检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

人细胞骨架调节蛋白基因Nelin的原核表达与分离纯化被引量：4: 1; 作者尤昕时娜 +3 位作者柳明洙曹慧青刘冬青孟宪敏《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1128-1131,共4页; 目的:原核表达并分离纯化人细胞骨架调节蛋白基因Nelin。方法:利用DNAstar软件预测Nelin的B细胞表位,选择Nelin基因B细胞表位较多、特异性最强的片段。用DNA重组技术,将此片段插入原核表达载体pET28a(+),构建C末端带有His6标签的原核表... 展开更多; 关键词 Nelin基因原核表达分离纯化 B细胞表位; 在线阅读下载PDF 职称材料

反义TR和p21双基因共表达对人主动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的作用被引量：2: 2; 作者孟宪敏米立国 +4 位作者赵秀文曹慧青刘冬青高润霖丁金凤《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期339-342,I001,共5页; 目的观察携带反义凝血酶受体(ATR)或/和p21的单、双基因重组腺病毒伴随病毒(rAAV)载体对人主动脉平滑肌细胞(ASMC)增殖与凋亡的影响。方法以携带ATR或/和p21的单、双基因rAAV感染人ASMC。半定量RT-PCR检测各基因的整合与表达;MTT法测定... 展开更多; 关键词细胞增殖反义凝血酶受体基因 P21基因共表达主动脉平滑肌细胞再狭窄细胞凋亡; 在线阅读下载PDF 职称材料

Nelin与F-actin及Filamin相互作用的鉴定被引量：2: 3; 作者王震刘冬青 +2 位作者王茵屈伸孟宪敏《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期281-284,F0003,共5页; 目的在用酵母双杂交方法将Nelin与人心脏cDNA文库进行杂交筛选,得到3个阳性克隆的基础上,进一步探讨新基因Nelin及其心肌表达产物Nelin蛋白的功能,并寻找能够与其发生相互作用的蛋白质。方法采用基因转染和表达技术,在真核细胞内外分别... 展开更多; 关键词 Nelin 肌动蛋白细丝蛋白免疫共沉淀; 在线阅读下载PDF 职称材料

心肌特异性新蛋白激酶p93和peroxiredoxin3的相互作用被引量：3: 4; 作者冯艳刘冬青 +5 位作者王震曹慧青时娜邓仲端丁金凤孟宪敏《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第8期688-692,共5页; 为了明确p93在心血管系统中的生物学功能及在信号传导通路中的作用 ,采用酵母双杂交技术 ,选择 p93N端第 10 1～ 372位氨基酸构建诱饵质粒 ,筛选成人心脏cDNA文库 ,寻找与之相互作用的蛋白质 ,结果得到蛋白peroxiredoxin 3(PRX 3) .采... 展开更多; 关键词心肌特异性新蛋白激酶 p93 酵母双杂交心肌细胞生物学功能信号传导通路; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人细胞骨架调节蛋白基因Nelin的原核表达与分离纯化被引量：4: 1; 作者尤昕时娜柳明洙曹慧青刘冬青孟宪敏; 机构中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院分子医学中心延边大学医学院生物化学与分子生物学教研室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1128-1131,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.30500200和No.30470724); 文摘目的:原核表达并分离纯化人细胞骨架调节蛋白基因Nelin。方法:利用DNAstar软件预测Nelin的B细胞表位,选择Nelin基因B细胞表位较多、特异性最强的片段。用DNA重组技术,将此片段插入原核表达载体pET28a(+),构建C末端带有His6标签的原核表达载体pET28a-Nelin,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导,产物用Ni2+金属螯合吸附层析柱纯化。结果:成功构建了pET28a-Nelin表达载体,IPTG诱导后表达分子量约为17000的可溶性蛋白,Nelin-His6蛋白的表达量占菌体总蛋白的18%,经Ni2+金属螯合层析柱纯化,得到了电泳纯的Nelin-His6蛋白。结论:建立了稳定的Nelin基因的表达体系,为其功能研究奠定了基础。; 关键词 Nelin基因原核表达分离纯化 B细胞表位; Keywords Nelin gene Prokaryotic expression Purification B cell epitopes; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名反义TR和p21双基因共表达对人主动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的作用被引量：2: 2; 作者孟宪敏米立国赵秀文曹慧青刘冬青高润霖丁金凤; 机构中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院分子医学中心; 出处《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期339-342,I001,共5页; 基金国家"九五"攻关项目(96-906-02-07) 国家自然科学基金(39970297)资助~~; 文摘目的观察携带反义凝血酶受体(ATR)或/和p21的单、双基因重组腺病毒伴随病毒(rAAV)载体对人主动脉平滑肌细胞(ASMC)增殖与凋亡的影响。方法以携带ATR或/和p21的单、双基因rAAV感染人ASMC。半定量RT-PCR检测各基因的整合与表达;MTT法测定感染不同时间点的细胞存活率;流式细胞术检测细胞周期与凋亡细胞数目的变化;吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色检测凋亡细胞的比率。结果单、双基因在ASMC中均获得整合,且双基因发生了共表达;病毒感染4d时,ATR组、p21组和AP双基因组的细胞存活率与对照组相比分别降低了16.7%、21.6%和29.4%;三组的G0/G1期细胞数分别为(61.8±2.9)%、(82.5±4.0)%和(80.4±6.1)%;凋亡细胞数为(4.8±0.5)%、(5.7±0.1)%和(9.2±0.9)%;AO/EB染色显示的凋亡细胞比率分别为:对照组(1.5±0.8)%、ATR组(7.2±3.3)%、p21组(10.7±5.6)%、AP组(18.3±2.7)%。结论(1)双基因共表达对抑制细胞增殖和诱导凋亡的作用均较单基因具有较强的生物学效应。(2)为再狭窄的基因治疗提示了更优化的途径。; 关键词细胞增殖反义凝血酶受体基因 P21基因共表达主动脉平滑肌细胞再狭窄细胞凋亡; Keywords antisense thrombin receptor gene p21gene co-expression aortic smooth muscle cells restenosis; 分类号 R654.306 [医药卫生—外科学] R364.3 [医药卫生—病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Nelin与F-actin及Filamin相互作用的鉴定被引量：2: 3; 作者王震刘冬青王茵屈伸孟宪敏; 机构华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院分子医学中心华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系; 出处《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期281-284,F0003,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.30270557和No.30300131) 北京市重大科技项目(No.H020220020310); 文摘目的在用酵母双杂交方法将Nelin与人心脏cDNA文库进行杂交筛选,得到3个阳性克隆的基础上,进一步探讨新基因Nelin及其心肌表达产物Nelin蛋白的功能,并寻找能够与其发生相互作用的蛋白质。方法采用基因转染和表达技术,在真核细胞内外分别进行了Nelin蛋白与肌动蛋白(F-actin)结合的共沉降及免疫荧光共定位实验。并通过免疫共沉淀实验进一步验证所得的实验结果。结果证实了在细胞内外Nelin蛋白均能同F-actin相结合;还能与Filamin的C-末端免疫球蛋白样结构发生相互作用。结论Nelin为一个新的兼有actin及Filamin结合能力的蛋白。在心肌细胞内,Nelin很可能作为一个膜-细胞骨架连接蛋白,参与了细胞黏着斑形成的过程。; 关键词 Nelin 肌动蛋白细丝蛋白免疫共沉淀; Keywords Nelin F-actin Filamin co-immunoprecipitation; 分类号 R739.63 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名心肌特异性新蛋白激酶p93和peroxiredoxin3的相互作用被引量：3: 4; 作者冯艳刘冬青王震曹慧青时娜邓仲端丁金凤孟宪敏; 机构中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院分子医学中心华中科技大学同济医学院药理系华中科技大学同济医学院病理系; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第8期688-692,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目 ( 3 0 2 70 5 5 7 3 0 3 0 0 13 1) 北京市重大科技资助项目 (H0 2 0 2 2 0 0 2 0 3 10 )~~; 文摘为了明确p93在心血管系统中的生物学功能及在信号传导通路中的作用 ,采用酵母双杂交技术 ,选择 p93N端第 10 1～ 372位氨基酸构建诱饵质粒 ,筛选成人心脏cDNA文库 ,寻找与之相互作用的蛋白质 ,结果得到蛋白peroxiredoxin 3(PRX 3) .采用体外结合实验和免疫共沉淀等方法 ,证实了原核和真核表达的 p93确实可与PRX3相互作用 ,通过双重荧光共定位 ,为二者的相互作用提供了定位依据 .研究提示p93可能参与心肌细胞中与PRX3有关的各种生理病理过程 ,如生长、分化、发育、凋亡。; 关键词心肌特异性新蛋白激酶 p93 酵母双杂交心肌细胞生物学功能信号传导通路; Keywords p93 peroxiredoxin 3 yeast two-hybrid interaction; 分类号 Q55 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人细胞骨架调节蛋白基因Nelin的原核表达与分离纯化	尤昕时娜柳明洙曹慧青刘冬青孟宪敏	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2006	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	反义TR和p21双基因共表达对人主动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的作用	孟宪敏米立国赵秀文曹慧青刘冬青高润霖丁金凤	《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心	2002	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	Nelin与F-actin及Filamin相互作用的鉴定	王震刘冬青王茵屈伸孟宪敏	《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2007	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	心肌特异性新蛋白激酶p93和peroxiredoxin3的相互作用	冯艳刘冬青王震曹慧青时娜邓仲端丁金凤孟宪敏	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	2004	3	在线阅读下载PDF 职称材料