微孔比色法在猪胰腺PLA_2制备中的应用 被引量：5

1

作者 刘猛六 胡卓逸 徐龙川 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第5期570-575,共6页

微孔比色法采用合成的磷脂类似物２－硫代十六酰乙基磷酸胆碱作底物，在多孔聚苯乙烯板的小孔中反应，并用酶联免疫检测器连续测定和记录吸收值．同时应用此法及滴定法检测酶活力，从猪胰腺中制备了一种分子量低（１４．３ｋＤ），对热... 微孔比色法采用合成的磷脂类似物２－硫代十六酰乙基磷酸胆碱作底物，在多孔聚苯乙烯板的小孔中反应，并用酶联免疫检测器连续测定和记录吸收值．同时应用此法及滴定法检测酶活力，从猪胰腺中制备了一种分子量低（１４．３ｋＤ），对热、酸稳定，活性依赖Ｃａ２＋的ＰＬＡ２．两种方法检测结果具有可比性，而微孔比色法同时可测多个样品，有节约样品，灵敏度较高等优点．微孔比色法特别适用于大量的样品测定，如拮抗剂筛选、临床样品及制备酶时层析级分的检测等． 展开更多

关键词 磷脂酶A2 胰腺 微孔比色法 制备

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钙调素拮抗剂的研究动态 被引量：6

2

作者 胡卓逸 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1992年第6期427-431,共5页

从钙、钙调素的功能论及钙桔抗剂和钙调素拮抗剂的概念.并着重叙述了国内外钙调素拮抗剂研究中的问题和开发动态。

关键词 钙调素拮抗剂 调钙蛋白

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双苄基异喹啉类化合物Fs对钙调素拮抗作用的研究 被引量：1

3

作者 戴洁 蔡健 +2 位作者 曾于平 胡卓逸 刘国卿 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期284-287,共4页

采用钙调素（ＣａＭ）依赖性磷酸二酯酶及丹磺酰标记ＣａＭ，研究了双苄基异喹啉类化合物Ｆｓ对ＣａＭ的拮抗作用。实验结果表明，化合物Ｆｓ能抑制ＣａＭ刺激磷酸二酯酶活性，抑制作用可被过量ＣａＭ完全克服，化合物ＦＳ拮抗作用大于... 采用钙调素（ＣａＭ）依赖性磷酸二酯酶及丹磺酰标记ＣａＭ，研究了双苄基异喹啉类化合物Ｆｓ对ＣａＭ的拮抗作用。实验结果表明，化合物Ｆｓ能抑制ＣａＭ刺激磷酸二酯酶活性，抑制作用可被过量ＣａＭ完全克服，化合物ＦＳ拮抗作用大于三氟啦嗪，为强的拮抗剂。化合物Ｆｓ在Ｃａ￣（２＋）存在下，可降低丹磺酰钙调素（ＤＮＳ－ＣａＭ）的荧光强度，滴加ＣａＭ，荧光强度逐渐回升，在ＥＧＴＡ条件下，化合物ＦＳ没有作用。实验结果显示：双苄基异喹啉化合物ＦＳ是钙调素拮抗剂，且作用强于三氟啦嗪。 展开更多

关键词 双苄基异喹啉 化合物 钙调素 磷酸二酯酶 拮抗剂

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苄基异喹啉类化合物 D_(20)抑制钙调素激活磷酸二酯酶的研究 被引量：1

4

作者 张虞安 胡卓逸 +1 位作者 赵烨 蔡惠民 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1993年第1期28-32,共5页

苄基异喹啉化合物是一类钙调素拮抗剂.对新合成的双苄基异喹啉化合物 D_(20)对钙调素依赖的磷酸二酯酶的抑制作用进行了研究,IC_(50)=5μmol/L,表明其拮抗作用大于三氟啦嗪,是强的拮抗剂.荧光分析表明,钙调素与化合物 D_(20)的结合常数... 苄基异喹啉化合物是一类钙调素拮抗剂.对新合成的双苄基异喹啉化合物 D_(20)对钙调素依赖的磷酸二酯酶的抑制作用进行了研究,IC_(50)=5μmol/L,表明其拮抗作用大于三氟啦嗪,是强的拮抗剂.荧光分析表明,钙调素与化合物 D_(20)的结合常数为2.64(μmol/L)^(-1),一个化合物 D_(20)分子与两个钙调素分子结合,并显示了结合方向性及空间位阻影响. 展开更多

关键词 钙调素 磷酸二酯酶 拮抗剂

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平菇钙调素总结合蛋白的制备及性质研究 被引量：1

5

作者 戴洁 贡岳松 胡卓逸 《食用菌》 北大核心 1995年第1期12-13,共2页

钙调素(Calmodulin,CaM)是广泛存在于一切真核细胞中的耐热钙结合蛋白,它的许多功能是通过与CaM结合蛋白的相互作用而实现的。目前CaM结合蛋白是CaM研究的一个活跃领域。一般来说,CaM与CaM结合蛋白的相互作用在有Ca^(2+)较无Ca^(2-)时... 钙调素(Calmodulin,CaM)是广泛存在于一切真核细胞中的耐热钙结合蛋白,它的许多功能是通过与CaM结合蛋白的相互作用而实现的。目前CaM结合蛋白是CaM研究的一个活跃领域。一般来说,CaM与CaM结合蛋白的相互作用在有Ca^(2+)较无Ca^(2-)时有更大的亲和力,往往可以利用CaM-Sepharose 4B柱,在Ca^(2+)存在条件下,让CaM结合蛋白结合上去,在EG- 展开更多

关键词 平菇 钙调素 制备

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平菇钙调素的分离纯化和性质的研究

6

作者 戴洁 贡岳松 胡卓逸 《食用菌》 北大核心 1994年第5期9-10,共2页

钙调素(Calmodulin,CaM)是广泛存在于一切真核生物中的一种多功能调节蛋白,作为细胞内的主要钙离子受体,人们确信它在动物、植物细胞功能活动中起着重要作用,目前有关真菌CaM的研究较少,对真菌CaM性质的系统研究,国内尚无报道。本文从平... 钙调素(Calmodulin,CaM)是广泛存在于一切真核生物中的一种多功能调节蛋白,作为细胞内的主要钙离子受体,人们确信它在动物、植物细胞功能活动中起着重要作用,目前有关真菌CaM的研究较少,对真菌CaM性质的系统研究,国内尚无报道。本文从平菇(Pleurotus ostreatus)中分离纯化得到真菌CaM,并做了有关物理化学特性及其生物活性的研究。 一、材料和方法 (一)供试材料 平菇购自南京蔬菜研究所;苯基琼脂糖Phenyl-sepharose CL 4B为Pharmacia产品;DEAE-Cellulose 32为Whatman产品;Ampholyte为中国科学院上海生化所产品,其余试剂均为分析纯。 (二)试验方法 包括以下五个方面。 1.平菇CaM的分离纯化:平菇加入3倍体积缓冲液A(Buffer A:20mmol/l Tris-HCl,1mmol/l)巯基乙醇,0.5mmol/l PMSF,2retool/l EDAT,pH17.5)匀浆10″×6次,8000g离心30分钟,重复抽提,合并上清,加入30％TCA至终浓度为3％,离心,弃上清,沉淀用缓冲液搅匀透析过夜,再加适量缓冲液A,用1mol/l Tris-base调pH17.5,搅拌30分钟。 展开更多

关键词 平菇 钙调素 分离 提纯

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浒苔多糖的降血脂及其对SOD活力和LPO含量的影响 被引量：97

7

作者 周慧萍 蒋巡天 +1 位作者 王淑如 陈琼华 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第2期161-165,共5页

浒苔多糖剂量１５０ｍｇ／ｋｇ可使高胆固醇血症小鼠血清胆固醇下降２２％，剂量１６８ｍｇ／ｋｇ可使高脂血症大鼠ＴＣＨ和ＴＧ分别降低５８％和６１％，ＨＤＬ升高２７％，剂量２５０ｍｇ／ｋｇ可分别提高血清、脑和肝ＳＯＤ活力３３... 浒苔多糖剂量１５０ｍｇ／ｋｇ可使高胆固醇血症小鼠血清胆固醇下降２２％，剂量１６８ｍｇ／ｋｇ可使高脂血症大鼠ＴＣＨ和ＴＧ分别降低５８％和６１％，ＨＤＬ升高２７％，剂量２５０ｍｇ／ｋｇ可分别提高血清、脑和肝ＳＯＤ活力３３％、１１８％和２２４％，剂量１６８ｍｇ／ｋｇ对高血脂大鼠血清和心脏ＬＰＯ含量降低３５％和４６％。 展开更多

关键词 浒苔 多糖 血脂 超氧化物歧化酶 低密度脂蛋白

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浒苔多糖的分离、纯化和分析 被引量：30

8

作者 周慧萍 朱海燕 陈琼华 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第1期91-94,共4页

浒苔（Ｅｎｔｅｒｏｍｏｒｐｈａｐｒｏｌｉｆｅｒａ）经热水提取，Ｓｅｖａｇｅ法除去蛋白质，用乙醇沉淀，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱层析，得浒苔多糖（简称ＥＰ）精制品。经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱层析鉴定为单一对称性洗... 浒苔（Ｅｎｔｅｒｏｍｏｒｐｈａｐｒｏｌｉｆｅｒａ）经热水提取，Ｓｅｖａｇｅ法除去蛋白质，用乙醇沉淀，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱层析，得浒苔多糖（简称ＥＰ）精制品。经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱层析鉴定为单一对称性洗脱峰。红外光谱分析具有多糖特征吸收峰，紫外光谱分析未见有核酸和蛋白质的特征吸收峰。总糖含量为８８．８％，其中糖醛酸含量为３３．６％。单糖组成为Ｌ－阿拉伯糖、Ｌ－岩藻糖、Ｄ－甘露糖、Ｄ－半乳糖及Ｄ－葡萄糖，平均分子量为２５０００。 展开更多

关键词 浒苔 多糖 分离 分析 提纯

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九里香多糖和蛋白多糖的分离、纯化和分析 被引量：18

9

作者 刘京丽 王淑如 陈琼华 《生物化学杂志》 CSCD 1989年第1期33-38,共6页

九里香(Murraya Paniculata L.Jack)皮部经热水提取、乙醇沉淀、SephadexG—100柱层析分离、磷酸氢钙吸附、酸溶,再通过Sephadex G-200柱层析纯化,得到灰白色粉末状九里香蛋白多糖。总糖含量为52.1％(其中葡萄糖醛酸含量为10.9％),蛋白... 九里香(Murraya Paniculata L.Jack)皮部经热水提取、乙醇沉淀、SephadexG—100柱层析分离、磷酸氢钙吸附、酸溶,再通过Sephadex G-200柱层析纯化,得到灰白色粉末状九里香蛋白多糖。总糖含量为52.1％(其中葡萄糖醛酸含量为10.9％),蛋白质含量为20.0％。九里香蛋白多糖去蛋白后,即得九里香多糖,总糖含量为88.2％(其中葡萄糖醛酸含量为20.0％),经纸层析和聚丙烯酰胺凝胶园盘电泳鉴定为单一斑点和单一区带。平均分子量约为1.7×10^(-5)。组成单糖的摩尔比为葡萄糖:露甘糖:木糖:阿拉伯糖:岩藻糖:葡萄糖醛酸=1.0:0.40:0.16:0.17:0.20:0.48. 展开更多

关键词 九里香 多糖 蛋白多糖

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波叶大黄多糖对胰腺五种酶的抑制作用 被引量：5

10

作者 姚文兵 唐朝晖 陈琼华 《生物化学杂志》 CSCD 1991年第5期530-534,共5页

本文报道波叶大黄多糖(Rheum hotaoense polysaccharide,RHP)对胰腺五种酶的抑制作用。结果表明。(1)RHP对胰蛋白酶、胰脂肪酶、胰淀粉酶、胰弹性蛋白酶和胰激肽释放酶均有很明显的抑制作用。IC_(50)分别为250μg/mL、21μg/mL、18μg/m... 本文报道波叶大黄多糖(Rheum hotaoense polysaccharide,RHP)对胰腺五种酶的抑制作用。结果表明。(1)RHP对胰蛋白酶、胰脂肪酶、胰淀粉酶、胰弹性蛋白酶和胰激肽释放酶均有很明显的抑制作用。IC_(50)分别为250μg/mL、21μg/mL、18μg/mL,189μg/mL和300μg/mL。(2)动力学研究表明,RHP对胰蛋白酶和胰脂肪酶的抑制均是非竞争性的,Km值分别为1.2×10^(-4)μmol/mL和1.2mg/mL,Ki值分别为355.0μg/mL和63.85μg/mL。(3)牛血清白蛋白(BSA)对RHP抑制胰蛋白晦和胰脂肪酶具有拮抗作用。当BSA浓度达72.0mg/mL时,对胰蛋白酶活性的恢复率为71.54％。当BSA浓度达20.0mg/mL时,对胰脂肪酶活性的恢复率为63.64％。上述结果表明,RHP对胰腺五种酶的抑制作用,可能是大黄治疗急性胰腺炎作用的生化机制之一,预示RHP在临床上将有重要应用前景。 展开更多

关键词 波叶大黄 多糖 胰酶 胰腺炎

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茶叶多糖心血管系统的部分药理作用 被引量：18

11

作者 王丁刚 王淑如 《茶叶》 1991年第2期4-5,共2页

茶叶多糖(TLP)具下列药理作用。(1)降血压及减慢心率作用:TLP22.5 mg/kg 十二指肠给药,30min 后可使麻醉大鼠血压下降 28mmHg,心率减慢15%。(2)耐缺氧作用:TLP ip 50 mg/kg 和 100mg/kg,正常小鼠在常压下存活时间分别延长59%和66%;并用... 茶叶多糖(TLP)具下列药理作用。(1)降血压及减慢心率作用:TLP22.5 mg/kg 十二指肠给药,30min 后可使麻醉大鼠血压下降 28mmHg,心率减慢15%。(2)耐缺氧作用:TLP ip 50 mg/kg 和 100mg/kg,正常小鼠在常压下存活时间分别延长59%和66%;并用异丙肾上腺素的小鼠存活时间分别延长31%和29%。(3)增加冠状动脉流量:心脏插管侧支注入1mg/ml TLP 0.4 ml,可增加离体豚鼠心脏冠脉流量37%。 展开更多

关键词 茶叶 茶叶多糖 降血压 耐缺氧

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酪氨酸蛋白激酶的分离、鉴定及基本特性 被引量：1

12

作者 姚文兵 胡卓逸 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1989年第5期351-353,358,共4页

自1979年发现动物细胞内存在有能使酪氨酸磷酸化的蛋白激酶以来,对酪氨酸蛋白激酶的研究工作有了很大进展,特别是发现癌细胞的增殖与酪氨酸蛋白激酶有关。本文对该蛋白激酶的分离.鉴定及基本特性作一综述。

关键词 酷氨酸 蛋白激酶 分离

全文增补中

磷脂酶A2的活力测定与临床初步应用 被引量：1

13

作者 张文辉 李晓军 +2 位作者 武建国 刘猛六 胡卓逸 《医学研究生学报》 CAS 1995年第3期82-83,共2页

磷脂酶Ａ２（ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＡ２，ＰＬＡ２）是能催化和水解膜磷脂的磷脂酶中的一种，几乎存在于所有的细胞中，在血清、胰液、精浆、唾液、滑膜液中都可测得。酶蛋白由１２５个氨基酸的单一多肽链组成，分子量１２０００... 磷脂酶Ａ２（ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＡ２，ＰＬＡ２）是能催化和水解膜磷脂的磷脂酶中的一种，几乎存在于所有的细胞中，在血清、胰液、精浆、唾液、滑膜液中都可测得。酶蛋白由１２５个氨基酸的单一多肽链组成，分子量１２０００～１５０００，等电点是９．２，最适... 展开更多

关键词 磷脂酶A2 急性胰腺炎 不育症

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人生长激素释放因子基因的高效表达

14

作者 陈正兰 刘景晶 +1 位作者 胡卓逸 丁敏 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期466-470,共5页

将人生长激素释放因子 ( h GRF)基因和编码 L-天门冬酰胺酶 ( L- ans B) C-末端 12 6个氨基酸残基的基因片断进行融合表达 ,融合蛋白在菌体总蛋白中的比率达到 30 %左右 ,比和 L- ans B全基因融合表达时高得多 ,表达条件优化后 ,比率可... 将人生长激素释放因子 ( h GRF)基因和编码 L-天门冬酰胺酶 ( L- ans B) C-末端 12 6个氨基酸残基的基因片断进行融合表达 ,融合蛋白在菌体总蛋白中的比率达到 30 %左右 ,比和 L- ans B全基因融合表达时高得多 ,表达条件优化后 ,比率可增加到 4 5%。融合蛋白以不溶性的包含体形式存在。包含体的尿素抽提液经乙醇分级沉淀后得到较纯的融合蛋白 ,60 mmol/ L的盐酸水解融合蛋白 ,通过 SDS- PAGE和电喷雾质谱分析 ,融合蛋白释放出一分子量为 52 35.59Da的物质 ,而 GRF的分子量是 52 35.4 8Da,也就是说融合蛋白酸水解释放出了 展开更多

关键词 生长激素 释放因子 天门冬酰胺酶 hGRF 融合表达

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平菇子实体钙调素的分离纯化及其与猪脑钙调素的生物活性比较

15

作者 孔令魁 胡卓逸 《生物化学杂志》 CSCD 1993年第2期173-177,共5页

平菇萃取液经酸性沉淀、热变性、Phenyl-Sepharose CL-4B疏水亲和层析和DEAE-Cellulose 52离子交換层析分冉出了电泳纯的真菌钙调素。在比较钙调素对磷酸二酯酶活化的能力和ELISA实验的免疫亲和力对发现,平菇钙调素与猪脑钙调素的生物... 平菇萃取液经酸性沉淀、热变性、Phenyl-Sepharose CL-4B疏水亲和层析和DEAE-Cellulose 52离子交換层析分冉出了电泳纯的真菌钙调素。在比较钙调素对磷酸二酯酶活化的能力和ELISA实验的免疫亲和力对发现,平菇钙调素与猪脑钙调素的生物活性有较大差异,提示在钙调素定量测定中有必要考虑到标准钙调素与样品钙调素之间的同源性差异。 展开更多

关键词 平菇 钙调素 生物活性 分离 提纯

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