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多细胞生物自噬的分子机制和生理功能 被引量:10
1
作者 张宏 张慧 《安徽大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2018年第5期105-114,共10页
细胞自噬是真核生物的一种高度保守的由溶酶体介导的降解过程.自噬将胞内物质包裹在双层膜的自噬小体内,运送到溶酶体进行降解再利用以维持细胞的稳态平衡.经过半个多世纪的研究,特别是研究自噬的遗传模型的建立,人们对自噬的分子机制... 细胞自噬是真核生物的一种高度保守的由溶酶体介导的降解过程.自噬将胞内物质包裹在双层膜的自噬小体内,运送到溶酶体进行降解再利用以维持细胞的稳态平衡.经过半个多世纪的研究,特别是研究自噬的遗传模型的建立,人们对自噬的分子机制和调控机理已经有了较为深入的了解.目前已经发现了20多个自噬相关基因(ATG基因和EPG基因)参与自噬小体的形成和成熟过程.多种信号通路,如氨基酸缺失、激素刺激等都参与自噬活性的调控.自噬参与生命过程的多个方面,自噬异常与多种人类疾病的发生发展密切相关,如神经退行性疾病、糖尿病、肿瘤等.多细胞生物自噬的分子机制和调控机理的研究对预防和治疗相关疾病有重要意义,并为研发药物提供理论依据和新的靶点. 展开更多
关键词 细胞自噬 选择性自噬 蛋白质降解 神经退行性疾病 线虫
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细胞内的大分子拥挤环境 被引量:9
2
作者 李剑 王志珍 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第6期788-792,共5页
所有的细胞中都存在着大量的蛋白质、核酸、多糖等各种生物大分子 ,它们大约占用细胞容积的 2 0 %~30 % ,总浓度高达 80~ 2 0 0 g/L ,因此任何一种大分子都处于一个充满其他大分子的拥挤环境中 .对源于排斥容积效应的拥挤理论分析表... 所有的细胞中都存在着大量的蛋白质、核酸、多糖等各种生物大分子 ,它们大约占用细胞容积的 2 0 %~30 % ,总浓度高达 80~ 2 0 0 g/L ,因此任何一种大分子都处于一个充满其他大分子的拥挤环境中 .对源于排斥容积效应的拥挤理论分析表明它对所有大分子之间的反应在热力学和动力学上都有很大的影响 .可是以往人们在体外研究生物大分子的性质和相互作用时几乎都忽略了这样一个细胞大分子拥挤的实际环境 .最近几年建议把大分子拥挤与 pH、离子强度和溶液组成等一样作为常规因素来研究生物大分子的呼声很高 。 展开更多
关键词 细胞 大分子拥挤环境 排斥容积效应 蛋白质折叠 拥挤试剂
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生物膜结构研究的一些进展 被引量:26
3
作者 杨福愉 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第4期495-502,共8页
膜蛋白三维结构的解析存在很多困难 .最近几年由于一些通道 (如K+ 通道 ,Cl-通道 ,水通道Aquaporin 1等 )和泵 (如Ca2 + 泵 )的结晶获得成功 ,这些膜蛋白具有原子分辨率三维结构的解析才得以完成 ,从而基本阐明一些极性分子和离子选择... 膜蛋白三维结构的解析存在很多困难 .最近几年由于一些通道 (如K+ 通道 ,Cl-通道 ,水通道Aquaporin 1等 )和泵 (如Ca2 + 泵 )的结晶获得成功 ,这些膜蛋白具有原子分辨率三维结构的解析才得以完成 ,从而基本阐明一些极性分子和离子选择性通过生物膜的分子机理 .在膜脂结构方面 ,动物细胞质膜膜脂的分布是不均匀的 .近年来已多方面证明 ,质膜具有一些被命名为“脂筏 (lipidrafts)”和“质膜微囊 (Caveolae)”的微区 .它们富含鞘脂和胆固醇。简单介绍了这些脂质微区的大小、组分以及动态变化 .根据研究结果 ,这类脂质微区含有大量信号分子 ,很可能具有信号传递中心的作用 .此外 。 展开更多
关键词 生物膜 膜蛋白 三维结构 脂筏 质膜微囊
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生物膜膜蛋白三维结构研究的现状与展望 被引量:3
4
作者 杨福愉 张旭家 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第6期569-575,共7页
关键词 生物膜 膜蛋白 三维结构
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玉米花粉低分子量ATP酶部分性质研究
5
作者 王建华 吴英杰 吴显荣 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第4期409-412,共4页
对纯化的玉米花粉低分子量ATP酶-38kD蛋白的部分理化及药理学性质进行了研究。该酶与植物细胞中现已发现的马达蛋白(动蛋白及dynamin)存在较大差异。紫外吸收光谱在278nm处有最大吸收。圆二色谱分析表明该蛋白呈... 对纯化的玉米花粉低分子量ATP酶-38kD蛋白的部分理化及药理学性质进行了研究。该酶与植物细胞中现已发现的马达蛋白(动蛋白及dynamin)存在较大差异。紫外吸收光谱在278nm处有最大吸收。圆二色谱分析表明该蛋白呈现典型球蛋白特征。最适pH为8.0,对ATP的Km为8×10-4mol/L,Vmax为3.5μmolPi每min每mg蛋白质。对NTP底物专一性为CTP>ATP≥GTP>ITP>UTP,药理学研究表明:该酶对0.1mmol/LNa3VO4、2.4mmol/LNaF及0.1mmol/LNEM均非常敏感。 展开更多
关键词 玉米 花粉 腺苷三磷酸酶 性质
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幽门螺旋杆菌肿瘤坏死因子α诱导蛋白活性分子的构建、结晶及初步晶体学研究 被引量:2
6
作者 高明明 张英 王大成 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1215-1219,共5页
幽门螺旋杆菌中的肿瘤坏死因子α诱导蛋白(Tipα)被鉴定为幽门螺旋杆菌致病感染中的新型致癌因子.Tipα通过NF-κB的激活诱导肿瘤坏死因子α(TNF-α)的大量表达,从而促使宿主的炎症反应以及肿瘤发生、发展的进程.Tipα的同源二聚体为其... 幽门螺旋杆菌中的肿瘤坏死因子α诱导蛋白(Tipα)被鉴定为幽门螺旋杆菌致病感染中的新型致癌因子.Tipα通过NF-κB的激活诱导肿瘤坏死因子α(TNF-α)的大量表达,从而促使宿主的炎症反应以及肿瘤发生、发展的进程.Tipα的同源二聚体为其发挥生物学功能的活性形式,此二聚体以两个单体间N端半胱氨酸形成的二硫键(Cys25-Cys25与Cys27-Cys27)共价连接.Tipα(25-192)的基因克隆至载体pET22b中,并且在大肠杆菌菌株BL21(DE3)中以可溶形式高水平表达.重组蛋白经过Ni2+金属亲和层析、阳离子交换层析和凝胶阻滞层析进行分离纯化.Tipα蛋白样品分别通过悬滴和microbatch的方法进行结晶搜索和优化.母体和硒代晶体分别衍射到2.2和2.6,均属于C2空间群,并且具有相似的晶胞参数.母体晶体的晶胞参数为a=127.01,b=47.57,c=96.5,α=γ=90°,β=127.5°. 展开更多
关键词 结晶 纯化 肿瘤坏死因子α诱导蛋白 致癌因子 幽门螺旋杆菌
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蛋白质生物合成的第四步:翻译终止后复合物的解体 被引量:1
7
作者 郭鹏 张立强 静国忠 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第6期483-489,共7页
蛋白质合成过程一般被归纳为由合成的起始、肽链的延伸和合成的终止组成的三步曲.然而,随着对核糖体再循环因子(ribosomerecyclingfactor,RRF)在蛋白质合成过程中作用的深入研究,人们提出了蛋白质生物合成应是四步曲,这第四步就是翻译... 蛋白质合成过程一般被归纳为由合成的起始、肽链的延伸和合成的终止组成的三步曲.然而,随着对核糖体再循环因子(ribosomerecyclingfactor,RRF)在蛋白质合成过程中作用的深入研究,人们提出了蛋白质生物合成应是四步曲,这第四步就是翻译终止后核糖体复合物的解体,也就是通常说的核糖体循环再利用.简要地介绍了翻译终止后复合物解体的可能机制:核糖体再循环因子和蛋白质合成延伸因子G在核糖体上协同作用催化这一过程的完成. 展开更多
关键词 翻译终止后核糖体复合物的解体 核糖体再循环因子 延伸因子G
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合成生物学与荧光成像技术 被引量:2
8
作者 武伟红 李炜 +1 位作者 张先恩 崔宗强 《合成生物学》 CSCD 2022年第2期369-384,共16页
合成生物学的迅速发展为分子荧光标记与生物成像技术提供了新的机遇。基于合成生物学原理,可以建立材料生物合成新方法,开发性能优异的荧光纳米材料和探针,发展新的荧光成像技术。合成生物学应用于生物荧光成像,多涉及荧光材料与探针的... 合成生物学的迅速发展为分子荧光标记与生物成像技术提供了新的机遇。基于合成生物学原理,可以建立材料生物合成新方法,开发性能优异的荧光纳米材料和探针,发展新的荧光成像技术。合成生物学应用于生物荧光成像,多涉及荧光材料与探针的设计合成、对生物靶标分子进行定点改造和修饰、荧光探针和靶标分子的可控时空耦合等以实现生物分子的精准特异性标记。这些荧光纳米材料和生物分子标记技术可应用于细胞内分子的荧光标记、成像和动态示踪,可视化解析相关的关键分子事件,从而深入揭示细胞内分子运动机制和病原致病机理等。本文主要综述了近年来合成生物学技术在生物荧光成像方面的应用,包括利用合成生物学技术合成量子点等荧光纳米材料与探针、对蛋白质和核酸分子的精准标记及其用于病毒荧光成像和示踪。最后,也对该领域面临的问题如荧光杂合生物材料可控合成、分子原位多重标记等进行了探讨和展望。合成生物学与荧光成像技术的交叉融合,将推动荧光成像技术发展和进步,并拓展合成生物学的研究领域。 展开更多
关键词 合成生物学 生物探针 分子标记 荧光成像 病毒示踪
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冷冻电镜技术在分子植物学研究中的应用 被引量:1
9
作者 殷国良 孙文浩 +1 位作者 庞效云 孙飞 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期15-32,共18页
植物体的各项生理活动依赖于分子水平上多种植物蛋白质/蛋白质复合体的相互作用和动态变化,了解这些蛋白质/蛋白质复合体的结构和功能对于研究相关植物生理活动的分子机理至关重要。得益于最近的技术进步——包括直接电子探测器的发展... 植物体的各项生理活动依赖于分子水平上多种植物蛋白质/蛋白质复合体的相互作用和动态变化,了解这些蛋白质/蛋白质复合体的结构和功能对于研究相关植物生理活动的分子机理至关重要。得益于最近的技术进步——包括直接电子探测器的发展和先进的图像处理算法,冷冻电镜技术已经逐步发展成为研究蛋白质/蛋白质复合体的重要技术手段,这也为深入理解植物生理活动分子机理提供了结构生物学研究利器。目前,冷冻电镜技术在分子植物学研究领域的应用仍处于早期,对于一些重要蛋白质复合体的结构功能研究还不够深入。本文在对冷冻电镜技术发展历史进行简要回顾的基础上,对近年来人们利用冷冻电镜技术在植物光合作用、胁迫响应等方面进行的分子机理研究进行了梳理,旨在为加强分子植物学和冷冻电镜技术两个研究领域的合作提供有益参考。 展开更多
关键词 冷冻电镜 分子植物学 光合作用 胁迫响应
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纳米合成生物学:融合创新的新维度
10
作者 李峰 张先恩 《合成生物学》 CSCD 2022年第2期253-255,共3页
1959年,量子物理学家理查德·费曼在加州理工学院发表了一次历史性的演讲[1]。他提出了一个问题:“为什么我们不能把24卷《大英百科全书》全部写在一个针尖上?”要实现这一目标,必须将书写工具的尺寸缩小25000倍,而这在当时是不可... 1959年,量子物理学家理查德·费曼在加州理工学院发表了一次历史性的演讲[1]。他提出了一个问题:“为什么我们不能把24卷《大英百科全书》全部写在一个针尖上?”要实现这一目标,必须将书写工具的尺寸缩小25000倍,而这在当时是不可能做到的。然后费曼转向了生物系统:“它可以非常小,许多细胞非常微小,但它们非常活跃;它们制造各种物质,在非常微小的尺度上做着各种神奇的事情”。 展开更多
关键词 加州理工学院 书写工具 融合创新 生物学 新维度
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纳米级光学超分辨成像技术研究及展望
11
作者 潘天颖 谷陆生 纪伟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第10期2519-2531,共13页
荧光显微成像技术能够将细胞生理活动可视化,是现代生命科学研究的重要手段。超分辨成像技术的出现将研究推进到亚细胞结构层次,而具有纳米级分辨率的单分子定位成像技术成为了研究细胞器、大分子复合物空间分布及相互作用的有力工具。... 荧光显微成像技术能够将细胞生理活动可视化,是现代生命科学研究的重要手段。超分辨成像技术的出现将研究推进到亚细胞结构层次,而具有纳米级分辨率的单分子定位成像技术成为了研究细胞器、大分子复合物空间分布及相互作用的有力工具。继2014年超分辨成像技术获得诺贝尔化学奖后,《自然》(Nature)发布的2024年值得关注的七大技术中再次将纳米级分辨率光学成像技术作为热点进行介绍,超高分辨率成像技术是重要的前沿研究领域。本文首先简要介绍了荧光显微成像技术的发展历史、荧光显微镜的基础概念、超分辨成像技术的基本概况,之后着重介绍了单分子超分辨成像技术的研究进展,并在最后对该技术的发展及应用做了展望。 展开更多
关键词 超分辨成像技术 单分子定位成像技术 多色成像 三维成像 纳米级成像技术
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量子点标记天花粉蛋白的研究 被引量:29
12
作者 张春阳 马辉 +4 位作者 丁尧 金雷 陈瓞延 苗琦 聂书明 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2001年第1期34-37,共4页
将半导体量子点应用于标记天花粉蛋白 ,研究了量子点标记天花粉蛋白的吸收光谱、荧光光谱和酶活性变化 .与游离的 QDs相比 ,QDs-TCS的吸收光谱在 4 0 0~ 60 0 nm范围内不发生明显变化 ;QDs-TCS的发射光谱发生蓝移 ,但发射半宽不变 ;标... 将半导体量子点应用于标记天花粉蛋白 ,研究了量子点标记天花粉蛋白的吸收光谱、荧光光谱和酶活性变化 .与游离的 QDs相比 ,QDs-TCS的吸收光谱在 4 0 0~ 60 0 nm范围内不发生明显变化 ;QDs-TCS的发射光谱发生蓝移 ,但发射半宽不变 ;标记上 QDs后 TCS的酶活性没有发生改变 .利用双光子激发扫描荧光显微镜和激光共聚焦显微镜同时观察 QDs-TCS在人绒癌细胞内的分布发现 ,QDs-TCS能够跨膜进入细胞 ,并在细胞核周围呈聚集分布 . 展开更多
关键词 天花粉蛋白 酶活性 半导体量子点 标记 中药研究 生物荧光探针
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DNA错配修复蛋白MutS和MutL的相互作用研究(英文) 被引量:7
13
作者 毕利军 张先恩 +1 位作者 周亚凤 张治平 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1178-1184,共7页
MutL和MutS是DNA错配修复系统中起关键作用的修复蛋白.利用基因融合技术高效表达了MutL和MutS融合蛋白,并利用它们发展了一种研究二者相互作用的简便方法.融合蛋白MutL-GFP(Trx-His6-GFP-(Ser-Gly)6-MutL),MutL-StreptagⅡ(Trx-His6-(Se... MutL和MutS是DNA错配修复系统中起关键作用的修复蛋白.利用基因融合技术高效表达了MutL和MutS融合蛋白,并利用它们发展了一种研究二者相互作用的简便方法.融合蛋白MutL-GFP(Trx-His6-GFP-(Ser-Gly)6-MutL),MutL-StreptagⅡ(Trx-His6-(Ser-Gly)6-StreptagⅡ-(Ser-Gly)6-MutL)和MutS(Trx-His6-(Ser-Gly)6-MutS)被构建并在大肠杆菌中高效表达.收集菌体细胞、超声波破碎后离心取上清进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,结果表明有与预期分子质量相应的诱导表达条带出现,其表达量约占全细胞蛋白的30%且以可溶形式存在.利用固定化金属离子配体亲和层析柱分别纯化融合蛋白,其纯度达到90%.通过将MutS蛋白固定的方法研究两种MutL融合蛋白分别与MutS之间的相互作用.结果表明:只有MutS蛋白与含有错配碱基DNA分子结合后才与MutL蛋白发生相互作用.通过检测MutL融合蛋白标记的绿色荧光信号或酶学显色信号来鉴定相互作用的发生.建立的融合分子系统方法也为研究其他的蛋白质或生物大分子之间的相互作用提供了一个技术平台. 展开更多
关键词 融合蛋白 绿色荧光蛋白 Strep tagⅡ MUTS MUTL 相互作用
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胡杨液泡膜H^+-ATPase的部分纯化及其耐盐性研究 被引量:7
14
作者 马挺军 李卓 +1 位作者 张旭家 王沙生 《西北植物学报》 CAS CSCD 2004年第7期1246-1249,共4页
为了阐明液泡膜H+-ATPase在盐胁迫下的作用和适应性机制,对悬浮培养的胡杨细胞在50mmol/L盐浓度下处理10d,结果表明液泡膜H+-ATPase、焦磷酸酶的水解活性、质子泵活性增加。将通过差速离心和不连续蔗糖密度梯度离心富积的液泡膜微囊先... 为了阐明液泡膜H+-ATPase在盐胁迫下的作用和适应性机制,对悬浮培养的胡杨细胞在50mmol/L盐浓度下处理10d,结果表明液泡膜H+-ATPase、焦磷酸酶的水解活性、质子泵活性增加。将通过差速离心和不连续蔗糖密度梯度离心富积的液泡膜微囊先由脱氧胆酸钠(DOC)和n-辛基-β-D-葡萄糖(OG)分步破膜抽提,经蔗糖密度梯度离心分离,部分纯化的酶含V型H+-ATPase的主要亚基。 展开更多
关键词 胡杨 H^+-ATPASE 亚基组成
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磷酸丙糖异构酶的折叠及稳定性研究 被引量:4
15
作者 刘江红 石毅 周筠梅 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第5期465-472,共8页
从鸡胸肌中纯化出磷酸丙糖异构酶(triosephosphateisomerase,TIM),通过蛋白质内源荧光,圆二色性,紫外吸收二阶导数光谱等多种研究溶液构象的方法,对TIM被盐酸胍和热变性过程进行了详细的研究.结果表明,用不同测量方法得到TIM的变性过程... 从鸡胸肌中纯化出磷酸丙糖异构酶(triosephosphateisomerase,TIM),通过蛋白质内源荧光,圆二色性,紫外吸收二阶导数光谱等多种研究溶液构象的方法,对TIM被盐酸胍和热变性过程进行了详细的研究.结果表明,用不同测量方法得到TIM的变性过程均高度协同,没有观察到折叠中间态,应用单分子二态去折叠模型计算了TIM去折叠的热力学参数.通过圆二色光谱在222nm处的变化监测的TIM热变性过程也是高度协同的二态过程,天然态TIM的表观Tm为64.6℃.在低浓度盐酸胍存在下,TIM的热稳定性降低.讨论了二体蛋白质的可能去折叠机制,证明在使用的实验条件下磷酸丙糖异构酶去折叠过程中二级结构与三级结构的变化是同时发生的,其去折叠遵循观察不到二体解离的表观二态过程. 展开更多
关键词 磷酸丙糖异构酶 变性 构象变化 折叠中间态 二态模型
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阿诺碱受体及其亚型2调控因子研究进展 被引量:3
16
作者 李玉明 姬广聚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2011年第5期408-417,共10页
阿诺碱受体(RyR)是心肌细胞等可兴奋细胞中重要的Ca2+释放受体,在维持细胞的兴奋性和生理功能方面起重要作用.研究发现,RyR存在3个亚型,每个亚型都是由4个单体组成的四聚体,后者构成Ca2+释放通道.RyR的结构中有调控因子的结合位点,一些... 阿诺碱受体(RyR)是心肌细胞等可兴奋细胞中重要的Ca2+释放受体,在维持细胞的兴奋性和生理功能方面起重要作用.研究发现,RyR存在3个亚型,每个亚型都是由4个单体组成的四聚体,后者构成Ca2+释放通道.RyR的结构中有调控因子的结合位点,一些内源性调控因子可影响RyR的构型和Ca2+释放.结合作者的研究,就RyR的结构功能、RyR2的一些重要内源性调控因子及其调控机制做一简要综述. 展开更多
关键词 阿诺碱受体 环腺苷二磷酸核糖 FK506结合蛋白 烟碱酸腺嘌呤二核苷酸 钙释放
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微囊蛋白基因及其与疾病关系研究进展 被引量:3
17
作者 梁旭方 黄芬 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第3期375-378,共4页
微囊蛋白 (caveolin)基因家族已鉴定出 3个成员 :微囊蛋白 1、微囊蛋白 2、微囊蛋白 3 ,并被定位于抑癌基因位点区域 .微囊蛋白 1是细胞质膜微囊的标记蛋白 ,其中间疏水区域在细胞膜内形成发夹结构 ,并使其N端区域与C端区域在细胞膜内... 微囊蛋白 (caveolin)基因家族已鉴定出 3个成员 :微囊蛋白 1、微囊蛋白 2、微囊蛋白 3 ,并被定位于抑癌基因位点区域 .微囊蛋白 1是细胞质膜微囊的标记蛋白 ,其中间疏水区域在细胞膜内形成发夹结构 ,并使其N端区域与C端区域在细胞膜内表面聚合形成支架结构 .微囊蛋白 1与微囊蛋白 2以组成异源寡聚体的形式存在 ,在脂肪细胞、内皮细胞和成纤维细胞中表达最丰富 ,微囊蛋白 3则特异表达于肌肉 .离体与活体研究结果均表明微囊蛋白 1可能具有抑癌功能 ,并可能在细胞信号传导中起刹车作用 .微囊蛋白 1基因敲除小鼠心血管NO与Ca2 +信号途径受损、功能异常 ,肺泡上皮细胞出现异常扩增 ,脂质代谢失衡 ,身体消瘦 .微囊蛋白 2基因敲除小鼠肺功能与耐力均严重受损 ,与微囊蛋白 1基因敲除小鼠的表型非常相似 .微囊蛋白 3为维持心脏正常功能所必需 。 展开更多
关键词 微囊蛋白基因 疾病 信号转导 生物膜 细胞质膜微囊
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腾冲嗜酸热两面菌伴侣素ATcpnβ底物结合特性研究 被引量:1
18
作者 王丽 张凯 +2 位作者 樊峥 董志扬 孙飞 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2011年第2期151-158,共8页
嗜酸嗜热古菌腾冲嗜酸热两面菌(Acidianus tengchongensis)来源的Ⅱ型伴侣素ATcpnβ已获得晶体结构解析,其顶端结构域突触下端相应于Ⅰ型伴侣素GroEL的重要底物结合位点处的氨基酸多为极性氨基酸,将其突变为疏水性氨基酸时,突变体对变... 嗜酸嗜热古菌腾冲嗜酸热两面菌(Acidianus tengchongensis)来源的Ⅱ型伴侣素ATcpnβ已获得晶体结构解析,其顶端结构域突触下端相应于Ⅰ型伴侣素GroEL的重要底物结合位点处的氨基酸多为极性氨基酸,将其突变为疏水性氨基酸时,突变体对变性底物的捕获能力显著增强.表面等离子共振研究表明,ATcpnβ对于化学变性底物的再折叠中间体的其捕获作用不依赖于Mg2+/ATP.前期对该伴侣素冷冻电镜观察和结构解析表明,ATP的存在并不能驱动ATcpnβ从开放构型向闭合构型转变,但是表面等离子共振研究表明,ATcpnβ对热变性过程中已经聚集的底物的捕获作用依赖于Mg2+/ATP,说明Mg2+/ATP可以介导ATcpnβ顶端结构域一定的构象变化,引起顶端结构域疏水残基的进一步暴露,从而能够与大分子聚集体紧密结合.两个方面的研究均表明,伴侣素蛋白与变性底物的结合仍然以疏水相互作用为主,并且伴侣素蛋白与变性底物的结合受Mg2+/ATP的结合调控,与伴侣素蛋白疏水面的暴露程度相关. 展开更多
关键词 嗜酸嗜热古菌 伴侣素(chaperonin) 蛋白质折叠 表面等离子共振
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江浙蝮蛇毒溶血毒素晶体培养及初步晶体学研究 被引量:2
19
作者 赵克浩 宋时英 +2 位作者 孟五一 林政炯 周元聪 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第5期566-569,共4页
从江浙蝮蛇中分离纯化的碱性磷脂酶A2在pH9.5,0.05mmol/LCHES缓冲液中,用汽相悬滴扩散的方法,获得了适用于高分辨率X射线结构分析的单晶.经X200B面探测器分析,表明该晶体属于正交晶系,P2I2I2I... 从江浙蝮蛇中分离纯化的碱性磷脂酶A2在pH9.5,0.05mmol/LCHES缓冲液中,用汽相悬滴扩散的方法,获得了适用于高分辨率X射线结构分析的单晶.经X200B面探测器分析,表明该晶体属于正交晶系,P2I2I2I空间群,晶胞参数为a=97.13,b=103.69,c=23.27.并收集了一套衍射数据,独立衍射点数12001个,数据完整度为86.2%,Rmerge为0.0459.最高分辨率达2.0,根据分子量与晶胞体积估算,一个不对称单位含两个分子. 展开更多
关键词 江浙蝮蛇 碱性磷脂酶A2 蛇毒 溶血毒素 晶体
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鼻咽癌NAP1(18~44)融合表达载体的构建、表达纯化及初步研究 被引量:1
20
作者 罗权 邓志威 王金凤 《北京师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期538-542,共5页
通过PCR扩增及定点突变等构建了pET-DsbA/NAP1(18- 44)融合表达载体,将其转化入大肠杆菌BL21后获得可溶表达.通过镍亲和柱,Thrombin酶切及G50分子筛对鼻咽癌NAP1(18- 44)进行了纯化并进行了质谱鉴定.NAP1(18- 44)的圆二色谱和2D1H... 通过PCR扩增及定点突变等构建了pET-DsbA/NAP1(18- 44)融合表达载体,将其转化入大肠杆菌BL21后获得可溶表达.通过镍亲和柱,Thrombin酶切及G50分子筛对鼻咽癌NAP1(18- 44)进行了纯化并进行了质谱鉴定.NAP1(18- 44)的圆二色谱和2D1HNMR DQF-COSY谱表明鼻咽癌肽段在TFE溶液中能形成一定的α螺旋.这些工作为进一步用核磁共振技术研究NAP1(18- 44)打下了基础. 展开更多
关键词 鼻咽癌 NAP1 融合表达 NMR
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