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中药有效部位复方奇士乐体外抗HIV-1活性研究 被引量:7
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作者 杨柳萌 王睿睿 +3 位作者 张高红 张兴杰 陈纪军 郑永唐 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期566-571,共6页
目的评价有效部位复方奇士乐(QSL)的体外抗HIV-1药效学。方法通过合胞体抑制、HIV-1感染细胞保护、HIV-1 p24抗原测定等方法检测急性感染中QSL对HIV-1实验株、临床分离株、耐药株的抑制作用和对慢性感染细胞中病毒复制的影响;通过ELISA... 目的评价有效部位复方奇士乐(QSL)的体外抗HIV-1药效学。方法通过合胞体抑制、HIV-1感染细胞保护、HIV-1 p24抗原测定等方法检测急性感染中QSL对HIV-1实验株、临床分离株、耐药株的抑制作用和对慢性感染细胞中病毒复制的影响;通过ELISA方法和荧光法分别检测了QSL体外抑制HIV-1逆转录酶和蛋白酶活性作用。结果有效部位复方制剂QSL能有效地抑制HIV-1ⅢB诱导淋巴细胞病变、保护HIV-1ⅢB感染MT-4细胞死亡、阻断HIV-1ⅢB慢性感染H9细胞与C8166细胞间融合的作用。QSL对HIV-1实验株HIV-1ⅢB、临床分离株HIV-1KM018、耐药株HIV-174V的病毒复制也有较好的抑制作用。QSL抑制HIV活性的作用机制可能为多靶点,主要是抑制HIV逆转录酶、蛋白酶和病毒进入细胞。结论 QSL是具有较好体外抗HIV-1活性的中药有效部位复方。 展开更多
关键词 中药 有效部分 复方 奇士乐 艾滋病 HIV-1 抗HIV-1
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VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc假病毒筛选抗HIV-1药物的条件优化及应用 被引量:4
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作者 王萍 陈欢 +3 位作者 罗荣华 卿晨 张高红 郑永唐 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期433-438,共6页
目的建立并优化VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc假病毒筛选抗HIV药物药效模型。方法参照Promega公司的荧光素酶活性分析系统,比较VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc对4种不同细胞的感染力。通过采用3种不同实验条件对不同类型HIV-1上市药物进行活性评价,进... 目的建立并优化VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc假病毒筛选抗HIV药物药效模型。方法参照Promega公司的荧光素酶活性分析系统,比较VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc对4种不同细胞的感染力。通过采用3种不同实验条件对不同类型HIV-1上市药物进行活性评价,进一步验证了该模型的可行性与有效性。最后,应用该系统对特定靶点化合物进行筛选,并与HIV-1_(ⅢB)病毒筛选体系所得结果进行比较。结果 VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc对CRFK细胞的感染力最强,报告基因的表达水平与加入的病毒量呈剂量依赖关系。比较3种实验条件下不同阳性药物抑制VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc的半数有效剂量浓度EC50,发现第3种条件最优。而用该假病毒对合成化合物进行筛选,发现其EC50与病毒HIV-1_(ⅢB)所得EC_(50)基本一致。结论成功建立并优化了基于VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc假病毒的抗HIV药物筛选系统。 展开更多
关键词 VSVG/HIV-1NL4-3Luc HIV 药物筛选 阳性药物 优化 应用
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HIV潜伏感染激活剂研究进展 被引量:6
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作者 吴润东 刘光明 庞伟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期1-6,共6页
艾滋病是由HIV病毒感染引起的一种死亡率较高的获得性免疫缺陷综合症,虽然高效抗逆转录病毒疗法(HAART)能够将血浆内病毒载量降至不可检测水平,但病毒并不能被彻底清除,主要原因是HIV感染后会通过在某些细胞内形成潜伏病毒存在于病毒库... 艾滋病是由HIV病毒感染引起的一种死亡率较高的获得性免疫缺陷综合症,虽然高效抗逆转录病毒疗法(HAART)能够将血浆内病毒载量降至不可检测水平,但病毒并不能被彻底清除,主要原因是HIV感染后会通过在某些细胞内形成潜伏病毒存在于病毒库中,在停用HAART后潜伏病毒将大量复制。目前研究普遍认为HIV潜伏库是根除HIV感染的主要障碍,随之发展出的一种清除潜伏病毒的新策略为:使用HIV潜伏激活剂诱导潜伏病毒复制及其基因表达,然后通过HAART或自身免疫系统将激活的病毒及其宿主细胞杀灭。因此,寻找高效、安全、可行性高的激活剂成为清除潜伏病毒的关键。迄今为止,HIV潜伏感染激活剂有多种,分别作用于HIV转录的不同阶段并各有优缺点。该文将对潜伏感染的机制及其激活剂的最新研究进展做一介绍。 展开更多
关键词 HIV 潜伏感染 激活剂 病毒库 去乙酰化 正转录 延伸因子b 蛋白激酶C
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HIV-1整合酶抑制剂体外筛选方法研究进展 被引量:4
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作者 张旋 杨柳萌 郑永唐 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期14-17,共4页
整合酶是HIV基因表达和复制所必需的酶,而且宿主细胞内不存在该酶的类似物。因此,HIV-1整合酶已成为设计、筛选抗HIV药物的理想靶点。迄今为止,Raltegravir仍是唯一上市的HIV整合酶抑制剂,而且临床上也已经出现耐药问题。研发新一代整... 整合酶是HIV基因表达和复制所必需的酶,而且宿主细胞内不存在该酶的类似物。因此,HIV-1整合酶已成为设计、筛选抗HIV药物的理想靶点。迄今为止,Raltegravir仍是唯一上市的HIV整合酶抑制剂,而且临床上也已经出现耐药问题。研发新一代整合酶抑制剂非常必要。高通量、高灵敏度、简单易行的筛选方法是研究开发新一代HIV-1整合酶抑制剂的关键。目前,HIV-1整合酶抑制剂筛选方法有多种,各有优缺点,该文将对文献报道的整合酶抑制剂体外筛选方法的最新进展做一介绍。 展开更多
关键词 HIV 整合酶抑制剂 酶联免疫吸附 时间分辨荧光法 ALPHASCREEN 荧光共振能量转移 表面等离子共振 实时荧光定量PCR 虚拟筛选
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HIV-1整合酶3′端加工抑制剂筛选方法的建立与优化 被引量:1
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作者 陆翠林 张旋 +2 位作者 詹金彪 杨柳萌 郑永唐 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1469-1473,共5页
目的建立与优化HIV-1整合酶3'端加工抑制剂筛选方法。方法利用荧光共振能量转移原理建立筛选方法,用DNaseⅠ切割底物DNA确定底物检测波长,在该检测波长下,对缓冲液成分、底物浓度、酶浓度、金属离子浓度等影响整合酶活性的条件进行... 目的建立与优化HIV-1整合酶3'端加工抑制剂筛选方法。方法利用荧光共振能量转移原理建立筛选方法,用DNaseⅠ切割底物DNA确定底物检测波长,在该检测波长下,对缓冲液成分、底物浓度、酶浓度、金属离子浓度等影响整合酶活性的条件进行优化,并用阳性药物雷特格韦和杨梅黄素进行方法验证。结果检测波长为495 nm/525 nm,使用缓冲液1、底物浓度500 nmol·L-1,整合酶浓度1μmol·L-1,镁离子浓度20 mmol·L-1时整合酶3'端加工活性最强。在此反应条件下雷特格韦和杨梅黄素能有效地抑制整合酶3'端加工活性。用所建立的方法筛选到2个有较强抑制整合酶3'端加工活性的抑制剂。结论该文成功建立并优化了HIV-1整合酶3'端加工抑制剂筛选方法。 展开更多
关键词 HIV-1 整合酶 3′端加工 荧光共振能量转移 影响因素 优化 抑制剂
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骨骼肌细胞中UBXD8的敲除及其对脂质代谢的影响
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作者 邹飞 刁志清 +4 位作者 张红超 徐式孟 刘平生 梁斌 魏璇 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2015年第10期926-934,共9页
UBXD8是能与p97/VCP相互作用共同参与内质网相关的泛素化后蛋白质降解过程的膜蛋白.新近的脂滴蛋白质组学研究表明UBXD8能够定位到脂滴上,同时有研究表明UBXD8调控甘油三酯的代谢.但是UBXD8调控甘油三酯代谢的分子机制并不清楚.因此我... UBXD8是能与p97/VCP相互作用共同参与内质网相关的泛素化后蛋白质降解过程的膜蛋白.新近的脂滴蛋白质组学研究表明UBXD8能够定位到脂滴上,同时有研究表明UBXD8调控甘油三酯的代谢.但是UBXD8调控甘油三酯代谢的分子机制并不清楚.因此我们采用改良的CRISPR/Cas9技术敲除小鼠成骨骼肌细胞C2C12中的UBXD8.从筛选出来的26个可能的UBXD8敲除单克隆细胞系中鉴定获得了2个确切的UBXD8敲除单克隆细胞系.研究表明,敲除UBXD8没有显著改变脂滴上蛋白质的分布,但敲除UBXD8增加了细胞内中性脂的累积.同时敲除UBXD8可缓解棕榈酸引起的胰岛素抵抗和抵抗棕榈酸引起的细胞凋亡.当在敲除UBXD8的细胞中重新过表达UBXD8后,细胞再次出现了棕榈酸引起的胰岛素抵抗及细胞凋亡.这些数据表明UBXD8在细胞脂质代谢及其异常所引起的胰岛素信号和细胞凋亡中起着十分重要的作用. 展开更多
关键词 UBXD8 脂滴 CRISPR/Cas9 脂质代谢
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美国FDA关于抗HIV药物的临床前药效学评价标准
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作者 陈欢 王睿睿 郑永唐 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1352-1355,共4页
药物治疗是目前唯一有效治疗艾滋病的手段,而我国至今尚无自主知识产权的抗HIV药物上市,药物研发的任务紧迫且艰巨。药物的临床前药效学评价对后续的临床实验具有重要的指导意义。该文以Etravirine为例,介绍和讨论FDA抗HIV药物的临床前... 药物治疗是目前唯一有效治疗艾滋病的手段,而我国至今尚无自主知识产权的抗HIV药物上市,药物研发的任务紧迫且艰巨。药物的临床前药效学评价对后续的临床实验具有重要的指导意义。该文以Etravirine为例,介绍和讨论FDA抗HIV药物的临床前药效学评价指导原则,分析了抗HIV药物临床前药效学研究部分的实验要点和重点,希望为完善符合我国国情的抗HIV药物临床前研究标准提出参考。 展开更多
关键词 FDA 指导原则 抗HIV药物 临床前 药效学 ETRAVIRINE
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性激素对天然免疫的调节改变女性生殖道HIV-1易感性 被引量:1
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作者 张明旭 郑永唐(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期969-972,976,共5页
性传播已经成为HIV-1传播的主要途径。HIV-1性传播过程中,女性作为易感群体,在HIV-1感染者中占据越来越高的比例,中低收入国家中女性感染者占到了52%的比例,而在HIV-1盛行的撒哈拉以南非洲,这一比例甚至达到了57%。
关键词 性传播 中低收入国家 免疫成分 免疫微环境 易感群体 窗口期 Female 间接调节 共受体 黏膜免疫系统
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