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人干扰素α2b-胸腺肽α1融合基因在家蚕细胞中的表达和活性研究 被引量:4
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作者 郭冬生 朱成钢 +1 位作者 张耀洲 吴祥甫 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第5期803-807,共5页
根据细胞因子协同作用的特点,采用重组DNA技术构建了人干扰素(IFN)α2b 胸腺肽(THY)α1融合基因,克隆到pBacPAK8上,获得重组转移载体pBacPAK IFN THY.与线形化Bm BacPAK6病毒基因组DNA共转染家蚕细胞,经过体内重组,筛选到重组病毒Bm Bac... 根据细胞因子协同作用的特点,采用重组DNA技术构建了人干扰素(IFN)α2b 胸腺肽(THY)α1融合基因,克隆到pBacPAK8上,获得重组转移载体pBacPAK IFN THY.与线形化Bm BacPAK6病毒基因组DNA共转染家蚕细胞,经过体内重组,筛选到重组病毒Bm BacPAK IFN THY.将Bm BacPAK IFN THY感染家蚕细胞进行表达.DNA印迹证明IFN THY已插入Bm BacPAK6中(4kb左右的杂交带);SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳、蛋白质印迹证明IFN THY在家蚕细胞中得到了表达(分子质量为 2 3ku左右),且具有IFN蛋白的免疫原性;微量细胞病变抑制法和玫瑰花结法显示 96h的表达产物IFN活性为 3 72× 10 4U/ml,12 0h表达产物IFN活性为 3 10× 10 5U/ml,4 8~ 72h表达产物IFN活性较低;4 8~ 12 0h表达产物的玫瑰花结形成率均在 10 %以上.结果表明融合基因在家蚕细胞中得到了高效表达,表达的融合蛋白具有IFN α2b和THY 展开更多
关键词 人干扰素α2b-胸腺肽α1融合基因 家蚕细胞 活性 家蚕核型多角体病毒 基因表达
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睾酮对血管平滑肌细胞中雄激素受体mRNA表达的调控 被引量:12
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作者 马瑞 吴赛珠 +1 位作者 林其谁 江时森 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第3期298-300,共3页
目的观察睾酮对雄性大鼠血管平滑肌细胞中雄激素受体mRNA表达的自身调控作用.方法贴块法培养雄性 SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs),Northern印迹分析法检测细胞中雄激素受体mRNA水平;采用细胞计3H]-胸腺嘧啶掺入法观察调控过程中... 目的观察睾酮对雄性大鼠血管平滑肌细胞中雄激素受体mRNA表达的自身调控作用.方法贴块法培养雄性 SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs),Northern印迹分析法检测细胞中雄激素受体mRNA水平;采用细胞计3H]-胸腺嘧啶掺入法观察调控过程中细胞数量和DNA合成变化情况.结果0~4 μmol/L睾酮与静止的VSMCs作用24 h,细胞内ARmRNA表达水平呈剂量相关性增加;生理水平睾酮(40nmol/L)与静止的VSMCs作用不同时间(0~24 h),细胞内ARmRNA表达水平在24 h时方有显著增加;实验过程中细胞数量及DNA合成速率均无明显改变.结论血管平滑肌细胞中存在睾酮对雄激素受体mRNA表达的自身上调作用,调控过程中细胞活力保持稳定.提示 VSMCs中睾酮对AR表达的调控作用部分需要转录水平的参与. 展开更多
关键词 雄激素类 睾酮 受体 雄激素 平滑肌 血管
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