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人干扰素α2b-胸腺肽α1融合基因在家蚕细胞中的表达和活性研究
被引量:
4
1
作者
郭冬生
朱成钢
+1 位作者
张耀洲
吴祥甫
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2003年第5期803-807,共5页
根据细胞因子协同作用的特点,采用重组DNA技术构建了人干扰素(IFN)α2b 胸腺肽(THY)α1融合基因,克隆到pBacPAK8上,获得重组转移载体pBacPAK IFN THY.与线形化Bm BacPAK6病毒基因组DNA共转染家蚕细胞,经过体内重组,筛选到重组病毒Bm Bac...
根据细胞因子协同作用的特点,采用重组DNA技术构建了人干扰素(IFN)α2b 胸腺肽(THY)α1融合基因,克隆到pBacPAK8上,获得重组转移载体pBacPAK IFN THY.与线形化Bm BacPAK6病毒基因组DNA共转染家蚕细胞,经过体内重组,筛选到重组病毒Bm BacPAK IFN THY.将Bm BacPAK IFN THY感染家蚕细胞进行表达.DNA印迹证明IFN THY已插入Bm BacPAK6中(4kb左右的杂交带);SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳、蛋白质印迹证明IFN THY在家蚕细胞中得到了表达(分子质量为 2 3ku左右),且具有IFN蛋白的免疫原性;微量细胞病变抑制法和玫瑰花结法显示 96h的表达产物IFN活性为 3 72× 10 4U/ml,12 0h表达产物IFN活性为 3 10× 10 5U/ml,4 8~ 72h表达产物IFN活性较低;4 8~ 12 0h表达产物的玫瑰花结形成率均在 10 %以上.结果表明融合基因在家蚕细胞中得到了高效表达,表达的融合蛋白具有IFN α2b和THY
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关键词
人干扰素α2b-胸腺肽α1融合基因
家蚕细胞
活性
家蚕核型多角体病毒
基因表达
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职称材料
睾酮对血管平滑肌细胞中雄激素受体mRNA表达的调控
被引量:
12
2
作者
马瑞
吴赛珠
+1 位作者
林其谁
江时森
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第3期298-300,共3页
目的观察睾酮对雄性大鼠血管平滑肌细胞中雄激素受体mRNA表达的自身调控作用.方法贴块法培养雄性 SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs),Northern印迹分析法检测细胞中雄激素受体mRNA水平;采用细胞计3H]-胸腺嘧啶掺入法观察调控过程中...
目的观察睾酮对雄性大鼠血管平滑肌细胞中雄激素受体mRNA表达的自身调控作用.方法贴块法培养雄性 SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs),Northern印迹分析法检测细胞中雄激素受体mRNA水平;采用细胞计3H]-胸腺嘧啶掺入法观察调控过程中细胞数量和DNA合成变化情况.结果0~4 μmol/L睾酮与静止的VSMCs作用24 h,细胞内ARmRNA表达水平呈剂量相关性增加;生理水平睾酮(40nmol/L)与静止的VSMCs作用不同时间(0~24 h),细胞内ARmRNA表达水平在24 h时方有显著增加;实验过程中细胞数量及DNA合成速率均无明显改变.结论血管平滑肌细胞中存在睾酮对雄激素受体mRNA表达的自身上调作用,调控过程中细胞活力保持稳定.提示 VSMCs中睾酮对AR表达的调控作用部分需要转录水平的参与.
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关键词
雄激素类
睾酮
受体
雄激素
平滑肌
血管
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职称材料
题名
人干扰素α2b-胸腺肽α1融合基因在家蚕细胞中的表达和活性研究
被引量:
4
1
作者
郭冬生
朱成钢
张耀洲
吴祥甫
机构
浙江大学生命
科学院
生物
化学
研究所
中国科学院生物化学和细胞生物学研究所
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2003年第5期803-807,共5页
文摘
根据细胞因子协同作用的特点,采用重组DNA技术构建了人干扰素(IFN)α2b 胸腺肽(THY)α1融合基因,克隆到pBacPAK8上,获得重组转移载体pBacPAK IFN THY.与线形化Bm BacPAK6病毒基因组DNA共转染家蚕细胞,经过体内重组,筛选到重组病毒Bm BacPAK IFN THY.将Bm BacPAK IFN THY感染家蚕细胞进行表达.DNA印迹证明IFN THY已插入Bm BacPAK6中(4kb左右的杂交带);SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳、蛋白质印迹证明IFN THY在家蚕细胞中得到了表达(分子质量为 2 3ku左右),且具有IFN蛋白的免疫原性;微量细胞病变抑制法和玫瑰花结法显示 96h的表达产物IFN活性为 3 72× 10 4U/ml,12 0h表达产物IFN活性为 3 10× 10 5U/ml,4 8~ 72h表达产物IFN活性较低;4 8~ 12 0h表达产物的玫瑰花结形成率均在 10 %以上.结果表明融合基因在家蚕细胞中得到了高效表达,表达的融合蛋白具有IFN α2b和THY
关键词
人干扰素α2b-胸腺肽α1融合基因
家蚕细胞
活性
家蚕核型多角体病毒
基因表达
Keywords
IFNα 2b-THYα 1 fused gene, Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus, BmN cells, gene expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
Q511 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
睾酮对血管平滑肌细胞中雄激素受体mRNA表达的调控
被引量:
12
2
作者
马瑞
吴赛珠
林其谁
江时森
机构
南京军区总医院心血管内科
南方医科大学南方医院心血管内科
中国科学院生物化学和细胞生物学研究所
出处
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第3期298-300,共3页
基金
"973"国家重点基础研究发展规划项目(G200057008)~~
文摘
目的观察睾酮对雄性大鼠血管平滑肌细胞中雄激素受体mRNA表达的自身调控作用.方法贴块法培养雄性 SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs),Northern印迹分析法检测细胞中雄激素受体mRNA水平;采用细胞计3H]-胸腺嘧啶掺入法观察调控过程中细胞数量和DNA合成变化情况.结果0~4 μmol/L睾酮与静止的VSMCs作用24 h,细胞内ARmRNA表达水平呈剂量相关性增加;生理水平睾酮(40nmol/L)与静止的VSMCs作用不同时间(0~24 h),细胞内ARmRNA表达水平在24 h时方有显著增加;实验过程中细胞数量及DNA合成速率均无明显改变.结论血管平滑肌细胞中存在睾酮对雄激素受体mRNA表达的自身上调作用,调控过程中细胞活力保持稳定.提示 VSMCs中睾酮对AR表达的调控作用部分需要转录水平的参与.
关键词
雄激素类
睾酮
受体
雄激素
平滑肌
血管
Keywords
androgens
testosterone
receptors, androgen
muscle, smooth, vascular
分类号
R33 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人干扰素α2b-胸腺肽α1融合基因在家蚕细胞中的表达和活性研究
郭冬生
朱成钢
张耀洲
吴祥甫
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2003
4
在线阅读
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职称材料
2
睾酮对血管平滑肌细胞中雄激素受体mRNA表达的调控
马瑞
吴赛珠
林其谁
江时森
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2005
12
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已选择
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引证文献
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