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反刍动物埃立克体微滴数字PCR方法的建立及初步应用被引量：6: 1; 作者王素华王忠才 +6 位作者黄凌哲吕继洲吴绍强赵治国付海滨韩小虎张舟《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期60-64,共5页; 为建立反刍动物埃立克体(E.ruminantium)准确定量的微滴数字PCR方法(ddPCR),本研究以E.rum-inantium pCS20基因为靶基因,选取保守区域设计引物和探针,建立了E.ruminantium ddPCR方法。利用本研究建立的ddPCR方法检测E.ruminantium、牛... 展开更多; 关键词反刍动物埃立克体检测 pCS20基因微滴数字PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

反刍动物埃立克体荧光定量PCR检测技术的建立和应用被引量：1: 2; 作者王素华王忠才 +5 位作者黄凌哲莫虹斐吴绍强吕继洲赵治国帅江冰《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期1975-1982,共8页; 为快速、准确地检测反刍动物埃立克体,本研究以反刍动物埃立克体pCS20为靶基因设计特异性引物和探针,建立了TaqMan和Eva Green荧光定量PCR方法,对其反应的特异性、敏感性和重复性进行了分析,并与OIE推荐的套式PCR方法一起对临床样品进... 展开更多; 关键词反刍动物埃立克体 pCS20基因 TaqMan荧光定量PCR Eva Green荧光定量PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

草原革蜱和边缘革蜱的分子生物学鉴定被引量：10: 3; 作者吕继洲王振宝 +1 位作者袁向芬吴绍强《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第9期8-15,共8页; 本研究旨在建立草原革蜱和边缘革蜱的分子生物学鉴定方法,并探讨其系统发生关系。在新疆从动物体表采集寄生蜱,形态学鉴定后,PCR扩增获得2种革蜱的16S rRNA及线粒体色素氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因序列,测序后进行同源性分析。用Mega 5.0和M... 展开更多; 关键词线粒体色素氧化酶亚基Ⅰ基因 16S RRNA 草原革蜱边缘革蜱分子鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

环形泰勒虫SYBR Green I荧光定量PCR方法的建立及应用被引量：4: 4; 作者王素华袁淑辉 +4 位作者吴绍强吕继洲帅江冰张晓峰赵治国《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期53-57,共5页; 为建立一种快速、敏感检测牛环形泰勒虫的方法,本研究根据GenBank中登录的牛环形泰勒虫Tams1基因序列,设计合成1对特异性引物,通过优化反应条件,建立了检测牛环形泰勒虫SYBR Green I荧光定量PCR检测方法。研究结果显示,该方法可以特异... 展开更多; 关键词牛环形泰勒虫 Tams1基因 SYBR Green I荧光定量PCR 建立及应用; 在线阅读下载PDF 职称材料

炭疽杆菌双重荧光定量PCR检测技术的建立和应用被引量：2: 5; 作者王素华帅江冰 +4 位作者李舟袁淑辉吴绍强吕继洲赵治国《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1658-1665,共8页; 为快速和准确检测炭疽杆菌,本研究以炭疽杆菌染色体上的BA5345基因和pXO1质粒上的PA基因为靶基因设计特异性引物和探针,建立了炭疽杆菌双重荧光定量PCR检测方法,对其反应的特异性、敏感性和重复性进行了分析,并与常规PCR方法一起对临床... 展开更多; 关键词炭疽杆菌 BA5345基因 PA基因双重荧光定量PCR 检测方法; 在线阅读下载PDF 职称材料

蜱传牛巴贝斯虫套式PCR检测方法的建立及应用被引量：4: 6; 作者王素华袁淑辉 +3 位作者蔡军帅江冰吴绍强张晓峰《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期711-714,共4页; 为建立一种快速、敏感检测牛巴贝斯虫的方法,本研究根据GenBank中登录的牛巴贝斯虫rap-1基因保守区设计2对特异性引物,经反应条件的优化,建立了牛巴贝斯虫套式PCR检测方法。结果显示,该方法可以特异地检测牛巴贝斯虫,而对双芽巴贝斯虫... 展开更多; 关键词牛巴贝斯虫 rap-1基因套式PCR 蜱传; 在线阅读下载PDF 职称材料

南非蜱虫套式PCR鉴定方法的建立: 7; 作者王素华闫宝龙 +3 位作者吴绍强帅江冰张晓峰吕继洲《动物医学进展》北大核心 2018年第2期14-18,共5页; 为探讨来自南非不同蜱种的系统进化关系,建立南非截获蜱虫的套式PCR鉴定方法。根据GenBank中蜱虫的18SrRNA基因序列,设计2对特异性引物,通过优化条件建立蜱虫套式PCR鉴定方法。从南非进口生牛皮上截获寄生蜱,经过形态学初步鉴定后,应用... 展开更多; 关键词蜱 18SrRNA基因套式PCR 鉴定系统进化; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名反刍动物埃立克体微滴数字PCR方法的建立及初步应用被引量：6: 1; 作者王素华王忠才黄凌哲吕继洲吴绍强赵治国付海滨韩小虎张舟; 机构温州海关综合技术服务中心中国检验检疫科学研究院动物检疫所呼和浩特海关技术中心沈阳海关技术中心沈阳农业大学动物科学与医学学院; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期60-64,共5页; 基金浙江省重点研发计划项目(2021C02060) 海关总署科技计划项目(2020HK156) 中国检验检疫科学研究院基本科研业务费项目(2019JK022)。; 文摘为建立反刍动物埃立克体(E.ruminantium)准确定量的微滴数字PCR方法(ddPCR),本研究以E.rum-inantium pCS20基因为靶基因,选取保守区域设计引物和探针,建立了E.ruminantium ddPCR方法。利用本研究建立的ddPCR方法检测E.ruminantium、牛巴贝斯虫、牛双芽巴贝斯虫、环形泰勒虫、无形体、犬埃立克体、牛埃立克体、马埃立克体和立氏埃立克体等,结果显示仅E.ruminantium出现特异性扩增,而与其他寄生虫均无交叉反应,特异性强;将pUC57-pCS20重组质粒标准品10倍倍比稀释(1×10^(-1)拷贝/μL~1×10^(5)拷贝/μL)后,利用该ddPCR方法检测,结果显示,该方法对重组质粒标准品的检测限为1.8拷贝/μL,比相应荧光定量PCR方法的敏感性高10倍,本实验建立的ddPCR方法敏感性高;批内和批间重复性试验结果变异系数(CV)均小于2%,重复性好。利用建立的ddPCR方法对50只钝眼蜱样品检测,结果显示,阳性样品反刍动物埃立克体核酸的最低拷贝数为26拷贝/μL,ddPCR和荧光定量PCR检测试剂盒的检出率均为16.0%(8/50)。本研究首次建立的ddPCR方法敏感性高、特异性强、重复性好,可作为E.ruminantium准确定量检测的有效手段。; 关键词反刍动物埃立克体检测 pCS20基因微滴数字PCR; Keywords Ehrlichia ruminantium detection pCS20 gene droplet digital PCR; 分类号 S852.61 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名反刍动物埃立克体荧光定量PCR检测技术的建立和应用被引量：1: 2; 作者王素华王忠才黄凌哲莫虹斐吴绍强吕继洲赵治国帅江冰; 机构温州海关综合技术服务中心杭州海关技术中心中国检验检疫科学研究院动物检疫所呼和浩特海关技术中心; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期1975-1982,共8页; 基金浙江省自然科学基金项目(LGN19C180001) 海关总署科技计划项目(2020HK156)。; 文摘为快速、准确地检测反刍动物埃立克体,本研究以反刍动物埃立克体pCS20为靶基因设计特异性引物和探针,建立了TaqMan和Eva Green荧光定量PCR方法,对其反应的特异性、敏感性和重复性进行了分析,并与OIE推荐的套式PCR方法一起对临床样品进行检测。结果显示,本方法特异性强,与牛巴贝斯虫、牛双芽巴贝斯虫、环形泰勒虫、犬埃立克体、牛埃立克体、马埃立克体和立氏埃立克体无交叉反应;TaqMan和Eva Green荧光定量PCR对pCS20质粒标准品的最低检测限分别为17.4拷贝·μL^(-1)和1.74拷贝·μL^(-1),标准曲线相关系数大于0.99,组内和组间CV均小于1.5%。对420只钝眼蜱样本的检测显示,TaqMan和Eva Green荧光定量PCR的检出率分别为25.48%和29.29%,与套式PCR检测方法相比,敏感性更高。本研究为反刍动物埃立克体的检测和流行病学调查提供了一种快速、准确的检测方法。; 关键词反刍动物埃立克体 pCS20基因 TaqMan荧光定量PCR Eva Green荧光定量PCR; Keywords Ehrlichia ruminantium pCS20 gene TaqMan real-time PCR Eva Green real-time PCR; 分类号 S852.61 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名草原革蜱和边缘革蜱的分子生物学鉴定被引量：10: 3; 作者吕继洲王振宝袁向芬吴绍强; 机构中国检验检疫科学研究院动物检疫所新疆伊犁出入境检验检疫局; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第9期8-15,共8页; 基金国家科技支撑计划课题(2012BAK11B04); 文摘本研究旨在建立草原革蜱和边缘革蜱的分子生物学鉴定方法,并探讨其系统发生关系。在新疆从动物体表采集寄生蜱,形态学鉴定后,PCR扩增获得2种革蜱的16S rRNA及线粒体色素氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因序列,测序后进行同源性分析。用Mega 5.0和Mrbayes 3.2软件分别构建系统进化树,草原革蜱16S rRNA序列与GenBank数据库中已知草原革蜱16S rRNA序列聚类,而边缘革蜱COⅠ序列与GenBank数据库中已知边缘革蜱COⅠ序列聚类,与形态学鉴定结果一致。本研究结果表明,在传统形态学分类的基础上,结合分子生物学鉴定方法能简易、准确鉴定草原革蜱和边缘革蜱。; 关键词线粒体色素氧化酶亚基Ⅰ基因 16S RRNA 草原革蜱边缘革蜱分子鉴定; Keywords COⅠ 16S rRNA Dermacentor nuttalli Dermacentor marginatus molecular identification; 分类号 Q969.91 [生物学—昆虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名环形泰勒虫SYBR Green I荧光定量PCR方法的建立及应用被引量：4: 4; 作者王素华袁淑辉吴绍强吕继洲帅江冰张晓峰赵治国; 机构温州海关中国检验检疫科学研究院动物检疫所杭州海关呼和浩特海关; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期53-57,共5页; 基金国家质检总局科技计划项目(2016IK277) 浙江省重大科技专项重点农业项目(2015C02044); 文摘为建立一种快速、敏感检测牛环形泰勒虫的方法,本研究根据GenBank中登录的牛环形泰勒虫Tams1基因序列,设计合成1对特异性引物,通过优化反应条件,建立了检测牛环形泰勒虫SYBR Green I荧光定量PCR检测方法。研究结果显示,该方法可以特异地检测牛环形泰勒虫,而对牛巴贝斯虫、反刍动物艾立希体和弓形虫检测均为阴性;该方法的灵敏度可达到180拷贝/μL,比常规PCR敏感10倍;组内和组间变异系数均小于1.0%。对15份临床血液样品和20只璃眼蜱进行检测,SYBR Green I荧光定量PCR和常规PCR的阳性检出率分别为42.86%和28.57%。本研究建立的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法具有特异性强、敏感性高的特点,可准确、高效检测牛环形泰勒虫,为牛环形泰勒虫病防控提供技术支持。; 关键词牛环形泰勒虫 Tams1基因 SYBR Green I荧光定量PCR 建立及应用; Keywords Theileria annulata Tams1 gene SYBR Green I real-time PCR establishment and application; 分类号 S852.72 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名炭疽杆菌双重荧光定量PCR检测技术的建立和应用被引量：2: 5; 作者王素华帅江冰李舟袁淑辉吴绍强吕继洲赵治国; 机构温州海关综合技术服务中心杭州海关技术中心中国检验检疫科学研究院动物检疫所呼和浩特海关技术中心; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1658-1665,共8页; 基金国家质检总局科技计划项目(2017IK098) 浙江省重大科技专项重点农业项目(2015C02044); 文摘为快速和准确检测炭疽杆菌,本研究以炭疽杆菌染色体上的BA5345基因和pXO1质粒上的PA基因为靶基因设计特异性引物和探针,建立了炭疽杆菌双重荧光定量PCR检测方法,对其反应的特异性、敏感性和重复性进行了分析,并与常规PCR方法一起对临床样品进行检测。结果显示,所建立方法特异性强,与蜡样芽胞杆菌群中其他芽胞杆菌无交叉反应;对BA5345基因和PA基因的最低检测限分别为8.0和7.8拷贝·μL^-1,标准曲线相关系数大于0.99,组内和组间CV均小于1.5%。对35份污染皮毛样品检测显示BA5345基因和PA基因的检出率分别为80.0%和82.9%,与常规PCR检测方法相比,敏感性更高。本研究为炭疽杆菌的检测和流行病学调查提供了一种快速、准确的检测方法。; 关键词炭疽杆菌 BA5345基因 PA基因双重荧光定量PCR 检测方法; Keywords Bacillus anthracis BA5345 gene PA gene duplex real-time PCR detection method; 分类号 S852.616 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蜱传牛巴贝斯虫套式PCR检测方法的建立及应用被引量：4: 6; 作者王素华袁淑辉蔡军帅江冰吴绍强张晓峰; 机构温州出入境检验检疫局浙江省检验检疫科学技术研究院中国检验检疫科学研究院动物检疫所; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期711-714,共4页; 基金国家质检总局科技计划项目(2016IK277) 浙江省重大科技专项重点农业项目(2015C02044); 文摘为建立一种快速、敏感检测牛巴贝斯虫的方法,本研究根据GenBank中登录的牛巴贝斯虫rap-1基因保守区设计2对特异性引物,经反应条件的优化,建立了牛巴贝斯虫套式PCR检测方法。结果显示,该方法可以特异地检测牛巴贝斯虫,而对双芽巴贝斯虫、牛环形泰勒虫和弓形虫的检测均为阴性;该方法的灵敏度可达1.3×10~1拷贝/μL,是牛巴贝斯虫荧光定量PCR检测试剂盒的10倍,是常规PCR的1 000倍。对50只扇头蜱和微小牛蜱DNA进行检测,套式PCR、牛巴贝斯虫荧光定量PCR检测试剂盒和常规PCR的阳性检出率分别为100.0%、72.0%和0。本实验建立的套式PCR检测方法适用于牛巴贝斯虫病的早期诊断和分子流行病学调查,为蜱传牛巴贝斯虫病的防控提供技术支持。; 关键词牛巴贝斯虫 rap-1基因套式PCR 蜱传; Keywords Babesia boris rap-1 gene nested PCR tick-borne; 分类号 S852.7 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名南非蜱虫套式PCR鉴定方法的建立: 7; 作者王素华闫宝龙吴绍强帅江冰张晓峰吕继洲; 机构温州出入境检验检疫局温州医科大学中国检验检疫科学研究院动物检疫所浙江出入境检验检疫局; 出处《动物医学进展》北大核心 2018年第2期14-18,共5页; 基金国家质检总局科技计划项目(2016IK277) 浙江省重大科技专项重点农业项目(2015C02044); 文摘为探讨来自南非不同蜱种的系统进化关系,建立南非截获蜱虫的套式PCR鉴定方法。根据GenBank中蜱虫的18SrRNA基因序列,设计2对特异性引物,通过优化条件建立蜱虫套式PCR鉴定方法。从南非进口生牛皮上截获寄生蜱,经过形态学初步鉴定后,应用所建立的套式PCR扩增获得10种南非蜱虫(T1-T10)的18S rRNA基因序列,测序后与NCBI中已公布的蜱虫18S rRNA基因序列进行同源性分析。应用MEGA5.0软件进行系统进化分析发现,T1、T2、T3、T4、T7、T8是花蜱属的亚种,T5和T6分别是牛蜱属的不同种或亚种;T9和T10是扇头蜱属的不同种或亚种。说明建立的套式PCR检测方法能够在传统形态学分类的基础上,准确鉴定不同形态的蜱种。; 关键词蜱 18SrRNA基因套式PCR 鉴定系统进化; Keywords tick 18 S rRNA gene nested-PCR identification phylogenetic; 分类号 S852.746 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	反刍动物埃立克体微滴数字PCR方法的建立及初步应用	王素华王忠才黄凌哲吕继洲吴绍强赵治国付海滨韩小虎张舟	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2023	6	在线阅读下载PDF 职称材料
2	反刍动物埃立克体荧光定量PCR检测技术的建立和应用	王素华王忠才黄凌哲莫虹斐吴绍强吕继洲赵治国帅江冰	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2021	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	草原革蜱和边缘革蜱的分子生物学鉴定	吕继洲王振宝袁向芬吴绍强	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2013	10	在线阅读下载PDF 职称材料
4	环形泰勒虫SYBR Green I荧光定量PCR方法的建立及应用	王素华袁淑辉吴绍强吕继洲帅江冰张晓峰赵治国	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2019	4	在线阅读下载PDF 职称材料
5	炭疽杆菌双重荧光定量PCR检测技术的建立和应用	王素华帅江冰李舟袁淑辉吴绍强吕继洲赵治国	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2019	2	在线阅读下载PDF 职称材料
6	蜱传牛巴贝斯虫套式PCR检测方法的建立及应用	王素华袁淑辉蔡军帅江冰吴绍强张晓峰	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2018	4	在线阅读下载PDF 职称材料
7	南非蜱虫套式PCR鉴定方法的建立	王素华闫宝龙吴绍强帅江冰张晓峰吕继洲	《动物医学进展》北大核心	2018	0	在线阅读下载PDF 职称材料