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肺腺癌A_(549)/DDP细胞周期变化及其多药耐药性 被引量:4
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作者 梁兴杰 黄振华 +2 位作者 路艳蒙 李玉梅 黄有国 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第6期616-620,共5页
用Fura 2 /AM标记药物敏感的肺腺癌细胞A54 9和抗顺铂药物的肺腺癌细胞A54 9/DDP两种细胞胞内游离Ca2 +,用碘化丙锭 (PI)标记细胞DNA ,检测其胞内Ca2 +的变化及两种细胞增殖能力和细胞周期 .实验结果表明 ,抗药性细胞株A54 9/DDP胞浆内... 用Fura 2 /AM标记药物敏感的肺腺癌细胞A54 9和抗顺铂药物的肺腺癌细胞A54 9/DDP两种细胞胞内游离Ca2 +,用碘化丙锭 (PI)标记细胞DNA ,检测其胞内Ca2 +的变化及两种细胞增殖能力和细胞周期 .实验结果表明 ,抗药性细胞株A54 9/DDP胞浆内游离Ca2 +的浓度仅为药物敏感细胞株A54 9的 1/ 3左右 ,同时前者的细胞增殖能力较后者明显增强 ,而且细胞周期也明显缩短 .当用BAPTA AM和EGTA或A2 3187和Thapsigargin处理细胞以降低或升高其胞内自由Ca2 +浓度时可改变细胞的生长周期 ,二者也呈现明显差别 .这些结果表明 ,对顺铂产生耐药性的人肺腺癌A54 9/DDP细胞胞内Ca2 +浓度的降低 ,可能影响细胞的增殖 ,缩短细胞的生长周期 ,特别是影响起决定作用的G1期 。 展开更多
关键词 多药耐药性 细胞周期 肺腺癌细胞A549
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A549/DDP细胞的抗凋亡特性与其pH_i和[Ca^(2+)]_i变化相关 被引量:4
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作者 黄振华 黄有国 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第5期722-727,共6页
以临床用药剂量 (30 μmol/L)的顺铂处理敏感的人肺腺癌细胞A5 49和抗顺铂的A5 49/DDP细胞 ,在相同条件下培养 .对培养不同时间的两株细胞DNA琼脂糖凝胶电泳分析的结果表明 ,前者在培养 12h后即呈现DNA梯子 ,而后者在培养 48h后却未见... 以临床用药剂量 (30 μmol/L)的顺铂处理敏感的人肺腺癌细胞A5 49和抗顺铂的A5 49/DDP细胞 ,在相同条件下培养 .对培养不同时间的两株细胞DNA琼脂糖凝胶电泳分析的结果表明 ,前者在培养 12h后即呈现DNA梯子 ,而后者在培养 48h后却未见凋亡特征 .用流式细胞计检测其凋亡峰也获得相似的结果 .当测定与凋亡相关的生物化学和生物物理变化时发现对顺铂敏感的A5 49细胞的线粒体膜电势显著降低 ,胞内更加酸化且胞内钙离子浓度升高 ;而抗顺铂药物的A5 49/DDP细胞的线粒体膜电势和pH值却维持在相对较高的水平 ,而其胞内钙离子浓度随培养时间的延长下降 .这些结果表明 ,抗顺铂的人肺腺癌A5 49/DDP细胞的抗凋亡特性与其胞内的相对碱化和较高的线粒体膜电势 ,以及胞内钙离子浓度的降低相关 .这些特性可能参与了A5 展开更多
关键词 肺腺癌A549细胞 细胞凋亡 PH [CA^2+]I 线粒体膜电势 耐药性 抗凋亡 顺铂
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鸭肝脂肪酸合成酶的NADPH底物抑制及作用动力学 被引量:14
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作者 田维熙 蒋若帆 +2 位作者 吴海斌 史艳红 王一煌 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第4期413-419,共7页
己知动物脂肪酸合成酶的底物乙酰辅酶A和丙二酰辅酶A具有竞争性双底物抑制的乒乓机制。实验发现鸭肝脂肪酸合成酶的第三个底物NADPH也具有底物抑制,并研究了它的规律及与NADPH有关的稳态动力学。发现对于该酶的全反应,增... 己知动物脂肪酸合成酶的底物乙酰辅酶A和丙二酰辅酶A具有竞争性双底物抑制的乒乓机制。实验发现鸭肝脂肪酸合成酶的第三个底物NADPH也具有底物抑制,并研究了它的规律及与NADPH有关的稳态动力学。发现对于该酶的全反应,增加丙二酰辅酶A浓度,降低环境盐浓度,均使NADPH底物抑制减少。但以NADPH作底物的酮酰还原和烯酰还原二步单独反应以及包含四步单独反应的乙酰乙酰辅酶A还原反应都无NADPH底物抑制现象。NADPH底物抑制对丙二酰辅酶A为竞争性,丙二酰辅酶A底物抑制对NADPH为非竞争性。在全反应中NADPH和丙二酰辅酶A之间发现为乒乓机制,在乙酰乙酰辅酶A还原反应中,两个底物NADPH和乙酰乙酰辅酶A之间则表现为序列反应机制。降低环境盐浓度使NADPH和丙二酰辅酶A之间的乒乓机制向序列机制转化。在全反应中,NADP产物抑制相对NADP为竞争性,对丙二酰辅酶A为非竞争性。 展开更多
关键词 酶动力学 脂肪酸合成酶 NADPH
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神经节苷脂GM_3对肌质网Ca^(2+)-ATP酶活力的调节 被引量:1
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作者 王丽华 崔肇春 +1 位作者 屠亚平 杨福愉 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第3期308-312,共5页
研究了神经节苷脂GM_3参入肌质网膜后Ca^(2+)-ATP酶活力的变化,结果表明:GM_3参入肌质网膜后,对肌质网Ca^(2+)ATP酶活性(ATP水解活力与转运活力)有明显的激活作用.当参入的GM_3浓度为8μmol... 研究了神经节苷脂GM_3参入肌质网膜后Ca^(2+)-ATP酶活力的变化,结果表明:GM_3参入肌质网膜后,对肌质网Ca^(2+)ATP酶活性(ATP水解活力与转运活力)有明显的激活作用.当参入的GM_3浓度为8μmol/L、参入时间为120min、温度为30℃时,对Ca^(2+)-ATP酶的激活作用最大. 展开更多
关键词 神经节苷脂GM3 肌质肉 腺苷三磷酸酶
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克山病病区粮喂养大鼠后心肌细胞自由钙浓度变化与硒的作用
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作者 聂玉生 李力 +2 位作者 刘晓丹 林治焕 杨福愉 《生物化学杂志》 CSCD 1992年第4期452-456,共5页
为了解克山病的发病机理,本文研究了低硒对心肌细胞钙转运的影响。用克山病病区粮喂养的大白鼠与用非病区粮喂养的大白鼠相比,心肌细胞胞浆自由钙的浓度高,心肌细胞膜流动性及Na^+,K^+-ATP酶活性也高,在病区粮中添加适量的硒,上述指标... 为了解克山病的发病机理,本文研究了低硒对心肌细胞钙转运的影响。用克山病病区粮喂养的大白鼠与用非病区粮喂养的大白鼠相比,心肌细胞胞浆自由钙的浓度高,心肌细胞膜流动性及Na^+,K^+-ATP酶活性也高,在病区粮中添加适量的硒,上述指标与用非病区粮喂养的大白鼠的差距缩小,说明低硒是引起心肌细胞钙转运失常从而使细胞浆自由钙浓度升高的重要因素但不是唯一的因素,文中讨论了细胞浆自由钙浓度与细胞膜流动性、Na^+,K^+-ATP酶活性及心肌线粒体功能的关系,以及低硒对它们的影响。 展开更多
关键词 克山病 心肌细胞
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GM1对肌质网Ca^(2+)-ATPase活性及膜流动性的影响 被引量:3
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作者 王玉苓 崔肇春 杨福愉 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第5期820-823,共4页
外源性GM1对肌质网Ca2+-ATPase的水解及转运活性都有明显的抑制作用.在GM1浓度为0~8nmol/mg蛋白质范围内抑制作用具有浓度依赖性.当GM1浓度达到8nmol/mg蛋白质时,酶活性受到最大抑制,此时水解活性降低51%,转运活性降低49%.荧光偏振测... 外源性GM1对肌质网Ca2+-ATPase的水解及转运活性都有明显的抑制作用.在GM1浓度为0~8nmol/mg蛋白质范围内抑制作用具有浓度依赖性.当GM1浓度达到8nmol/mg蛋白质时,酶活性受到最大抑制,此时水解活性降低51%,转运活性降低49%.荧光偏振测定结果表明:GM1参入后,肌质网膜流动性降低. 展开更多
关键词 神经节苷脂 肌质网膜 质膜 ATPASE 膜流动性
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酵母乙醇脱氢酶胍变性时的失活与去折叠的比较研究 被引量:1
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作者 汤震宇 何飚 周海梦 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第2期122-126,共5页
应用荧光发射光谱,圆二色光谱,二阶导数光谱和紫外差吸收光谱等监测手段,研究了酵母乙醇脱氢酶在胍溶液中的去折叠。比较不同盐酸胍浓度下酵母乙醇脱氢酶的失活与构象变化,实验表明酶的失活先于构象变化:在低浓度胍溶液中,构象尚... 应用荧光发射光谱,圆二色光谱,二阶导数光谱和紫外差吸收光谱等监测手段,研究了酵母乙醇脱氢酶在胍溶液中的去折叠。比较不同盐酸胍浓度下酵母乙醇脱氢酶的失活与构象变化,实验表明酶的失活先于构象变化:在低浓度胍溶液中,构象尚未发生明显变化时,酶活几乎已经完全丧失。由上述结果可见,含有辅基金属离子Zn^(2+)酶的活性部位较酶分子的整体结构也具有柔性。 展开更多
关键词 酵母乙醇脱氢酶 胍变性 失活 构象 YADH
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