心脏插管 留置术

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血清EB病毒抗体EBNA1 IgA检测临界值探讨 被引量：6

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作者 程伟民 季明芳 +5 位作者 宗永生 顾耀亮 吴子柏 李晓玲 杨金兰 郭媛卿 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期638-640,共3页

目的:通过对健康人群与鼻咽癌患者EB病毒抗体EBNA1IgA水平的分析,探讨在鼻咽癌高发区应用该抗体作为鼻咽癌血清学指标时临界值的确定。方法:采用ELISA法检测780例健康人和104例鼻咽癌患者血清EB病毒EBNA1IgA,根据灵敏度和特异度曲线分... 目的:通过对健康人群与鼻咽癌患者EB病毒抗体EBNA1IgA水平的分析,探讨在鼻咽癌高发区应用该抗体作为鼻咽癌血清学指标时临界值的确定。方法:采用ELISA法检测780例健康人和104例鼻咽癌患者血清EB病毒EBNA1IgA,根据灵敏度和特异度曲线分别选择灵敏度、特异度在95%所对应的rOD值作为阴性临界值和阳性临界值,根据该临界值将人群划分成3个不同等级,rOD≥1.85为阳性,1.85>rOD≥1.10为可疑阳性,rOD<1.10为阴性。结果:健康人群EBNA1IgA的均值是0.850±0.637,鼻咽癌患者为2.241±0.875。健康人群中EBNA1IgA阴性、可疑阳性和阳性人群分别占75.13%、17.44%和7.44%,而鼻咽癌患者则分别是4.81%,17.31%,77.88%。结论:鼻咽癌高发区人群血清EBNA1IgA的rOD值离散程度较大。以EBNA1IgA作为鼻咽癌血清学诊断指标,可根据灵敏度和特异度确定阳性、可疑阳性和阴性3个人群,以利于临床作出对鼻咽癌的辅助诊断。 展开更多

关键词 EB病毒 血清学 鼻咽癌 酶联免疫吸附试验

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