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不同提取方法在橡胶树总RNA提取中的应用研究
被引量：
4
1
作者
孙芳
安泽伟
+3 位作者
王其同
李玉婷
华玉伟
黄华孙
《热带农业科学》
2012年第3期31-36,共6页
总RNA的纯度和完整性对橡胶树分子生物学实验至关重要。为探索更适合橡胶树总RNA的提取方法,本文以巴西橡胶树无性系热研7-33-97叶片为试材,利用凝胶电泳、紫外吸光值测定、RT-PCR检测等方法对CTAB-LiCl法和CTAB-NaAc法提取的总RNA进行...
总RNA的纯度和完整性对橡胶树分子生物学实验至关重要。为探索更适合橡胶树总RNA的提取方法,本文以巴西橡胶树无性系热研7-33-97叶片为试材,利用凝胶电泳、紫外吸光值测定、RT-PCR检测等方法对CTAB-LiCl法和CTAB-NaAc法提取的总RNA进行比较。结果显示:CTAB-LiCl法提取RNA不仅耗时产率低,且RNA溶液中的Li+和Cl-影响反转录效率。CTAB-NaAc法提取叶片的总RNA经DNaseⅠ处理后凝胶电泳条带完整,产率高,无DNA污染;A260/A280比值为2.03,A260/A230比值为1.96;反转录的cDNA经PCR检测质量较好。另用CTAB-NaAc法对橡胶树的花、树皮、胚、根进行总RNA的提取,均能得到较高质量的总RNA。
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关键词
橡胶树
RNA提取
CTAB-NaAc法
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职称材料
根癌农杆菌介导的橡胶树花药愈伤组织遗传转化体系的建立
被引量：
33
2
作者
黄天带
李哲
+3 位作者
孙爱花
周权男
华玉伟
黄华孙
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第10期1691-1697,共7页
为建立根癌农杆菌介导的橡胶树遗传转化体系,以花药愈伤组织为受体,研究了农杆菌菌株、共培养温度、共培养时间、乙酰丁香酮(AS)等因素对遗传转化效率的影响。结果表明,农杆菌菌株、共培养温度和共培养时间对转化效率具有显著影响,AS不...
为建立根癌农杆菌介导的橡胶树遗传转化体系,以花药愈伤组织为受体,研究了农杆菌菌株、共培养温度、共培养时间、乙酰丁香酮(AS)等因素对遗传转化效率的影响。结果表明,农杆菌菌株、共培养温度和共培养时间对转化效率具有显著影响,AS不影响转化效率。2.2万个花药愈伤组织经EHA105菌株侵染后,转入未添加AS的培养基,22℃共培养6d,通过50mgL-1卡那霉素抗性筛选、叶片GUS染色、uidA和NptII基因PCR特异扩增、PCR产物测序及NptII基因Southern检测,鉴定出11株转基因植株,并通过嫁接和次生体胚发生,获得来自8个转基因株系的681株转基因植株,移栽成活253株。
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关键词
橡胶树
根癌农杆菌
花药愈伤组织
遗传转化
次生体胚发生
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职称材料
橡胶树抗寒种质遗传多样性分析
被引量：
5
3
作者
王其同
安泽伟
+2 位作者
胡彦师
方家林
黄华孙
《热带农业科学》
2012年第2期11-14,共4页
应用RAPD和ISSR技术对20份橡胶树抗寒种质进行遗传多样性分析。结果表明,16个RAPD引物和12个ISSR引物分别扩增出条带113和101条,多态性条带指数(PPB)分别为61.1%和63.4%。据Nei-Li相似系数,ISSR标记在相似系数约0.74处,可将20份材料分...
应用RAPD和ISSR技术对20份橡胶树抗寒种质进行遗传多样性分析。结果表明,16个RAPD引物和12个ISSR引物分别扩增出条带113和101条,多态性条带指数(PPB)分别为61.1%和63.4%。据Nei-Li相似系数,ISSR标记在相似系数约0.74处,可将20份材料分为野生种质和栽培种质两大类;RAPD标记在相似系数约0.70处,也可将供试材料分为野生种质和栽培种质两类,但只有XJ002420为野生种质。对2种标记的分析结果进行相关分析,结果表明,RAPD和ISSR所检测的遗传相似系数呈极显著正相关,相关系数为0.672。以上结论表明,RAPD和ISSR标记可用于橡胶树种质资源的遗传多样性研究,但鉴于ISSR较RAPD有更强的多态性检出能力,ISSR技术应作为遗传多样性研究的首选单引物标记。
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关键词
橡胶树
抗寒种质
遗传多样性
ISSR
RAPD
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职称材料
题名
不同提取方法在橡胶树总RNA提取中的应用研究
被引量：
4
1
作者
孙芳
安泽伟
王其同
李玉婷
华玉伟
黄华孙
机构
海南大学农
学院
中国热带农业科学院橡胶研究所/国家橡胶树育种中心/农业部橡胶树生物学重点开放实验室
出处
《热带农业科学》
2012年第3期31-36,共6页
基金
国家天然橡胶产业技术体系(No.nytx-34)
文摘
总RNA的纯度和完整性对橡胶树分子生物学实验至关重要。为探索更适合橡胶树总RNA的提取方法,本文以巴西橡胶树无性系热研7-33-97叶片为试材,利用凝胶电泳、紫外吸光值测定、RT-PCR检测等方法对CTAB-LiCl法和CTAB-NaAc法提取的总RNA进行比较。结果显示:CTAB-LiCl法提取RNA不仅耗时产率低,且RNA溶液中的Li+和Cl-影响反转录效率。CTAB-NaAc法提取叶片的总RNA经DNaseⅠ处理后凝胶电泳条带完整,产率高,无DNA污染;A260/A280比值为2.03,A260/A230比值为1.96;反转录的cDNA经PCR检测质量较好。另用CTAB-NaAc法对橡胶树的花、树皮、胚、根进行总RNA的提取,均能得到较高质量的总RNA。
关键词
橡胶树
RNA提取
CTAB-NaAc法
Keywords
rubber tree
total RNA extraction
CTAB
分类号
S794.1 [农业科学—林木遗传育种]
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职称材料
题名
根癌农杆菌介导的橡胶树花药愈伤组织遗传转化体系的建立
被引量：
33
2
作者
黄天带
李哲
孙爱花
周权男
华玉伟
黄华孙
机构
中国热带农业科学院橡胶研究所/国家橡胶树育种中心/农业部橡胶树生物学重点开放实验室
/省部共建
国家
重点
实验室
培育基地/海南省
热带
作物栽培生理学
重点
实验室
出处
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第10期1691-1697,共7页
基金
现代农业产业技术体系建设专项(nycytx-34)
国家自然科学基金项目(30960322)
+1 种基金
中国热带农业科学院橡胶研究所基本科研业务费专项资金(XJSYWFZX2008-01)
国际科技合作项目(2008DFA32020)资助
文摘
为建立根癌农杆菌介导的橡胶树遗传转化体系,以花药愈伤组织为受体,研究了农杆菌菌株、共培养温度、共培养时间、乙酰丁香酮(AS)等因素对遗传转化效率的影响。结果表明,农杆菌菌株、共培养温度和共培养时间对转化效率具有显著影响,AS不影响转化效率。2.2万个花药愈伤组织经EHA105菌株侵染后,转入未添加AS的培养基,22℃共培养6d,通过50mgL-1卡那霉素抗性筛选、叶片GUS染色、uidA和NptII基因PCR特异扩增、PCR产物测序及NptII基因Southern检测,鉴定出11株转基因植株,并通过嫁接和次生体胚发生,获得来自8个转基因株系的681株转基因植株,移栽成活253株。
关键词
橡胶树
根癌农杆菌
花药愈伤组织
遗传转化
次生体胚发生
Keywords
Hevea brasiliensis
Agrobacterium tumefaciens
Anther calli
Genetic transformation
Secondary embryogenesis
分类号
S794.1 [农业科学—林木遗传育种]
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职称材料
题名
橡胶树抗寒种质遗传多样性分析
被引量：
5
3
作者
王其同
安泽伟
胡彦师
方家林
黄华孙
机构
海南大学农
学院
中国热带农业科学院橡胶研究所/国家橡胶树育种中心/农业部橡胶树生物学重点开放实验室
出处
《热带农业科学》
2012年第2期11-14,共4页
基金
国家天然橡胶产业技术体系(No.CARS-34)
中国热带农业科学院橡胶研究所基本科研业务费专项(No.1630022011002)
文摘
应用RAPD和ISSR技术对20份橡胶树抗寒种质进行遗传多样性分析。结果表明,16个RAPD引物和12个ISSR引物分别扩增出条带113和101条,多态性条带指数(PPB)分别为61.1%和63.4%。据Nei-Li相似系数,ISSR标记在相似系数约0.74处,可将20份材料分为野生种质和栽培种质两大类;RAPD标记在相似系数约0.70处,也可将供试材料分为野生种质和栽培种质两类,但只有XJ002420为野生种质。对2种标记的分析结果进行相关分析,结果表明,RAPD和ISSR所检测的遗传相似系数呈极显著正相关,相关系数为0.672。以上结论表明,RAPD和ISSR标记可用于橡胶树种质资源的遗传多样性研究,但鉴于ISSR较RAPD有更强的多态性检出能力,ISSR技术应作为遗传多样性研究的首选单引物标记。
关键词
橡胶树
抗寒种质
遗传多样性
ISSR
RAPD
Keywords
Hevea brasiliensis
cold-tolerant germplasm
genetic diversity
ISSR
RAPD
分类号
S794.1 [农业科学—林木遗传育种]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
不同提取方法在橡胶树总RNA提取中的应用研究
孙芳
安泽伟
王其同
李玉婷
华玉伟
黄华孙
《热带农业科学》
2012
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
根癌农杆菌介导的橡胶树花药愈伤组织遗传转化体系的建立
黄天带
李哲
孙爱花
周权男
华玉伟
黄华孙
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
33
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
橡胶树抗寒种质遗传多样性分析
王其同
安泽伟
胡彦师
方家林
黄华孙
《热带农业科学》
2012
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
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