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致力于研究酶与核酸相互作用的科学家——王恩多院士 被引量:1
1
作者 周小龙 薛美芹 《食品与药品》 CAS 2011年第11期447-448,共2页
王恩多院士,女,生物化学与分子生物学家。1944年出生于四川重庆,原籍山东诸城。1969、1981年两次研究生毕业于中国科学院上海生物化学研究所。1984-1987年获美国国立卫生研究院Fogarty国际奖研金并访问美国加州大学戴维斯分校。1992、1... 王恩多院士,女,生物化学与分子生物学家。1944年出生于四川重庆,原籍山东诸城。1969、1981年两次研究生毕业于中国科学院上海生物化学研究所。1984-1987年获美国国立卫生研究院Fogarty国际奖研金并访问美国加州大学戴维斯分校。1992、1994、1998年3次赴法国国立科研中心分子与细胞生物学研究所合作研究。 展开更多
关键词 相互作用 院士 科学家 美国国立卫生研究院 化学研究所 核酸 美国加州大学 中国科学院
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p38MAPK抑制剂增强阿霉素抑制乳腺癌细胞增殖的体外研究 被引量:6
2
作者 蒋宇翔 陈栋 +4 位作者 王玮 李贵发 Fuqua SAW 崔玉昆 赵辅昆 《浙江理工大学学报(自然科学版)》 2010年第1期130-133,共4页
以乳腺癌细胞株MCF-7为研究对象,经阿霉素及阿霉素联合p38MAPK抑制剂(SB20580)作用细胞,通过MTT法测定细胞存活率、光学显微镜观察细胞形态变化。实验数据显示相同药物浓度下,SB20580可以明显降低MCF-7细胞存活率。结果表明p38MAPK抑制... 以乳腺癌细胞株MCF-7为研究对象,经阿霉素及阿霉素联合p38MAPK抑制剂(SB20580)作用细胞,通过MTT法测定细胞存活率、光学显微镜观察细胞形态变化。实验数据显示相同药物浓度下,SB20580可以明显降低MCF-7细胞存活率。结果表明p38MAPK抑制剂可以促进阿霉素抑制细胞增殖的效果。 展开更多
关键词 乳腺癌 阿霉素 P38MAPK 增殖抑制
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Hsp27高表达和低表达乳腺癌细胞的比较蛋白质组学研究 被引量:2
3
作者 陈栋 蒋宇翔 +5 位作者 王玮 李贵发 谷明波 丁明 崔玉昆 赵辅昆 《浙江理工大学学报(自然科学版)》 2009年第5期770-775,共6页
以Hsp27高表达的乳腺癌细胞株MCF-7为亲本,分别通过导入靶向Hsp27的shRNA敲减载体和对照空载体的方法,构建了Hsp27敲减细胞株和相应对照细胞株。然后对对照细胞株与Hsp27敲减细胞株3B2进行了比较蛋白质组学研究,结果发现在双向凝胶电泳... 以Hsp27高表达的乳腺癌细胞株MCF-7为亲本,分别通过导入靶向Hsp27的shRNA敲减载体和对照空载体的方法,构建了Hsp27敲减细胞株和相应对照细胞株。然后对对照细胞株与Hsp27敲减细胞株3B2进行了比较蛋白质组学研究,结果发现在双向凝胶电泳的差异蛋白质表达谱上,共有7个明显差异蛋白点,经过MALDI-TOF-TOF质谱分析和数据库搜索,共鉴定出了4个差异蛋白点,它们分别是Hsp27和另外2种差异表达的蛋白OVCA2和PYRG2。本实验构建了Hsp27敲减的稳定细胞模型并为进一步了解Hsp27的生物学功能提供了新的线索。 展开更多
关键词 乳腺癌 热休克蛋白27 RNA干扰 双向凝胶电泳 质谱
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真核细胞蛋白质翻译起始研究进展 被引量:2
4
作者 周培 杨力 +3 位作者 陈佳 李伯良 赵学明 张耀洲 《浙江工程学院学报》 2004年第4期312-315,共4页
在大量有关机制的研究基础上,针对真核蛋白质翻译起始,提出了核糖体沿mRNA滑动识别翻译起始位点的机制和核糖体从mRNA内部识别翻译起始位点的机制。
关键词 蛋白质翻译 真核细胞 研究进展 核蛋白质 核糖体 RNA 机制 起始 研究基础
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多吡啶钌(Ⅱ)配合物的合成及其与RNA相互作用的光谱学研究 被引量:13
5
作者 徐宏 邓洪 +4 位作者 胡红雨 刘建忠 巢晖 刘杰 计亮年 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2003年第1期25-27,共3页
A new ruthenium polypyridine complex, [Ru(phen) 2(pMIP)] 2+(phen=1,10-phenanthroline, pMIP=2-(4-methylphenyl)imidazo phenanthroline), was synthesized and characterized by elementary analysis, MS and 1H NMR. Spectrosco... A new ruthenium polypyridine complex, [Ru(phen) 2(pMIP)] 2+(phen=1,10-phenanthroline, pMIP=2-(4-methylphenyl)imidazo phenanthroline), was synthesized and characterized by elementary analysis, MS and 1H NMR. Spectroscopic methods have been carried out on the interaction mechanism of the Ru (Ⅱ) complex with yeast tRNA systematically. The experimental results indicate that the complex binds to yeast tRNA with an intercalative mode possibly, and interacts with yeast tRNA enantioselectively. The experimental results also suggest that spectroscopic method is effective on studying the interaction mechanism of Ru (Ⅱ) complexes with RNA. Information obtained from the study is potentially useful in the design of new RNA-targeting drugs. 展开更多
关键词 合成 光谱学研究 多吡啶钌(Ⅱ)配合物 RNA 相互作用 药物设计
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侧柏籽核糖体失活蛋白的分离及作用机制研究 被引量:3
6
作者 斯越秀 刘望夷 钱凯先 《浙江大学学报(工学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第3期423-426,共4页
提出了从裸子植物侧柏中分离纯化核糖体失活蛋白的制备和检测方法.通过盐溶液抽提、硫酸铵分级沉淀、阴离子交换层析、阳离子交换层析等步骤制备了该蛋白.该蛋白的检测方法是把这种蛋白作用于大鼠 80S肝核糖体后, 不经过酸性苯胺处理,... 提出了从裸子植物侧柏中分离纯化核糖体失活蛋白的制备和检测方法.通过盐溶液抽提、硫酸铵分级沉淀、阴离子交换层析、阳离子交换层析等步骤制备了该蛋白.该蛋白的检测方法是把这种蛋白作用于大鼠 80S肝核糖体后, 不经过酸性苯胺处理,直接进行聚丙烯酰胺的尿素变性胶电泳.在电泳图上得到 400 bp左右的特征性核酸条带.分析结果表明,该蛋白为一种新的核糖酶型的核糖体失活蛋白,阐明了侧柏核糖体失活蛋白失活核糖体的分子机制. 展开更多
关键词 RNA水解酶 核糖体失活蛋白 侧柏 分离 纯化
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慢病毒载体法制备转基因动物研究进展 被引量:3
7
作者 刘吉宏 李峰 +2 位作者 郝子悦 李碧春 陈学进 《动物医学进展》 CSCD 2008年第2期64-67,共4页
慢病毒能够感染分裂细胞和非分裂细胞,因而被发展成为重要的转基因载体,已成为制备转基因动物的一种工具,转基因效率明显提高。该文介绍了制备转基因动物的技术方法,比较了慢病毒载体制备转基因动物的特点和优势,介绍了慢病毒载体安全... 慢病毒能够感染分裂细胞和非分裂细胞,因而被发展成为重要的转基因载体,已成为制备转基因动物的一种工具,转基因效率明显提高。该文介绍了制备转基因动物的技术方法,比较了慢病毒载体制备转基因动物的特点和优势,介绍了慢病毒载体安全设计的发展,并将近年来国内外利用慢病毒载体法制备转基因动物的研究进行了概述。 展开更多
关键词 慢病毒 转基因动物 安全性
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利用毕赤酵母表达蚕丝丝素蛋白典型肽段的研究 被引量:1
8
作者 田保中 王建南 +2 位作者 陆长德 李明忠 白伦 《丝绸》 CAS 北大核心 2006年第6期20-23,共4页
设计并克隆了一个以源于蚕丝丝素蛋白结晶区的序列为GAGAGS(GlyAlaGlyAlaGlySer)的典型肽段为基本框架的基因,并导入毕赤酵母(Pichiapastoris)X33内进行了表达。研究表明,在X33酵母里可以正确表达目的蛋白Bmf31D1-8,而且获得了0.202g/L... 设计并克隆了一个以源于蚕丝丝素蛋白结晶区的序列为GAGAGS(GlyAlaGlyAlaGlySer)的典型肽段为基本框架的基因,并导入毕赤酵母(Pichiapastoris)X33内进行了表达。研究表明,在X33酵母里可以正确表达目的蛋白Bmf31D1-8,而且获得了0.202g/L的表达效率。 展开更多
关键词 毕赤酵母 蚕丝丝素蛋白 GAGASGS 肽段表达效率
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连续自由流电泳微重力下分离模式蛋白质的研究 被引量:1
9
作者 丁士健 刘韬 +10 位作者 宋金芳 吴高德 邵晓霞 夏其昌 吴汉基 蒋远大 张志远 刘文喜 冯学章 马玉立 李钦 《空间科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期233-240,共8页
以连续自由流电泳的区带电泳模式分离血红蛋白和细胞色素C,比较了不同缓冲液甘油浓度下的分离效果,确定了最终装载在神舟4号飞船上A3-2型电泳仪的电泳分离条件,通过地面和空间实验,初步探讨了微重力对连续自由流电泳分离的影响,并对电... 以连续自由流电泳的区带电泳模式分离血红蛋白和细胞色素C,比较了不同缓冲液甘油浓度下的分离效果,确定了最终装载在神舟4号飞船上A3-2型电泳仪的电泳分离条件,通过地面和空间实验,初步探讨了微重力对连续自由流电泳分离的影响,并对电泳的分离产物做了多种检测。 展开更多
关键词 连续自由流电泳 微重力 分离模式 蛋白质 血红蛋白 细胞色素C 空间实验
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纳豆激酶基因在家蚕生物反应器中的表达 被引量:6
10
作者 陈寅 林旭瑷 +3 位作者 张志芳 易咏竹 何家禄 吴祥甫 《中国蚕业》 2003年第1期67-68,共2页
纳豆由枯草杆菌(Bacillussubtilis)或纳豆菌(Bacillusnatto)发酵大豆而成.1987年,日本学者须见洋行等首次从传统食品纳豆中发现了一种具有溶栓活性的酶制剂,并命名为纳豆激酶(nattokinase,NK).
关键词 纳豆激酶 家蚕 生物反应器 基因表达 抗栓药物 杆状病毒表达载体
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核磁共振和分子模拟法研究三萜皂苷Anemoside A_3在溶液中的三维结构
11
作者 李茜 施燕红 +2 位作者 郜永光 叶文才 姚新生 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期123-126,共4页
目的:研究三萜皂苷anemoside A3在溶液中的三维结构。方法:利用NMR结果和分子模拟方法研究了该皂苷在溶液中的构象,测定了anemoside A3的一系列1D和2D核磁共振谱。结果:对该皂苷的质子和碳信号进行了完整归属,计算出1组结构收敛的anemos... 目的:研究三萜皂苷anemoside A3在溶液中的三维结构。方法:利用NMR结果和分子模拟方法研究了该皂苷在溶液中的构象,测定了anemoside A3的一系列1D和2D核磁共振谱。结果:对该皂苷的质子和碳信号进行了完整归属,计算出1组结构收敛的anemoside A3在溶液中的构象。结论:所得结果可应用于三萜皂苷的构效关系研究。 展开更多
关键词 分子模拟 NMR 三萜皂苷 anemoside A3 三维结构
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空间连续自由流电泳研究
12
作者 丁士健 张志远 +3 位作者 吴高德 蒋远大 吴汉基 夏其昌 《载人航天》 CSCD 2004年第4期26-29,共4页
本文论述了研究空间连续自由流电泳的必要性,扼要介绍了美国和欧洲、日本等研究空间连续自由流电泳的情况,简述了我国连续自由流电泳的仪器设备和分离纯化生物样品的研究进展。
关键词 连续自由流电泳 微重力 模式蛋白质 分辨率
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ELISA方法研究多糖与人干扰素-γ相互作用 被引量:6
13
作者 冯伟云 赵鲁杭 王克夷 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2004年第4期315-319,325,共6页
目的 :建立一种体外研究多糖与干扰素 - γ(Interferon- γ,IFN- γ)相互作用的 EL ISA方法。方法 :在硼氰氢化钠作用下合成肝素 -牛血清白蛋白复合物 (Heparin- BSA Complex,HBC) ,Sepharose4 B凝胶过滤系统分离纯化 HBC,并用 SDS- PAG... 目的 :建立一种体外研究多糖与干扰素 - γ(Interferon- γ,IFN- γ)相互作用的 EL ISA方法。方法 :在硼氰氢化钠作用下合成肝素 -牛血清白蛋白复合物 (Heparin- BSA Complex,HBC) ,Sepharose4 B凝胶过滤系统分离纯化 HBC,并用 SDS- PAGE鉴定。将 HBC(相当于 0 .5 μg蛋白含量 )包被在酶标板上 ,EL ISA方法检测 HBC与 IFN- γ的相互作用 ,并探讨游离肝素、低分子量肝素、硫酸软骨素 A、硫酸软骨素 C和透明质酸 ,以及卡拉胶等多糖对这种结合的影响。结果 :IFN- γ与 HBC的结合呈 IFN- γ剂量依赖性 ,2 ng左右达到饱和。游离肝素和低分子量肝素以及其他多糖均不同程度地抑制了 IFN- γ与 HBC的结合 ,肝素和低分子肝素的 IC50 分别为 2 .4 μg/ ml和 18.6 μg/ml。结论 :IFN- γ与肝素、卡拉胶高亲和力结合 ,而与硫酸软骨素 A、硫酸软骨素 C、透明质酸结合力极弱。EL ISA是一个简单。 展开更多
关键词 多糖类 干扰素Ⅰ型 肝素 药物相互作用 肝素一BSA复合物 干扰素-Γ 酶联免疫吸附测定
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福寿螺多功能纤维素酶(EGXA)的结构功能研究 被引量:6
14
作者 赵颖 丁明 +2 位作者 高如丽 许根俊 赵辅昆 《浙江理工大学学报(自然科学版)》 2008年第5期535-538,558,共5页
利用点突变的方法构建了E332A、E332S和D290Q的多功能纤维素酶EGXA)的突变体,研究了在甲醇酵母中重组表达的突变体的酶学性质。结果表明:E332可能是该酶的活性必需基团,而D290Q突变体的外切葡聚糖酶及内切木聚糖酶活性均提高2~3倍... 利用点突变的方法构建了E332A、E332S和D290Q的多功能纤维素酶EGXA)的突变体,研究了在甲醇酵母中重组表达的突变体的酶学性质。结果表明:E332可能是该酶的活性必需基团,而D290Q突变体的外切葡聚糖酶及内切木聚糖酶活性均提高2~3倍,对EGXA研究及其应用提供了理论依据。 展开更多
关键词 多功能纤维素酶EGXA 点突变 外切-β-1 4-葡聚糖酶 纤维素酶Cex 内切-β-1 4-葡聚糖酶 内切-β-1 4-木聚糖酶
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原子力显微镜在α-Synuclein积聚和解聚研究中的应用
15
作者 唐琳 李洪涛 +5 位作者 杜海宁 吉丽娜 张峰 李民乾 胡红雨 胡钧 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期116-119,共4页
研究α Synuclein蛋白纤维的积聚和解聚过程对于帕金森症等神经退化性疾病的预防和治疗有着重要意义。本文利用原子力显微镜对α Synuclein的积聚过程的不同阶段进行了研究 ,并在此基础上对已经积聚形成的α Synuclein纤维在溶液中的解... 研究α Synuclein蛋白纤维的积聚和解聚过程对于帕金森症等神经退化性疾病的预防和治疗有着重要意义。本文利用原子力显微镜对α Synuclein的积聚过程的不同阶段进行了研究 ,并在此基础上对已经积聚形成的α Synuclein纤维在溶液中的解聚过程进行了原位观察。实验结果表明 :α Synuclein积聚过程包括单体→寡聚体→短纤维→长纤维这几个阶段 ;而α Synuclein纤维在浓度降低的情况下 ,会发生解聚 ,解聚是从纤维的中间发生断裂开始 ,经过一段时间后 。 展开更多
关键词 原子力显微镜 α—Synuclein 神经退化性疾病 帕金森氏综合症 积聚 解聚
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小型类胰岛素生长因子-1的制备及其体外解折叠的初步研究
16
作者 刘弈岩 赵杰 +2 位作者 程龙霄 唐月华 冯佑民 《浙江理工大学学报(自然科学版)》 2009年第5期782-785,共4页
构建mini-IGF-1作为IGF-1的模型肽,利用酿酒酵母高效表达系统表达,并对模型肽进行分离纯化。利用二硫键稳定性测试,得到在[GSH/GSSG]为30/1和40/1条件时mini-IGF-1体外解折叠中间体最多。采用[GSH/GSSG]为30/1的比例对mini-IGF-1进行体... 构建mini-IGF-1作为IGF-1的模型肽,利用酿酒酵母高效表达系统表达,并对模型肽进行分离纯化。利用二硫键稳定性测试,得到在[GSH/GSSG]为30/1和40/1条件时mini-IGF-1体外解折叠中间体最多。采用[GSH/GSSG]为30/1的比例对mini-IGF-1进行体外解折叠,通过对mini-IGF-1解折叠过程中间体的分析,得出mini-IGF-1解折叠和重折叠的过程是可逆的结论。 展开更多
关键词 小型类胰岛素生长因子-1 纯化 解折叠 中间体
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鹅副黏病毒与新城疫病毒对鸡胚和鹅胚成纤维细胞的感染性分析 被引量:3
17
作者 单松华 谢爱织 +1 位作者 邹键 姚龙涛 《动物医学进展》 CSCD 2005年第2期73-76,共4页
用鸡新城疫病毒F48E9,Komarov, LaSota,V4/66株和鹅副黏病毒SF02株分 别感染鸡胚和鹅胚成纤维细胞,用MTT显 色方法检测存活细胞数目。结果表明,不同 毒力新城疫病毒致细胞病变的作用不一样, 鸡新城疫强毒F48E9株和鹅副黏病毒SF02 株均... 用鸡新城疫病毒F48E9,Komarov, LaSota,V4/66株和鹅副黏病毒SF02株分 别感染鸡胚和鹅胚成纤维细胞,用MTT显 色方法检测存活细胞数目。结果表明,不同 毒力新城疫病毒致细胞病变的作用不一样, 鸡新城疫强毒F48E9株和鹅副黏病毒SF02 株均引起两种细胞几乎全部死亡,感染动物 时,SF02与NDV强毒株的致病性有显著的 区别,但感染细胞时,二者并无明显差别; NDV与GPMV在感染水禽时的致病性差异 并不是因为诸如细胞膜受体等细胞水平的因 素不同造成的,可能与干扰素途径有关。 展开更多
关键词 鹅副黏病毒 新城疫病毒 胚胎成纤维细胞 感染性 致病机制
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蛋白酶体抑制剂MG132诱导肝癌细胞Hep3B凋亡的机制 被引量:3
18
作者 张静 刘锡君 +3 位作者 李伟 孔彦平 章康健 周秀梅 《浙江理工大学学报(自然科学版)》 2010年第5期799-804,共6页
研究探讨蛋白酶体抑制剂MG132(Z-Leu-leu-leu-CHO)诱导肝癌细胞Hep3B凋亡的作用与机制。实验采用不同浓度梯度和时间梯度,通过荧光显微镜、Hoechst33342染色、MTT检测和Western印迹分别检测MG132对Hep3B细胞的形态、凋亡小体形成、细胞... 研究探讨蛋白酶体抑制剂MG132(Z-Leu-leu-leu-CHO)诱导肝癌细胞Hep3B凋亡的作用与机制。实验采用不同浓度梯度和时间梯度,通过荧光显微镜、Hoechst33342染色、MTT检测和Western印迹分别检测MG132对Hep3B细胞的形态、凋亡小体形成、细胞存活率、细胞凋亡相关蛋白表达的影响。结果表明,MG132能够选择性抑制肝癌细胞生长,对正常肝细胞没有明显影响。此外,MG132可以通过内质网应激途径诱导肝癌细胞Hep3B凋亡,呈现剂量和时间的双重依赖性。提示通过抑制蛋白酶体来达到诱导肿瘤细胞凋亡的方法是可行的,MG132此类药物的研究与应用将为肿瘤治疗提供新的选择。 展开更多
关键词 蛋白酶体抑制剂 肝癌细胞 凋亡 内质网应激 CASPASE-12
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激光共聚焦显微镜样品制备方法(一)——细胞培养样品 被引量:10
19
作者 余礼厚 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期185-188,共4页
随着激光共聚焦显微镜在生物学研究中的广泛应用,绿色荧光融合蛋白能够提供蛋白质在细胞体内的精确时空信息。因此免疫荧光样品的制备也成为基本的细胞生物学实验方法。本文主要介绍在培养细胞中表达绿色荧光融合蛋白及免疫荧光样品的... 随着激光共聚焦显微镜在生物学研究中的广泛应用,绿色荧光融合蛋白能够提供蛋白质在细胞体内的精确时空信息。因此免疫荧光样品的制备也成为基本的细胞生物学实验方法。本文主要介绍在培养细胞中表达绿色荧光融合蛋白及免疫荧光样品的制备过程。 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白 细胞培养 免疫荧光 激光共聚焦显微镜
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对虾白斑杆状病毒对螯虾血淋巴原代细胞的感染 被引量:8
20
作者 李钫 杨丰 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第12期74-77,共4页
应用螯虾血淋巴细胞的原代培养系统 ,作为对虾白斑杆状病毒 (whitespotbacilliformvirus ,WSBV )的替代宿主 ,进行体外感染实验。通过PCR及RNA点杂交的方法监测WSBV的DNA复制、转录情况。结果显示 ,来源于对虾的WSBV可以感染体外培养的... 应用螯虾血淋巴细胞的原代培养系统 ,作为对虾白斑杆状病毒 (whitespotbacilliformvirus ,WSBV )的替代宿主 ,进行体外感染实验。通过PCR及RNA点杂交的方法监测WSBV的DNA复制、转录情况。结果显示 ,来源于对虾的WSBV可以感染体外培养的螯虾原代血淋巴细胞 ,并在其中增殖 ;WSBV感染螯虾原代血淋巴细胞后 6h左右病毒开始大量复制 ,感染后的细胞可以存活数日。在目前虾细胞系尚未建立之前 ,螯虾血淋巴原代细胞可以作为研究WSBV感染、转录和复制等机理的替代系统。 展开更多
关键词 对虾白斑杆状病毒 WSBV 螯虾血淋巴细胞 原代培养 病毒感染
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