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激光捕获显微切割技术纯化的鼻咽癌和正常鼻咽上皮细胞的比较蛋白质组学研究
被引量：
6
1
作者
程爱兰
黄卫国
+8 位作者
张鹏飞
李茂玉
彭芳
李峰
李萃
易红
李美香
陈主初
肖志强
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期521-530,共10页
为筛选鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的分子标志物,采用激光捕获显微切割技术(laser capture microdissection,LCM)分别从NPC组织和正常鼻咽上皮组织(normal nasopharyngal epithelial tissue,NNET)中切割纯化NPC细胞和正常鼻...
为筛选鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的分子标志物,采用激光捕获显微切割技术(laser capture microdissection,LCM)分别从NPC组织和正常鼻咽上皮组织(normal nasopharyngal epithelial tissue,NNET)中切割纯化NPC细胞和正常鼻咽上皮细胞(normal nasopharyngal epithelial cells,NNEC),应用二维凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)分离LCM纯化细胞的蛋白质,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和电喷雾电离串联质谱(ESI-Q-TOF-MS)鉴定差异蛋白质点,Western blot检测差异蛋白cytokeratin8(CK8)在LCM纯化的NPC细胞和NNEC以及具有不同分化程度或转移潜能的4株NPC细胞中的表达,免疫组织化学检测CK8在63例NPC、28例NNET及20例颈淋巴结转移NPC组织中的表达水平.建立了LCM纯化的NPC细胞和NNEC的2-DE图谱,质谱鉴定了29个差异蛋白质,其中15个蛋白质只在NPC表达或表达明显增高,14个蛋白质在NPC中表达下调或缺失;Western blot结果显示,CK8的表达水平在NPC中较NNET明显下调,并与NPC细胞株的分化程度和转移潜能有关;免疫组织化学结果显示,CK8在NPC组织中的表达较NNET明显下调,在颈淋巴结转移NPC中的表达较原发NPC明显上调.研究结果提示,CK8与NPC分化及淋巴结转移相关,有望成为预测NPC转移和区别NPC分化程度的分子标志物.
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关键词
激光捕获显微切割
鼻咽癌
蛋白质组学
二维凝胶电泳
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
电喷雾电离串联质谱
Western
blot
免疫组织化学
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职称材料
幽门螺杆菌改变人肝细胞系HepG2蛋白质表达谱
2
作者
张艳
范学工
+4 位作者
陈仁
肖志强
冯雪萍
田雪飞
陈朝晖
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2005年第7期561-565,共5页
目的研究H.pylori作用后肝细胞系HepG2蛋白质表达谱的改变,通过对差异蛋白质点的鉴定与分析,以探讨H.pylori对肝细胞的病理作用。方法采用体外肝细胞和H.pylori共培养,应用双向凝胶电泳分离H.pylori处理前后细胞总蛋白,筛选出差异表达...
目的研究H.pylori作用后肝细胞系HepG2蛋白质表达谱的改变,通过对差异蛋白质点的鉴定与分析,以探讨H.pylori对肝细胞的病理作用。方法采用体外肝细胞和H.pylori共培养,应用双向凝胶电泳分离H.pylori处理前后细胞总蛋白,筛选出差异表达的蛋白质点,并进行质谱分析鉴定。结果鉴定出7种表达上调的蛋白质点,包括整合素-β1、蛋白激酶C-α、LIM同源盒蛋白Lhx1、真核翻译起始因子2-β亚单位、PINCH蛋白、MAPK激酶3、Ras相关蛋白Rab-37等。这些蛋白质参与了基因表达调控、细胞免疫、细胞生长、信号传导等众多事件。结论H.pylori可能通过介导这些蛋白质的上调而发挥对HepG2细胞的病理作用。这种蛋白质组的差异分析有助于进一步研究H.pylori与人类肝胆疾病的关系。
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关键词
细胞系HepG2
蛋白质表达谱
幽门螺杆菌
H.pylori
蛋白激酶C-Α
人肝
整合素β-1
MAPK激酶
基因表达调控
病理作用
s相关蛋白
差异表达
分析鉴定
表达上调
结果鉴定
电泳分离
Β亚单位
起始因子
细胞免疫
细胞生长
信号传导
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职称材料
气相色谱-质谱法同时测定乳酸和7种糖的研究
被引量：
10
3
作者
徐正华
李晓宁
+4 位作者
易伦朝
谭斌斌
梁逸曾
曾茂茂
何君
《分析科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期142-146,共5页
建立了气相色谱-质谱(GC-MS)法同时测定乳酸和葡萄糖、葡萄糖-6-磷酸、果糖、半乳糖、乳糖、1,5-脱水山梨醇、山梨醇7种糖的方法。选择核糖醇为内标,进样前先进行肟化反应再进行硅烷化反应。采用DB-5熔融石英毛细管柱,升温程序为初始温...
建立了气相色谱-质谱(GC-MS)法同时测定乳酸和葡萄糖、葡萄糖-6-磷酸、果糖、半乳糖、乳糖、1,5-脱水山梨醇、山梨醇7种糖的方法。选择核糖醇为内标,进样前先进行肟化反应再进行硅烷化反应。采用DB-5熔融石英毛细管柱,升温程序为初始温度70℃,保持4min,以8℃/min的速率升至300℃,保持3min。在优化测定条件下各对照品得到良好分离,且在测定范围内具有良好线性关系(r2>0.9983),平均加标回收率为74.5%～104.2%,日间相对标准偏差(RSD)与日内RSD小于9.2%。该方法简便、灵敏度高,已成功应用于2型糖尿病大鼠和健康大鼠血清中乳酸和糖类物质的定性定量分析。
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关键词
气相色谱-质谱
乳酸
糖
血清
2型糖尿病
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职称材料
题名
激光捕获显微切割技术纯化的鼻咽癌和正常鼻咽上皮细胞的比较蛋白质组学研究
被引量：
6
1
作者
程爱兰
黄卫国
张鹏飞
李茂玉
彭芳
李峰
李萃
易红
李美香
陈主初
肖志强
机构
中南大学湘雅医院
医学
实验
研究
中心
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期521-530,共10页
基金
国家重点基础研究发展计划(973)(2001CB5120)
芙蓉学者特聘教授科研奖励基金(湘教通[2007]362号)
+1 种基金
教育部跨世纪优秀人才培养计划基金(教计函[2002]48)
湖南省科技厅重大科技专项(04XK1001,06SK2004)资助项目~~
文摘
为筛选鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的分子标志物,采用激光捕获显微切割技术(laser capture microdissection,LCM)分别从NPC组织和正常鼻咽上皮组织(normal nasopharyngal epithelial tissue,NNET)中切割纯化NPC细胞和正常鼻咽上皮细胞(normal nasopharyngal epithelial cells,NNEC),应用二维凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)分离LCM纯化细胞的蛋白质,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和电喷雾电离串联质谱(ESI-Q-TOF-MS)鉴定差异蛋白质点,Western blot检测差异蛋白cytokeratin8(CK8)在LCM纯化的NPC细胞和NNEC以及具有不同分化程度或转移潜能的4株NPC细胞中的表达,免疫组织化学检测CK8在63例NPC、28例NNET及20例颈淋巴结转移NPC组织中的表达水平.建立了LCM纯化的NPC细胞和NNEC的2-DE图谱,质谱鉴定了29个差异蛋白质,其中15个蛋白质只在NPC表达或表达明显增高,14个蛋白质在NPC中表达下调或缺失;Western blot结果显示,CK8的表达水平在NPC中较NNET明显下调,并与NPC细胞株的分化程度和转移潜能有关;免疫组织化学结果显示,CK8在NPC组织中的表达较NNET明显下调,在颈淋巴结转移NPC中的表达较原发NPC明显上调.研究结果提示,CK8与NPC分化及淋巴结转移相关,有望成为预测NPC转移和区别NPC分化程度的分子标志物.
关键词
激光捕获显微切割
鼻咽癌
蛋白质组学
二维凝胶电泳
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
电喷雾电离串联质谱
Western
blot
免疫组织化学
Keywords
laser capture microdissection, nasopharyngeal carcinoma, proteome, two-dimensional gel electropboresis, MALDI-TOF-MS, ESI-Q-TOF-MS, Western blot, immunobistocbemistry
分类号
R318.0 [医药卫生—生物医学工程]
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职称材料
题名
幽门螺杆菌改变人肝细胞系HepG2蛋白质表达谱
2
作者
张艳
范学工
陈仁
肖志强
冯雪萍
田雪飞
陈朝晖
机构
中南大学湘雅医院
传染科
中南大学湘雅医院医学实验研究中心卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室
出处
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2005年第7期561-565,共5页
文摘
目的研究H.pylori作用后肝细胞系HepG2蛋白质表达谱的改变,通过对差异蛋白质点的鉴定与分析,以探讨H.pylori对肝细胞的病理作用。方法采用体外肝细胞和H.pylori共培养,应用双向凝胶电泳分离H.pylori处理前后细胞总蛋白,筛选出差异表达的蛋白质点,并进行质谱分析鉴定。结果鉴定出7种表达上调的蛋白质点,包括整合素-β1、蛋白激酶C-α、LIM同源盒蛋白Lhx1、真核翻译起始因子2-β亚单位、PINCH蛋白、MAPK激酶3、Ras相关蛋白Rab-37等。这些蛋白质参与了基因表达调控、细胞免疫、细胞生长、信号传导等众多事件。结论H.pylori可能通过介导这些蛋白质的上调而发挥对HepG2细胞的病理作用。这种蛋白质组的差异分析有助于进一步研究H.pylori与人类肝胆疾病的关系。
关键词
细胞系HepG2
蛋白质表达谱
幽门螺杆菌
H.pylori
蛋白激酶C-Α
人肝
整合素β-1
MAPK激酶
基因表达调控
病理作用
s相关蛋白
差异表达
分析鉴定
表达上调
结果鉴定
电泳分离
Β亚单位
起始因子
细胞免疫
细胞生长
信号传导
Keywords
H. pylori
HepG2
two-dimensional gel electrophoresis
MALDI-TOF-MS
protein expression profile
分类号
R977.11 [医药卫生—药品]
R392.3 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
气相色谱-质谱法同时测定乳酸和7种糖的研究
被引量：
10
3
作者
徐正华
李晓宁
易伦朝
谭斌斌
梁逸曾
曾茂茂
何君
机构
中南大学
化
学
化工
学
院中药现代化
研究
中心
中国
医学
科
学
院
实验
动物
研究
所
中南大学湘雅医院
医学
实验
研究
中心
出处
《分析科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期142-146,共5页
基金
中国博士后科学基金(No.200902481)
抗肿瘤、糖尿病、神经退行性疾病新药临床前药效学评价技术平台的建立项目(No.2009ZX09303)
文摘
建立了气相色谱-质谱(GC-MS)法同时测定乳酸和葡萄糖、葡萄糖-6-磷酸、果糖、半乳糖、乳糖、1,5-脱水山梨醇、山梨醇7种糖的方法。选择核糖醇为内标,进样前先进行肟化反应再进行硅烷化反应。采用DB-5熔融石英毛细管柱,升温程序为初始温度70℃,保持4min,以8℃/min的速率升至300℃,保持3min。在优化测定条件下各对照品得到良好分离,且在测定范围内具有良好线性关系(r2>0.9983),平均加标回收率为74.5%～104.2%,日间相对标准偏差(RSD)与日内RSD小于9.2%。该方法简便、灵敏度高,已成功应用于2型糖尿病大鼠和健康大鼠血清中乳酸和糖类物质的定性定量分析。
关键词
气相色谱-质谱
乳酸
糖
血清
2型糖尿病
Keywords
Gas chromatography-mass spectrometry
Sugars
Lactate
Serum
Type 2 diabetes mellitus
分类号
O657.63 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
激光捕获显微切割技术纯化的鼻咽癌和正常鼻咽上皮细胞的比较蛋白质组学研究
程爱兰
黄卫国
张鹏飞
李茂玉
彭芳
李峰
李萃
易红
李美香
陈主初
肖志强
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2008
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
幽门螺杆菌改变人肝细胞系HepG2蛋白质表达谱
张艳
范学工
陈仁
肖志强
冯雪萍
田雪飞
陈朝晖
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2005
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
气相色谱-质谱法同时测定乳酸和7种糖的研究
徐正华
李晓宁
易伦朝
谭斌斌
梁逸曾
曾茂茂
何君
《分析科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
10
在线阅读
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职称材料
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