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大鼠海马内注射β淀粉样蛋白诱导外周血T细胞MIP-1α过表达及其穿过血脑屏障 被引量:5
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作者 郭大文 马怡然 +1 位作者 方文刚 陈誉华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1177-1182,共6页
为观察脑内β淀粉样蛋白(amyloidbeta,Aβ)沉积对外周血T细胞穿过血脑屏障的影响,通过立体定位仪将Aβ1~42肽注射到大鼠双侧海马(以Aβ42~1反序列肽为对照),实时定量PCR(RT-qPCR)检测发现,Aβ1~42上调了外周血T细胞中巨嗜细胞炎症蛋... 为观察脑内β淀粉样蛋白(amyloidbeta,Aβ)沉积对外周血T细胞穿过血脑屏障的影响,通过立体定位仪将Aβ1~42肽注射到大鼠双侧海马(以Aβ42~1反序列肽为对照),实时定量PCR(RT-qPCR)检测发现,Aβ1~42上调了外周血T细胞中巨嗜细胞炎症蛋白(macrophageinflammatoryprotein-1α,MIP-1α)的表达,同时免疫荧光分析显示,脑内的Aβ1~42也引起了脑微血管内皮上MIP-1α受体(CCR5)的表达增加,以及伴随的脑实质内T细胞数量的增加.然而,大鼠腹腔内注射抗MIP-1α中和抗体则阻断了Aβ1~42所致的脑内T细胞数量的增加.提示脑内Aβ沉积能诱导外周血T细胞MIP-1α依赖性迁移入脑. 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 β淀粉样蛋白 MIP-1Α T细胞 血脑屏障
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毒力岛基因ibeT有助于大肠杆菌抵抗人脑微血管内皮细胞溶酶体的降解 被引量:3
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作者 张可 赵伟东 +3 位作者 李强 方文刚 朱莉 陈誉华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第4期417-423,共7页
大肠杆菌是导致新生儿细菌性脑膜炎最常见的革兰氏阴性致病菌.为探讨毒力岛基因ibeT在大肠杆菌K1株致病过程中的作用,构建了ibeT基因缺失的大肠杆菌K1株,细菌在细胞内存活试验结果显示,ibeT基因缺失抑制了大肠杆菌K1株在人脑微血管内皮... 大肠杆菌是导致新生儿细菌性脑膜炎最常见的革兰氏阴性致病菌.为探讨毒力岛基因ibeT在大肠杆菌K1株致病过程中的作用,构建了ibeT基因缺失的大肠杆菌K1株,细菌在细胞内存活试验结果显示,ibeT基因缺失抑制了大肠杆菌K1株在人脑微血管内皮细胞中的生长.利用激光共聚焦扫描显微镜观察到,在细菌侵袭进入人脑微血管内皮细胞后,与野生型相比,ibeT基因缺失突变株较多地滞留在溶酶体内;透射电镜结果进一步显示,ibeT基因缺失使大肠杆菌K1株逃逸ECV(含有大肠杆菌的囊泡)的能力发生了下降,继而使其在细胞浆内的复制减少.利用体外模拟的弱酸性环境,检测大肠杆菌菌体胞内的缓冲容量,发现ibeT基因缺失突变株菌体胞内的缓冲能力较野生型低.这些结果提示,在大肠杆菌K1株侵袭进入人脑微血管内皮细胞后,ibeT基因有利于大肠杆菌降解ECV膜,避免与溶酶体融合,进而促使大肠杆菌逃逸进入细胞浆并进行复制. 展开更多
关键词 ibeT 大肠杆菌K1株 人脑微血管内皮细胞 溶酶体 逃逸
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肺硬化性血管瘤临床病理特点及免疫表型分析 被引量:3
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作者 黄波 李妍 +2 位作者 李强 陈莉 李波 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期524-526,共3页
目的回顾性分析40例肺硬化性血管瘤的临床病理及免疫表型特点。方法免疫组织化学S-P法检测CK(Pan)、CK(H)、CK(L)、EMA、TTF-1、Syn、CgA、NSE、CR、MC、CD34、Vim。结果女性33例,右肺25例,右肺下叶15例,左肺下叶11例。立方形细胞和圆... 目的回顾性分析40例肺硬化性血管瘤的临床病理及免疫表型特点。方法免疫组织化学S-P法检测CK(Pan)、CK(H)、CK(L)、EMA、TTF-1、Syn、CgA、NSE、CR、MC、CD34、Vim。结果女性33例,右肺25例,右肺下叶15例,左肺下叶11例。立方形细胞和圆形细胞构成乳头状、实性区、硬化区、出血区4种相互移行的组织结构,乳头状结构最常见,出血性结构最少见。表面立方形细胞表达EMA、CK(Pan)、TTF-1,间质内圆形细胞表达EMA、TTF-1、Vim;两种细胞均无间皮及血管内皮标记的表达,个别病例两种细胞不同程度散在表达Syn、NSE、CgA。结论立方形与多角形细胞均为肿瘤细胞,免疫表型具有异质性,表现不同的分化程度。 展开更多
关键词 肺硬化性血管瘤 临床病理 免疫表型
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中期因子在糖尿病大鼠坐骨神经中的表达及意义 被引量:1
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作者 邱阳 胡海地 +2 位作者 张锦 翟秀岩 吴伟 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期199-200,共2页
目的:探讨中期因子(MK)在糖尿病坐骨神经病变中的作用。方法:SD雄性大鼠制成糖尿病模型,采用Westernblot及免疫组化方法观察MK在坐骨神经中的表达。结果:3个月糖尿病组大鼠坐骨神经MK表达较对照组增多(P<0.01)。6个月时MK表达下降,... 目的:探讨中期因子(MK)在糖尿病坐骨神经病变中的作用。方法:SD雄性大鼠制成糖尿病模型,采用Westernblot及免疫组化方法观察MK在坐骨神经中的表达。结果:3个月糖尿病组大鼠坐骨神经MK表达较对照组增多(P<0.01)。6个月时MK表达下降,与对照组比较无显著差别。结论:MK可能为治疗糖尿病周围神经病变提供新的手段。 展开更多
关键词 糖尿病神经病变 中期因子 坐骨神经 大鼠
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糖调节蛋白Grp78在幽门螺杆菌感染者胃黏膜中的表达及意义 被引量:1
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作者 王孟春 方文刚 +1 位作者 陈澄 李岩 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期70-71,74,共3页
目的 :了解葡萄糖调节蛋白Grp78在幽门螺杆菌 (HP)感染人胃黏膜组织中的表达情况。方法 :应用半定量RT PCR及Westernblotting方法检测人胃黏膜组织中Grp78mRNA及蛋白的表达。 结果 :HP未感染组 2 8例 ,Grp78mRNA表达为 0 .80 3 8± ... 目的 :了解葡萄糖调节蛋白Grp78在幽门螺杆菌 (HP)感染人胃黏膜组织中的表达情况。方法 :应用半定量RT PCR及Westernblotting方法检测人胃黏膜组织中Grp78mRNA及蛋白的表达。 结果 :HP未感染组 2 8例 ,Grp78mRNA表达为 0 .80 3 8± 0 .0 50 0 ,感染组 3 2例 ,Grp78mRNA表达为 1.1586± 0 .0 83 9;未感染组Grp78蛋白表达为 0 .43 4 5± 0 .0 545,感染组Grp78蛋白表达为 0 .62 0 4± 0 .0 412。两组相比差异显著 (P <0 .0 1)。结论 :正常胃黏膜组织有Grp78mRNA的表达及蛋白的合成。HP感染胃黏膜增加Grp78mRNA的表达及蛋白的合成 。 展开更多
关键词 糖调节蛋白 幽门螺杆菌
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NRSE/RE-1序列与小鼠胚胎干细胞向神经细胞诱导分化的关系
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作者 张涛 顾文佳 +1 位作者 刘晓玉 庞希宁 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期412-415,共4页
目的探索神经限制性沉默元件(NRSE/RE-1)序列与小鼠胚胎干细胞向神经细胞诱导分化的关系。方法应用序贯诱导法定向诱导鼠胚胎干细胞分化为神经细胞,基因芯片筛选出的11种含NRSE/RE-1序列的神经相关基因,实时定量PCR测定其在分化过程中... 目的探索神经限制性沉默元件(NRSE/RE-1)序列与小鼠胚胎干细胞向神经细胞诱导分化的关系。方法应用序贯诱导法定向诱导鼠胚胎干细胞分化为神经细胞,基因芯片筛选出的11种含NRSE/RE-1序列的神经相关基因,实时定量PCR测定其在分化过程中的表达。结果诱导分化后的胚胎干细胞表达多种成熟神经元标志,11种含NRSE/RE-1序列基因随诱导分化的进程表达量升高。结论鼠胚胎干细胞可通过序贯诱导分化为神经细胞,NRSE/RE-1序列可能是胚胎干细胞向神经元诱导分化的主要调控位点。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 神经元 细胞分化 神经限制性沉默元件
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针对小鼠Chmp1b基因的可诱导shRNA表达转基因载体的构建及功能鉴定
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作者 蔡莹 刘柳 +1 位作者 连博文 陈澄 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期968-972,976,共6页
目的设计构建针对小鼠Chmp1b基因的可诱导shRNA表达转基因载体,以用于制备相关转基因小鼠,并在体外验证其有效性。方法剔除pc DNA3.1载体的CMV启动子以及多克隆位点,然后接入带有LacZ-fLoxP插入失活的小鼠U6启动子并引入适当的酶切位点... 目的设计构建针对小鼠Chmp1b基因的可诱导shRNA表达转基因载体,以用于制备相关转基因小鼠,并在体外验证其有效性。方法剔除pc DNA3.1载体的CMV启动子以及多克隆位点,然后接入带有LacZ-fLoxP插入失活的小鼠U6启动子并引入适当的酶切位点,装入设计好的shRNA片段,测试shRNA抑制Chmp1b表达的效率与专一性,检查Cre重组酶介导位点特异性重组去除LoxP位点之间的lac基因后U6启动子活性恢复情况。结果设计的shRNA片段可明显降低Chmp1b的表达,抑制效率达90%以上;成功构建针对小鼠Chmp1b基因的可诱导shRNA表达转基因载体,插入U6启动子中的LacZ-fLoxP片段既可以控制U6启动子活性又可以起到报告基因的作用。结论针对小鼠Chmp1b基因的可诱导shRNA表达转基因载体可以用于制备相关转基因小鼠。 展开更多
关键词 SHRNA Chmp1b Cre/LoxP 转基因载体 构建
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骨髓间充质干细胞移植促进大鼠损伤脊髓的功能恢复 被引量:2
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作者 刁延娜 马兰兰 +2 位作者 孟凡彪 李宏图 庞希宁 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期7-9,共3页
目的研究骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对大鼠脊髓损伤的作用。方法将大鼠MSCs移植到大鼠脊髓损伤处,移植后评估大鼠行为学改变,免疫组织化学染色法观察BrdU标记的MSCs在脊髓损伤处存活情况,辣根过氧化物酶(HRP)逆行示踪,观察脊髓损伤处... 目的研究骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对大鼠脊髓损伤的作用。方法将大鼠MSCs移植到大鼠脊髓损伤处,移植后评估大鼠行为学改变,免疫组织化学染色法观察BrdU标记的MSCs在脊髓损伤处存活情况,辣根过氧化物酶(HRP)逆行示踪,观察脊髓损伤处神经通路的重构建,皮层体感诱发电位(CSEP)测定脊髓损伤处神经通路传导功能的恢复。结果术后移植组评分均高于损伤组,移植组大鼠脊髓损伤区远端检测到BrdU阳性细胞,脊髓损伤近侧端检测到HRP阳性细胞,CSEP波形恢复但波幅减低,潜伏时延长。结论MSCs可在损伤区存活并分化为神经元,在损伤局部形成神经元通路,使损伤脊髓的远端和近端建立联系,神经纤维传导功能部分恢复。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 脊髓损伤 移植
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脑内皮细胞趋化因子受体5参与β淀粉样蛋白引起的T细胞跨内皮迁移 被引量:1
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作者 朱莉 李曼 +1 位作者 赵伟东 陈誉华 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期410-412,431,共4页
目的利用血-脑屏障的体外模型,分析脑内皮细胞上的趋化因子受体5(CCR5)在β淀粉样蛋白(Aβ)引起的T细胞跨内皮迁移过程中的作用。方法培养人脑微血管内皮细胞(HBMEC),建立体外血-脑屏障模型,分析T淋巴细胞跨内皮迁移的能力。结果 Aβ能... 目的利用血-脑屏障的体外模型,分析脑内皮细胞上的趋化因子受体5(CCR5)在β淀粉样蛋白(Aβ)引起的T细胞跨内皮迁移过程中的作用。方法培养人脑微血管内皮细胞(HBMEC),建立体外血-脑屏障模型,分析T淋巴细胞跨内皮迁移的能力。结果 Aβ能够促进T淋巴细胞穿过体外血-脑屏障模型,HBMEC中CCR5过表达能够促进T淋巴细胞穿过体外血脑屏障模型,HBMEC中CCR5缺失突变能够抑制T淋巴细胞穿过体外血-脑屏障模型。结论 HBMEC中CCR5参与Aβ引起的T淋巴细胞的跨内皮迁移。 展开更多
关键词 Β淀粉样蛋白 趋化因子受体5 人脑微血管内皮细胞 T淋巴细胞 跨内皮迁移
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