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口蹄疫病毒衣壳蛋白氨基酸突变对病毒热稳定性的影响
被引量：
2
1
作者
高雅
李平花
+7 位作者
马雪青
寻广谨
白兴文
孙普
袁红
卢曾军
刘在新
李冬
《动物医学进展》
北大核心
2019年第7期1-8,共8页
口蹄疫是世界范围内广泛流行的一种偶蹄动物的烈性传染病,其病原为口蹄疫病毒(FMDV),它对热比较敏感,当温度高于30℃时,病毒衣壳容易解离为五聚体亚单位而影响疫苗的免疫保护效果。因此,改善病毒的热稳定性,制备热稳定优良的口蹄疫疫苗...
口蹄疫是世界范围内广泛流行的一种偶蹄动物的烈性传染病,其病原为口蹄疫病毒(FMDV),它对热比较敏感,当温度高于30℃时,病毒衣壳容易解离为五聚体亚单位而影响疫苗的免疫保护效果。因此,改善病毒的热稳定性,制备热稳定优良的口蹄疫疫苗具有重大的应用价值。在实验室建立的口蹄疫病毒型内嵌和全长感染性克隆的基础上,在结构蛋白引入1个或2个氨基酸突变,分别构建了2种基因修饰的口蹄疫病毒全长重组质粒。全长质粒经NotⅠ线化后分别转染表达T7RNA聚合酶的BSR/T7细胞以拯救重组病毒。间接免疫荧光和电镜分析表明,成功拯救到2株口蹄疫重组病毒。重组病毒经RT-PCR和序列测定证实只有1株重组病毒所含的耐热突变可以稳定遗传。热失活试验显示,拯救病毒与亲本病毒的耐热特性基本一致。结果表明在结构蛋白上引入V2090A-S2093F-H30568R的突变,并对口蹄疫病毒的热稳定性并没有明显的影响,为未来发展热稳定的口蹄疫疫苗提供了一定的参考。
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关键词
口蹄疫病毒
热稳定性
疫苗
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职称材料
猪波形蛋白的原核表达及其对口蹄疫病毒浸染PK-15细胞的作用
2
作者
令瑛
马雪青
+7 位作者
李平花
张婧
李坤
付元芳
冯若飞
马忠仁
卢曾军
刘在新
《动物医学进展》
北大核心
2019年第1期12-19,共8页
为研究波形蛋白在病毒侵染过程中发挥的作用,原核表达猪波形蛋白与病毒互感后检测其复制能力。根据GenBank中已发表的波形蛋白序列,设计特异性引物,从PK-15细胞中扩增波形蛋白基因,并将其克隆至pET-28a(+)载体,转化大肠埃希菌BL21进行...
为研究波形蛋白在病毒侵染过程中发挥的作用,原核表达猪波形蛋白与病毒互感后检测其复制能力。根据GenBank中已发表的波形蛋白序列,设计特异性引物,从PK-15细胞中扩增波形蛋白基因,并将其克隆至pET-28a(+)载体,转化大肠埃希菌BL21进行原核表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定后,进行目的蛋白的纯化及复性,并利用病毒抑制试验,检测其在病毒感染过程中的作用。结果表明,成功地克隆了猪波形蛋白基因,并克隆至pET-28a(+)载体,经诱导后高效表达,经纯化复性获得的波形蛋白抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)侵染Marc-145细胞,然而并不抑制口蹄疫(FMDV)侵染PK-15细胞。随后借助细胞流式术检测PK-15细胞中波形蛋白的分布,显示其主要存在于细胞膜内的基质中。猪源波形蛋白的克隆表达,为进一步研究猪源波形蛋白与口蹄疫病毒蛋白之间的相互作用奠定了基础。
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关键词
猪波形蛋白
原核表达
口蹄疫病毒
PK-15细胞
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职称材料
猪繁殖与呼吸综合征的诊断与防治
被引量：
1
3
作者
刘金龙
刘娜
+3 位作者
崔占鼎
谭鑫
卢曾军
李志勇
《北方牧业》
2022年第19期23-23,30,共2页
猪繁育与呼吸综合征(Porcine Breedingand Respiratory Syndrome,PRRS)又称猪蓝耳病,据报道1987年在美国一些地区首次暴发。随后在北美、欧洲和亚洲成为一种大流行疾病。目前为止,PRRS已成为全球养猪业的一种严重传染病,其传染性强、发...
猪繁育与呼吸综合征(Porcine Breedingand Respiratory Syndrome,PRRS)又称猪蓝耳病,据报道1987年在美国一些地区首次暴发。随后在北美、欧洲和亚洲成为一种大流行疾病。目前为止,PRRS已成为全球养猪业的一种严重传染病,其传染性强、发病率高、死亡率高达80%~90%,给养猪业带来了巨大挑战。尤其是我国作为生猪和猪肉生产的大国.
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关键词
猪繁殖与呼吸综合征
养猪业
猪蓝耳病
流行疾病
死亡率高
诊断与防治
PRRS
发病率高
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职称材料
题名
口蹄疫病毒衣壳蛋白氨基酸突变对病毒热稳定性的影响
被引量：
2
1
作者
高雅
李平花
马雪青
寻广谨
白兴文
孙普
袁红
卢曾军
刘在新
李冬
机构
中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/国家口蹄疫参考实验室
出处
《动物医学进展》
北大核心
2019年第7期1-8,共8页
基金
国家重点研发计划项目(2017YFD0500902)
甘肃省青年科技基金计划项目(1606RJYA256)
文摘
口蹄疫是世界范围内广泛流行的一种偶蹄动物的烈性传染病,其病原为口蹄疫病毒(FMDV),它对热比较敏感,当温度高于30℃时,病毒衣壳容易解离为五聚体亚单位而影响疫苗的免疫保护效果。因此,改善病毒的热稳定性,制备热稳定优良的口蹄疫疫苗具有重大的应用价值。在实验室建立的口蹄疫病毒型内嵌和全长感染性克隆的基础上,在结构蛋白引入1个或2个氨基酸突变,分别构建了2种基因修饰的口蹄疫病毒全长重组质粒。全长质粒经NotⅠ线化后分别转染表达T7RNA聚合酶的BSR/T7细胞以拯救重组病毒。间接免疫荧光和电镜分析表明,成功拯救到2株口蹄疫重组病毒。重组病毒经RT-PCR和序列测定证实只有1株重组病毒所含的耐热突变可以稳定遗传。热失活试验显示,拯救病毒与亲本病毒的耐热特性基本一致。结果表明在结构蛋白上引入V2090A-S2093F-H30568R的突变,并对口蹄疫病毒的热稳定性并没有明显的影响,为未来发展热稳定的口蹄疫疫苗提供了一定的参考。
关键词
口蹄疫病毒
热稳定性
疫苗
Keywords
Foot-and-mouth disease virus
thermostability
vaccine
分类号
S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
猪波形蛋白的原核表达及其对口蹄疫病毒浸染PK-15细胞的作用
2
作者
令瑛
马雪青
李平花
张婧
李坤
付元芳
冯若飞
马忠仁
卢曾军
刘在新
机构
西北民族大学生命
科学
与工程
学院
中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/国家口蹄疫参考实验室
/
农业
部畜禽病毒学
重点
开放
实验室
出处
《动物医学进展》
北大核心
2019年第1期12-19,共8页
基金
国家自然科学基金项目(31702266
31460665)
+1 种基金
农业部中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(1610312016016)
长江学者和创新团队发展计划项目(IRT-17R88)
文摘
为研究波形蛋白在病毒侵染过程中发挥的作用,原核表达猪波形蛋白与病毒互感后检测其复制能力。根据GenBank中已发表的波形蛋白序列,设计特异性引物,从PK-15细胞中扩增波形蛋白基因,并将其克隆至pET-28a(+)载体,转化大肠埃希菌BL21进行原核表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定后,进行目的蛋白的纯化及复性,并利用病毒抑制试验,检测其在病毒感染过程中的作用。结果表明,成功地克隆了猪波形蛋白基因,并克隆至pET-28a(+)载体,经诱导后高效表达,经纯化复性获得的波形蛋白抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)侵染Marc-145细胞,然而并不抑制口蹄疫(FMDV)侵染PK-15细胞。随后借助细胞流式术检测PK-15细胞中波形蛋白的分布,显示其主要存在于细胞膜内的基质中。猪源波形蛋白的克隆表达,为进一步研究猪源波形蛋白与口蹄疫病毒蛋白之间的相互作用奠定了基础。
关键词
猪波形蛋白
原核表达
口蹄疫病毒
PK-15细胞
Keywords
porcine vimentin
prokaryotic expression
food-and-mouth disease virus
PK-15 cells
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
Q789 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
猪繁殖与呼吸综合征的诊断与防治
被引量：
1
3
作者
刘金龙
刘娜
崔占鼎
谭鑫
卢曾军
李志勇
机构
河北工程大学生命
科学
与食品工程
学院
中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/国家口蹄疫参考实验室
温州医科大学
内蒙古
农业
大学
出处
《北方牧业》
2022年第19期23-23,30,共2页
基金
国家自然科学基金项目31972680。
文摘
猪繁育与呼吸综合征(Porcine Breedingand Respiratory Syndrome,PRRS)又称猪蓝耳病,据报道1987年在美国一些地区首次暴发。随后在北美、欧洲和亚洲成为一种大流行疾病。目前为止,PRRS已成为全球养猪业的一种严重传染病,其传染性强、发病率高、死亡率高达80%~90%,给养猪业带来了巨大挑战。尤其是我国作为生猪和猪肉生产的大国.
关键词
猪繁殖与呼吸综合征
养猪业
猪蓝耳病
流行疾病
死亡率高
诊断与防治
PRRS
发病率高
分类号
S85 [农业科学—兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
口蹄疫病毒衣壳蛋白氨基酸突变对病毒热稳定性的影响
高雅
李平花
马雪青
寻广谨
白兴文
孙普
袁红
卢曾军
刘在新
李冬
《动物医学进展》
北大核心
2019
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
猪波形蛋白的原核表达及其对口蹄疫病毒浸染PK-15细胞的作用
令瑛
马雪青
李平花
张婧
李坤
付元芳
冯若飞
马忠仁
卢曾军
刘在新
《动物医学进展》
北大核心
2019
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
猪繁殖与呼吸综合征的诊断与防治
刘金龙
刘娜
崔占鼎
谭鑫
卢曾军
李志勇
《北方牧业》
2022
1
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职称材料
已选择
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引证文献
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