纤维素酶E_5基因在E.coli中的克隆与表达 被引量：15

1

作者 沈雪亮 夏黎明 刘景晶 《浙江大学学报（工学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第6期640-644,共5页

将含纤维素酶 E5基因的质粒 p D5 4 1用 Nco I和 Eco R I双酶切后 ,经电泳分离获取含 E5基因的小片段 ,将该片段定向插入表达质粒 p SE4 2 0的多克隆位点上 ,进一步将重组 DNA转入大肠杆菌宿主 .采用刚果红染色法检测出选择性平板上的... 将含纤维素酶 E5基因的质粒 p D5 4 1用 Nco I和 Eco R I双酶切后 ,经电泳分离获取含 E5基因的小片段 ,将该片段定向插入表达质粒 p SE4 2 0的多克隆位点上 ,进一步将重组 DNA转入大肠杆菌宿主 .采用刚果红染色法检测出选择性平板上的转化子具有羧甲基纤维素酶 (CMCase)活性 .摇瓶产酶试验进一步表明 ,基因重组后的大肠杆菌能高效表达 E5基因并将产物分泌出胞外 ,培养液中可检测到的CMCase活力达 31.6 U/ m L .该研究结果为进一步构建高效纤维素分解菌株打下了良好的基础 ,具有重要的学术意义和实际应用价值 . 展开更多

关键词 纤维素酶 E5基因 重组 表达 胞外分泌

在线阅读 下载PDF 职称材料

新型融合基因hIFNα1-CB在大肠杆菌中表达 被引量：3

2

作者 邱定红 毛晓华 +3 位作者 高向东 李新荣 林碧蓉 徐蘅 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期521-525,共5页

目的　构建人干扰素 α1和抗菌肽 B的融合蛋白表达质粒 p HC,并初步研究融合蛋白的抗病毒活性。方法　重组质粒 p HC转化 E.coli JM83 ,温控诱导表达 ,SDS- PAGE制备蛋白质 ,病变抑制法测定其抗病毒比活性。结果　得到分子量约为 2 1ku... 目的　构建人干扰素 α1和抗菌肽 B的融合蛋白表达质粒 p HC,并初步研究融合蛋白的抗病毒活性。方法　重组质粒 p HC转化 E.coli JM83 ,温控诱导表达 ,SDS- PAGE制备蛋白质 ,病变抑制法测定其抗病毒比活性。结果　得到分子量约为 2 1ku的目的蛋白 ,抗病毒比活性为 2 .62× 10 6 IU/ m g。结论　成功构建了融合蛋白表达质粒 p HC,重组蛋白的构象及 C-端的 展开更多

关键词 大肠杆菌 表达 基因重组 人干扰素 抗菌肽B 抗病毒活性

在线阅读 下载PDF 职称材料

重组人血管内皮生长因子165在Pichia酵母中的表达 被引量：2

3

作者 刘煜 吴国祥 +4 位作者 赵建阳 颜天华 奚涛 沈子龙 成国祥 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期577-581,共5页

目的 :采用基因工程方法构建基因工程菌制备人VEGF1 65蛋白。方法 :自人肿瘤组织中获取人VEGF1 65cDNA ,构建pPIC9K酵母表达载体 ,采用Pichia酵母真核表达系统表达目的蛋白。结果 :SDS PAGE及Western blot结果显示目的蛋白已成功表达。... 目的 :采用基因工程方法构建基因工程菌制备人VEGF1 65蛋白。方法 :自人肿瘤组织中获取人VEGF1 65cDNA ,构建pPIC9K酵母表达载体 ,采用Pichia酵母真核表达系统表达目的蛋白。结果 :SDS PAGE及Western blot结果显示目的蛋白已成功表达。结论 :在Pichia酵母中成功表达人VEGF1 65。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子165 巴氏毕赤酵母 pPIC9K酵母表达载体 SDS-PAGE WESTERN-BLOT

在线阅读 下载PDF 职称材料

利用转基因动物乳腺生物反应器生产溶栓药物的研究进展 被引量：2

4

作者 徐寒梅 成国祥 沈子龙 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期474-477,共4页

目前 ,溶栓试剂主要有七大类 ,其中 ,纤溶酶原激活剂 ( PA)及其突变体是急性心肌梗塞的常规用药 ,但是由于来源有限 ,价格昂贵 ,远远不能满足临床需要。利用转基因动物乳腺作为生物反应器来生产溶栓药物能够降低成本 ,是一种高效率的表... 目前 ,溶栓试剂主要有七大类 ,其中 ,纤溶酶原激活剂 ( PA)及其突变体是急性心肌梗塞的常规用药 ,但是由于来源有限 ,价格昂贵 ,远远不能满足临床需要。利用转基因动物乳腺作为生物反应器来生产溶栓药物能够降低成本 ,是一种高效率的表达系统 .转基因动物乳腺生物反应器是将目的基因构建于乳腺表达载体 ,通过显微注射等方法注入动物的受精卵中 ,使目的基因整合到动物的染色体中 ,最终在动物乳汁中获得目的蛋白的一种制药方法。到目前为止 ,转基因组织型纤溶酶原激活剂 ( t PA) ,尿激酶型纤溶酶原激活剂 ( u PA) ,长效组织型纤溶酶原激活剂 ( LAt PA)的转基因小鼠 ,及长效组织型纤溶酶原激活剂 ( LAt PA)的转基因羊都已产生 ,并且在从转基因羊乳汁中纯化长效组织型纤溶酶原激活剂 ( LAt PA)蛋白方面也取得了突破性的进展。可以预测 ,利用转基因动物乳腺生物反应器生产溶栓药物将会有广阔的前景。 展开更多

关键词 溶栓试剂 纤溶酶原激活剂 转基因动物 乳腺生物反应器 溶栓药物

在线阅读 下载PDF 职称材料

人肽脱甲酰基酶基因真核表达载体的构建及在NIH3T3细胞中的表达

5

作者 何睿 黄恺飞 +2 位作者 罗学刚 邢莹莹 奚涛 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期575-579,共5页

目的:构建人肽脱甲酰基酶(HsPDF)基因的真核表达载体并转染NIH3T3细胞,研究HsPDF基因在真核细胞中的表达及功能。方法:通过RT-PCR从人宫颈癌细胞系HeLa中扩增获得HsPDF基因,克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-),利用阳离子脂质体转染NIH3T3细... 目的:构建人肽脱甲酰基酶(HsPDF)基因的真核表达载体并转染NIH3T3细胞,研究HsPDF基因在真核细胞中的表达及功能。方法:通过RT-PCR从人宫颈癌细胞系HeLa中扩增获得HsPDF基因,克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-),利用阳离子脂质体转染NIH3T3细胞,G418筛选建立稳定表达细胞系;RT-PCR检测转染后HsPDF基因的mRNA转录水平;MTT法测定转染后细胞增殖能力的变化;苏木精-伊红(HE)染色观察HsPDF对NIH3T3细胞形态的影响。结果:成功构建重组表达载体pcDNA3.1(-)-HsPDF。该载体被转染入NIH3T3细胞后,外源HsPDF基因获得了有效的转录与稳定表达。HsPDF显著促进NIH3T3细胞的增殖,并使细胞呈现出一定的恶变特征。结论:HsPDF基因在NIH3T3细胞中获得了稳定表达并表现出明显的生物学功能,为深入研究奠定了基础。 展开更多

关键词 人肽脱甲酰基酶 载体 构建 NIH3T3细胞 表达

在线阅读 下载PDF 职称材料

丹参酮ⅡA对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用 被引量：88

6

作者 叶龙彬 奚涛 +1 位作者 陈峰 王瑜 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期267-270,共4页

目的 :观察丹参酮ⅡA对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 :采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型 ,以水溶性的丹参酮ⅡA纳米制剂灌胃给药 ,观测其对脑缺血大鼠的神经行为、脑梗塞范围和脑含水量以及脑组织SOD活力、MDA... 目的 :观察丹参酮ⅡA对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 :采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型 ,以水溶性的丹参酮ⅡA纳米制剂灌胃给药 ,观测其对脑缺血大鼠的神经行为、脑梗塞范围和脑含水量以及脑组织SOD活力、MDA含量和NO水平的影响。结果 :丹参酮ⅡA(2 5mg/kg)能使脑缺血大鼠的神经行为明显改善 ,脑梗塞范围和脑含水量显著降低 ;丹参酮ⅡA亦能拮抗脑缺血再灌注引起的SOD活力的下降及MDA含量的升高 ,并使脑组织NO水平显著下降。结论 :丹参酮ⅡA对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有很好的保护作用。 展开更多

关键词 丹参酮ⅡA 纳米制剂 局灶性脑缺血 自由基 一氧化氮

在线阅读 下载PDF 职称材料

植物病原真菌灰葡萄孢A_(23)产生脱落酸的研究 被引量：13

7

作者 吴江 郑珩 +2 位作者 王鲁燕 顾觉奋 蔡勤 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期313-316,共4页

从南京蔬菜研究所植物病株上分离到一株真菌，经过鉴定为灰葡萄孢（Ｂｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｅｒｅａ）突变株，命名为Ａ２３。该菌在ＰＤＡ培养基上发酵培养，通过分离纯化，得到脱落酸（ＡＢＡ）结晶。通过在５种溶媒系统进行薄层层析... 从南京蔬菜研究所植物病株上分离到一株真菌，经过鉴定为灰葡萄孢（Ｂｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｅｒｅａ）突变株，命名为Ａ２３。该菌在ＰＤＡ培养基上发酵培养，通过分离纯化，得到脱落酸（ＡＢＡ）结晶。通过在５种溶媒系统进行薄层层析，并经过特异性显色反应鉴定，该结晶为脱落酸。通过优化发酵条件，找到最适培养温度２８℃，并对Ａ２３菌进行各种波长光照培养试验，使ＡＢＡ产量大幅度提高，其产率达到３．９２ｍｇ／１００ｇＰＤＡ。 展开更多

关键词 灰葡萄孢 脱落酸 发酵 植物 病原真菌

在线阅读 下载PDF 职称材料

聚乙二醇修饰干扰素α2b的体内药代动力学研究 被引量：14

8

作者 姚文兵 林碧蓉 +1 位作者 沈子龙 吴梧桐 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期457-461,共5页

目的 :运用同位素示踪法 -1 2 5I标记和 SDS-PAGE研究聚乙二醇修饰干扰素 α2 b的药代动力学。方法 :以大鼠为研究对象 ,分别按 1 ,3,5μg/ kg的剂量股静脉注射给药 ,颈动脉采血。利用 SDS-PAGE测定血液中原形药物放射量与总放射量的百... 目的 :运用同位素示踪法 -1 2 5I标记和 SDS-PAGE研究聚乙二醇修饰干扰素 α2 b的药代动力学。方法 :以大鼠为研究对象 ,分别按 1 ,3,5μg/ kg的剂量股静脉注射给药 ,颈动脉采血。利用 SDS-PAGE测定血液中原形药物放射量与总放射量的百分比 ,以校正全血血药浓度。用小鼠测定1 2 5I-干扰素 α2 b和 1 2 5I-单修饰干扰素α2 b的组织分布和尿粪排泄 ,用大鼠测定其胆汁排泄。结果 :1 2 5I-干扰 α2 b和 1 2 5I-单修饰干扰素 α2 b静脉注射给药符合一级消除动力学的二房室模型。按低 ,中 ,高三个剂量组 ,1 2 5I-干扰素α2 b的消除半衰期 ( t1 / 2 β)分别为 1 .0 2 0 ,0 .91 4 ,0 .6 6 5 h,1 2 5I-单修饰干扰素α2 b的消除半衰期 ( t1 / 2 β)分别为 2 .72 ,3.1 7,2 .6 9h,1 2 5I-单修饰干扰素α2 b在肾中的分布明显减少 ,在肝中的分布明显增加。结论 :聚乙二醇修饰能够显著延长干扰素 α2 b的体内半衰期。 展开更多

关键词 干扰素Α2B 聚乙二醇修饰干扰素α2b 药代动力学 组织分布

在线阅读 下载PDF 职称材料

聚乙二醇对干扰素α-2b的初步化学修饰研究 被引量：14

9

作者 田浤 姚文兵 +1 位作者 吴梧桐 沈子龙 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期74-77,共4页

以几种不同方法活化的聚乙二醇 5 0 0 0对干扰素进行化学修饰 ,并对修饰条件、修饰后干扰素生物活性进行了初步比较。相同反应条件下 ,单甲氧基聚乙二醇甲酸琥珀酰亚胺酯 (SC mPEG)的选择性较单甲氧基聚乙二醇琥珀酸琥珀酰亚胺酯 (SS mP... 以几种不同方法活化的聚乙二醇 5 0 0 0对干扰素进行化学修饰 ,并对修饰条件、修饰后干扰素生物活性进行了初步比较。相同反应条件下 ,单甲氧基聚乙二醇甲酸琥珀酰亚胺酯 (SC mPEG)的选择性较单甲氧基聚乙二醇琥珀酸琥珀酰亚胺酯 (SS mPEG)高 ,聚乙二醇甲酸琥珀酰亚胺酯 (BSC PEG)由于有两个活性基团 ,选择性与SS mPEG相近。以聚乙二醇活化的修饰剂会使干扰素分子见形成交联 ,修饰后生物活性损失较大 ,而单甲氧基聚乙二醇活化的修饰剂修饰干扰素 ,修饰率保持在 30 展开更多

关键词 聚乙二醇 干扰素 rhuIFNα-2b

在线阅读 下载PDF 职称材料

脱落酸产生菌液体发酵培养基的优化 被引量：7

10

作者 郑珩 盛海林 +2 位作者 吴江 赵辉 吴梧桐 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期460-462,共3页

应用 Plackett- Burman设计和球面对称设计实验 ,对脱落酸产生菌液体培养条件进行优化 ,确定最佳培养基组成 ,其摇瓶产量可达 14 5.9μg/ml,比优化前产量提高 60

关键词 球面对称设计 脱 酸 液体发酵 培养基 P-B设计

在线阅读 下载PDF 职称材料

硫氧还蛋白-(His)_ 6 融合的瑞替普酶的表达、纯化和活性检测(英文) 被引量：5

11

作者 张新元 廖建民 +1 位作者 孙石静 沈子龙 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期374-378,共5页

目的 :构建硫氧还蛋白 (His) 6 瑞替普酶融合表达载体 ,提高瑞替普酶在大肠杆菌中的表达量 ,简化rPA的分离纯化。方法 :将rPA基因克隆于原核表达载体pET32a硫氧还蛋白 (组氨酸 ) 6标签下游 ,在大肠杆菌BL2 1(DE3)中用乳糖进行诱导表... 目的 :构建硫氧还蛋白 (His) 6 瑞替普酶融合表达载体 ,提高瑞替普酶在大肠杆菌中的表达量 ,简化rPA的分离纯化。方法 :将rPA基因克隆于原核表达载体pET32a硫氧还蛋白 (组氨酸 ) 6标签下游 ,在大肠杆菌BL2 1(DE3)中用乳糖进行诱导表达。采用一步稀释法对融合蛋白体外复性后 ,使用Ni2 + 亲和层析柱 ,对包涵体复性液进行初步纯化。采用体外溶圈法对复性后和纯化后的融合蛋白进行生物活性的测定。结果 :得到分子量约为 5 6kDa的融合蛋白 ,表达量达到总蛋白的 30 %以上。比本实验室构建的非融合表达载体表达量提高了约 5 0 %。经过一步Ni2 + 亲和层析 ,融合蛋白纯度达到80 %以上。体外溶圈法实验表明融合蛋白复性后和纯化后具有溶栓活性。结论 :与非融合表达相比 ,融合表达的表达量明显提高。即使N端额外融合一段融合多肽 ,rPA仍然具有生物学活性。 展开更多

关键词 硫氧还蛋白 (组氨酸)6标签 瑞替普酶 融合蛋白 表达 纯化 活性

在线阅读 下载PDF 职称材料

重组人干扰素α-2b工程菌的培养与发酵条件的优化研究 被引量：4

12

作者 姚文兵 许敏 +1 位作者 吴梧桐 沈子龙 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期462-465,共4页

用均匀设计法对重组人干扰素α-2b基因工程菌的摇瓶发酵条件进行了优化，确定摇瓶培养基组成为：每升含蛋白胨10 g、葡萄糖6 g、酵母粉5 g、Na2HPO4　6　g、KH2PO4　2　g、NH4Cl　0.8　g、NaCl　4　g、CaCl2　0.01　g、MgSO4　0.2　g，... 用均匀设计法对重组人干扰素α-2b基因工程菌的摇瓶发酵条件进行了优化，确定摇瓶培养基组成为：每升含蛋白胨10 g、葡萄糖6 g、酵母粉5 g、Na2HPO4　6　g、KH2PO4　2　g、NH4Cl　0.8　g、NaCl　4　g、CaCl2　0.01　g、MgSO4　0.2　g，发酵表达条件为：pH　6.9，温度37℃，IPTG诱导后表达时间为5　h左右，装料量为20%。三批小试结果为：湿菌体平均产率18　g/L，生物活性3.93×108　IU/L。发酵罐三批中试放大试验，湿菌体平均产率为29　g/L，生物活性为6.68×108　IU/L发酵液。 展开更多

关键词 重组人干扰素Α-2B 基因表达 发酵条件 Q784

在线阅读 下载PDF 职称材料

新型降钙素基因工程菌高表达发酵条件的研究 被引量：4

13

作者 张玉彬 王旻 +4 位作者 吴梧桐 陈建华 何南 张兆林 郭长缨 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期152-155,共4页

对新型降钙素基因工程菌 n CT/p GEX-2 T/E.coli BL2 1高表达发酵条件进行了优化研究。研究表明重组工程菌遗传性状稳定 ,采用 LB培养基、1 %接种量 ,当菌体浓度到达 A6 0 0 nm 0 .6时 ,添加诱导剂 IPTG至终浓度为 0 .l mmol/L,37℃培养... 对新型降钙素基因工程菌 n CT/p GEX-2 T/E.coli BL2 1高表达发酵条件进行了优化研究。研究表明重组工程菌遗传性状稳定 ,采用 LB培养基、1 %接种量 ,当菌体浓度到达 A6 0 0 nm 0 .6时 ,添加诱导剂 IPTG至终浓度为 0 .l mmol/L,37℃培养 4 h,可使含新型降钙素的融合蛋白高效表达 ,融合蛋白占菌体总蛋白的 35%。2 0 L发酵罐中采用上述条件发酵培养 ,融合蛋白亦可高效表达 ( 32 % ) ,其菌体密度是摇瓶培养发酵的两倍。Western-blotting试验表明融合蛋白中含有新型降钙素 。 展开更多

关键词 新型降钙素 基因工程菌 发酵条件 融合法

在线阅读 下载PDF 职称材料

螺旋藻多糖抗肿瘤作用的研究 被引量：21

14

作者 高向东 吴梧桐 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期458-461,共4页

小鼠po PSP 0.6 g/kg和1.2 g/kg 9 d对移植肉瘤S180，Heps实体瘤和EC实体瘤具有明显的抑制作用；小鼠ip PSP 0.3 g/kg和0.6 g/kg对移植肉瘤S180，Heps实体瘤也有明显的抑制作用。ip PSP 100 g/kg和150 mg/kg能促进小鼠单核Mφ系统的吞... 小鼠po PSP 0.6 g/kg和1.2 g/kg 9 d对移植肉瘤S180，Heps实体瘤和EC实体瘤具有明显的抑制作用；小鼠ip PSP 0.3 g/kg和0.6 g/kg对移植肉瘤S180，Heps实体瘤也有明显的抑制作用。ip PSP 100 g/kg和150 mg/kg能促进小鼠单核Mφ系统的吞噬功能；促进SRBC致敏小鼠血清溶血素形成；并能显著促进ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞的增殖，最适浓度为40 μg/ml。结果提示PSP对多种肿瘤有抑制作用，并对免疫功能有调节作用。 展开更多

关键词 螺旋藻 多糖 抗肿瘤 免疫功能

在线阅读 下载PDF 职称材料

固定化牛肾氨基酰化酶拆分法制备D-丙氨酸 被引量：7

15

作者 姚文兵 侯振清 +1 位作者 吴梧桐 金建勤 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期297-300,共4页

研究了以中空纤维固定化牛肾氨基酰化酶拆分 DL-Ala制备 D-Ala及反应的各种优化条件和固定化酶的动力学性质。实验结果表明 ,固定化酶反应的最适 p H为 7.0 ,最适反应温度为 3 0～ 3 5℃ ;固定化酶拆分反应的酶量选择为 5mg/ ml,时空体... 研究了以中空纤维固定化牛肾氨基酰化酶拆分 DL-Ala制备 D-Ala及反应的各种优化条件和固定化酶的动力学性质。实验结果表明 ,固定化酶反应的最适 p H为 7.0 ,最适反应温度为 3 0～ 3 5℃ ;固定化酶拆分反应的酶量选择为 5mg/ ml,时空体积 SV=1 .0 ,在 p H 7.0 ,3 0℃条件下的全拆分底物浓度为 0 .1 ml/ L。固定化酶常温 1周内拆分率稳定 ,但对热不稳定 ,4 0℃条件下放置 3 0 min活力下降 3 0 %。 展开更多

关键词 D-丙氨酸 牛肾 氨基酰化酶拆分 固定化

在线阅读 下载PDF 职称材料

重组L-门冬酰胺酶空前体脂质体的研制及其包封率的测定 被引量：16

16

作者 王弘 吴梧桐 顾学裘 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 1999年第4期235-238,共4页

采用乳化挤压冻干三步法完成空前体脂质体的制备.空前体脂质体以L门冬酰胺酶为实验对象,测定了包封率.制得的前体脂质体水合形成的L门冬酰胺酶脂质体形态圆整,粒径在(0.662±0.0792)μm范围内.3批前体脂质体对L门冬酰胺酶的包封率... 采用乳化挤压冻干三步法完成空前体脂质体的制备.空前体脂质体以L门冬酰胺酶为实验对象,测定了包封率.制得的前体脂质体水合形成的L门冬酰胺酶脂质体形态圆整,粒径在(0.662±0.0792)μm范围内.3批前体脂质体对L门冬酰胺酶的包封率分别为(48.2±0.99)%、(51.0±1.21)%、(52.2±1.25)%.3个批号的包封率变异系数(RSD%)均小于3%.结果说明制备的空前体脂质体水合形成的L门冬酰胺酶脂质体粒度适宜,可用于L门冬酰胺酶的包封. 展开更多

关键词 前体脂质体 重组 L-门冬酰胺酶 包封率

在线阅读 下载PDF 职称材料

酶法拆分DL-β-乙酰硫基α-甲基丙酸 被引量：3

17

作者 高向东 顾炎 +2 位作者 姜林海 冷渊 关阳 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期393-396,共4页

研究了胰酶和脂肪酶对DL 加成酸的拆分效果和各种影响因素 ,结果表明 ,脂肪酶Ⅰ的拆分效果优于胰酶和脂肪酶Ⅱ。脂肪酶Ⅰ酶促反应的最优条件为 :底物 4.0 g ,酶用量 1.5 g ,反应时间 12h ,反应体系pH7.0。拆分结果得到D 加成酸。

关键词 乙酰硫基 甲基丙酸 卡托普利 酶法拆分

在线阅读 下载PDF 职称材料

氧化葡萄糖酸杆菌原生质体的形成和再生研究 被引量：3

18

作者 陈建华 盛勤 +2 位作者 冯瑞山 丁敏 吴梧桐 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第12期758-760,共3页

报道氧化葡萄糖酸杆菌原生质体的形成和再生的方法。将最佳生长条件下对数生长后期的培养物以溶菌酶处理,YE培养基上再生原生质体、原生质体形成率约99%,再生率2.93%。

关键词 氧化 葡萄糖酸杆菌 原生质体 维生素C 发醇

在线阅读 下载PDF 职称材料

采用激光微束将绿色荧光蛋白基因导入大肠杆菌 被引量：2

19

作者 李泰明 赵炎生 +3 位作者 王旻 朱曦 牛亚梅 胡容 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期136-138,共3页

将ＮｄＹＡＧ三倍频脉冲激光微束系统用于含有绿色荧光蛋白基因的质粒ｐＳ６５Ｔ的转化，利用激光微束技术在经高渗液处理过的大肠杆菌ＤＨ５α上打孔，将质粒成功导入ＤＨ５α中，通过筛选、检测，证明该方法是一种新的，快速有效的转... 将ＮｄＹＡＧ三倍频脉冲激光微束系统用于含有绿色荧光蛋白基因的质粒ｐＳ６５Ｔ的转化，利用激光微束技术在经高渗液处理过的大肠杆菌ＤＨ５α上打孔，将质粒成功导入ＤＨ５α中，通过筛选、检测，证明该方法是一种新的，快速有效的转化方法。 展开更多

关键词 激光微束 绿色荧光蛋白 大肠杆菌 基因导入

在线阅读 下载PDF 职称材料

聚乙二醇修饰干扰素α2b的分离纯化和制备 被引量：3

20

作者 林碧蓉 姚文兵 +1 位作者 沈子龙 吴梧桐 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期310-312,共3页

目的　建立聚乙二醇修饰干扰素 α2 b的分离纯化方法。方法　运用 Superdex75 Highload制备型凝胶色谱柱 ,以含 0 .1 5 mol/L Na Cl的 0 .0 1 mol/L磷酸盐缓冲液进行洗脱 ,流速为 1 .5 ml/min,检测波长为 2 1 5nm。结果　各洗脱组分经 S... 目的　建立聚乙二醇修饰干扰素 α2 b的分离纯化方法。方法　运用 Superdex75 Highload制备型凝胶色谱柱 ,以含 0 .1 5 mol/L Na Cl的 0 .0 1 mol/L磷酸盐缓冲液进行洗脱 ,流速为 1 .5 ml/min,检测波长为 2 1 5nm。结果　各洗脱组分经 SDS-PAGE检测呈单一条带。聚乙二醇修饰干扰素 α2 b的蛋白回收率为 3 6.5 % ,抗病毒活性回收率为 4 .3 % ,比活度为 4 .74× 1 0 7IU/mg,是原形干扰素 α2 b的 1 0 .4 %。结论　这种方法可以用于制备聚乙二醇修饰干扰素α2 展开更多

关键词 干扰素Α2B 聚乙二醇修饰干扰素α2b 分离 纯化 制备

在线阅读 下载PDF 职称材料